异海松酸基杂环酰胺衍生物的制备及抗癌活性

为了获得结构新颖的抗肿瘤药物分子,以天然产物异海松酸(Ⅰ)为母体结构,合成了9个异海松酸基杂环酰胺化合物(Ⅱa~Ⅱi),其结构经FTIR、1HNMR、13CNMR和TOF-MS确证。抗肿瘤活性测试结果表明,除Ⅱf外,其余目标化合物的抗肿瘤活性均比母体化合物异海松酸的活性高,尤其是含有吡嗪杂环的化合物异海松酸基(2-氨基吡嗪)酰胺(Ⅱd)对人黑色素瘤(A375)细胞显示出显著的增殖抑制活性,其半抑制浓度(IC_(50))为13.34μmol/L,有望通过进一步结构修饰来提高活性,成为异海松酸类抗癌先导化合物。

异海松酸分离制备的新方法

利用异丁醇胺对异海松酸的选择性结晶特性,采用湿地松松脂蒸馏后得到的新鲜松香,或者采用工厂生产得到的湿地松松香进行热异构使大部分枞酸型树脂酸异构成为枞酸,而后将异海松酸与异丁醇胺反应形成异海松酸的异丁醇铵盐而与其他树脂酸进行分离,再利用复式重结晶法纯化异海松酸铵盐结晶,分解游离得到异海松酸,其得率达到原料松香质量分数的10.1%,纯度达到95.4%,提取率为42.2%。

HPLC法测定侧柏叶及其制剂侧柏Ⅴ号胶囊和异海松酸胶囊中异海松酸

目的建立异海松酸的HPLC测定方法，控制侧柏叶及其制剂侧柏V号胶囊和异海松酸胶囊的质量。方法采用高效液相色谱法。色谱条件：Kromasil C18柱（200mm×4．6mm，5μm）；流动相：甲醇-水-冰醋酸（60：37；3）；体积流量：1mL／min；柱温：25℃；检测波长；231nm；进样量：10μL。采用外标法计算样品中异海松酸的质量分数。结果异海松酸的线性关系范围为1．25～10．00μg，回归方程为Y=66214X＋2487．9，r=1．000。平均回收率为95．8％，RSD为2．7％（n=5）。侧柏叶药材中异海松酸的测定结果分别为3．09、3．20、3．56mg／g，侧柏V号胶囊的测定结果分别为10．39、9．67、10．99mg／g，异海松酸胶囊的测定结果分别为553．89、541．50、528．83mg／g。结论该方法简便、准确、分离效果好、无干扰，可用于侧柏及其胶囊的质量评价。

异海松酸甲酯的合成与结构表征

以异海松酸为原料,草酰氯为酰氯化试剂,合成异海松酸酰氯活性中间体,在三乙胺作用下进行甲酯化反应制备异海松酸甲酯,并通过FT-IR、GC-MS、1H NMR和13C NMR等手段对产物进行了表征。用单因素试验法分别对异海松酸酰氯和异海松酸甲酯合成工艺进行优化,研究结果表明,当酰氯化反应中异海松酸与草酰氯物质的量比为1∶1,反应时间为3 h,甲酯化反应中异海松酸酰氯与三乙胺物质的量比为1∶0.24,反应时间为80 min时,目标产物的酰基转化率为99.43%,产物为白色晶体,总产率86.3%。

异海松酸基酰腙化合物的合成及抗癌活性

以异海松酸(IPA)为原料,通过羧基酰氯化、肼解和缩合3步反应,合成了5种异海松酸基酰腙化合物(Ⅲa~Ⅲe)。目标化合物的结构通过IR、~1HNMR、^(13)CNMR和MS分析得到确证,并通过MTT法测试目标产物对小鼠HepG2癌细胞的抑制活性。结果表明,5种化合物对小鼠HepG2癌细胞均表现出抑制活性,其中,化合物Ⅲa和Ⅲc在浓度为100μmol/L时对小鼠HepG2癌细胞表现出显著的抑制活性,抑制率分别为75.42%和70.50%。

侧柏中活性成分异海松酸的分离、鉴定与高效液相色谱定量

目的 :分离、鉴定及定量分析侧柏中活性成分异海松酸。方法 :分离、鉴定通过理化、色谱、光谱方法 ;定量分析通过HPL C法。结果 :分离出 1个无色透明结晶命名为 V号结晶 ;测定了侧柏不同部位、不同产地该成分含量。结论 :该结晶鉴定为异海松酸 ;该成分在侧柏叶中含量高于其他部位 ,北京产含量最高 0 .3 12 %。

异海松酸糠醛类酰腙化合物的合成及生物活性研究

以异海松酸为原料,采用先酰氯化后与水合肼反应的方法,制备得到异海松酸酰肼,然后再与不同取代基的糠醛发生反应,制备得到5种异海松酸糠醛类酰腙化合物:异海松酸基(糠醛)酰腙(4a)、异海松酸基(5-甲基糠醛)酰腙(4b)、异海松酸基(5-羟甲基糠醛)酰腙(4c)、异海松酸基(5-溴-2-糠醛)酰腙(4d)和异海松酸基(5-(4-溴苯基)糠醛)酰腙(4e),并采用FT-IR、1 H NMR、13 C NMR和MS对产物结构进行了确证。生物活性测定结果表明:目标化合物对肺炎链球菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌这5种菌种均具有一定的抑制活性,其中4a对肺炎克雷伯氏菌具有很好的抑菌活性,最低抑菌浓度为1.95 mg/L,化合物4c对肺炎链球菌具有非常好的抑菌活性,最低抑菌浓度仅为0.98 mg/L。当异海松酸糠醛类酰腙化合物的浓度为100μmol/L时,化合物4d对人体肝癌(Hep G2)、乳腺癌(MDA-MB-231)、前列腺癌(PC-3)和宫颈癌(Hela)这4种人体肿瘤细胞均具有较高的抑制率,其抑制率分别为75.17%、82.33%、78.52%和80.97%;化合物4e对人体肝癌(Hep G2)的抑制率高达93.68%,说明其对人体肝癌细胞具有很强的抑制活性。

抗痨胶囊中异海松酸的含量测定

目的:采用薄层扫描法测定抗痨胶囊中异海松酸的含量。方法:色谱条件为硅胶G;氯仿-甲醇(100∶0.5);2%香草醛浓硫酸显色;检测波长560nm。结果:3批胶囊中异海松酸含量为6.09,6.28,5.72mg.g-1。平均回收率97.14%,RSD为2.47%。结论:该法简便、灵敏、准确、重复性好,可用于抗痨胶囊的质量控制。

薄层扫描法测定侧柏叶中异海松酸的含量

目的 :采用薄层扫描法测定侧柏叶中异海松酸的含量 ,并进行方法学研究。方法 :色谱条件为硅胶 G;氯仿 -甲醇(10 0∶ 0 .5) ;2 %香草醛浓硫酸显色 ;检测波长 560 nm。结果 :平均回收率 97.7% ,RSD=2 .16%。结论 :该法简便、灵敏、准确、重复性好 。

异海松酸光固化产物中7-羰基-8,15-异海松酸的分离与结构鉴定(英文)

利用HPLC-UV研究了异海松酸(iPA)UV光固化反应产物,从中检测到了一种具有较强紫外吸收的非聚合物成分。通过硅胶柱色谱和制备型HPLC分离得到了该物质,经气相色谱分析检验,其纯度为82.6%。通过UV-vis、FT-IR、MS、1H NMR及13C NMR等光谱分析研究,该物质的化学结构被鉴定为7-羰基-8,15-异海松酸(7-O-8,15-iPA),这是异海松酸的一种氧化衍生物,与文献报道结构一致。还探讨了异海松酸发生氧化反应生成7-羰基-8,15-异海松酸的反应机理。

枞酸烯丙酯与异海松酸烯丙酯光固化反应的比较研究

研究了枞酸烯丙酯(AA)和异海松酸烯丙酯(AI)发生UV光固化反应的区别。采用红外光谱法表征双键转化率,两者均随引发剂用量的增加先变大后减小;均随光照时间的增加呈先增大后趋于平缓的趋势,但200 s前,AA的UV固化产物双键转化率高;同等光照强度条件下AA的双键转化率高于AI。在同等固化条件下AA的表干时间比AI短,对应的相对固化速率快。以2-羟基-2-甲基苯丙酮(Darocure-1173)为光引发剂,用量为原料质量的6%,光照时间200 s,光照距离4.5 cm,光照强度100%,在此条件下,AA和AI固化产物的数均相对分子质量分别为4 176和9 407,数均聚合度分别为12和28,两者的UV固化产物均有光滑透明的外观,均具有较好的附着力、耐冲击强度及柔韧性,均通过了耐酸、耐碱、耐盐及耐水性测定,AA和AI的硬度分别为H和HB。

异海松酸UV固化反应条件研究

研究了异海松酸为单体进行紫外光固化反应的影响因素,采用红外光谱法对双键转化率进行了表征和分析。采用凝胶色谱分析(GPC)、差示扫描量热分析(DSC)和热重分析(TG)等手段对固化膜的性能进行了表征。结果表明:固化过程中双键转化率随光照时间的增加而增加,随引发剂添加量增加先上升后下降;相对固化速率随引发剂用量、光照强度的增加及光照距离的减小而增加。

海松酸和异海松酸的质子核磁共振分析

前言核磁共振光谱分析是鉴定有机化学物质最重要的手段,目前已普遍应用于松香松节油组分的鉴定,已发表了近50种二萜树脂酸及甲酯(在60或100兆赫)的′HNMR光谱,涉及到具有海松烷、异海松烷和枞烷。

N-异海松酰基-N′-芳杂环基硫脲类衍生物的合成及生物活性

为得到潜在的新型抑菌剂和抗肿瘤药物,笔者以异海松酸为原料,先与草酰氯反应制备得到异海松酰氯,后与硫氰化钾反应生成异海松酰基异硫氰酸酯,在此基础上与不同杂环取代胺反应,设计并合成了10个新型N-异海松酰基-N′-芳杂环基硫脲类衍生物4a~4j,采用傅里叶红外光谱(FT-IR)、氢核磁共振(1H NMR)、碳核磁共振(13C NMR)和质谱(MS)等手段确定了目标化合物的结构,研究了N-异海松酰基-N′-芳杂环基硫脲类衍生物的抑菌及抗肿瘤活性。研究结果表明,大部分N-异海松酰基-N′-芳杂环基硫脲类衍生物对金黄色葡萄球菌都具有良好的抑菌活性,其中化合物4b、4c、4d、4e和4f对金黄色葡萄球菌的最低抑菌质量浓度达到0.98μg/mL,优于对照物青霉素钠,其中化合物4h的最低抑菌质量浓度也达到15.60μg/mL;化合物4i和4j的最低抑菌质量浓度为31.30μg/mL,大部分衍生物对樟子松枯梢病菌和无壳异担子菌无明显的抑菌活性。在浓度为100μmol/L时,部分N-异海松酰基-N′-芳杂环基硫脲类衍生物具有较好的抗肿瘤活性,化合物4f和4g对肝癌细胞的体外抑制率分别为68.59%和82.30%,化合物4g对宫颈癌细胞、前列腺癌细胞和乳腺癌细胞的体外抑制率分别为80.74%、71.21%和62.14%。

异海松酸对AP P／P S1小鼠学习记忆功能及突触可塑性的影响

目的：研究大电导钙激活钾通道（ BKCa ）激活剂异海松酸（ ISO）对APP／PS1转基因阿尔茨海默病模型小鼠认知功能及突触可塑性的影响。方法应用脑立体定向技术向4月龄雄性APP／PS1小鼠和相匹配的野生型（ WT）小鼠左侧侧脑室植入连接Alzet微量渗透压泵的套管，通过微量渗透压泵持续性注射ISO或DMSO治疗。治疗第3周开始在体进行旷场实验和Morris水迷宫实验，之后制备海马脑片，记录海马CA1区兴奋性突触后电位，给予双脉冲刺激检测海马的短时程突触可塑性，给予高频强直电刺激检测海马的长时程突触可塑性。结果在旷场实验中，各组小鼠30 min内自发活动总数及垂直运动距离比较，差异无统计学意义（P＞0．05）；APP／PS1＋DMSO组小鼠水平方向运动距离显著长于WT＋DMSO组（P＜0．05）。定位航行实验的逃避潜伏期，第3～5天APP／PS1＋DMSO组与WT＋DMSO组比较显著延长（P＜0．05）；第4～5天APP／PS1＋ISO组较APP／PS1＋DMSO组显著缩短（P＜0．05）。空间探索实验显示APP／PS1＋DMSO组小鼠穿越平台区时间百分比和穿越平台次数[（34．19±2．56）％，（1．93±0．33）次]较WT＋DMSO组[（43．27±3．24）％，（4．25±0．66）次]显著降低（P＜0．05），APP／PS1＋ISO组小鼠穿越平台区时间百分比[（46．16±3．51）％]和穿越平台次数[（3．41±0．34）次]较APP／PS1＋DMSO组显著增加（P＜0．05）。双脉冲间隔为30、40、和50 ms时，APP／PS1＋DMSO组海马CA1区的双脉冲易化较WT＋DMSO组显著下降（P＜0．05），短时程突触可塑性受损。双脉冲间隔为40 ms时APP／PS1＋ISO组海马CA1区的双脉冲比值[（224．50±13．79）％]与APP／PS1＋DMSO组[（174．99±6．68）％]相比显著升高（P＜0．05），说明ISO促进APP／PS1小鼠海马双脉冲易化作用，有助于恢复海马的短时程突触可塑性。与WT＋DMSO组[TBS后60 min，LTP＝（172．17±4．15）％]相比，APP／PS1＋DMSO组[TBS后60 min，LTP＝（135．19±1．32）％]海马CA1区的长时程增强（LTP）显著下降（P＜0．01）；APP／PS1＋ISO组[TBS后60 min，LTP＝（160．48±1．19）％]海马 CA1区 LTP 与APP／PS1＋DMSO组相比显著升高（P＜0．01），说明ISO对APP／PS1小鼠海马CA1区LTP具有促进作用，有助于恢复海马的长时程突触可塑性。结论 BKCa通道激活剂ISO通过促进双脉冲易化（ PPF）及提高海马LTP恢复APP／PS1小鼠的神经突触可塑性，改善学习和记忆能力。

异海松酰基噻吩类磺酰胺的制备及其抗肿瘤活性研究

以异海松酸为原料,酰氯化制得异海松酸酰氯,然后异海松酸酰氯再与对苯二胺连接的噻吩类磺酰胺发生胺解反应,合成得到4个未见报道的异海松酰基噻吩类磺酰胺:异海松酰基-4-溴-2,5-二氯噻吩-3-磺酰胺(5a)、异海松酰基-5-溴噻吩-2-磺酰胺(5b)、异海松酰基-5-氯-4-硝基噻吩-2-磺酰胺(5c)、异海松酰基-噻吩-2-磺酰胺(5d)。对合成的化合物的结构用FT-IR、1 H NMR、13 C NMR和ESI-MS进行确证,并采用噻唑蓝(MTT)法测定了目标化合物对4种肿瘤细胞的抑制活性。研究结果表明:浓度100μmol/L时,化合物5b对Hela、MDA-MB-231及Hep G2的肿瘤细胞增殖抑制率均超过90%,其抑制率分别为91.36%、94.06%和92.26%,而对PC-3的肿瘤细胞抑制率为86.93%,也接近90%,说明化合物5b具有良好的抗肿瘤活性。通过IC 50值的测定进一步得出化合物5b的抑制效果优于阳性对照物临床上应用较广的抗癌剂5-氟尿嘧啶(5-FU)。

N-杂环异海松酰基磺酰胺的制备及其抗肿瘤活性

为了寻求以天然资源为原料的抗肿瘤药物,以异海松酸为原料,设计并合成了6个N-[4-(异海松酰胺基)苯基]-杂环磺酰胺类化合物(Ⅴa~Ⅴf),采用FTIR、^(1)HNMR、^(13)CNMR和MS对其结构进行了表征。生物活性测试结果表明,部分化合物对人体宫颈癌细胞(Hela)、乳腺癌细胞(MDA-MB-231)、前列腺癌细胞(PC-3)和肝癌细胞(Hep G-2)具有良好的抑制活性。在浓度为100μmol/L时,N-[4-(异海松酰胺基)苯基]-2-氯-5-吡啶磺酰胺(Ⅴd)和N-[4-(异海松酰胺基)苯基]-3-溴-2-氯吡啶-5-磺酰胺(Ⅴe)对4种人体肿瘤细胞都具有良好的抑制活性,对上述人体肿瘤细胞的增殖抑制率均大于95%和94%;N-[4-(异海松酰胺基)苯基]-3-氯喹啉磺酰胺(Ⅴc)对上述肿瘤细胞的增殖具有较好的抑制活性。化合物Ⅴd和Ⅴe对4种肿瘤细胞的半抑制浓度(IC50)均低于临床上应用较广的抗癌剂5-氟尿嘧啶(5-FU),其抑制活性优于阳性对照,且对人体正常细胞——人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的毒性低于对肿瘤细胞的毒性,有一定的临床应用前景。

异海松基水杨酰腙的合成及细胞毒性评价

以水杨醛和异海松酸为原料,合成了异海松基水杨酰腙,通过IR,~1H NMR和HR-TOF-MS对产物结构进行了鉴定,采用噻唑蓝(MTT)比色法研究了目标化合物对癌细胞及正常细胞的细胞毒性,并进一步对比了其与阳性药物紫杉醇的细胞毒性。结果表明:异海松基水杨酰腙对人体肝癌细胞HepG-2和前列腺癌细胞PC-3具有显著的细胞毒性,半数抑制浓度(IC_(50))值分别为6.50和9.25μmol/L,高于或接近于对照物紫杉醇(IC_(50)12.14和6.48μmol/L)的细胞毒性,同时异海松基水杨酰腙对人体正常的肝细胞L-02具有较低的细胞毒性,IC_(50)值为68.01μmol/L,远远低于对照品紫杉醇(IC_(50)4.02μmol/L)。抑制率和细胞形态变化分析表明,异海松基水杨酰腙对细胞增殖的抑制活性与剂量有关。

异海松酰肼系列衍生物的合成与表征

以异海松酸(IPA)为原料,经酰氯化和肼解两步反应合成了中间体异海松酰肼,该化合物进一步衍生化合成了异海松酰胺基(2,5-二甲基)吡咯、异海松酰胺基硫脲、异海松酰胺基苯基硫脲和异海松酰胺基苯磺酰胺等4种新型异海松酰肼衍生物,收率为53.67%~76.46%。所得产物经光谱和波谱分析得到确证。

气相色谱分析方法在脂松香种类化学鉴别上的研究

用纯马尾松松脂、纯湿地松松脂、纯思茅松松脂制得松香样品；应用DB-5毛细管柱对松香样品中主要的树脂酸含量进行了气相色谱定量分析；通过测定松香样品中异海松酸GC含量和海松酸／异海松酸GC含量的比值，可以确定并鉴别松香所属种类。纯马尾松、湿地松、思茅松松香的异海松酸GC含量及海松酸／异海松酸GC含量的比值分别是：〈2％为8．58；4％～5％为1．24；≥14％为0．24。