啤酒花中异葎草酮体外抗肿瘤作用及机制研究

研究啤酒花(Humulus Lupulus L.)中成分异葎草酮(tetrahydro-iso-α-acid)对人胃腺癌细胞SGC-7901和人肝癌细胞HepG-2的体外抑制作用,并初步揭示其抗肿瘤的作用机制.以MTT法进行细胞毒测定;采用流式细胞仪观察异葎草酮对肿瘤细胞凋亡的影响;细胞线粒体跨膜电位(MMP)测定用罗丹明123(Rhodamine l23,Rh123)标记,以流式细胞仪检测.异葎草酮对SGC-7901和HepG-2的IC50分别为13.4μg/mL和11.58μg/mL.异葎草酮作用于SGC-7901和HepG-2细胞48 h后,肿瘤细胞均有明显凋亡峰出现.异葎草酮可以导致SGC-7901和HepG-2细胞内线粒体膜电位明显下降,并呈剂量依赖关系.结果表明,异葎草酮对肿瘤细胞SGC-7901及HepG-2均有较强抑制作用,这一作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡实现的.异葎草酮是通过线粒体路径启动细胞凋亡的,而且诱导线粒体功能异常可能是其引起细胞凋亡发生的主要作用机理.

四氢异葎草酮诱导SGC-7901细胞凋亡作用的研究

观察四氢异葎草酮(Tetrahydro-isohumulone,TH)通过线粒体途径诱导SGC-7901细胞凋亡的机制.MTT法检测TH对SGC-7901细胞增殖的影响;荧光显微镜观察TH对SGC-7901细胞凋亡形态的影响;流式细胞仪分析SGC-7901细胞凋亡率;采用试剂盒检测Caspase-9的活性;Western blot法检测Caspase-3蛋白表达情况.2、8、32μg/mL的TH处理SGC-7901细胞72 h后,SGC-7901细胞生长受到抑制,抑制率在一定范围内呈剂量、时间相关性;随着TH质量浓度的提高SGC-7901细胞的凋亡率也增加;TH各剂量均能够显著升高SGC-7901细胞内Caspase-9活性,并呈剂量依赖性;同时,TH能够上调SGC-7901细胞内Caspase-3的表达量,并且呈剂量依赖性.TH可通过诱导SGC-7901细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,启动线粒体凋亡通路可能是TH诱导SGC-7901细胞凋亡的重要机制之一.

啤酒花中四氢异葎草酮诱导HepG-2细胞凋亡的机制研究

目的:研究啤酒花(Humulus Lupulus L.)中成分四氢异葎草酮(Tetrahydro-isohumulone)对肿瘤细胞HepG-2生长抑制及诱导凋亡的作用。方法:MTT 法检测四氢异葎草酮对 HepG-2细胞体外增殖抑制的影响;流式细胞仪分析四氢异葎草酮对 HepG-2细胞的凋亡率、线粒体膜电位和活性氧生成;激光共聚焦显微镜测定细胞内[Ca^(2+)]i。结果:四氢异葎草酮对 HepG-2的增殖具有较强的生长抑制作用,IC_(50)为6.76μg/mL.0,5、10、20μg/mL 剂量的四氢异葎草酮作用 HepG-2细胞48h 细胞凋亡率分别为0.1%、24.1%,69.9%、84.1%,同时线粒体膜电位降低,细胞内活性氧含量升高,细胞内[Ca^(2+)]i 随给药剂量增加而升高。结论:四氢异葎草酮对 HepG-2具有较强的生长抑制作用,并且能够诱导 HepG-2细胞凋亡,其机制可能是通过升高细胞内 Ca^(2+)浓度使线粒体膜通透性增加,进而导致细胞凋亡。

四氢异葎草酮对S_(180)荷瘤小鼠抑瘤及抗血管生成作用的研究

目的探讨四氢异葎草酮(TH)对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及其抗血管生成作用。方法以S180荷瘤小鼠为研究对象,分组后给予不同剂量的TH,给药7d后测定抑瘤率,并运用免疫组化SABC法测定肿瘤组织微血管密度(MVD)。结果100、200mg/kgTH对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别达到24.84%和47.27%,瘤质量与对照组比较有显著性差异(P<0.05、0.01);TH100、200mg/kg剂量组肿瘤组织相应的MVD平均值分别为19.568和16.100,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05、0.01)。结论TH对S180小鼠实体瘤的生长具有一定的抑制作用,并可抑制肿瘤组织中的微血管生成。

高效液相色谱法检测不同酒花浸膏中的9种味觉物质

试验采用高效液相色谱法比较不同来源酒花浸膏对异合葎草酮(Humulone)、异葎草酮(Isohumulone)、异加葎草酮(Tetrahydroisoαacid)、合葎草酮(Cohumulone)、葎草酮(Humulone)、加葎草酮(Adhumulone)、合蛇麻酮(Colupulone)、蛇麻酮(Lupulone)及加蛇麻酮(Adlupulone)9种味觉物质含量的影响。试验采用Waters YMCTMCarotenoid 3μm色谱柱(4.6 mm×150 mm),流动相A相为0.1%H_3PO_4(含0.2 mmol/L EDTA);流动相B相为乙腈,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,DAD检测波长为315 nm;柱温为40℃。检测方法显示:9种味觉物质的检测线性范围为0.01~500 mg/L;方法的检出限在0.02~0.2 mg/kg之间,在10~500μg/g的加标条件下的加标回收率在97.48%~105.12%之间,精密度为1.25%~3.02%(n=6),检测方法灵敏、有效。检测结果表明,不同来源酒花浸膏得到的酒花浸膏中异合葎草酮、异葎草酮、异加葎草酮、合葎草酮、葎草酮、加葎草酮、合蛇麻酮、蛇麻酮及加蛇麻酮9种酒花浸膏味觉物质的总含量以青岛大花酒花最高。