G蛋白偶联受体异源二聚体及其偏向性配体:未来药物研发的新主角

不同类型G蛋白偶联受体(GPCRs)之间的异源二聚化作用已得到普遍认可,异源二聚体具有不同于单体和同源二聚体的高阶结构特点,这在一定层次上类似于变构调节机制,使得GPCRs异源二聚体呈现更高的信号特异性和多样性。成功筛选GPCRs异源二聚体的特异配体或偏向性配体,能够为研发降低副作用的药物提供新的策略。该文就GPCRs异源二聚体的信号特点及其偏向性配体的生理药理学价值和筛选GPCRs异源二聚体偏向性配体的技术做一简要综述。

骨形态发生蛋白异源二聚体(BMP2/7)诱导成骨的研究进展

骨形态发生蛋白(BMPs)异源二聚体较同源二聚体有更明显的诱导成骨效应,高效、低剂量起效且起效快的特点使其成为临床骨充填材料的最佳选择。本文介绍了异源二聚体BMP2/7诱导成骨的相关实验,并对相关机理研究做一概述,主要包括诱导成骨的相关受体、信号通路及反馈抑制研究,并对未来的研究进行了展望。

钙结合蛋白S100A8和S100A9的异源二聚体体外构建

目的体外构建S100A8和S100A9的异源二聚体(S100A8/S100A9),为其分子生物学功能研究提供依据。方法原核表达载体pET28 a-S100A8和pET28 a-S100A9分别转化感受态细胞BL21,并用异丙基硫化-β-D半-乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白,N i-NTA H is柱纯化蛋白,将等量纯化蛋白在一定钙离子浓度下室温孵育30 m in,通过SDS-PAGE和W estern b lot方法验证异源二聚体的形成。结果质粒pET28 a-S100A8和pET28 a-S100A9在相对分子质量约11 kD和14 kD处出现新生的蛋白条带,可溶性分析发现两个蛋白均可以以可溶的形式存在,纯化后得到了目的蛋白,S100A8和S100A9室温孵育后形成了异源二聚体。结论 S100A8和S100A9蛋白可以在体外形成异源二聚体。

早期联合检测神经元烯醇化酶、D-二聚体、超敏C反应蛋白与颅脑损伤预后相关性的研究

目的研究早期联合检测神经元烯醇化酶(Neuron specific enolase,NSE)、D-二聚体(D-dimer,DD)、超敏C反应蛋白(High sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)对颅脑损伤预后评估的意义。方法采用前瞻性研究,将216例颅脑损伤患者根据格拉斯哥预后评分(Glasgow outcome scale,GOS)分为预后不良组及预后良好组,早期检测外周血神经元烯醇化酶、D-二聚体、超敏C反应蛋白的浓度。比较两组间检验指标的均数,并以NSE、DD、hs-CRP作为自变量,预后不良作为因变量,建立Logistic逐步回归方程,用ROC曲线检验指标的诊断效能。结果单因素分析显示神经元烯醇化酶、D-二聚体、超敏C反应蛋白的浓度根据预后的不同有显著差异(P<0.05)。Logistic逐步回归方程显示三项检验指标均进入方程,提示共同影响颅脑损伤的预后。ROC曲线分析显示综合三项指标生成的预测概率的诊断效率明显高于单项指标。结论早期检测神经元烯醇化酶、D-二聚体、超敏C反应蛋白对颅脑损伤预后评估有重要临床意义,联合检测具有较高的诊断效率,有助于临床决策。

D-二聚体和血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验检测继发性纤溶的对比研究

目的探讨D-二聚体可代替血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验对继发性纤溶,动脉或静脉血栓性疾病,妊高症和恶性肿瘤的检测。方法选择20名继发性纤溶深静脉血栓、妊高症、白血病病人分别做D-二聚体和血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验进行对比。结果D-二聚体比血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验的敏感性高。结论D-二聚体是检测继发性纤溶的最佳指标,D-二聚体检测如阴性,则基本可排除血栓形成。

急性脑梗死患者血浆D二聚体、纤维蛋白原、神经元特异性烯醇化酶联合检测的临床价值

目的为探讨急性脑梗死(ACI)患者血浆D二聚体(D-D)、纤维蛋白原(Fbg)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)联合检测的临床价值。方法采用SysmexCS2000 i全自动血凝仪对150例ACI患者及100例健康体检者血浆D-D、Fbg、NSE分别进行检测,并进行比较。结果 ACI患者血浆D-D、Fbg、NSE水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论联合检测血浆D-D、Fbg、NSE对于ACI患者的早期诊断及病程变化监测具有重要临床价值。

骨形态发生蛋白2/7异源二聚体的研究进展

骨形态发生蛋白2/7(BMP2/7)异源二聚体,较其同源二聚体具有更强的诱导成骨潜能,是目前组织工程骨研究的重要分支之一。本文介绍了异源二聚体BMP2/7诱导成骨的相关实验,比较其与同源二聚体生物活性的差异,并对相关机制进行综述。

重型颅脑损伤患者颅内压与神经元特异性烯醇化酶、C-反应蛋白及D-二聚体水平变化关系研究

探讨重型颅脑损伤患者颅内压改变与神经元特异性烯醇化酶、C-反应蛋白和D-二聚体的关系。采用电化学发光免疫分析法检测两组血清神经元特异性烯醇化酶,免疫比浊法检测C-反应蛋白和D-二聚体水平。重型颅脑损伤患者神经元特异性烯醇化酶、C-反应蛋白和D-二聚体指标的水平均显著高于健康者,监测颅内压重度增高组患者的神经元特异性烯醇化酶、C-反应蛋白和D-二聚体水平均显著高于中度增高组。结果说明,重型颅脑损伤患者颅内压改变与患者血清中神经元特异性烯醇化酶、C-反应蛋白和D-二聚体指标水平存在明显的正相关性。

补肺化瘀通络汤联合阿替普酶治疗慢性肺栓塞疗效及对血清高迁移率族蛋白B1、肌钙蛋白和血浆D-二聚体的影响

目的观察补肺化瘀通络汤联合阿替普酶治疗慢性肺栓塞疗效及对血清高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)、肌钙蛋白(cTnI)和血浆D-二聚体(D-D)的影响。方法将102例慢性肺栓塞患者随机分为2组,对照组51例给予阿替普酶治疗,研究组51例给予补肺化瘀通络汤联合阿替普酶治疗,2组均持续治疗4周。对比2组治疗后临床疗效,检测2组治疗前后肺功能、凝血功能以及血清HMGB-1、cTnI和血浆D-D水平。结果治疗后研究组临床治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);2组治疗后FEV1、FEV1/FVC以及FIB和PT水平均较治疗前显著上升(P均<0.05),且研究组上述指标升高程度均显著优于对照组(P均<0.05);2组治疗后血清HMGB-1、cTnI和血浆D-D水平均较治疗前显著下降(P均<0.05),且研究组上述指标降低程度均显著优于对照组(P均<0.05)。结论补肺化瘀通络汤联合阿替普酶治疗慢性肺栓塞疗效显著,可明显降低血清HMGB-1、cTnI和血浆D-D水平。

急性脑梗死病人S100B蛋白、NSE、Hcy和D-二聚体水平变化及其临床意义

目的观察急性脑梗死(ACI)病人S100B蛋白、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、同型半胱氨酸(Hcy)和D-二聚体水平变化,并探讨其临床检测价值。方法选取2015年9月—2017年9月我院马王堆院区神经内科收治的急性脑梗死病人108例,作为ACI组,选择同期健康体检者60名为对照组。检测受试者血清S100B蛋白、NSE、Hcy和血浆D-二聚体水平;采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评估神经功能缺损程度,根据NIHSS评分将108例ACI病人分为轻型梗死组(32例)、中型梗死组(62例)、重型梗死组(14例),根据患病后是否并发意识障碍分为伴意识障碍组(22例)与不伴意识障碍组(86例)。结果ACI组S100B蛋白、NSE、Hcy和D-二聚体水平明显高于对照组(P<0.05)。不同神经功能缺损组间S100B蛋白、NSE和D-二聚体水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),Hcy水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。S100B蛋白、NSE和D-二聚体水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.630,P=0.000;r=0.420,P=0.002;r=0.458,P=0.001)。伴意识障碍组D-二聚体水平高于不伴意识障碍组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论S100B蛋白、NSE和D-二聚体可作为评价ACI病情严重程度的生物标志物,Hcy可作为辅助检查指标。

骨形态发生蛋白异源二聚体诱导成骨的研究新进展

骨形态发生蛋白异源二聚体较同源二聚体具有更低的使用剂量和更高的诱导成骨能力,因而受到广泛关注。本文介绍了BMP异源二聚体的相关研究,包括种类结构、作用机制和在诱导成骨方面的研究,比较其与BMP同源二聚体的功能差异,并对其前景作出展望。

益气养阴化瘀法对糖尿病肾病Ⅳ期C反应蛋白、D-二聚体、尿白蛋白/肌酐及视黄醇结合蛋白的影响

【目的】基于益气养阴化瘀法,观察中药复方参芪地黄汤对糖尿病肾病Ⅳ期(中、晚期)患者C反应蛋白(CRP)、D-二聚体(D-dimer)、尿白蛋白/肌酐(ACR)及视黄醇结合蛋白(RBP)的影响。【方法】选择符合糖尿病肾病Ⅳ期诊断患者60例,随机分为治疗组和对照组各30例。对照组给予西医常规基础治疗,治疗组在对照组基础上给予参芪地黄汤加减治疗,观察2组患者治疗前后肾功能[血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(CCr)]、CRP、D-dimer、ACR及RBP等指标和中医证候积分的变化情况,并评价2组患者的临床疗效。【结果】(1)治疗3个疗程后,治疗组的总有效率为86.67%,对照组为73.33%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。(2)治疗后,2组患者各项中医证候积分均较治疗前明显降低(P<0.05),且治疗组的降低作用均明显优于对照组(P<0.05)。(3)治疗后,2组患者的SCr、BUN、CCr等肾功能指标均较治疗前改善(P<0.05),且治疗组的改善作用均优于对照组(P<0.05)。(4)治疗后,2组患者的CRP、D-dimer、ACR、RBP均较治疗前改善,且治疗组的改善作用均优于对照组(P<0.05)。【结论】中药复方参芪地黄汤治疗糖尿病肾病Ⅳ期患者具有较好疗效,其可能通过降低肾小球与肾小管损伤、降低炎症反应和增强微血管循环等方面来改善糖尿病肾病患者恶化的肾功能,进而提高患者的生存率。

化瘀渗湿汤对全膝关节置换术后血浆D-二聚体和纤维蛋白原含量的影响

目的:探讨口服化瘀渗湿汤对全膝关节置换术后血浆D-二聚体(D-dimer,DD)和纤维蛋白原(fibrinogen,FBG)含量的影响。方法:将60例膝骨关节炎患者随机分为2组,每组30例;2组患者均进行单侧全膝关节置换术,术后均皮下注射低分子肝素钙,双下肢使用空气压力泵。其中1组患者在此基础上予以化瘀渗湿汤口服。分别于术前、术后第1天和第7天测定并比较2组患者血浆DD和FBG的含量。结果:手术前后不同时间点血浆DD含量比较,差异有统计学意义,存在时间效应(F=137.114,P=0.001);2组患者血浆DD含量比较,组间差异总体上有统计学意义,存在分组效应(F=6.484,P=0.014);术前和术后第1天2组患者血浆DD含量比较,差异均无统计学意义[(0.653±0.388)mg·L^(-1),(0.643±0.384)mg·L^(-1),t=0.104,P=0.918;(2.305±0.623)mg·L^(-1),(2.607±0.599)mg·L^(-1),t=-1.910,P=0.061];术后第7天低分子肝素钙联合空气压力泵和化瘀渗湿汤组的血浆DD含量低于低分子肝素钙联合空气压力泵组[(0.530±0.249)mg·L^(-1),(0.790±0.225)mg·L^(-1),t=-4.246,P=0.001];时间因素与分组因素不存在交互效应(F=2.498,P=0.099)。手术前后不同时间点血浆FBG含量比较,差异有统计学意义,存在时间效应(F=245.334,P=0.001);2组患者血浆FBG含量比较,组间差异总体上无统计学意义,不存在分组效应(F=2.380,P=0.128);术前和术后第1天2组患者血浆FBG含量比较,差异均无统计学意义[(3.010±0.511)g·L^(-1),(2.909±0.563)g·L^(-1),t=0.728,P=0.470;(4.621±0.421)g·L^(-1),(4.739±0.614)g·L^(-1),t=-0.870,P=0.388],术后第7天低分子肝素钙联合空气压力泵和化瘀渗湿汤组的血浆FBG含量低于低分子肝素钙联合空气压力泵组[(2.958±0.397)g·L^(-1),(3.336±0.488)g·L^(-1),t=-3.294,P=0.002];时间因素与分组因素存在交互效应(F=3.964,P=0.022)。结论:在皮下注射低分子肝素钙联合双下肢使用空气压力泵的基础上,给予口服化瘀渗湿汤,能降低全膝关节置换术后血浆DD和FBG的含量,改善术后血液高凝、高黏状态,其效果优于皮下注射低分子肝素钙联合双下肢使用空气压力泵。

拉贝洛尔联合硫酸镁对高龄妊娠期高血压患者D-二聚体、纤维蛋白原水平及血压控制的影响

目的 探讨拉贝洛尔联合硫酸镁对高龄妊娠期高血压患者D-二聚体、纤维蛋白原水平及血压控制的影响,以期为临床治疗提供参考。方法 本研究选取2019年5月—2021年5月西平县人民医院产科收治的72例高龄妊娠期高血压患者为研究对象。采用随机数字表法,将患者分为观察组与对照组,每组36例。对照组患者给予硫酸镁治疗,观察组患者给予拉贝洛尔联合硫酸镁治疗。比较2组患者治疗前(入院时)及治疗后(出院时)收缩压与舒张压。比较2组患者治疗前(入院时)及治疗后(出院时)D-二聚体及纤维蛋白原水平。比较2组患者妊娠结局与母婴不良结局。结果 治疗前,2组患者收缩压及舒张压水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组患者收缩压及舒张压水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组患者D-二聚体及纤维蛋白原水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组患者D-二聚体及纤维蛋白原水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者剖宫产率及母婴不良结局发生率均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 拉贝洛尔联合硫酸镁治疗高龄妊娠期高血压的效果显著,可以有效降低患者D-二聚体、纤维蛋白原水平及血压,改善分娩结局,值得推广应用。

神经元特异性烯醇化酶、D-二聚体、纤维蛋白原降解产物、细胞色素C对脑出血患者的临床评价价值

目的:探讨神经元特异性烯醇化酶(NSE)、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(Fbg)降解产物、细胞色素C(Cyt C)的表达对脑出血患者的临床评价价值。方法:选择2019年2月—2021年2月本院诊治的脑出血患者66例作为脑出血组,同时随机选取同期在本院的健康体检者66例作为正常对照组,检测两组血液样本NSE、D-D、Fbg降解产物、Cyt C的表达水平,调查脑出血组患者的NIHSS评分并进行相关性分析。结果:脑出血组的血液NSE、D-D、Fbg降解产物、Cyt C含量均高于正常对照组(P<0.05)。在脑出血组中,平均NIHSS评分为(9.22±0.87)分;Pearson分析显示NIHSS评分与NSE、D-D、Fbg降解产物、Cyt C存在负相关性(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示NSE、D-D、Fbg降解产物、Cyt C为影响NIHSS评分的重要因素(P<0.05)。结论:NSE、D-D、Fbg降解产物、Cyt C在脑出血患者中呈现高表达,与患者的NIHSS评分呈现相关性,也是影响患者病情的重要因素。

BMP2/7异源二聚体调控CIZ的表达与自身活性的关系

BMP2/7异源二聚体的活性显著高于BMP2同源二聚体,但其机制并不清楚。采用哺乳动物细胞表达的BMP2/7异源二聚体处理成骨细胞MC3T3-E1,细胞化学染色发现BMP2/7的活性显著高于BMP2,报告载体p3GC2-LUX检测发现BMP2/7能够明显上调BMP/Smad通路的活性(P<0.05)。但在成骨细胞中过表达CIZ(casinteracting zinc finger protein),能够显著抑制BMP2/7上调ALP与Osteocalcin的作用,并阻断BMP2/7对BMP/Smad通路的激活。同时发现BMP蛋白能够上调CIZ的表达,但BMP2/7的作用明显低于BMP2同源二聚体。可以认为BMP2/7能够诱导CIZ的表达,但由于作用较弱,所以对自身活性的反馈抑制作用也较弱,这可能是BMP2/7有着较强生物活性的关键所在。

在CHO细胞中表达具有高效成骨活性的BMP-2／7异源二聚体

PCR扩增BMP-2与BMP-7的编码基因,利用重叠PCR以柔性肽(Gly4Ser)5编码序列将二者串连并克隆到质粒pIRESneo3上,转染CHO-K1细胞得到混合稳定克隆。ELISA检测培养液中BMP-2/7异源二聚体蛋白的表达水平为230.75±13.34ng/mL,以此为条件培养基处理成骨细胞株MC3T3,对照组为分别含有CHO-K1细胞及大肠杆菌表达的BMP-2同源二聚体以及PBS的条件培养基。结果发现碱性磷酸酶染色与茜素红染色差异明显,定量RT-PCR显示分子指标OC、ALP、Runx2与Osx的转录水平明显增高(P<0.05),Luciferase报告基因检测BMP/Smad通路活性较对照组升高明显(P<0.05)。首次设计构建了BMP-2/7异源二聚体蛋白,其成骨活性显著高于BMP-2同源二聚体。

参芪化瘀汤辅助治疗对脓毒症患者炎性因子及D-二聚体的影响

目的:探讨中药参芪化瘀汤辅助治疗对脓毒症患者炎性因子及D-二聚体的影响。方法:84例脓毒症患者随机分为对照组42例与观察组42例,对照组采取感染控制、营养支持、血液净化、机械通气及基础疾病等对症治疗,观察组辅以参芪化瘀汤口服,每日1剂,7 d为1个疗程。治疗前及治疗7 d后进行血CRP(C反应蛋白)、PCT(降钙素原)、TNF-α(肿瘤坏死因子)、IL-6(白细胞介素-6)及D-D(D-二聚体)检测,并急性生理与慢性健康评分(APACHEII)评分。结果:治疗7 d后两组患者血CRP、PCT、TNF-α、IL-6、D-D水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),APACHEII评分也明显降低(P<0.05);观察组上述指标改善均显著于对照组(P<0.05)。结论:中药参芪化瘀汤辅助治疗可明显减轻脓毒症患者炎症反应,改善机体生理功能和健康状况。

血栓弹力图联合外周血NSE、CRP、D二聚体检测对肺癌根治术后VTE事件发生的预测价值

目的探讨血栓弹力图(TEG)联合外周血神经元特异性烯醇化酶(NSE)、C-反应蛋白(CRP)、D二聚体(D-D)检测对肺癌根治术后静脉血栓栓塞症(VTE)事件发生的预测价值。方法选取2020年1月至2022年12月收治的300例行肺癌根治术患者为研究对象,根据术后1个月内是否发生VTE分为VTE组(84例)和非VTE组(216例)。测定2组TEG参数、NSE、CRP及D-D水平,并分析TEG参数联合NSE、CRP及D-D对肺癌根治术后VTE的预测价值。结果与非VTE组比较,VTE组MA和凝固角(α)水平更高,血液凝固时间(K)和血液反应时间(R)水平更低(P<0.05);与非VTE组比较,VTE组NSE、CRP及D-D水平更高(P<0.05);ROC曲线结果显示,MA预测肺癌根治术后VTE的AUC和截点值分别为0.762、78.52 mm,K预测肺癌根治术后VTE的AUC和截点值分别为0.787、2.27 min,R预测肺癌根治术后VTE的AUC和截点值分别为0.682、5.30 min,α预测肺癌根治术后VTE的AUC和截点值分别为0.775、82.25°,NSE预测肺癌根治术后VTE的AUC和截点值分别为0.716、15.94μg/L,CRP预测肺癌根治术后VTE的AUC和截点值分别为0.786、20.12 mg/L,D-D预测肺癌根治术后VTE的AUC和截点值分别为0.818、3.64 mg/L,六者联合预测肺癌根治术后VTE的AUC为0.968,高于单项预测(P<0.05)。结论TEG参数联合NSE、CRP及D-D对肺癌根治术后VTE事件发生的预测价值较高。

MDV蛋白同源二聚体功能确立

马立克氏病毒（MDV）是一种可导致鸡肿瘤的疱疹病毒，具有高度传染性，鸡感染几周内可导致恶性T细胞淋巴瘤。MDV编码的一个肿瘤蛋白Meq，其功能与b-ZIP转录因子的Jun／Fos家族想类似。Meq蛋白的亮氨酸拉链区域可以形成同源或者异源二聚体。这两种二聚体的DNA结合力和转录活性都不相同。因此，它们可能对病毒和细胞内基因的转录调控机制也有所不同。美国德克萨斯州农工大学、加州大学达维斯分校比较医学中心和农业部禽病和肿瘤实验室的科研人员对Meq蛋白同源二聚体在MDV致病性方面的作用进行了研究。