异钩藤碱对大鼠急性胰腺炎细胞的炎症和凋亡改善及ERK信号通路调控作用

目的观察异钩藤碱(LSO)对大鼠急性胰腺炎(AP)细胞炎症和凋亡改善及ERK信号通路调控作用。方法将AR42J细胞分为6组,对照组正常培养,模型组、LSO组、抑制剂组、LSO+抑制剂组、LSO+激活剂组加入100 nmol/L雨蛙素制备AP细胞模型,LSO组制模后加入40μmol/L LSO,抑制剂组制模后加入10μmol/L U0126,LSO+抑制剂组制模后加入40μmol/L LSO和10μmol/L U0126,LSO+激活剂组制模后加入40μmol/L LSO和0.1μmol/L C16-PAF。采用ELISA法、EdU法及Hoechst 33258染色法分别测定细胞培养液中的炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-8、IL-1β)、细胞增殖率和凋亡率,qPCR法测定细胞中NLRP3、斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)mRNA,WB法测定细胞中ERK 1/2、p-ERK 1/2、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白。结果与对照组比较,模型组细胞TNF-α、IL-6、IL-8、IL-1β、凋亡率、p-ERK 1/2蛋白及NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA和蛋白升高,增殖率降低(P均<0.05);与模型组比较,LSO组、抑制剂组细胞炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-8、IL-1β)、凋亡率、p-ERK 1/2蛋白及NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA和蛋白降低,增殖率升高(P均<0.05);与LSO组比较,LSO+抑制剂组中U0126增强了LSO对细胞上述指标趋势的作用,而LSO+激活剂组中C16-PAF则逆转了LSO对细胞上述指标趋势的作用(P均<0.05)。结论LSO对大鼠急性胰腺炎细胞的炎症和凋亡有改善作用,可能通过调控ERK信号通路来实现。

基于线粒体氧化应激损伤探究异钩藤碱对小鼠肝纤维化的保护作用

目的 探讨异钩藤碱(IHY)对四氯化碳(CCl_(4))诱导的小鼠肝纤维化(HF)的影响及其潜在机制。方法 C57BL/6小鼠随机分对照(CON)组、CCl_(4)组、IHY 20 mg/kg组和IHY 40 mg/kg组,每组各10只。20%CCl_(4)橄榄油溶液(0.05 ml/10 g)灌胃8周制备肝纤维化模型,造模后第5周开始每天连续灌胃给予IHY治疗4周。白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平分别采用溴甲酚绿法、丙氨酸底物法及天门冬氨酸底物法检测。ELISA检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的水平。HE和Masson染色观察肝组织病理变化及胶原沉积情况。透射电镜观察肺组织线粒体结构。免疫组化检测肝组织Ⅰ型胶原(COL1A1)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达。比色法检测肝组织丙二醛(MDA)及4-羟基壬烯醛(4-HNE)含量。制备肝组织单细胞悬液,使用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(ROS)水平。Western blot法检测IL-6、TNF-α、TGF-β1、8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶1(OGG1)及沉默信号调节因子3(SIRT3)的蛋白水平。结果 与CON组相比,CCl_(4)组肝组织结构紊乱,肝细胞样结节再生,中央静脉周围可见炎症细胞浸润和大量蓝色胶原纤维沉积;COL1A1和MMP2蛋白表达明显升高;肝功能明显下降;炎症因子IL-6、TNF-α和TGF-β1水平明显升高;ROS、MDA及4-HNE水平明显增加,OGG1和SIRT3的表达明显降低,线粒体损伤明显加剧。与CCl_(4)组相比,IHY连续给药4周后,小鼠肝组织病理损伤明显减轻,胶原沉积明显减少,COL1A1和MMP2蛋白表达显著降低;肝功能明显改善;炎症因子IL-6、TNF-α和TGF-β1水平明显降低;ROS、MDA及4-HNE的水平也明显下降,OGG1和SIRT3的表达明显增加,线粒体损伤明显减轻。结论 IHY具有抗肝纤维化作用,其机制可能与其抗氧化,减轻线粒体氧化应激损伤,抑制炎症反应有关。

异钩藤碱对急性脑梗死大鼠认知障碍的影响及机制研究

目的探讨异钩藤碱对急性脑梗死大鼠认知障碍的影响及相应机制。方法将144只SD大鼠按照随机数字表法随机分为假手术组、急性脑梗死组、异钩藤碱低剂量组、异钩藤碱高剂量组、尼莫地平组、异钩藤碱高剂量+干扰素基因刺激蛋白(STING)激动剂(ADU-S100)组,每组24只。除假手术组外,其他各组大鼠均采用线栓闭塞大脑中动脉法构建急性脑梗死大鼠模型,假手术组仅游离右侧颈外动脉、颈总动脉和颈内动脉,不做插入线栓处理。建模成功后立即给药,异钩藤碱低剂量组和异钩藤碱高剂量组大鼠分别灌胃5 mg/kg、20 mg/kg异钩藤碱,且均需腹腔注射等量的等渗盐水;尼莫地平组大鼠需灌胃30 mg/kg尼莫地平,且还需腹腔注射等量的等渗盐水;异钩藤碱高剂量+ADU-S100组大鼠需灌胃20 mg/kg异钩藤碱且腹腔注射20 mg/kg ADU-S100;假手术组、急性脑梗死组大鼠均需灌胃10 ml/kg与腹腔注射10 ml/kg的等渗盐水。给药1次/d,持续2周。末次给药处理24 h后,采用Zela-Longa法对所有大鼠进行神经功能评分,并进行Morris水迷宫实验,记录大鼠的逃避潜伏期及原平台象限停留次数。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;检测各组大鼠脑组织含水量;采用2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色测定各组大鼠脑梗死体积;采用伊文思蓝检测各组大鼠血-脑屏障通透性;采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大鼠脑组织中闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)信使核糖核酸(mRNA)表达;采用免疫印迹检测大鼠脑组织中STING、磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)蛋白表达,并进行组间比较。结果(1)与假手术组相比,急性脑梗死组末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.96±0.32)分比0分]、脑组织含水量[(86.9±3.2)%比(71.8±3.1)%]、血清TNF-α[(86.7±3.5)ng/L比(35.6±1.7)ng/L]、IL-6[(167.8±6.1)ng/L比(50.2±2.2)ng/L]、脑梗死体积[(28.6±1.3)mm 3比0 mm 3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.57±0.13)g/L比(0.96±0.08)g/L]及STING[(1.83±0.16)比(0.86±0.08)]、p-TBK1[(0.89±0.07)比(0.41±0.03)]、p-IRF3[(0.67±0.05)比(0.13±0.01)]蛋白表达均升高,脑组织中ZO-1 mRNA[(0.45±0.04)比(1.00±0.00)]、occludin mRNA[(0.23±0.02)比(1.00±0.00)]表达均降低,逃避潜伏期延长[(33.6±1.6)s比(12.3±0.5)s],原平台象限停留次数减少[(5.9±0.2)次比(15.7±0.4)次],组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。(2)与急性脑梗死组比较,异钩藤碱低剂量组、异钩藤碱高剂量组、尼莫地平组大鼠末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.37±0.21)、(1.14±0.17)、(1.18±0.13)分比(2.96±0.32)分]、脑组织含水量[(81.8±3.0)%、(74.9±3.0)%、(74.3±2.9)%比(86.9±3.2)%]、血清TNF-α[(71.1±1.4)、(43.4±2.0)、(41.5±1.9)ng/L比(86.7±3.5)ng/L]、IL-6[(129.8±5.4)、(81.2±3.8)、(80.0±3.6)ng/L比(167.8±6.1)ng/L]、脑梗死体积[(21.7±1.0)、(10.5±0.5)、(10.7±0.5)mm 3比(28.6±1.3)mm 3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.39±0.12)、(1.16±0.10)、(1.18±0.19)g/L比(1.57±0.13)g/L]及STING[(1.50±0.14)、(1.02±0.11)、(1.01±0.09)比(1.83±0.16)]、p-TBK1[(0.75±0.05)、(0.54±0.04)、(0.52±0.05)比(0.89±0.07)]、p-IRF3[(0.51±0.05)、(0.25±0.02)、(0.27±0.02)比(0.67±0.05)]蛋白表达均降低,脑组织中ZO-1 mRNA[(0.58±0.05)、(0.87±0.07)、(0.89±0.09)比(0.45±0.04)]、occludin mRNA[(0.36±0.03)、(0.71±0.06)、(0.69±0.05)比(0.23±0.02)]表达均升高,逃避潜伏期缩短[(28.6±1.0)、(16.5±0.7)、(16.4±0.7)s比(33.6±1.6)s],原平台象限停留次数增加[(8.2±0.3)、(12.8±0.5)、(12.9±0.5)次比(5.9±0.2)次],组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。(3)与异钩藤碱高剂量组比较,异钩藤碱高剂量+ADU-S100组末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.12±0.14)分比(1.14±0.17)分]、脑组织含水量[(78.7±3.2)%比(74.9±3.0)%]、血清TNF-α[(59.7±2.1)ng/L比(43.4±2.0)ng/L]、IL-6[(118.9±4.6)ng/L比(81.2±3.8)ng/L]、脑梗死体积[(16.6±0.4)mm 3比(10.5±0.5)mm 3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.36±0.10)g/L比(1.16±0.10)g/L]及STING[(1.37±0.12)比(1.02±0.11)]、p-TBK1[(0.67±0.05)比(0.54±0.04)]、p-IRF3[(0.39±0.03)比(0.25±0.02)]蛋白表达均升高,脑组织中ZO-1 mRNA[(0.63±0.05)比(0.87±0.07)]、occludin mRNA[(0.46±0.05)比(0.71±0.06)]表达均降低,逃避潜伏期延长[(23.4±1.0)s比(16.5±0.7)s],原平台象限停留次数减少[(9.6±0.3)次比(12.8±0.5)次],组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论异钩藤碱可抑制急性脑梗死大鼠炎症、减少血-脑屏障损伤、降低脑水肿程度,改善认知障碍,其机制可能与抑制STING/TBK1/IRF3通路有关。

钩藤碱与异钩藤碱代谢的立体作用机制研究进展

钩藤为茜草科钩藤属常绿藤本植物,对心、肝相关疾病的治疗具有重要作用,但其具体作用机制尚不明确。钩藤作为中医药传统治疗中非常重要的一味中药,具有平肝熄风、清热定惊的功效,在失眠、心脑血管系统、消化系统的多种疾病中发挥重要作用。钩藤碱Rhynchophylline(RIN)和异钩藤碱Isorhynchophylline(IRN)是钩藤有效成分中重要的两种生物碱。本研究在梳理RIN、IRN药理学特征的基础上,通过对钩藤有效成分的相关实验研究结果及文献查阅后,发现钩藤临证发挥药效的作用机制与RIN、IRN细胞自噬有关。同时,本研究在比较钩藤、天麻药理学特征的基础上,概述了钩藤联合天麻的临床应用及作用机制,证实中药钩藤的两种主要成分RIN、IRN,通过相互联系和共同作用,产生促进肝细胞增殖、保护脑神经等正向激活作用;RIN、IRN与天麻三者联合可提高生物利用率。本研究对于研究中药临证作用、探讨中药有效成分、发现新的中医药治疗方法提供了参考和思路。

异钩藤碱对抑郁小鼠海马神经细胞凋亡和氧化应激的影响及其作用机制

目的:探讨异钩藤碱对抑郁小鼠海马神经细胞凋亡和氧化应激的影响及其作用机制。方法:将24只SD雄性小鼠随机分为异钩藤碱组、阳性对照组、模型组和对照组,异钩藤碱组、阳性对照组、模型组采用慢性轻度不可预见性温和应激法构建抑郁模型,异钩藤碱组和阳性对照组在建模后分别以异钩藤碱和氟西汀灌胃,持续21 d。对照组正常饲养。采用糖水偏好实验和强迫游泳实验评价抑郁程度;通过试剂盒检测海马氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测海马神经细胞凋亡;采用蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路相关蛋白JNK和磷酸化JNK(p-JNK)的表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠糖水偏好百分比和海马中SOD、GSH-Px水平以及Bcl-2蛋白表达水平均明显降低,强迫游泳不动时间明显延长,而海马中MDA水平和Bax、Cleaved Caspase-3、p-JNK蛋白表达水平明显升高,海马神经元细胞凋亡数明显增多,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,异钩藤碱组和阳性对照组小鼠糖水偏好百分比和海马中SOD、GSH-Px水平以及Bcl-2蛋白表达水平均明显升高,强迫游泳不动时间明显缩短,而MDA水平和Bax、Cleaved Caspase-3、p-JNK蛋白表达水平明显降低,海马神经元细胞凋亡数明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:异钩藤碱可通过抑制神经细胞凋亡和氧化应激改善抑郁小鼠的抑郁行为,其作用机制可能与抑制JNK信号通路活化有关。

异钩藤碱对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的 探讨异钩藤碱(IRN)调节单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)/CC趋化因子受体2(CCR2)信号通路对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 通过注射和吸入卵清蛋白的方法建立哮喘小鼠模型,将造模成功后的小鼠随机分为哮喘组、IRN低剂量组(IRN-L组,灌胃10 mg/kg IRN)、IRN高剂量组(IRN-H组,灌胃20 mg/kg IRN)、IRN-H+CCL2组[灌胃20 mg/kg IRN+腹腔注射7.5 ng CC趋化因子配体(CCL2)]、阳性对照组(腹腔注射2 mg/kg地塞米松),并以注射和吸入无菌磷酸盐缓冲液的小鼠为空白对照组,每组10只。各药物组小鼠每天给予相应药物1次,连续给药2周。检测各组小鼠气道高反应指标——呼吸间歇(Penh)值,血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素13(IL-13)、IL-4水平,支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞(EOS)、淋巴细胞(LYM)和中性粒细胞(NEU)数量,肺组织中MCP-1、CCR2蛋白表达水平;观察肺组织病理学变化并进行炎症细胞浸润评分。结果 与空白对照组比较,哮喘组小鼠肺组织炎症细胞浸润较明显,并有细胞肿胀、脱落现象发生;炎症细胞浸润评分,Penh值,IL-4、IL-13、TNF-α水平,EOS、NEU、LYM数量和MCP-1、CCR2蛋白表达水平均显著增加或升高(P<0.05);与哮喘组比较,IRN-L组、IRN-H组、阳性对照组小鼠肺组织病理损伤得到改善,上述定量指标均显著降低(P<0.05);与IRN-L组比较,IRN-H组、阳性对照组上述定量指标均显著降低(P<0.05);IRN-H组与阳性对照组比较,上述定量指标差异均无统计学意义(P>0.05);与IRN-H组比较,IRN-H+CCL2组上述定量指标均显著增加或升高(P<0.05),CCL2逆转了高剂量IRN对哮喘小鼠的保护作用。结论 IRN可能通过抑制MCP-1/CCR2信号通路的激活来减少哮喘小鼠气道炎症因子的释放,从而达到改善哮喘的目的。

异钩藤碱抗血小板聚集和释放作用的研究

目的 探讨异钩藤碱(Isorhy)抗血小板聚集和释放的作用。方法 利用胶原和凝血酶诱导血小板聚集,将实验分为对照组,Isorhy低(0.33 mmol·L^(-1))、中(0.65 mmol·L^(-1))、高(1.30 mmol·L^(-1))剂量组和阳性药阿司匹林(ASA)(1.69 mmol·L^(-1))组。以比浊法测定Isorhy体外给药对家兔血小板聚集和解聚的影响,荧光分光光度法检测血小板五羟色胺(5-HT)的释放,硫代巴比妥法检测丙二醛(MDA)的含量,检测肝素凝血酶凝固时间(HTCT)确定血小板因子4(PF4)的释放。结果 Isorhy在0.33~1.30 mmol·L^(-1)浓度范围内能剂量依赖性地抑制胶原和凝血酶诱导的血小板聚集,并促进血小板解聚;Isorhy能够抑制血小板5-HT释放和MDA的生成,延长HTCT。结论 Isorhy具有抗血小板聚集和释放的作用。

异钩藤碱对麻醉兔心脏传导功能的影响

采用心房起搏及希氏束电图方法观察了异钩藤碱（Ｉｓｏｒｈｙ）对麻醉兔心脏传导功能的影。一次ｉｖＩｓｏｒｈｙ８ｍｇ·ｋｇ－１，５ｍｉｎ产生最大抑制效应，３０－１２０ｍｉｎ作用消失．恒速ｉｖＩｓｏｒｈｙ０－１６ｍｇ·ｋｇ－１呈剂量依赖性减慢心率，延长窦房结恢复时间，窦房传导时间及心房－希氏束间期，希氏束－心室间期，心电图的Ｐ－Ｒ间期．其中对房室传导抑制显著，Ｉｓｏｒｈｙ对心脏传导功能的影响可部分被异丙肾上腺素对抗，而不受阿托品影响．

钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定

目的研究和探讨钩藤药材中钩藤碱与异钩藤碱的最佳提取与含量测定方法。方法采用Phenomenex C18柱(4.6mm×150mm,5μm),以甲醇-0.01mmol·L-1三乙胺水溶液(70∶30,冰醋酸调pH7.0)为流动相;流速:0.5mL·min-1;柱温:30℃;进样器温度:5℃;检测波长为245nm,测定和考察钩藤不同时间的水煎液和不同条件下甲醇冷浸超声提取液中主要有效成分钩藤碱和异钩藤碱含量的变化。结果钩藤碱回归方程Y=76.7170X-0.0727(r=0.9998),在2.5～80.0μg·mL-1范围内线性关系良好,平均加样回收率99.84%～116.91%,RSD小于8.8%;异钩藤碱回归方程Y=87.4729X-0.3666(r=0.9997),在2.0～80.0μg·mL-1范围内线性关系良好,平均加样回收率87.08～104.97%,RSD小于7.3%;甲醇冷浸超声提取液中钩藤碱与异钩藤碱的提取率大约是水煎液中的十倍。在甲醇提取工艺中,影响提取率的因素从大到小依次为超声时间、甲醇用量、冷浸时间,经正交实验优选的最佳提取工艺为用20倍质量的甲醇,冷浸24h,超声60min。结论钩藤药材中有效成分钩藤碱与异钩藤碱的提取,采用甲醇冷浸超声法优于水煎法。该含量测定方法快速、简便、准确,可为评价钩藤药材的质量提供依据。

钩藤碱和异钩藤碱对^(45)Ca转运的影响

在离体家兔主动脉条.钩藤碱和异钩藤碱明显减少KCl(77.0 mmol·L^(-1))溶液所致45Ca内流量、不影响去甲肾上腺素所引起的45Ca内流和外溢。结果表明.钩藤碱和异钩藤碱对电位依赖性钙通道具有阻滞作用。

异钩藤碱对血小板聚集和血栓形成的影响

目的研究异钩藤碱(isorhynchophylline,Isorhy)对血小板聚集和血栓形成的影响,并初步探讨其机制。方法比浊法测定Isorhy体内给药对大鼠血小板聚集的影响;放免法测定血小板血栓烷B2(TXB2)及血浆6-keto-PGF1α含量;利用小鼠尾静脉注射胶原-肾上腺素合剂诱导血栓形成模型,测定15min内小鼠死亡率。结果ivIsorhy2.5,5和10mg·kg-1呈剂量依赖性地抑制ADP、胶原、花生四烯酸(AA)和凝血酶诱导的大鼠血小板聚集;ivIsorhy50和100mg·kg-1明显降低实验性血栓模型小鼠死亡率。Isorhy0.33,0.65和1·30mmol·L-1对AA诱导的TXB2生成及家兔血浆6-keto-PGF1α生成无明显影响,但可抑制胶原诱导的TXB2生成。结论Isorhy具有抗血小板聚集和抑制血栓形成的作用,其抗胶原所致血小板聚集的作用可能部分与抑制TXA的生成有关。

异钩藤碱体外对家兔血小板聚集和胞浆游离钙离子浓度的影响

目的研究异钩藤碱对血小板内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）的影响，以探讨其抗血小板聚集作用的可能机制。方法比浊法测定家兔血小板聚集功能；双波长Fura-2荧光法测定血小板胞浆[Ca^2＋]i。结果异钩藤碱0．33～1．30mmol·L-1体外给药对ADP和凝血酶引起的血小板聚集有浓度依赖性的抑制作用。存在细胞外钙时，异钩藤碱对基础状态血小板的[Ca^2＋]i和ADP及凝血酶诱导的[Ca^2＋]i水平有浓度依赖性的降低作用，而无细胞外钙存在时，则均无明显影响，表明其可抑制血小板的外钙内流，对内钙释放无明显抑制作用。结论异钩藤碱可抑制血小板聚集，其作用机制可能与其抑制血小板胞浆[Ca^2＋]i升高有关。

高效液相色谱法测定钩藤中钩藤碱、异钩藤碱含量

钩藤［Ｕｎｃａｒｉａｒｒｈｙｎｃｈｏｐｈｙｌａ（Ｍｉｑ）Ｊａｃｋｓ］为常用中药，具有清热镇惊、平肝熄风功能，钩藤中已分离出３０多种化合物，主要为吲哚类生物碱，评价钩藤及其制剂质量多以钩藤总生物碱或钩藤碱含量为指标，测定钩藤碱方法有薄层扫描法［１］和高...

异钩藤碱的降压及血流动力学作用(英文)

在清醒正常血压大鼠,iv Isorhy2.5 mg/kg对BP及HR均无明显影响,iv5 mg/kg则使DAP和HR降低,但SAP无变化,剂量加大至10 mg/kg时,上述各项指标均明显降低。经十二指肠内给Isorhy10 mg/kg后20 min出现BP及HR降低,而20mg/kg剂量组于10 min开始出现BP及HR的进一步下降.Isorhy(10mg/kg和2 mg/kg,iv)亦能分别降低肾性高血压清醒大鼠和麻醉犬的BP。icv表明中枢不是降压作用的主要部位,在体条件下无α-受体和神经节阻断作用。Isorhy使清醒大鼠和麻醉犬的LVSP,dP/dt_(max),V_(max)等左室收缩性能指标短暂下降,而BP呈持久性降低。在麻醉犬给药后CO,CI,HR及LVWI下降的同时SV和SI不变,TPVR降低,反映心肌氧耗的TTI明显减少.结果提示Isorhy具有肯定的降压作用,其持续降压与扩张血管及减慢心率导致CO下降有关,而其负性肌力作用亦可能参与了早期的降压机理.Isorhy能减少心肌氧耗对高血压心肌劳损可能有保护意义。

反相HPLC法测定兔血浆异钩藤碱浓度及其药物代谢动力学

用ＯＤＳ柱分离，甲醇—水（９５∶５）为流动相，检测波长ＵＶ２５４ｎｍ，建立了兔血浆异钩藤碱浓度的ＨＰＬＣ测定方法。结果显示，血药浓度在００１６～１６μｇ·ｍｌ－１范围内呈线性关系，血浆最低检测浓度为００１６μｇ·ｍｌ－１，绝对回收率为８０５％～８５１％。兔ｉｖＩＲＨＹ２及５ｍｇ·ｋｇ－１，药代动力学过程符合二室开放模型，Ｔ１／２β分别为１３２ｈ和１２５ｈ。兔经十二指肠给２及５ｍｇ·ｋｇ－１后，Ｔ１／２β分别为１７５ｈ和１２６ｈ。生物利用度为４２４％～６９４％。此法简便、快速。ＩＲＨＹ在兔体内吸收迅速，消除也较快。

异钩藤碱对血小板聚集与血栓形成的抑制作用

目的研究异钩藤碱（isorhynchophylline,Isorhy）对血小板聚集与血栓形成的影响,并探讨其机制。方法以比浊法测定Isorhy体外给药对大鼠血小板聚集的影响;采用动-静脉旁路血栓形成法制作大鼠血栓模型,观察Isorhy对血栓形成的作用;以放免法测定Isorhy对ADP作用下cAMP含量的影响。结果Isorhy0.65mmol·L^-1和1.30mmol·L^-1对ADP（1.5×10^-5mol·L^-1）和凝血酶（thrombin,Thr,3U·ml^-1）诱导的大鼠血小板聚集均有抑制作用（P〈0.01）。静脉注射Isorhy10mg·kg^-1和5mg·kg^-1可明显降低大鼠血栓形成湿重（P〈0.01）。Isorhy0.33-1.30mmol·L^-1可升高ADP作用后的血小板cAMP浓度（P〈0.01）。结论Isorhy明显抑制血小板聚集与大鼠血栓形成,其抗ADP所致血小板聚集的作用机制至少部分地与升高cAMP水平有关。

异钩藤碱对猫的心血管作用与血药浓度的关系

目的 用麻醉猫研究异钩藤碱 (Iso)的心血管药理效应与血药浓度的关系。方法 异钩藤碱粉末 ,分别临用时配制 (FPI)和配好后室温放置 1周备用 (DPI)。以RM 6 0 0 0八道生理仪记录猫的收缩压、舒张压和心率的变化 ,相应时间点取血 1.0mL。用反相高效液相色谱法测定血药浓度。结果 Iso的降压及负性频率效应与其给药剂量及血药浓度呈明显的量 效关系 ,同剂量的DPI和FPI给药 ,FPI的起效时间、疗效维持时间及最大效应均强于DPI。结论 Iso的降压及负性频率效应与其给药剂量及血药浓度呈明显的量 效关系 ;Iso的溶液剂型不稳定 ,室温放置 1周后可降低其心血管药理效应。

异钩藤碱药理作用的最新研究进展

异钩藤碱是中药钩藤的主要有效成分之一,本文综述了异钩藤碱的降血压、负性频率效应、扩张小血管、抑制心率和房室传导、负性变时和变力、阻滞电压依赖性钙通道、抑制血小板聚集和血栓形成、诱导血管平滑肌细胞凋亡、抑制血管平滑肌细胞增殖等心血管系统的药理作用,以及保护脑缺血和神经细胞、逆转多药耐药性和抗炎,为进一步研发异钩藤碱提供参考。

高效液相色谱法测定安神养血口服液中钩藤碱和异钩藤碱含量

目的：建立安神养血口服液的含量测定方法。方法：运用HPLC测定安神养血口服液中钩藤碱和异钩藤碱含量。色谱柱：依利特KromasilC18柱（5μm，4．6mm×250mm）；流动相：甲醇-水（55：45）（含0．01mol／L三乙胺，用冰醋酸调pH值至7．5）；柱温：25℃；检测波长：254nm；流速：1．0mL／min。结果：钩藤碱的平均回收率为99．04％，异钩藤碱为98．75％。钩藤碱在进样量0．12～1．20μg范围内线性关系良好（r1=0．9999），异钩藤碱在进样量0．08～0．80μg范围内线性关系良好（r2=0．9993）。结论：该方法简便、快速、准确，可用于安神养血口服液的质量控制。

异钩藤碱对血管平滑肌细胞中Baml1、Clock基因表达的调节作用

目的研究异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)中时钟基因(Bmal1、Clock)昼夜节律表达变化的调节作用。方法以AngⅡ诱导胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)建立节律变化模型。实验分AngⅡ诱导组、异钩藤碱组、正常对照组。AngⅡ诱导组以终浓度为100 nmol.L-1的AngⅡ诱导24 h,异钩藤碱组加入终浓度为100 nmol.L-1的AngⅡ和12 mg.L-1异钩藤碱处理24 h。采用Real-time PCR方法检测不同时间点VSMC中Bmal1、Clock基因表达水平,比较各组之间节律参数的差异。结果异钩藤碱通过调节AngⅡ诱导的A7r5细胞中的Baml1、Clock基因表达,改变其中值、振幅及峰相位,使A7r5昼夜节律发生改变。结论异钩藤碱对A7r5细胞中Baml1、Clock基因的昼夜节律的表达有调节作用。