异源反应性NK细胞对骨髓移植小鼠脾脏Th1/Th2细胞亚群的影响

目的:观察异源反应性自然杀伤细胞(NK细胞)对骨髓移植小鼠脾脏辅助性T细胞Th1/Th2亚群的影响。方法:以BALB/c和CB6F1小鼠为受体,在γ射线照射后通过尾静脉输入C57BL/6J小鼠的骨髓细胞和脾脏单个核细胞,建立移植物抗宿主病模型;然后输入供体的NK细胞,检测受体小鼠脾脏中Th1/Th2淋巴细胞亚群和外周血中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)的变化。结果:与单纯输入骨髓细胞和单个核细胞组小鼠相比,输入异源反应性NK细胞后,BALB/c和CB6F1小鼠脾脏中Th1细胞比例均下降,Th2细胞比例均上升,CB6F1小鼠脾脏中Th2虽有升高但没有统计学意义;外周血中IL-10水平显著升高,IFN-γ的水平显著下降。结论:异源反应性NK细胞可能通过降低脾脏中Th1细胞亚群比例和升高Th2细胞亚群比例减轻移植物抗宿主病。

异源反应性NK细胞对骨髓移植小鼠Th17细胞亚群和IL-17分泌的影响

目的观察异源反应性NK细胞对骨髓移植小鼠脾脏Th17细胞亚群和血清中IL-17水平的影响,初步探讨Th17细胞和IL-17在异源反应性NK细胞减轻移植物抗宿主病(GVHD)中的可能机制。方法以BALB/c小鼠为受体,在γ射线照射后通过尾静脉输入C57BL/6J小鼠的骨髓细胞和脾脏单个核细胞,建立GVHD模型。输入供体的NK细胞后,在不同时间点以流式微载体技术和流式细胞术检测受体外周血中IL-17水平和脾脏中Th17细胞亚群比例的变化。结果移植术后4、6、8d,GVHD+NK细胞组小鼠GVHD症状明显减轻,急性GVHD临床评分分别为1.32±0.43、1.61±0.13、1.45±0.28,显著低于GVHD组小鼠(3.12±0.57、4.00±0.32、3.23±0.37,P<0.01)。术后2d,IL-17的浓度一过性升高,但差异无统计学意义(P%=0.257)。术后6d和8d时,NK细胞组小鼠外周血IL-17水平显著下降[(1.68±0.19)vs.(2.29±0.67)pg/ml,P=0.004;(1.67±0.36)vs.(3.61±0.49)pg/ml,P=0.000];同时流式细胞仪检测结果显示,脾脏中Th17细胞亚群的比例也显著降低[(0.26±0.08)vs.(1.04±0.47),(0.15±0.14)vs.(1.08±0.47),P=0.000]。结论异源反应性NK细胞可能通过抑制脾脏中Th17细胞亚群细胞比例和外周血中IL-17水平减轻GVHD。

不同KIR亚型与HLA-Cw相互作用后对NK细胞的异源反应及移植预后的影响

杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）在移植中的地位越来越明显，KIR亚型与HLA-Ⅰ类分子，尤其是HLA—Cw之间的相互作用对自然杀伤（NK）细胞及移植预后的影响有着不同的见解，本文主要对这从KIR的亚型与HLA-C的相互识别作用对自然杀伤细胞及移植预后这一点予以综述。

异源肺癌细胞微小RNA-21差异性表达促进肺癌转移

目的探讨不同来源的肺癌细胞中微小RNA(miRNA,miR)表达与肺癌转移能力的相关性及其分子机制.方法在人肺支气管上皮细胞Beas2B和人肺泡上皮细胞CC-H007过表达K-ras并敲除p53,裸鼠体内细胞移植证明两种细胞转变成肿瘤细胞;划痕实验和侵袭实验检测两种肿瘤细胞的迁移能力;实时定量聚合酶链反应(PCR)检测两种肿瘤细胞中E-粘连蛋白、N-粘连蛋白、波形蛋白mRNA和miR-21表达变化.计数数据均以均值±标准差(Mean±SD)表示,采用t检验.结果克隆形成实验证明过表达K-ras并敲除p53后两种细胞在裸鼠体内都可以形成肿瘤,肿瘤大小为(0.86±0.06)g和(0.67 ±0.08) g(t =59.251、78.590,P<0.05);划痕实验和侵袭实验显示Beas2B肿瘤细胞迁移能力比CC-H007强,侵袭细胞数和迁移率分别为(196.3 ±6.5)个、(21.8±3.5)%和(38.3±9.5)个、(2.7±0.6)%(t=19.227、8.566,P<0.05);实时定量PCR结果显示Beas2B肿瘤细胞miR-21、N-粘连蛋白和波形蛋白mRNA表达上调(4.50 ±0.40、3.09±0.12、4.96±0.16),E-粘连蛋白mRNA表达降低(0.22±0.03),差异有统计学意义(t=6.865、6.202、7.351、15.384,P<0.05);CC-H007肿瘤细胞miR-21、E-粘连蛋白、N-粘连蛋白和波形蛋白mRNA表达无明显变化(0.94 ±0.03、0.97 ±0.03、0.93±0.02、1.04±0.14),差异无统计学意义(t=5.011、5.209、5.851、10.394,P>0.05).结论 Beas2B来源的肺癌细胞中miR-21高表达诱导上皮-间充质转化促进肺癌转移,CC-H007来源的肺癌细胞中miR-21低表达而缺乏转移能力.

Gene expression of cytokines after allogeneic peripheral stem cell transplantation and its relationship with acute graft-versus-host disease

Objective: To investigate the role of cytokines IL-2, IL-4, IL-10, IL-12, and IFN-γ in pathogenesis of acute graft-versus-host disease (aGVHD) after allogeneic peripheral blood stem cell transplantation (allo-PBSCT). Methods: Forty-two patients undergoing allo-PBSCT were included in this study. Reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to analyze gene expression of cytokines IL-2, IL-4, IL-10, IL-12, and IFN-γ. Results: All patients achieved engraftment, 18 patients developed grade ⅠGVHD, 6 patients developed grade Ⅱ-Ⅳ GVHD. The gene expression of IL-2, IL-12, and IFN-γ increased, the gene expression of IL-4 and IL-10 decreased. Conclusion: Cytokines IL-2, IL-12, and IFN-γ lead to a positive regulation of the development in human aGVHD, and IL-4 and IL-10 play negative regulatory roles.