RP-HPLC法同时测定茵陈中5种化学成分的含量

目的建立同时测定茵陈中芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、4，5-O-二咖啡酰奎宁酸、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷含量的方法，为茵陈药材的质量控制提供依据。方法采用RP-HPLC法。色谱柱：Luna C18柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相：乙腈-体积分数0.04％磷酸水溶液（体积比17：83）；检测波长：345nm。结果芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、4，5-O-二咖啡酰奎宁酸、异鼠李素弓一O-葡萄糖苷质量浓度分别在0．942～18．84mg·L^-1（r=0．9995）、1．190～23．79mg·L^-1（r=0．9995）、1．107～22．14mg·L^-1。（r=0．9994）、56．78～1．136×10^3mg·L^-1。（r=0．9990）、0．6219～12．44mg·L^-1（r=0．9998）内与峰面积呈良好的线性关系（n=5）；方法回收率（n=9）分别为98．1％、100．7％、98．4％、100．2％、101．7％。结论该方法可用于茵陈药材的质量控制。

基于“初生-次生代谢产物”互作途径的大果沙棘和中华沙棘差异性研究

目的分析大果沙棘Hippophae rhamnoides vat.sp L.与中华沙棘H.rhamnoides初生/次生代谢物的差异,并对其生物合成途径变化进行分析。方法采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)法对2个种属的沙棘进行初生及次生代谢产物表征,基于二水平析因-星点设计法(plackett burman-central composite design,PB-CCD)设计对沙棘UPLC-DAD指纹图谱进行研究,优化液相方法,指认共有峰;以偏最小二乘-判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)、聚类分析及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析对大果沙棘、中华沙棘进行差异初生代谢物筛选及相关代谢通路富集;进一步采用质谱多反应检测(multiple reaction monitoring,MRM)对筛选得到具有差异的初生代谢物和次生代谢物进行定量分析;最后,对2个品种沙棘的差异性成分进行分析并对其进行生物合成途径的关联和阐释。结果基于成分表征和PLS-DA初步鉴定出中华、大果沙棘含量差异较大的成分有11个,其中包括2个氨基酸类初生代谢物和9个黄酮类次生代谢物。结论建立的方法能鉴定出中华沙棘、大果沙棘中的差异性成分。分析结果显示,总黄酮在中华沙棘中含量较高,说明中华沙棘在药用功效上可能强于大果沙棘;其次异鼠李素在大果沙棘中含量较高,说明其对临床的质控和应用可能不太适用。

基于UPLC定量指纹图谱与UPLC-QE-Plus-MS/MS技术的吴茱萸(石虎)标准汤剂量值传递研究

目的借助UPLC定量指纹图谱与UPLC-QE-Plus-MS/MS技术,研究吴茱萸Euodiae Fructus[石虎Euodia rutaecarpa(Juss.)Benth.var.officinalis(Dode)Huang]标准汤剂的量值传递规律。方法通过对18批吴茱萸(石虎)样品进行检测,获得吴茱萸(石虎)饮片和标准汤剂的对照指纹图谱,并采用UPLC-QE-Plus-MS/MS技术,对标定的吴茱萸(石虎)共有峰进行鉴定。通过峰个数传递、相似度比较、有效成分含量转移率、出膏率测定等,对吴茱萸(石虎)标准汤剂的量值传递规律进行研究。结果在饮片与标准汤剂中共标定25个对照指纹图谱共有峰,包括5个生物碱类化合物(去氢吴茱萸碱、evodiaxinine、吴茱萸酰胺、吴茱萸碱、吴茱萸次碱)、12个有机酸类化合物(咖啡酰葡萄糖酸及其同分异构体、阿魏酰葡萄糖酸及其同分异构体、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、阿魏酰奎宁酸等)、7个黄酮类化合物(香树素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芦丁、金丝桃苷、柠檬黄素-3-O-芸香糖苷、柯伊利素-7-O-芸香糖苷、水仙苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷)、1个柠檬苦素类化合物(柠檬苦素)。经测定饮片中25个共有峰均传递到标准汤剂中,共有峰传递率为100%。以每批次吴茱萸(石虎)饮片的指纹图谱为对照,对应批次标准汤剂的指纹图谱相似度均大于0.9。以有效成分柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱为指标,吴茱萸(石虎)标准汤剂中指标成分的转移率均在其均值±30%范围内。18批标准汤剂的出膏率也在其均值±30%范围内。结论制备过程量值传递情况稳定,制备工艺可行,可为吴茱萸(石虎)配方颗粒的质量标准研究提供依据。

傅里叶红外光谱结合HPLC对不同产地南葶苈子成分的含量测定

目的创建一种能够快速测定南葶苈子药材中芥子碱硫氰酸盐(sinapine thiocyanate,SH),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-0-β-D-龙胆双糖苷(quercetin-3-O-beta-D-glucose-7-O-beta-D-gentiobioside,QGG),异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin-3-O-glucoside,IG),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(quercetin3-O-β-D-glucopyranoside,QG)4种成分的方法。方法高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定南葶苈子样品中SH、QGG、IG、QG的含量,采用偏最小二乘法(partial least squares method,PLS)建立南葶苈子中SH、QGG、IG、QG的定量分析模型。结果所创建的QGG、QG、IG、SH的定量分析模型的内部交叉验证决定系数(R2)分别为0.9270、0.9266、0.8086、0.8289;校正均方差(root mean square error of calibration,RMSEC)分别为0.0100、0.00263、0.00313、0.111;验证均方差(root mean square error of prediction,RMSEP)分别为0.0139、0.00715、0.00395、0.0860。其中SH的特征光谱为9100~6100 cm-1;QGG的特征光谱为7300~5500 cm-1;IG的特征光谱为9500~6700 cm-1;QG的特征光谱为8200~5100 cm-1。结论利用傅里叶红外光谱建立的定量模型,能够对南葶苈子药材中QGG、QG、IG、SH的含量进行无损测定。此外通过近红外光谱PCA分析发现道地产地南葶苈子与非道地产地南葶苈子的差异较大,道地产地南葶苈子之间的差异较小。

垂盆草药材质量控制方法的研究

目的 建立垂盆草药材的质量控制方法。方法 以异鼠李素 3、7 二 O D 葡萄糖苷为指标 ,用TLC法 ,建立了垂盆草药材的定性鉴别方法 ;用RP -HPLC法测定了 2个产地垂盆草药材中指标成分的含量。结果 南京紫金山样品平均含量为 :0 .0 3 2 % ,RSD =3 .83 % (n =5 ) ;宜兴凤凰山样品平均含量为 :0 .0 3 0 % ,RSD =3 .3 3 % (n =5 )。数理统计显示 ,两者有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 该质量控制方法简便易行。

HPLC测定番泻叶中5种主要化学成分的含量

目的：建立番泻叶中主要化学成分的含量测定方法。方法：采用HPLC，DiamonsilC18柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相乙腈-1％冰醋酸梯度洗脱（10：90-15：85-18：82-20：80-25：75），流速1mL·min^-1，柱温40℃，检测波长270nm。结果：5种化学成分均达到基线分离，各成分都有较宽的线性范围和良好的线性关系。结论：本法快速、灵敏、准确，可靠，重复性好，可用于中药番泻叶药材的质量控制。

白刺果实活性成分提取及其抗氧化活性研究

目的:白刺果实活性成分提取及其抗氧化活性的研究。方法:用70%丙酮提取白刺果实,其提取物依次用乙醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取得各部分及水相,通过分光光度法测定各部分的黄酮及多酚含量,DPPH法和ABTS法测定各部分的体外抗氧化活性,大孔吸附树脂结合制备液相法对活性强的水相部分分离纯化。结果:水相部分黄酮和多酚含量较高且抗氧化活性最强,分离得到两个单体化合物,鉴定为异鼠李素-3-O-芦丁苷和异鼠李素-3-O-芦丁-7-O-葡萄糖苷,并对两个单体的抗氧化活性进行测定,两个单体都有明显抗氧化活性,且异鼠李素-3-O-芦丁苷相比于异鼠李素-3-O-芦丁-7-O-葡萄糖苷清除自由基的能力较强。结论:白刺果实中的黄酮及多酚具有抗氧化活性。

复方垂盆草冲剂质量标准研究

目的 :建立复方垂盆草冲剂 (垂盆草 ,矮地茶 )的质量标准。方法 :采用TLC法对处方中垂盆草、矮地茶进行定性鉴别 ;用HPLC法测定异鼠李素 3 7 O D 葡萄糖苷的含量。结果 :TLC色谱检出异鼠李素 3 7 O D 葡萄糖苷、矮地茶 ;异鼠李素 3 7 O D 葡萄糖苷的线性范围为 0 .86～ 4.3 μg ,r =0 .9996,平均加样回收率为 98.2 2 % ,RSD为 1.72 % (n =6)。结论 :该方法灵敏、简便、重现性好 。

花椒果皮中糖苷类化学成分研究

目的研究花椒(Zanthoxylum bungeanum Maxim.)果皮中的糖苷类化学成分。方法利用D101大孔树脂,硅胶柱色谱,LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)柱色谱,ODS柱色谱,半制备HPLC等方法对花椒果皮体积分数95%乙醇提取物进行分离纯化。根据化合物理化性质及多种波谱数据鉴定化合物结构。结果从花椒果皮体积分数95%乙醇提取物的正丁醇部位共分离得到14个糖苷类化合物,分别鉴定为裂-去氢双松柏醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(1)、(-)-异落叶松树脂酚-3α-O-β-D-葡萄糖苷(2)、二氢去氢双松柏醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(3)、开环异落叶松树脂酚-9′-O-β-D-葡萄糖苷(4)、淫羊藿苷E5(5)、菠叶素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)、金丝桃苷(7)、槲皮素-3-O-β-D-阿拉伯糖苷(8)、槲皮素-3-O-(4″-甲氧基)-α-L-鼠李糖基(9)、异鼠李素-3-O-β-D-半乳糖苷(10)、异鼠李素-7-O-β-D-葡萄糖苷(11)、淫羊藿苷D1(12)、苯乙基芸香糖苷(13)和2-苯乙基-O-β-D-葡萄糖苷(14)。结论化合物1~4,9~10和12~13为首次从花椒属植物中分离得到,化合物5为首次从花椒植物中分离得到。

一测多评法测定布渣叶总黄酮部位中8种黄酮苷成分

目的建立一测多评法(QAMS)同时测定布渣叶总黄酮部位中多种化学成分的方法,用于其质量控制。方法采用QAMS,以牡荆苷对照品为参照,计算芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷、芹菜素-6-C-阿拉伯糖-8-C-葡萄糖苷、芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-阿拉伯糖苷、芹菜素-6-C-木糖-8-C-葡萄糖苷、异牡荆苷、紫云英苷和异鼠李素-3-O-芸香糖苷的相对保留时间和相对校正因子;利用该相对较正因子计算其他7种黄酮苷的量。结果 8种黄酮苷的相对保留时间和相对校正因子有较好的重复性,以牡荆苷为参照,相对校正因子分别为1.01、0.60、0.76、2.02、1.05、1.14和2.42。10批布渣叶总黄酮部位中8种黄酮苷量的QAMS计算值与外标法测定值无显著差异。结论以牡荆苷为参照,采用QAMS能同时测定布渣叶总黄酮部位中8种黄酮苷的量,该方法简单、可靠,为其量效关系研究和制剂开发提供了参考。

基于HPLC多组分定量联合化学计量学及灰色关联度分析的地肤子质量控制研究

目的建立定量检测地肤子中9种成分含量的高效液相色谱(HPLC)法,并联合化学计量学及灰色关联度分析对其质量控制进行研究。方法采用HPLC法同时检测地肤子中芦丁、金丝桃苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、异鼠李素、齐墩果酸、胡萝卜苷、地肤子皂苷Ⅰc、β-谷甾醇含量,并通过聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析及灰色关联度分析比较不同产地地肤子质量差异。结果芦丁、金丝桃苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、异鼠李素、齐墩果酸、胡萝卜苷、地肤子皂苷Ⅰc和β-谷甾醇分别在各自范围内线性关系良好(r>0.9992);精密度、稳定性及重复性良好;平均加样回收率在96.93%~100.12%。聚类分析结果显示17批样品聚为3类;主成分分析结果显示主成分1、2是影响样品质量评价的主要因子;正交偏最小二乘法-判别分析结果显示地肤子皂苷Ⅰc、芦丁和齐墩果酸变量重要性投影(VIP)值均>1,是影响产品质量差异的标志性成分;灰色关联度分析结果显示17批样品的相对关联度在0.3340~0.6225,不同产地地肤子质量存在一定差异。结论所建立的HPLC多组分定量联合化学计量学及灰色关联度分析方法操作便捷、结果准确,可为地肤子质量控制和品质评价提供依据。

金银花化学成分研究

目的研究金银花(忍冬Lonicera japonica干燥花蕾)的化学成分。方法反复利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、中压柱色谱及制备液相色谱等方法分离纯化;通过MS、1H-NMR及13C-NMR等技术鉴定化合物结构。结果从金银花醋酸乙酯部位分离得到12个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲酸(1)、香草酸(2)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(3)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、3′,4′,7-三羟基-3,5-二甲氧基黄酮(5)、异鼠李素(6)、金丝桃苷(7)、槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、环裂马钱子酸(9)、断氧马钱子苷半缩醛内酯(10)、5-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(11)、豆甾醇(12)。结论化合物5首次从忍冬属植物中分离得到;化合物1~4、6、11、12首次从金银花中分离得到。

荷叶黄酮类化学成分研究

目的研究荷叶(Folium nelumbinis)的黄酮类化学成分。方法荷叶乙醇提取物经大孔树脂初步分离后,采用各种柱色谱法进行分离纯化,根据理化性质及光谱数据鉴定结构。结果分离鉴定了8个黄酮类化合物,分别为:异鼠李素(1),山奈酚(2),槲皮素(3),槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4),紫云英苷(5),柯伊利素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6),异槲皮苷(7),金丝桃苷(8)。结论化合物1、4、6为首次从荷叶中分离得到。

翻白草的化学成分研究

目的研究翻白草Potentilla discolor的化学成分。方法采用70%乙醇提取,利用硅胶、反相(ODS)、凝胶等柱色谱及制备液相色谱进行分离,并根据理化性质和光谱数据鉴定化合物结构。结果从翻白草中分离得到10个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(2)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(3)、8-甲氧基草质素-3-O-β-D-槐糖苷(4)、芦丁(5)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(6)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(7)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(8)、槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(9)、短叶苏木酚酸(10)。结论化合物4、7为首次从该属植物中得到,化合物4、7、9、10为首次从该种植物中得到。

不同种质金银花发育过程中黄酮类成分含量变化规律研究

目的建立一种同时测定金银花Lonicerae Japonicae Flos 20种黄酮类成分含量的方法,并对含量结果进行多元统计分析,探讨不同种质金银花发育过程中黄酮类成分的含量变化规律,为优良品种选育与金银花药材质量控制提供技术支撑。方法建立基于HPLC-ESI-MS/MS同时测定金银花20种黄酮类成分含量的方法,测定5种种质金银花不同发育时期黄酮类成分含量,利用主成分分析(principal components analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPLS-DA)研究其变化规律,并筛选差异性活性成分。结果建立的HPLC-ESI-MS/MS方法重复性好、稳定性好,5种种质金银花总黄酮含量:华金6号>九丰一号>四季花>红白忍冬>华金3号,木犀草苷含量:华金6号>红白忍冬>九丰一号>四季花>华金3号;在各种质金银花发育过程中,木犀草苷和总黄酮含量在二白期或大白期最高;通过多元统计分析确定了不同种质间存在9个潜在差异性黄酮标志物(野漆树苷、似梨木双黄酮、忍冬苷、水仙苷、芦丁、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷、圣草酚-7-O-葡萄糖苷、芹菜素和山柰酚-3-O-芸香糖苷),不同发育时期有7个差异性黄酮标志物(苜蓿素、野漆树苷、香叶木素、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、金圣草黄素、紫云英苷和圣草酚-7-O-葡萄糖苷)。结论金银花黄酮类成分组成与含量既决定于种质又受发育程度的影响,选育优良品种、确定合理采收时期是提高金银花药材黄酮类成分含量的有效途径。

窄叶鲜卑花地上部分化学成分研究

目的研究窄叶鲜卑花地上部分水提物的化学成分。方法采用HP-20大孔吸附树脂、凝胶柱色谱、反相柱色谱和制备液相色谱等方法进行分离纯化;通过理化性质、波谱数据并结合文献报道数据对比确定化合物结构。结果从窄叶鲜卑花地上部分水提物中共分离得到12个化合物,分别鉴定为:藜芦酸(1)、(+)-cycloolivil(2)、3,7-dimethyl-3(E),6-octadien-5-one-1-O-β-D-glucoside(3)、3,7-dimethyl-3(Z)-6-octadien-5-one-1-O-β-D-glucoside(4)、1-O-β-D-glucopyranosyl(1→2)-β-D-glucopyranosyl-3,7-dimethyl-2(E)-6-heptdiene(5)、(7R,8S)-二氢脱氢二松柏醇-9'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、(+)-1-hydroxypinoresinol-1-β-D-glucoside(7)、茵芋苷(8)、kaempferol 3-O-α-L-arabinopyranosyl-(1→6)-β-D-galactopyranoside(9)、异鼠李素-3-O-[β-D-半乳糖(1→6)]-β-D-葡萄糖苷(10)、isorhamnetin 3-O-α-arabinopyranosyl-(1→6)-β-galactopyranoside(11)和quercetin 3-O-[2'''-O-(E)-caffeoyl]-α-L-arabinopyranosyl-(1→6)-β-D-galactopyranoside(12)。结论所有化合物均为首次从鲜卑花属植物中分离得到。