新月弯孢霉KA-91转化异羟基洋地黄毒苷元的研究

考察了新月弯孢霉(Curvularialunata)KA-91对地高辛和异羟基洋地黄毒苷元的生物转化反应。结果发现,新月弯孢霉KA-91对地高辛不具有转化能力,对异羟基洋地黄毒苷元转化产生一个产物,经结构鉴定产物为3-羰基-异羟基洋地黄毒苷元。确定了转化异羟基洋地黄毒苷元反应的最优工艺参数为:发酵培养基的初始pH值6.0,装液量50 mL.(250 mL)-1,底物浓度0.60 mmol.L-1,转化温度28℃,180 r.min-1振荡培养24 h,转化54 h。此时,转化率为40%。

高效液相色谱/电喷雾-离子阱-飞行时间质谱法鉴定地高辛中的微量有关物质

目的建立快速、准确鉴别地高辛中化学成分的液相色谱-质谱联用方法。方法采用高效液相色谱/电喷雾-离子阱-飞行时间质谱(HPLC/ESI-IT-TOF/MS)对异羟基洋地黄毒苷(地高辛)和洋地黄毒苷对照品进行分析,总结了二者的多级质谱裂解规律,研究质谱碎片裂解途径,建立了地高辛原料药的液相色谱分离条件及质谱分析条件。结果依据各有关物质组分的多级质谱数据,鉴定了12个主要的有关物质,其中异羟基洋地黄毒苷元双洋地黄毒糖单葡萄糖苷和异羟基洋地黄毒苷元3≥洋地黄毒糖单葡萄糖苷为地高辛原料药中首次发现的有关物质组分。结论在原料药地高辛化学成分研究工作中,采用HPLC/ESI-IT-TOF/MS可提高原料药化学成分的分析效率并有利于新化合物的发现和鉴别,对保证原料药的质量控制有重要意义。此方法已经应用到国际比对研究中,取得良好结果。