大豆异黄酮对坝上长尾鸡生长性能、免疫功能、睾丸发育及血浆生殖激素的影响

试验旨在研究大豆异黄酮对坝上长尾鸡生长性能、免疫功能、睾丸发育及生殖激素的影响。选取750只40周龄坝上长尾鸡,随机分为5组,每组3个重复,每个重复50只鸡。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组饲粮中分别添加5、10、15、20、25 mg/kg大豆异黄酮。预试期7 d,正式试验期63 d。结果显示,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组坝上长尾鸡增重显著高于Ⅰ组(P<0.05)。Ⅲ组坝上长尾鸡的胸腺指数显著高于其他组(P<0.05);Ⅲ组坝上长尾鸡的法氏囊指数分别比Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅴ组显著提高16.09%、14.70%和22.67%(P<0.05);Ⅲ组坝上长尾鸡的脾脏指数比Ⅰ组显著提高17.98%(P<0.05)。Ⅲ组坝上长尾鸡的睾丸指数最高,显著高于Ⅰ组(P<0.05),提高了11.74%。Ⅲ组坝上长尾鸡的采精量、精子密度和有效精子数显著高于Ⅰ组(P<0.05),分别提高了9.52%、4.79%和8.97%。Ⅲ组坝上长尾鸡的睾酮(TESTO)含量分别比Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅴ组显著提高10.42%、4.72%和6.42%(P<0.05);Ⅲ组坝上长尾鸡的黄体生成素(LH)含量分别比Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅴ组显著提高7.63%、5.83%和10.12%(P<0.05)。研究表明,大豆异黄酮能够改善坝上长尾鸡的生长性能、免疫功能、睾丸发育、精液品质及血浆生殖激素的分泌水平,且最适添加量为15 mg/kg。

淡豆豉异黄酮调控TGF-β1/SnoN通路对糖尿病肾病小鼠肾组织的保护作用研究

[目的]观察淡豆豉异黄酮对糖尿病肾病(DKD)小鼠肾组织的保护作用,并探讨其对转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad核转录共抑制因子(SnoN)通路的调控作用。[方法]50只清洁级db/db小鼠和10只清洁级db/m小鼠,前者验证DKD建模成功后随机分5组,后者记为对照组。依那普利组予以依那普利10 mg/kg溶于0.1 mL/kg生理盐水中灌胃,淡豆豉异黄酮低、中、高剂量组分别予以12.5、25、50 mg/kg淡豆豉异黄酮溶于生理盐水中灌胃,其余组均予以生理盐水灌胃,均每日1次,共干预8周。己糖激酶法检测各组干预前、4周后、干预后空腹血糖(FBG),蛋白质定量(BCA)法检测24 h尿蛋白;检测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、TGF-β1水平;干预后处死小鼠并取肾组织,观察肾组织病理;实时-逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组肾组织TGF-β1、Smad2/3、Smad7、SnoN信使核糖核酸(mRNA)表达;检测肾组织TGF-β1、Smad2/3、Smad7、SnoN蛋白表达及磷酸化-Smad2/3(p-Smad2/3)。[结果]模型组4周后、干预后FBG、24 h尿蛋白、Scr、BUN、TGF-β1水平均高于正常组(P<0.05),依那普利组24 h尿蛋白、Scr、BUN、TGF-β1水平和淡豆豉异黄酮低、中、高剂量组FBG、24 h尿蛋白、Scr、BUN、TGF-β1水平均低于模型组(P<0.05);模型组肾组织呈显著病理改变,依那普利组和淡豆豉异黄酮低、中、高剂量组病理改变和胶原纤维沉积均减轻;模型组肾组织TGF-β1 mRNA与蛋白表达、Smad2/3 mRNA表达与p-Smad2/3升高(P<0.05),依那普利组和淡豆豉异黄酮低、中、高剂量组均低于模型组(P<0.05);模型组肾组织Smad7、SnoN表达降低(P<0.05),依那普利组和淡豆豉异黄酮低、中、高剂量组均高于模型组(P<0.05)。淡豆豉异黄酮组的作用呈剂量依赖性,除FBG外淡豆豉异黄酮中剂量组上述定量指标与依那普利组差异均无统计学意义(P>0.05)。[结论]淡豆豉异黄酮可降低DKD小鼠血糖,减少24 h尿蛋白,保护肾功能,降低血清TGF-β1水平,减轻肾病变,下调TGF-β1、Smad2/3表达,降低p-Smad2/3水平,上调Smad7、SnoN表达。

补骨脂异黄酮通过miR-497-5p调控对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和迁移的机制研究

目的:探讨补骨脂异黄酮通过调控miR-497-5p抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和迁移的机制研究。方法:体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞,使用浓度为0、9、18、36μg/ml补骨脂异黄酮处理细胞,记为Con组、低剂量组、中剂量组、高剂量组;按照脂质体法miR-NC、miR-497-5p转染细胞,记为miR-NC组、miR-497-5p组;按照脂质体法anti-miR-NC、anti-miR-497-5p转染细胞后,使用36μg/ml补骨脂异黄酮处理细胞,记为高剂量组+anti-miR-NC组、高剂量组+anti-miR-497-5p组。CCK8、克隆实验检测细胞增殖;伤口愈合实验检测细胞迁移;Western blot实验检测Cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达水平;qRT-PCR实验检测miR-497-5p表达水平。结果:补骨脂异黄酮呈剂量关系降低瘢痕疙瘩成纤维细胞活性、迁移率(P<0.05),减少克隆细胞数(P<0.05),降低Cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达水平(P<0.05),增加miR-497-5p表达水平。与miR-NC组相比,miR-497-5p组细胞活性、迁移率降低(P<0.05),克隆细胞数减少(P<0.05),Cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达水平降低(P<0.05)。抑制miR-497-5p可以逆转补骨脂异黄酮对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移的影响。结论:补骨脂异黄酮可能通过上调miR-497-5p抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和迁移。

岷山红三叶草异黄酮对运动大鼠免疫功能及运动能力的影响

目的:研究岷山红三叶草异黄酮对大鼠免疫功能及运动能力的影响。方法:将40只大鼠随机均分为四组:安静组、安静给药组、运动组和运动给药组,建立递增运动负荷大鼠模型,测量运动大鼠力竭时间、免疫脏器指数、大鼠免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群含量。结果:经过6周的大强度运动,服用岷山红三叶草异黄酮大鼠组与相应的对照组比较,其力竭运动时间明显延长,免疫脏器指数和T淋巴细胞亚群(CD_(4)^(++)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+))、免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)的含量均有明显上升和变化。结论:(1)岷山红三叶草异黄酮可明显提高大强度耐力训练大鼠力竭运动时间,提高运动能力;(2)岷山红三叶草异黄酮对运动大鼠的免疫系统产生影响,可以通过调节免疫细胞的功能,增强机体的免疫能力,并且对免疫抑制有一定改善。

Box-Behnken响应面法优化葛根异黄酮提取纯化工艺及损伤心肌细胞治疗作用研究

目的:采用Box-Behnken响应面优化葛根异黄酮最佳提取工艺,并研究葛根异黄酮对损伤心肌细胞的治疗作用。方法:在单因素实验的基础上,以料液比、提取时间、溶剂浓度为考察因素,以3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、大豆苷的含量为评价指标,采用Box-Behnken响应面法设计实验,以葛根异黄酮总提取率为考察指标,通过分析回归方程模型,优选最佳提取工艺并验证工艺;采用MTT法检测葛根异黄酮对损伤心肌细胞的治疗作用。结果:Box-Behnken响应面法优化得到葛根异黄酮最佳提取工艺为:料液比为30 mg·mL^(-1),提取时间为100 min,乙醇体积分数为73%,葛根异黄酮的总提取率平均值为41.6 mg·g^(-1),与预测值42.08 mg·g^(-1),相对误差0.81%;葛根异黄酮对H 2O_(2)损伤的缺氧复氧模型和Na 2S_(2)O 4损伤的缺血再灌注模型OD值分别为0.7436±0.0292和0.7457±0.0094,细胞存活率分别为81.32%和73.41%。结论:优选葛根抗氧化活性异黄酮最佳工艺稳定,预测模型效果良好,且葛根异黄酮对心肌缺血有良好的治疗作用。

淫羊藿中异戊烯基黄酮的鉴别和含量测定的综合实验设计

为加深学生对传统中药淫羊藿的药效成分异戊烯基黄酮的认识,设计了综合化学实验.将淫羊藿粉末经乙醇热回流提取,蒸馏浓缩得到总浸膏,再将总浸膏溶于水,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相.将三相的有机物分别用薄层色谱展开,在紫外灯下观察254 nm和365 nm荧光颜色和强度,同时用硫酸、氯化铁显色,表明各相均含有黄酮.以淫羊藿苷为标品,通过作标准曲线结合紫外光谱对其各相的异戊烯基黄酮含量进行平行测定,同时考察了方法的重复性和样品的稳定性.

新补骨脂异黄酮对破骨细胞形成及破骨基因表达的作用

目的:探讨新补骨脂异黄酮对破骨细胞形成及破骨相关基因表达的影响。方法:采用CCK-8法检测不同浓度新补骨脂异黄酮对RAW 264.7细胞增殖的影响,并筛选出最佳干预浓度;通过TRAP活性染色和细胞骨架F-actin染色评估新补骨脂异黄酮对破骨细胞形成的影响;通过实时定量PCR技术检测破骨细胞分化相关基因基质金属蛋白酶9、组织蛋白酶K、和原癌基因c-Fos的mRNA表达。结果:在12.5μM及以下的浓度,新补骨脂异黄酮对RAW 264.7细胞无显著毒性;TRAP染色活性染色结果表明,新补骨脂异黄酮可以抑制破骨细胞分化;细胞骨架F-actin染色结果表明,新补骨脂异黄酮减小破骨细胞肌动蛋白纤维环的产生,抑制了破骨分化;新补骨脂异黄酮抑制原癌基因c-Fos(P<0.05),显著抑制基质金属蛋白酶9和组织蛋白酶K(P<0.01)等破骨细胞分化的mRNA的表达。结论:新补骨脂异黄酮能够在体外抑制破骨相关基因的表达,进而抑制破骨细胞的生成。

葛根异黄酮抑制XOD和GLUT9分别发挥减少尿酸生成、促进尿酸排泄双重途径的机制

目的:分析葛根异黄酮抑制XOD和GLUT9分别发挥减少尿酸生成、促进尿酸排泄的可能机制。方法:2021年8月~2022年4月,采用随机数字表法将40只SPF级雄性昆明小鼠分为健康组(1次d频率250 mg/kg剂量灌胃羧甲基纤维素钠)、模型组(HUA小鼠1次d频率250 mg/kg剂量灌胃羧甲基纤维素钠)和低(HUA小鼠1次d频率125 mg/kg剂量灌胃葛根异黄酮)、中(HUA小鼠1次d频率250 mg/kg剂量灌胃葛根异黄酮)、高(HUA小鼠1次d频率500 mg/kg剂量灌胃葛根异黄酮)剂量组,每组各8只。比较各组干预前和干预后(30 d)血清和尿液中尿酸(SUA)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)含量的统计学差异,比较各组干预后(30 d)肾脏组织中黄嘌呤氧化酶(XOD)和人葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)、环氧化酶-2(COX-2)、肿瘤坏死因子(TNF-ɑ)、白细胞介素-1(IL-1β)含量的统计学差异。结果:干预后比较,模型组肾脏炎症因子(COX-2、TNF-ɑ、IL-1β);血液和尿液3项指标(SUA、BUN、SCr);XOD、GLUT9含量均高于健康组(P<0.05);低、中、高剂量组肾脏炎症因子(COX-2、TNF-ɑ、IL-1β);血液和尿液3项指标(SUA、BUN、SCr);XOD、GLUT9含量均低于模型组,且有低>中>高剂量组,两两分组的比较均有统计学意义(P<0.05)。干预后相比干预前,血液或尿液3项指标(COX-2、TNF-ɑ、IL-1β)含量均有下降,组内比较的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:葛根异黄酮能治疗HUA小鼠能通过抑制XOD、GLUT9表达,继而发挥减少尿酸生成、促进尿酸排泄作用,同时有利于缓解疾病的炎症程度。

酱渣大豆异黄酮大孔树脂纯化工艺及其抗氧化活性研究

研究酱渣大豆异黄酮的纯化工艺及其抗氧化活性。选用5种树脂(AB-8、HPD300、ADS-7、DM301、D101)进行静态吸附试验,筛选吸附效果最好的树脂,再以动态吸附试验筛选最佳纯化工艺,最后研究纯化后酱渣大豆异黄酮的抗氧化活性。结果表明,AB-8树脂的吸附效果最好,在流速1.5 mL/min、pH 3的条件下吸附0.6 mg/mL的样品溶液75 mL,再用100 mL 60%乙醇溶液解吸,样品纯度可由11.37%提升到55.84%;纯化后的酱渣大豆异黄酮具有较好的抗氧化活性,其浓度为0.07 mg/mL时,对DPPH自由基和ABTS自由基的清除率分别为93.35%和98.67%。AB-8树脂可用于酱渣大豆异黄酮的分离纯化且效果较好,酱渣大豆异黄酮具有较强的抗氧化活性。

葛根异黄酮通过调控LKB1/AMPK/PGC⁃1α信号通路对去卵巢大鼠心肌损伤的保护作用

目的研究葛根异黄酮对去卵巢大鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法将36只大鼠随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇组(0.1 mg/kg)和葛根异黄酮低、中、高剂量组(55、110、220 mg/kg)。模型组和各给药组大鼠切除双侧卵巢,假手术组大鼠仅切除卵巢周边小块脂肪组织。手术后2周开始给药,每天1次,每周6 d,连续灌胃给药16周。第16周末,通过PowerLab检测血流动力学[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均压(MBP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张压(LVMP)、等容收缩期左心室内压力最大上升和下降速率(±dp/dt_(max))];HE染色观察心脏组织病理变化;生化分析仪检测血浆中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及葡萄糖(Glu)水平;比色法检测心肌组织中三磷酸腺苷(ATP)水平;RT-qPCR法检测心肌组织中葡萄糖转运蛋白4(GLUT 4)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1α)、酰基辅酶A-羧化酶(ACC)、肝激酶B1(LKB 1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活酶因子1α(PGC-1α)mRNA表达;Western blot法检测心肌组织中能量代谢相关蛋白LKB1、p-AMPK/AMPK、PGC-1α表达。结果与模型组比较,葛根异黄酮组SBP、DBP、MBP、LVSP、LVMP降低(P<0.05,P<0.01),-dp/dt_(max)升高(P<0.05,P<0.01);去卵巢所致大鼠心肌纤维溶解、间隙增宽及炎性浸润情况得到改善;LDH、CK活性降低(P<0.05);心肌组织ATP水平升高(P<0.05,P<0.01);TC、TG、LDL-C及Glu水平降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平升高(P<0.05,P<0.01);心肌组织GLUT4、LDHA、CPT-1α、ACC、LKB1、AMPK、PGC-1αmRNA表达升高(P<0.05,P<0.01);心肌组织LKB1、p-AMPK/AMPK、PGC-1α蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论葛根异黄酮对去卵巢所致的大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制与改善心肌组织能量代谢相关蛋白,调控LKB1/AMPK/PGC-1α能量代谢相关信号通路有关。

大豆异黄酮对幼年小鼠生殖发育的影响

目的探讨大豆异黄酮(SI)对幼鼠生殖发育的影响。方法将C57BL/6幼鼠随机分为对照组和SI小、大剂量组(10、100 mg/kg),每组10只,雌雄各半。各药物组幼鼠灌胃相应药液,每天1次,持续2周。末次灌胃后,计算幼鼠的体重增长百分比,检测血清雌二醇、睾酮水平以及生殖器官组织中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,观察其生殖器官组织的病理改变,并检测其细胞凋亡情况。结果与对照组比较,SI大剂量组雌性幼鼠的体重增长百分比显著升高,而雄性幼鼠的体重增长百分比显著降低(P<0.05或P<0.01)。SI各剂量组幼鼠卵巢组织均可见囊性卵泡,睾丸组织可见精母细胞排列松散,附睾组织可见部分上皮细胞脱落。SI各剂量组雌性幼鼠血清睾酮水平和雄性幼鼠血清睾酮、雌二醇水平,SI小剂量组雌性幼鼠卵巢组织中GSH-Px活性和SI各剂量组雌性幼鼠卵巢组织中T-AOC,以及SI各剂量组雄性幼鼠睾丸及附睾组织细胞凋亡率均显著升高(P<0.05或P<0.01);SI各剂量组雌性幼鼠血清雌二醇水平,SI大剂量组雌性幼鼠卵巢组织中SOD活性和SI各剂量组雌性幼鼠卵巢组织中MDA含量,以及SI各剂量组雌性小鼠卵巢组织细胞凋亡率均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论SI可提高雌性幼鼠卵巢组织的抗氧化应激能力,减少其氧化应激损伤,但对雄性幼鼠的生殖器官具有一定的蓄积毒性。

异戊烯基黄酮类化合物药理作用研究进展

异戊烯基黄酮类化合物是黄酮类物质的一个重要分支,其结构多样,具有多种潜在的生物活性,包括抗肿瘤、抗炎、神经保护、抗菌、抗氧化、抗糖尿病、雌激素、酶抑制等,且较多集中在抗肿瘤、抗菌、抗炎、抗氧化等活性,其中大部分的研究集中在体外研究,体内动物实验及临床研究较少。已有报道的异戊烯基黄酮大部分来自桑科和豆科,异戊烯基的存在增加了化合物对生物膜的亲和力以及对靶蛋白的作用,具有很高的药物化学研究价值。本文就异戊烯基黄酮类化合物的药理作用进行了系统综述,以期为此类化合物的潜在机制及临床研究提供依据,推动该类成分的合理药用开发。

异黄酮与β-伴大豆球蛋白的相互作用及其对蛋白结构和潜在致敏性的影响

探究异黄酮和β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin,BCG)的相互作用机理及其对复合物结构和潜在致敏性的影响。利用荧光光谱、圆二色光谱分析2种大豆异黄酮(染料木素(genistein,Gen)、大豆苷元(daidzein,Dai))与BCG相互作用的猝灭类型、结合位点数、作用力类型和蛋白二级结构含量的变化,表征不同条件下制备的异黄酮-BCG复合物的结构,并利用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)与消化产物免疫印迹检测其潜在致敏性。结果表明:活性异黄酮(Gen/Dai)对BCG的猝灭为静态猝灭,且相互作用力以疏水相互作用为主,结合位点数均接近1;并且与异黄酮相互作用诱导了BCG氨基酸微环境的极性增加,使蛋白肽链伸展,结构更为松散;ELISA与消化产物免疫印迹结果显示,与异黄酮结合后蛋白的潜在致敏性增强。本研究有助于科学认识异黄酮在食品复杂基质体系中对过敏蛋白致敏性影响机制,对其抗过敏的深度开发利用具有重要意义。

异黄酮生物合成通路及关键酶研究进展

异黄酮是植物苯丙氨酸代谢途径中重要的次生代谢产物,具有良好的药理活性,多用于保健食品、豆制品、乳制品等,在抗肿瘤、改善心血管疾病、预防骨质疏松和抗抑郁等方面都有良好的疗效。以往对于异黄酮的研究多体现在药理活性上面,但对参与合成途径的关键酶和转录因子的报道较少。该文在阐述异黄酮的结构、药理活性的基础上,重点对异黄酮的合成途径、关键酶和主要转录调控因子展开综述,并对异黄酮研究中存在的问题和未来研究方向进行了分析和展望,以期为后续深入研究异黄酮合成的分子调控机制及植物的分子改良提供参考。

饲粮中添加大豆异黄酮对安格斯肉牛生产及繁殖性能的影响

【目的】研究饲粮中添加不同水平大豆异黄酮对安格斯肉牛生长性能、血清生化指标、抗氧化能力、免疫性能及繁殖激素的影响,探讨大豆异黄酮在肉牛生产实践中的适宜添加量。【方法】选取40头体重相近、2~3胎次且健康的安格斯母牛,随机分为4组,每组10头。对照组牛饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组牛分别在基础饲粮中添加10、20和40 mg/kg大豆异黄酮。试验始末对牛进行称重,记录每日采食量,计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及料重比(F/G);第40天时,采集血液检测血清生化、抗氧化、免疫指标及繁殖激素水平。【结果】与对照组相比,(1)添加大豆异黄酮对安格斯肉牛ADFI、ADG及F/G均无显著影响(P>0.05)。(2)试验Ⅰ、Ⅱ组牛血清中总蛋白含量显著升高(P<0.05),谷丙转氨酶活性显著降低(P<0.05);试验Ⅲ组牛血清中总蛋白和球蛋白含量极显著升高(P<0.01),谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性极显著降低(P<0.01);试验Ⅲ组牛血清中免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)及γ-干扰素水平极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05)。(3)试验Ⅱ组牛血清中总抗氧化能力(T-AOC)及谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性均极显著升高(P<0.01);试验Ⅲ组牛血清中T-AOC、GSH-Px及超氧化物歧化酶水平均极显著升高(P<0.01),丙二醛含量极显著降低(P<0.01)。(4)试验Ⅱ组牛血清中雌二醇水平显著升高(P<0.05);试验Ⅲ组牛血清中孕酮、雌二醇、促卵泡激素及促黄体生成素水平均极显著升高(P<0.01)。【结论】饲粮中添加大豆异黄酮可有效提高安格斯肉牛免疫功能和繁殖机能,其中40 mg/kg大豆异黄酮添加量效果最佳。

25-羟维生素D_(3)、维生素C、大豆异黄酮对鸡蛋壳质量及钙代谢的影响

为探究不同剂量组合的25-羟维生素D_(3)、维生素C、大豆异黄酮对鸡蛋壳质量及钙代谢的影响,试验采用三因素三水平正交试验设计,在基础日粮中分别添加0、10、20μg/kg 25-羟维生素D_(3),0、50、100 mg/kg维生素C,0、5、10 mg/kg大豆异黄酮。选取972只50周龄的健康京粉一号蛋鸡,随机分为9组,每组6个重复,每个重复18羽,预试期1周,正试期6周。结果表明:(1)与0添加量相比,添加20μg/kg 25-羟维生素D_(3)可显著增加平均蛋重(P<0.05)。(2)在第5~6周,添加不同水平的25-羟维生素D_(3)、维生素C和大豆异黄酮均能显著提高蛋壳强度、蛋壳厚度(P<0.05)。(3)添加大豆异黄酮和维生素C可提高机体的抗氧化能力。(4)添加不同水平的25-羟维生素D_(3)、维生素C均可显著提高十二指肠中CaBP-D_(28k)及肾脏中CYP_(27)B_(1)表达量(P<0.05),添加5 mg/kg大豆异黄酮可显著提高子宫中ERα、CA_(2)表达量(P<0.05)。综上,(1)饲粮中添加25-羟维生素D_(3)、维生素C和大豆异黄酮均可提高蛋壳质量,最优组合为20μg/kg 25-羟维生素D_(3)、50 mg/kg维生素C和5 mg/kg大豆异黄酮。(2)25-羟维生素D_(3)通过促进十二指肠及肾脏中CaBP-D_(28k)表达,促进机体钙吸收和蛋壳钙沉积;维生素C通过提高十二指肠CaBP-D_(28k)、肾脏CYP_(27)B_(1)表达量,促进钙吸收和胫骨钙沉积;大豆异黄酮通过提高机体雌激素水平,促进子宫ERα、CA_(2)表达,促进胫骨钙沉积。

日粮中联合添加大豆异黄酮和胆汁酸对绿壳蛋鸡生产性能及血清生理生化指标的影响

[目的]研究日粮中联合添加大豆异黄酮和胆汁酸对绿壳蛋鸡生产性能及血清生理生化指标的影响。[方法]选择72只370日龄绿壳蛋鸡,随机分为2组,每组4个重复,每个重复9只鸡。对照组蛋鸡饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验组蛋鸡日粮中添加12.5 mg/kg大豆异黄酮和60 mg/kg胆汁酸,预试期7 d,正试期105 d。记录每个重复蛋鸡在试验期间的采食情况、产蛋数和产蛋重量,计算平均采食量、料蛋比和产蛋率,试验结束时,采集鸡蛋样品测定鸡蛋品质指标,采集血液样品制备血清,测定血清生理生化指标。[结果]与对照组相比,试验组蛋鸡平均采食量和产蛋率分别提高11.80%和10.64%,差异显著(P<0.05)。试验组和对照组的料蛋比、蛋形指数、蛋重、蛋壳相对重和蛋黄相对重差异不显著(P>0.05),但试验组的蛋重和蛋壳相对重有提高的趋势。试验组蛋鸡血清中乙酰胆碱酯酶(AChE)含量较对照组提高32.45%,差异显著(P<0.05)。试验组和对照组的血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALb)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、促卵泡素(FSH)和黄体生成素(LH)差异不显著(P>0.05),但试验组的总蛋白(TP)、白蛋白(ALb)、促卵泡素(FSH)和黄体生成素(LH)有提高的趋势,谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)有下降的趋势。[结论]给产蛋中后期的绿壳蛋鸡日粮中联合添加12.5 mg/kg大豆异黄酮和60 mg/kg胆汁酸,可以提高蛋鸡生产性能并改善血清生化指标。

饲料中大豆异黄酮检测方法的建立

[目的]建立用于检测饲料中大豆提取物的高效液相色谱方法(HPLC),为大豆异黄酮在畜牧业的合理使用提供支持。[方法]通过查阅文献,采用HPLC色谱技术,样品经甲醇溶液超声提取后,以乙腈-0.1%醋酸水为流动相梯度洗脱,260 nm波长检测。[结果]建立的HPLC检测方法,线性范围为0.2~20μg/mL,定量限可达0.197μg/mL,以2、15μg/mL的质量浓度进行添加回收,添加回收率为97.45%~102.54%。[结论]按建立的HPLC方法检测5%纯度的大豆异黄酮,可检测6种组分的含量分别为:大豆苷1.13%、大豆黄苷0.22%、染料木苷2.79%、大豆苷元0.55%、大豆黄素0.06%和染料木素0.29%,总黄酮含量为5.04%。

黄豆和黑豆中大豆异黄酮甙元的分析

采用高效液相色谱(HPLC)法对黄豆和黑豆中大豆异黄酮甙元进行分析测定.结果表明:在5.0~100.0μg·mL-1范围内,大豆异黄酮甙元与峰面积呈良好线性关系,回归方程A=9960.0C-6693.6,相关系数为0.9998,变异系数为1.11%,回收率为98.2%~103.6%.

大豆异黄酮通过抑制Wnt/Ca2+信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注引起的钙超载

目的 探讨大豆异黄酮(SI)减轻脑缺血再灌注(I/R)引起钙超载的作用机制。方法 将48只SD大鼠采用随机数法分为4组:假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注模型组(I/R组)、病毒空载组(NC组)、Frizzled-2敲低组(Knock down组),12只/组。采用线栓法堵塞大脑中动脉2 h,再灌注24 h构建I/R模型。采用Western blot验证病毒敲低效率并检测Wnt/Ca2+信号通路相关蛋白Wnt5a、Frizzled-2和P-CaMKⅡ的变化。采用钙含量显色法检测各组缺血半暗带(IP)区钙离子浓度变化,HE检测各组IP区组织结构变化。另将72只SD大鼠采用随机数法分为3组:Sham组、I/R组、大豆异黄酮预处理组(SI组),24只/组。采用多普勒血流仪检测局部脑血流变化,TTC染色检测脑梗死体积,HE和尼氏染色检测IP区组织变化、免疫荧光检测ROS、Ca2+和细胞凋亡水平、流式检测细胞钙离子浓度,试剂盒检测血清MDA和SOD水平,Western blotting和免疫组化检测IP区Wnt5a、Frizzled-2和P-CaMKⅡ蛋白表达。结果 与I/R组比较,Knock down组钙离子浓度(P<0.001)、Wnt5a(P<0.05)、Frizzled-2(P<0.05)和P-CaMKⅡ(P<0.001)表达水平均降低;与I/R组比较,SI组钙离子浓度(P<0.05)、ROS和MDA水平(P<0.001)、细胞凋亡程度(P<0.001)、脑梗死体积(P<0.001)、Wnt5a、Frizzled-2和P-CaMKⅡ表达水平(P<0.05)均降低,SOD水平升高(P<0.001)。结论大豆异黄酮可能通过抑制Wnt/Ca2+信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注引起的钙超载。