荧光抗体技术及其对分割沙门氏菌的检验

分割肉品(猪、兔、鸡)沙门氏菌检验是加工出口肉品的法定检验项目。由于沙门氏菌常规细菌学检验手续繁琐,费时长,给加工生产带来困难。同时检验抽样数量较多,需要花费一定人力物力。故分割肉品沙门氏菌检验快速化,势在必行。应用荧光抗体技术检验食品沙门氏菌已在国际上得到公认。我国外贸商检部门经多年探索试验,应用荧光抗体作为沙门氏菌的检验积累了大量数据。但是由于荧光标记抗体市上缺少供应,而加工厂实验室以自己免疫动物提取多价沙门氏菌抗血清,并进行异硫氰酸荧光黄(FITC)标记尚有很多困难,影响推广应用。鉴于生产部门的迫切需要,故对有关抗体制作及荧光抗体技术等方面进行探索和研究,现介绍方法如下:

壳聚糖-碳纳米粒的制备及其体外性质的研究

目的制备壳聚糖-碳纳米颗粒并研究其理化性质和体外活性。方法首先,用溶胶法制备出分散性良好的碳纳米粉末,再通过正负电荷相互吸引制备出壳聚糖-碳纳米颗粒;其次,用绿色荧光蛋白(PEGFP-C1)质粒DNA作报告基因,以静电吸附的方式将PEGFP-C1质粒DNA与壳聚糖-碳纳米颗粒结合形成载基因纳米粒;再次,用扫描电镜观察其形态特征,激光粒度分析仪测定其粒度分布及表面电位(Zeta电位),MTT试验检测壳聚糖-碳纳米载体对HepG2细胞和COS7细胞的毒性作用,凝胶阻滞实验确定该基因载体的DNA携带率,DNaseⅠ保护实验研究其对所携带基因的保护作用,体外纳米粒导入实验定性评价纳米粒进入在体外进入细胞的活性,并用荧光显微镜观察导入效果。结果壳聚糖-碳纳米粒表面携带正电荷,聚合指数<0.3;与DNA结合后效率较高,且可保护DNA免受DNaseⅠ的降解;经FITC标记后能够成功地进入到COS7细胞和HepG2细胞。结论壳聚糖-碳纳米颗粒能进入到细胞内部,且导入效率较高,可以用作基因递送的非病毒载体系统,值得进一步研究。

结冷胶在酸性乳饮料中与酪蛋白结合的研究

为了解结冷胶在酸性乳饮料中与酪蛋白的结合情况,通过罗丹明B标记酪蛋白,异硫氰酸荧光黄(FITC)共价标记结冷胶,并与CMC进行对比;利用激光共聚焦显微镜观察结冷胶和CMC与酪蛋白结合的状态。结果表明,CMC包裹在酪蛋白胶束团粒周围(粒径2.95～2.99μm),结冷胶吸附在酪蛋白胶束上(粒径1.50～2.00μm)。说明CMC对酪蛋白起稳定作用,而结冷胶不能在酪蛋白胶束团粒表面形成有效的保护层以阻止胶束团粒的聚集。