异硫氰酸异丁酯抑制肝癌细胞HepG2生长的效应与机理

为了探究异硫氰酸异丁酯(isobutyl isothiocyanate)对肝癌细胞HepG2的生长抑制效应及其分子机制,该研究通过MTT实验检测化合物对细胞的生长抑制率,计算出IC_(50)值为3.5μg·mL^(-1);通过流式细胞技术检测发现0.437μg·mL^(-1)以上浓度的化合物能诱导HepG2细胞凋亡;通过划痕实验检测发现0.875μg·mL^(-1)以上浓度的化合物能抑制细胞迁移;进一步通过生物信息学分析表明异硫氰酸异丁酯的靶蛋白可能为巨噬细胞迁移抑制因子(MIF),且HepG2细胞中MIF表达量高于低敏感株.免疫印迹实验也进一步发现化合物不仅能够抑制蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的激活,还能下调p53蛋白表达.研究结果表明,异硫氰酸异丁酯可能通过靶向HepG2细胞中的MIF蛋白,影响MIF与其受体CD74相互作用,从而下调p53蛋白表达,阻滞细胞周期的正常进行,诱导细胞凋亡,对肝癌具有特异性的抑癌潜力.

GC内标法同时测定刺山柑果实中3种刺激性成分的含量

目的:建立毛细管气相色谱法同时测定刺山柑果实中3种刺激性成分(异硫氰酸异丙酯、异硫氰酸甲酯、异硫氰酸异丁酯)的方法。方法:采用挥发油提取器提取挥发油;以异硫氰酸丁酯为内标物,用TM-FFAP毛细管柱分离,火焰离子化检测器检测;以保留时间定性,内标法定量。结果:在所选的色谱条件下,上述成分在46 min内获得较好的分离;3种成分与内标物的峰面积比值与其浓度呈良好的线性关系(r>0.999 1);样品加标平均回收率为85.9%～104%,RSD 2.44%～3.12%。结论:方法简单、准确,可同时测定刺山柑果实中3种刺激性成分的含量,为其质量控制提供依据。