高盐条件下红树植物内生异色拟盘多毛孢菌Pestalotiopsis versicolor次级代谢产物的研究

对红树植物桐花树内生异色拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis versicolor）高盐条件下固体发酵培养物的化学成分进行研究。利用硅胶拄层析，SephadexLH-20凝胶柱层析，半制备高效液相色谱仪等分离手段对内生异色拟盘多毛孢菌（P．versicolor）的提取物进行分离纯化，并利用各种波谱方法，结合文献对照，确定化合物结构。从提取物中分离得到9个化合物，经鉴定为pestalachlofide B（1）、1，6，8-三羟基-3-（羟甲基）蒽醌（2）、大黄素（3）、麦角甾-6，22-二烯6口，8σ-环二氧．3-醇（4）、3β-羟基-5-胆甾烯-6-酮（5）、3-吲哚甲醛（6）、4，6-二羟基-1（3H）-异苯并呋喃酮（7）、2-（4-羟苯基）乙醇（8）、对羟基苯甲醛（9）。其中，化合物1—3,6—8为首次从该种真菌中分离得到。

红树植物异色拟盘多毛孢内生真菌次级代谢产物及其生物活性

目的研究红树植物异色拟盘多毛孢内生真菌Pestalotiopsis versicolor的次级代谢产物及其生物活性。方法真菌固体发酵产物采用硅胶、Sephadex LH-20、制备薄层进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。PNPG法测定化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制能力。结果从中分离得到8个化合物,分别鉴定为3-(4-甲苯氧基)丙酸(1)、对羟基苯乙醇(2)、2-苯乙醇(3)、3β, 5α, 9α-三羟基-(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(4)、麦角甾醇(5)、麦角甾4,6,8(14),22-四烯-3酮(6)、(1aS,3R,4R,4aR,6S,7R,8aS)-7-chloro-3,6-dihydroxy-3,4a,8,8-tetramethyl-octahydro-1aH-naphtho[1-b]oxirene-4-carboxylic acid (7)、cepharosporolides G (8)。化合物1在质量浓度为6.25 mg/mL时对α-葡萄糖苷酶具有较弱的抑制活性。结论化合物7为首次从拟盘多毛孢属内生真菌的固体发酵产物中分离得到,化合物5为首次从异色拟盘多毛孢内生真菌的固体发酵产物中分离得到。化合物1有较弱的生物活性。

根据形态学和分子系统学特征界定拟盘多毛孢属的种

以拟盘多毛孢属108个ITS(内转录间区)序列建立了分子系统树,探讨拟盘多毛孢属的形态特征与分子系统树的相互关系。结果表明,拟盘多毛孢属首先按照分生孢子有色胞的颜色区分为暗色和淡色(同色)2个分支,暗色组再分成2个亚分支——同色亚分支和异色亚分支,淡色分支内进一步根据顶端附属丝特征和基部附属丝的有无区分为7个亚分支。寄主植物的某个分类单元在拟盘多毛孢属的分子系统树上并未形成特定的分支。通过对形态特征与分子系统树结合分析,重新界定小孢拟盘多毛孢(P esta lotiop sism icrosp ora)、异色拟盘多毛孢(P.versicolor)和茶拟盘多毛孢(P.theae)。

杨梅凋萎病菌侵染、传播及树体内分布规律

为了制定有效的杨梅凋萎病防控措施,对凋萎病菌分生孢子侵染、传播、病害周年发生动态及病菌在树体内分布规律进行了研究。结果表明：2×10^1～2×10^6m L^-1浓度范围内的分生孢子溶液都能侵染杨梅致病,主要通过嫩枝的皮口及伤口侵入,有2个侵染高峰期分别是5月和6月中旬至7月中旬。凋萎病菌分生孢子周年均可捕捉到,5月中旬至6月中旬和8月底至10月中旬为两个分生孢子捕捉高峰期。凋萎病周年都有新病枝出现,发病高峰期集中在9月中旬至11月初,在果园内海拔低、流水冲刷严重的位置先发病。周年内发病杨梅树内拟盘多毛孢的分离菌株数及DNA拷贝数都是健康树的2～6倍。凋萎病菌可以周年寄生在杨梅的整个树体内,没有明显的菌量高峰期,嫩枝位置菌量最大。

广西高峰林场相思树的真菌病害调查

相思树是从澳大利亚引进的速生丰产林种,在广西以高峰林场为主要种植基地。经初步调查,不同相思树上发生的真菌性病害不同,马占相思树、厚荚相思树、直干相思树、纹英相思树、杂交相思发生炭疽病,其病原茵为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),在马占相思、直干相思、纹荚相思和杂交相思的叶片上只产生病原菌的无性阶段,而在厚荚相思叶片上可同时出现无性阶段和有性阶段;马占相思树和杂交相思树上发生的白粉病菌为白粉菌Oidium sp．,其中杂交相思白粉病发生普遍而严重,发病期多在3-5月;黑木相思树发生叶尖枯病,病原为异色拟盘多毛孢(Pestalotiopsis versicolor),一年四季均可发病;马占相思树干基部心腐病发生严重,造成木材的大量损失,病原尚未得到确定。本文对病害的症状特点、病原菌形态特征进行了描述。

云南新产区杨梅枝枯的病原菌鉴定及土壤营养元素分析

为了明确云南新产区杨梅枝枯的原因,利用科赫氏法则确定了引起枝枯的病原菌,依据形态学特征,结合ITS序列分析对病原菌进行鉴定,并且对发病定植苗及其容器苗、健康定植苗和本地生长的杨梅树土壤元素含量进行了分析。结果表明:引起云南杨梅枝枯的病原菌为异色拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsis versicolor);果园内的发病定植苗与健康定植苗相比,磷、硼、钾、钙、锌元素含量都显著升高,升高幅度在55.8%~511.5%,氮的含量也略有升高(9.2%),说明果园内的定植苗处于一种相对富营养的土壤环境;与本地生长的健康杨梅树土壤相比,容器内的植株土壤磷、钾含量大大升高,升高幅度为203.2%~431.6%,镁的含量也略有升高(27.6%),其他营养元素含量都显著降低,降低幅度为28.6%~96.9%,表明容器苗的土壤相对本地生长的健康杨梅树来说,各元素含量不太均衡。该研究结果可为指导云南杨梅新产区的病害防控提供依据。

云南澳洲坚果春季病害病原调查及主要病原防治药剂筛选

在对云南澳洲坚果春季病害的调查中采集到9种症状的病害,其中叶枯、枝枯为主要病害。经病原菌分离和致病性测试,鉴定病原菌有9种,拟盘多毛孢为优势种群,其次为拟茎点霉、毛色二孢、炭疽菌等。对拟盘多毛孢作防治药剂筛选,推荐使用多菌灵、甲基硫菌灵、戊唑醇、丙环唑等,以后渐次为咪鲜胺、苯醚甲环唑、异菌脲、嘧菌酯等。

加那利海枣叶斑病病原鉴定

对加那利海枣叶斑病的症状进行了观察。结果表明,加那利海枣叶斑病主要发生在叶片和叶柄。初期症状是在叶片和叶柄出现水渍状褪绿色的褐色小点,病斑扩大成浅褐色椭圆形或不规则病斑,病斑周围有黄色的晕圈,后期变褐色至灰褐色,中央产生小黑点。按照柯赫氏法则对该病害的病原菌进行分离和致病性测定。通过形态学观察和rDNA-ITS序列分析鉴定,将病原菌鉴定为异色拟盘多毛孢[Pestalotiopsis versicolor(Speg.)Steyaert]。

紫荆1种叶斑病病原鉴定及防治药剂初步筛选

为明确南京市紫荆叶部常见的1种叶斑病病原菌种类并筛选出有效防治药剂,采用组织分离法分离病原菌并验证其致病性,根据菌落特征、菌株形态及ITS序列分析将该病的主要病原鉴定为异色拟盘多毛孢菌株(Pestalotiopsis versicolor)。通过菌丝生长速率法测定6种杀菌剂对病原菌的室内抑制活性,初步筛选出防治该病的药剂。通过室内药剂防治试验,筛选出对病原菌生长有较强抑制作用的农药噁霉灵,可作为备选药剂进行田间防治试验。

红海榄赤斑病病原菌鉴定及其生物学特性研究

本文对来自红海榄(Rhizophora stylosa)赤斑病同一病斑上获得的2个菌株PⅠ-1和PⅡ-3进行了鉴定和生物学特性研究。结果表明,PⅡ-3菌株的致病力比PⅠ-1的稍强;2个菌株均具有一定的寄主专化性。经形态特征观察与rDNA-ITS序列分析,2个菌株均鉴定为异色拟盘多毛孢(Pestalotiopsis versicolor)。生物学特性测定结果表明,温度、pH值和光照对2个菌株菌丝生长及孢子萌发的影响差异不大,生长温度均为10～32℃(最适25℃),pH值为3.0～10.9(最适4.0);孢子萌发温度均为10～35℃(最适25～28℃),pH值为2.5～8.0(最适3.0);黑暗条件有利于2个菌株菌丝生长和孢子萌发。但2个菌株的产孢特性存在明显差异,其中PⅠ-1产孢的最适温度为28℃而PⅡ-3为20℃;PⅠ-1产孢的最适pH值为5.1而PⅡ-3为9.0;PⅠ-1产孢对光照不敏感,而PⅡ-3在黑暗条件下几乎不产孢。另外,在相似条件下,PⅠ-1产孢量比PⅡ-3大,而PⅡ-3菌丝生长速度比PⅠ-1快,孢子萌发率也比PⅠ-1高。由此可见,2个菌株PⅠ-1和PⅡ-3虽属于同一个种,但某些生物学特性存在一定的差异。

澳洲坚果叶斑病病原鉴定及其生物学特性

通过症状观察、致病性测定、形态和培养性状观察、rDNA-ITS序列分析及生物学活性测定将分离到的病原菌鉴定为异色拟盘多毛孢Pestalotiopsis versicolor(Speg.)Steyaert。菌株JG01在PDA培养基上菌落白色、背面呈橘黄色花瓣状,分生孢子盘墨汁状散生在菌丝上,分生孢子长梭形,大小为18.3～27.4μm×5.6～7.7μm,4隔,中间3个细胞着色,分隔处颜色很深,顶端附属丝一般2～3根。ITS序列分析,菌株JG01与P.versicolor(AF405298)亲缘关系最近,同源性达到99.60%。在PDMA培养基上,25～28℃、pH 4.0～6.0、碳氮源分别为葡萄糖和酵母提取物的条件下菌丝生长最快,培养条件对菌株产孢的影响不明显。