苗药防感香囊活性提取物对聚肌胞苷酸刺激的支气管上皮细胞IFN-α、IL-6水平的影响及机制

目的探讨苗药防感香囊活性提取物甘草酸二铵(DG)与异草苷酸镁(MI)分别对聚肌胞苷酸(PIC)刺激的人正常支气管上皮细胞(NHBE)的作用与影响,明确DG与MI的疗效并探讨可能的作用机制。方法使用1μg/ml的PIC刺激NHBE构建细胞模型,阳性对照组地塞米松(DXMS)的浓度为10μg/ml,分别使用0.5、1.0、2.0 mg/ml低中高3种浓度的DG与MI进行细胞给药干预。使用CCK8法检测细胞活性,ELISA法检测干扰素α(IFN-α)、白介素-6(IL-6)表达水平,qPCR法检测IFN-α、 IL-6 mRNA表达水平,Western blot检测p-TAK1/TAK1与p-IkB/IkB水平。结果 CCK8检测结果显示,NHBE细胞活力随药物浓度的增加而下降,DXMS处理的阳性对照组中细胞活力下降更加明显。造模后,相较于空白对照组,IFN-α、IL-6表达量上升,差异有统计学意义(P<0.05);相较于模型组,不同剂量的DG与MI处理后,IFN-α、IL-6表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。造模后,相较于空白对照组,IFN-α、IL-6 mRNA表达量显著上升(P<0.05);干预组相较于模型组,IFN-α、IL-6 mRNA表达量显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。相较于空白对照组,PIC造模后的通路蛋白p-TAK1/TAK1与p-IkB/IkB比值有明显的升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,相较于模型组,经低中高3种浓度的DG与MI处理NHBE细胞后,p-TAK1/TAK1与p-IkB/IkB比值未见明显改变,而在DXMS处理后的阳性对照组细胞中该比值相较模型组显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论苗药防感香囊提取物主要活性成分之一为甘草酸铵。DG与MI对PIC诱发NHBE促炎症反应有一定疗效,其可能的作用方式是当细胞处于一种促炎症反应状态时,通过下调IFN-α、IL-6的表达量,减轻PIC诱导的炎症反应,降低炎症对宿主的免疫损伤,从而调节呼吸道免疫功能,抵抗呼吸道感染。对于PIC诱发NHBE促炎症反应机制是否与TAK1与IkB蛋白的磷酸化水平有关,则需要进一步深入研究。