十大功劳中异汉防己碱的提取与分析

从民间常用中药十大功劳中提取、分离出一种结晶性的抗流感病毒活性组分F6;经熔点测定、旋光度测定、薄层色谱分析 (TLC)、高效液相色谱分析 (HPLC)、质谱分析 (MS)、核磁共振分析 (NMR)和红外分析(IR) ,确定F6的主要成分为异汉防己碱。

功劳木中异汉防己碱对P-糖蛋白介导的人乳腺癌细胞多药耐药性的逆转作用(英文)

本文探讨了异汉防己碱对P-糖蛋白(P-gp)介导的人乳腺癌细胞多药耐药性的逆转作用。首先以RT-PCR和免疫组化方法分别从RNA和蛋白水平检测MCF-7/DOX细胞P-gp表达情况,以明确MCF-7/DOX细胞的耐药特征;然后采用MTT法检测异汉防己碱的内在细胞毒性及其对阿霉素(DOX)的增敏作用,并以RF(reversal fold)值评价其逆转效果;同时应用流式细胞仪(FCM)对细胞内DOX的蓄积量进行了分析;再以免疫组化方法检测异汉防己碱对MCF-7/DOX细胞P-gp表达水平的影响;最后采用罗丹明蓄积和外排试验检测了异汉防己碱对P-gp功能的影响。整个试验以维拉帕米作为阳性对照。实验结果表明:MCF-7/DOX细胞是具有多药耐药表型且P-gp表达阳性的细胞株;无毒剂量异汉防己碱可明显增强DOX对MCF-7/DOX细胞的细胞毒性(RF=3.89),明显高于维拉帕米(RF=2.54)的逆转活性(P<0.05),但其几乎不影响DOX对MCF-7细胞的抑制作用;异汉防己碱对MCF-7/DOX细胞P-gp表达水平无明显影响,但其可有效抑制P-gp的药物外排功能。因此,异汉防己碱可有效逆转P-gp介导的人乳腺癌细胞的多药耐药性,它可能成为有效多药耐药逆转剂的候选药物。

异汉防己碱逆转白血病K562/DOX细胞多耐药性的实验研究

目的探讨中药十大功劳中异汉防己碱对白血病K562/DOX细胞多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的逆转作用。方法采用MTT法检测异汉防己碱的内在细胞毒性及其对阿霉素(DOX)的增敏作用,并以逆转倍数(RF)值评价其逆转效果;应用免疫组化方法检测K562/DOX细胞膜上P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达水平及异汉防己碱对P-gp表达的影响;应用流式细胞仪分析细胞内罗丹明123(rhodamine123,Rh123)和DOX浓度;以维拉帕米(verapamil,VER)为阳性对照。结果异汉防己碱在10μg/ml的无毒剂量下可明显增强DOX的细胞毒性,RF=4.86,明显高于维拉帕米(RF=2.65)的逆转活性(P<0.05);K562/DOX细胞膜上P-gp呈强阳性表达,但异汉防己碱对该P-gp表达水平无明显影响;异汉防己碱使细胞内Rh123和DOX的浓度明显增加。结论异汉防己碱可通过抑制P-gp功能而有效逆转白血病细胞的多药耐药性,它有望成为肿瘤多药耐药逆转剂的候选药物。

异汉防己碱增强多药耐药肿瘤细胞对阿霉素的敏感性及其机制

目的以K562/DOX和MCF-7/DOX细胞为对象,探讨异汉防己碱对化疗药物阿霉素(DOX)的增敏作用及其作用机制。方法采用MTT法检测异汉防己碱的内在细胞毒性及其对阿霉素的增敏作用,并以RF值评价其增敏效果。应用流式细胞术(FCM)检测细胞膜上P-gp的表达以及细胞内DOX和罗丹明123(Rh123)的蓄积量。结果异汉防己碱在10μg/ml的无毒剂量可明显增强DOX的细胞毒性。K562/DOX和MCF-7/DOX细胞膜上P-gp均呈强阳性表达,但异汉防己碱对该P-gp表达水平无明显影响。异汉防己碱可使K562/DOX和MCF-7/DOX细胞内DOX和Rh123的荧光密度(FI)均明显增加,由此证明异汉防己碱可有效抑制P-gp的功能。结论异汉防己碱可通过抑制P-gp的功能而增强阿霉素的敏感性,从而有效逆转肿瘤细胞的多药耐药性(MDR),它可能成为有效多药耐药逆转剂的候选药物。

微量量热法研究异汉防己碱对细菌的代谢作用

从十大功劳中提取异汉防己碱并用红外光谱法、高效液相色谱-质谱联用法、熔点测定法、薄层色谱法对其进行了表征,用瑞典产的八通道微量量热仪(3114/3236 TAM Air)测定了310.15 K时不同浓度的异汉防己碱液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌代谢作用的热功率-时间曲线,计算出各浓度下细菌生长的速率常数,建立了速率常数与药物浓度之间的关系,进而确定了异汉防己碱对3种细菌的最佳用药浓度.

异汉防己碱增强阿霉素诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨异汉防己碱增强阿霉素诱导耐阿霉素乳腺癌细胞系MCF-7/DOX凋亡的效应和机制。方法:采用MTT法检测异汉防己碱、阿霉素及两者联合对MCF-7/DOX细胞增殖的抑制作用,用流式细胞术定量分析MCF-7/DOX细胞的凋亡率,用Westem blot技术检测Bax及Bcl-2表达。结果:异汉防己碱可增强阿霉素对MCF-7/DOX细胞增殖的抑制作用,并可诱导细胞凋亡;异汉防己碱联合阿霉素可上调Bax表达,降低Bcl-2表达。结论:异汉防己碱联合阿霉素是通过上调Bax/Bcl-2比值而增强阿霉素诱导癌细胞凋亡的作用。