HPLC测定肉苁蓉总苷胶囊中异类叶升麻苷的含量

目的 :建立HPLC法测定肉苁蓉总苷胶囊中异类叶升麻苷含量。方法 :固定相为C1 8ODS柱 ;流动相为乙腈 - 1 .5 %乙酸溶液 ,其中乙腈线性梯度 1 1 .5 %～ 2 0 % (0～ 2 5min) ;检测波长 335nm。结果 :异类叶升麻苷的线性范围为 0 .2～1 .0 μg ,r=0 .9996 ,样品平均回收率为 98.85 % ,RSD =1 .51 % (n =9)。结论 :本法简便、准确、灵敏度高 ,重复性好 。

异类叶升麻苷和桔梗皂苷D的体外抗肺癌研究

目的:探讨异类叶升麻苷与桔梗皂苷D单用及配伍对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法:采用CCK-8、细胞划痕、Transwell试验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭,Western Blot检测EphA2/AKT/mTOR通路蛋白,ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)含量。结果:异类叶升麻苷和桔梗皂苷D均能抑制细胞增殖,且IC50分别为141、170μg/mL。与对照组比较,桔梗组、配伍组愈合率显著下降(P<0.01),给药各组穿膜细胞数均显著减少(P<0.01),其中配伍组最为明显。与对照组比较,桔梗组、配伍组显著下调EphA2、p-EphA2蛋白表达(P<0.01),桔梗组显著下调p-AKT、mTOR蛋白表达(P<0.01)。与对照组比较,桔梗组IL-6、TNF-α显著升高(P<0.01,P<0.05),而异类叶组TNF-α和配伍组IL-6显著下调(P<0.01)。结论:异类叶升麻苷、桔梗皂苷D通过调控EphA2/AKT/mTOR通路和调节TNF-α、IL-6抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭。且二者配伍显著调控Eph A2因子,并能减轻桔梗诱导IL-6和TNF-α的上调,推测配伍组可能具有增效减毒的作用。

UHPLC-LTQ-Orbitrap测定异类叶升麻苷在大鼠尿液中的代谢产物

目的采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨组合质谱技术(ultra-performance liquid chromatography-linear ion trap/orbitraphigh resolution mass spectrometry, UHPLC-LTQ-Orbitrap)分析异类叶升麻苷在大鼠尿液中的代谢产物,并归纳其代谢途径。方法将大鼠按随机数字表法分为给药组、空白组。给药组大鼠灌胃异类叶升麻苷生理盐水溶液100 mg/kg,空白组灌胃等体积生理盐水。连续收集大鼠尿液12 h,经纯化处理后,采用Thermo Scientific BDS Hypersil C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,2.4 μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.3 ml/min,柱温30 ℃。在负离子检测模式下对给药组及空白组尿液进行分析。结果通过分析高分辨质谱提供的准分子离子峰和碎片离子信息,结合对照品与文献报道结果,从给药组大鼠尿液样品中共鉴定得到8个代谢产物,主要代谢途径为葡萄糖醛酸化、水解、甲基化、磺酸化。结论应用UHPLC-LTQ-Orbitrap高分辨液质联用技术可分析异类叶升麻苷在大鼠体内主要的代谢产物和代谢途径,为其进一步的药效及药理机制研究提供参考。

星点设计-效应面法优化肉苁蓉软化切制工艺

目的:采用星点设计-效应面法优化肉苁蓉软化切制工艺。方法:通过单因素试验,以蒸制时间、切片厚度、烘干温度为自变量,以松果菊苷、毛蕊花糖苷、异类叶升麻苷、甜菜碱含量的综合评分为评价指标,采用星点设计的方法筛选肉苁蓉的最佳软化切制工艺。结果:肉苁蓉最优的软化切制方法为:蒸制时间100 min,切片厚度6mm,烘干温度80℃。最优的软化切制方法的综合评分的验证值与预测值的偏差是4.80%。结论:用星点设计-效应面法优化肉苁蓉的软化切制工艺,所得参数为肉苁蓉的生产提供了科学依据。

地黄中主要次生代谢产物在根际土壤中分布及其对细菌群落特征的影响

目的分析地黄Rehmannia glutinosa中的次生代谢产物在地黄根际土壤中的分布特征及其对根际土壤细菌群落特征的影响,为揭示地黄连作土壤形成过程中根系分泌物与根际微生物之间互作机制的研究提供理论参考。方法以7、8、10月金九地黄根际土壤为研究对象,采用HPLC分析3个时期地黄根际土壤中苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类及酚酸类次生代谢产物的分布;通过llumina MiSeq高通量测序法分析根际土壤中细菌群落的结构特征;利用SIMCA 14.1、SPSS 27等软件分析3个生长时期根际土壤中次生代谢产物及细菌群落结构的差异性,筛选出引起两者差异性的主要次生代谢产物和标志性菌群,并结合Canoco 5.0软件分析两者之间的相关性。结果地黄3个生长时期根际土壤中均检测到6种苯乙醇苷类成分、3种环烯醚萜苷类成分及5种酚酸类成分,各单体成分的含量变化差异较大,其中香豆酸、异类叶升麻苷、红景天苷、香草酸为主要差异物质;地黄根际土壤中优势细菌的相对丰度随生育进程而发生变化,门水平及属水平上的放线菌门、厚壁菌门、绿弯菌门、不明蓝藻菌属、Gaiella的相对丰度逐渐降低,酸杆菌门、拟杆菌门、浮霉菌门、疣微菌门、热酸菌属、不明酸杆菌属的相对丰度则逐渐增加;相关性分析及冗余分析表明根际土壤中次生代谢产物与细菌群落结构之间存在着一定相关性,其中香豆酸、对羟基苯甲酸对根际细菌群落结构的影响较大。结论地黄中的主要次生代谢产物在地黄根际土壤中均可以检测到,而且对根际土壤细菌群落的结构特征产生了一定影响。

HPLC法同时测定糙苏中3个苯乙醇苷类化合物含量

目的:建立同时测定糙苏中3个苯乙醇苷含量的HPLC法。方法:采用Agilent Zorbax SB C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-磷酸二氢钾缓冲盐(pH=2.5)20∶80等度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长334 nm。结果:连翘酯苷B在0.32～1.60μg,类叶升麻苷在0.48～2.40μg,异类叶升麻苷在0.36～1.80μg与峰面积呈良好的线性关系;r分别为0.9999,0.9995,0.9998。平均加样回收率(n=3)分别为99.6%,99.4%,98.6%;RSD分别为0.88%,0.40%,1.0%。结论:本方法快速简便、灵敏、可靠,为土家族民间药物糙苏的质量评价提供了科学依据。

圆苞金足草化学成分研究

目的研究圆苞金足草Goldfussia pentstemonoides全草的化学成分。方法采用色谱技术进行分离纯化,根据波谱数据并参考文献鉴定化合物结构。结果从圆苞金足草95%乙醇提取物的正丁醇萃取部位分离得到10个芳香类化合物,分别鉴定为毛柳苷(1)、3,4,5-三甲氧基苯酚-1-O-6-L-鼠李糖基-(1→6)-O-β-D-葡萄糖苷(2)、异类叶升麻苷(3)、isonuomioside A(4)、苯甲醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、淫羊藿次苷F2(6)、(-)-lyoniresinol 3α-O-β-D-glucopyranoside(7)、(+)-异落叶松脂素-9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、脱咖啡酰基毛蕊糖苷(9)、dehydrodiconiferyl alcohol 4-O-β-D-glucopyranoside(10)。结论所有化合物为首次从圆苞金足草中分离得到。

辅料砂仁、陈皮对熟地黄炮制前后化学成分的影响研究

目的分析不同砂仁陈皮制熟地黄炮制前后的化学成分含量变化,探讨辅料砂仁、陈皮在熟地黄加工过程中的炮制作用。方法采用HPLC法建立生地黄、砂仁陈皮制熟地黄及缺不同辅料熟地黄炮制品图谱,结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)、SPSS 21.0、SIMCA 14.1软件进行分析,并对7个非糖成分(梓醇、地黄苷D、5-羟甲基糠醛、益母草苷、毛蕊花糖苷、异类叶升麻苷、橙皮苷)和8个糖类成分(D-果糖、葡萄糖、蔗糖、蜜二糖、棉子糖、甘露三糖、水苏糖、毛蕊花糖)进行含量测定。结果生地黄、砂仁陈皮制熟地黄与缺不同辅料砂仁陈皮制熟地黄炮制品在成分空间上存在差异;含量测定结果表明,生地黄炮制后,单糖含量增加,寡糖、苷类含量总体呈减少趋势,生、熟地黄之间以及佐以砂仁、陈皮都使地黄成分含量存在差别,且砂仁陈皮制熟地黄中D-果糖、葡萄糖、甘露三糖含量相较于砂仁陈皮制熟地黄(缺砂仁、缺陈皮)分别增加了29.24%、57.14%、44.65%。结论辅料砂仁、陈皮的加入是其化学成分含量变化的重要因素,为阐述砂仁陈皮制熟地黄的炮制机制提供依据。

双波长HPLC同时测定生地黄中6种化合物的含量

目的采用双波长HPLC同时测定生地黄中6种化合物(梓醇、地黄苷D、地黄苷A、益母草苷、毛蕊花糖苷、异类叶升麻苷)的含量。方法菲罗门Neptune C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^-1;柱温30℃;检测波长203 nm(梓醇、地黄苷D、地黄苷A、益母草苷),334 nm(毛蕊花糖苷、异类叶升麻苷)。结果6种化合物在各自的范围内呈现良好的线性关系(r>0.9990),3个浓度水平回收率96.33%~98.55%,RSD为0.97%~1.45%。结论该法简单快捷、稳定可靠,准确率高,重复性好,可用于生地黄质量评价。

基于双波长高效液相色谱法同时测定九蒸九晒熟地黄中7种成分的含量

目的 建立同时测定九蒸九晒熟地黄中梓醇、益母草苷、地黄苷A、地黄苷D、毛蕊花糖苷、异类叶升麻苷、5-羟甲基糠醛(5-HMF)等7种成分含量的方法。方法 采用超声法提取九蒸九晒熟地黄炮制过程中每一次蒸晒后的样品,然后应用高效液相色谱(HPLC)法同时测定样品中7种成分的含量;色谱柱为赛默飞C18(250.0 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱,柱温30℃,检测波长203,332 nm,进样量10μL。结果 7种成分在各自线性范围内线性关系良好,平均加样回收率为97.57%~100.58%,RSD为0.60%~1.78%。结论 该方法准确、稳定,重复性好,可用于九蒸九晒熟地黄饮片的质量控制。