半卧狗娃花中的黄酮类化合物(英文)

从半卧狗娃花（ Heteropappus semiprost Griers）全草的乙醇提取物中分离并鉴定了7个黄酮类化合物，通过波谱分析及化学方法鉴定其结构为：3’，4’，5，7-四羟基黄酮（1），3＇-甲氧基槲皮素（2），槲皮素-3-O-α-L-吡喃李糖甙（3），槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖甙（4），异鼠李亭-3-O-β-D-吡喃半乳糖甙（5），槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖甙（6），异鼠李亭-3-O-α-L-吡喃鼠李糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖甙（7），其中化合物1—5为首次从本属植物中分离得到。

槲皮素在Caco-2单层细胞模型上的跨膜吸收和甲基化代谢

目的基于人小肠吸收模型,研究槲皮素的跨膜吸收和甲基化代谢。方法人小肠吸收模型选用Caco-2单层细胞,分别于基底侧或腔侧加入槲皮素9.0和18.0 mg·L-1(终浓度),于30,60,90,120和150 min采样,采用高效液相色谱-质谱(LC-MS)法测定加载侧和透过侧样品中槲皮素、异鼠李亭和柽柳黄素的含量。先于腔侧加入外排蛋白P-糖蛋白(P-pg)或多药耐药蛋白2(MRP2)的特效抑制剂环孢菌素A(CysA)10 mmol·L-1或MK571 1 mmol·L-1(pH=7.2),孵育15 min后,再于腔侧加入槲皮素(终浓度9.0和18.0 mg·L-1),同法测定透过侧样品中槲皮素含量。结果双向转运过程中,在150 min孵育时间内,加载侧槲皮素剩余量的动态变化表现为随孵育时间持续下降(相邻时间点之间比较P<0.05);透过侧槲皮素透过量则表现为先升后降的趋势特征,120 min达峰,150 min下降(相邻时间点之间比较P<0.05);在透过侧和加载侧均检测到槲皮素的甲基化产物异鼠李亭和柽柳黄素,两侧的动态变化特征与槲皮素相似;不同的是,无论腔侧还是基底侧加载槲皮素,在30~60 min后,腔侧异鼠李亭和柽柳黄素含量均明显高于基底侧。分析双侧槲皮素、异鼠李亭和柽柳黄素占槲皮素加载量的百分比,发现孵育30 min时,加载侧槲皮素剩余量不足加载量的20%~25%,透过侧槲皮素含量仅为加载量的约1%;150 min时加载侧槲皮素剩余量下降至不足加载量的10%,而透过侧槲皮素含量仅为加载量的6%~7%;槲皮素甲基化产物异鼠李亭和柽柳黄素在两侧的产生量也仅为槲皮素加载量的0.1%~0.3%。与槲皮素对照组比较,预先加入CysA或MK571,均明显增加槲皮素从腔侧到基底侧的转运(P<0.05)。结论槲皮素在Caco-2单层细胞模型上的转运具有先升后降的趋势特征,并发生甲基化代谢;P-pg和MRP2的外排作用对槲皮素跨膜转运可能具有一定影响。

异鼠李素调控卵巢癌细胞生长、凋亡和氧化应激反应的机制

目的研究异鼠李素(isorhamnetin,ISO)对人卵巢癌SKOV3细胞生长、凋亡及氧化应激的调控机制.方法用ISO对卵巢表面上皮细胞系进行浓度梯度试验,以不影响细胞活力的不同浓度ISO处理SKOV3细胞,检测各组细胞的细胞增殖活性、侵袭率、凋亡率及相关蛋白表达,并检测氧化应激通路蛋白酶相关表达情况.结果浓度梯度试验显示35μmol/L处理时HOSE细胞的增殖活性受到明显抑制(P<0.05);用不同剂量ISO处理SKOV3细胞后,细胞增殖活性、侵袭率、ROS、MDA水平显著降低,细胞凋亡率、SOD、Gpx显著升高(P<0.05);Ki67、PCNA、N-cadherin、Vimentin、Bcl-2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平均随ISO浓度升高而降低(P<0.05),E-cadherin、Bax、Caspase-3、Caspase-9、Keap1均随ISO浓度升高而升高(P<0.05).结论ISO可能通过抑制Nrf2通路激活降低氧化应激来抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭并促使细胞凋亡.

槲皮苷、槲皮素及其甲基化产物的高压液相-质谱测定方法

目的建立同时测定槲皮苷、槲皮素、异鼠李亭、柽柳黄素的高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)测定方法。方法以丁螺环酮为内标,将槲皮苷、槲皮素、异鼠李亭和柽柳黄素溶解于磷酸缓冲液(PBS)中,进行HPLC-MS测定。色谱柱为Agilent-C18柱,流动相为甲醇:乙腈(1:1)(含0.1%甲酸),等梯度洗脱,离子源为ESI(+),采用选择离子监测(SIM)方式检测。结果槲皮素在2～2000ng/ml范围内线性良好,槲皮苷、异鼠李亭、柽柳黄素在1～1000 ng/ml范围内线性良好,相关系数分别为0.99998、0.99712、0.99862、0.99806;方法的准确性和精密度良好。结论该方法操作简单、灵敏度高、准确性好,可应用于细胞培养样品中槲皮苷、槲皮素及其甲基化代谢产物的测定。

建立测定槲皮素及其甲基化产物的高效液相色谱-质谱法

目的建立同时测定同一体系中槲皮素、异鼠李亭和柽柳黄素的高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)检测方法。方法将槲皮素、异鼠李亭和柽柳黄素溶解于磷酸缓冲液(PBS)中,以丁螺环酮为内标,进行HPLC-MS测定。色谱柱选择Agilent-C_(18)柱,流动相为甲醇:乙腈(1∶1),等梯度洗脱,离子源为ESI(+),采用选择离子监测(SIM)模式检测。结果槲皮素、异鼠李亭、柽柳黄素在1~1000μg/L范围内线性关系良好,相关系数分别为0.99996、0.99955、0.99983;方法的准确度和精密度良好。结论该方法操作简便、灵敏度高、准确度好,可应用于槲皮素及其甲基化代谢产物异鼠李亭和柽柳黄素的测定。