蒲黄总黄酮提取物中香蒲新苷及异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的HPLC测定

建立了HPLC法测定蒲黄总黄酮提取物中香蒲新苷(1)及异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷(2)的含量。采用Eclipse XDBC18柱,乙腈-0.5%乙酸-甲醇梯度洗脱,检测波长248nm。1和2分别在10～400mg/ml和12.6～504mg/ml范围内呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率分别为98.9%和102.3%,RSD分别为1.66%和2.05%。

高效液相色谱法测定复方蒲黄片中香蒲新苷与异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷含量

目的建立测定复方蒲黄片中香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷含量的高效液相色谱法。方法采用Luna-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.4%磷酸为流动相进行梯度洗脱,流速0.8 mL.min-1,柱温30℃,检测波长254 nm。结果香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷分别在0.029～0.570 mg.mL-1和0.050～1.010 mg.mL-1浓度范围内有良好线性关系,平均加样回收率分别为98.0%和97.5%,RSD均<2.0%。结论该方法简便,快速,准确,重复性好,可用于该制剂的质量控制。

异鼠李素-3,7-二-O-β-D-葡萄糖苷的保肝降酶试验

目的 :验证异鼠李素 - 3 ,7-二 - O-β- D-葡萄糖苷的保肝降酶作用 ,考察其作为垂盆草药材质控指标的可行性。方法 :用垂盆草药材 n- Bu OH部分经过溶剂分离和色谱分离制得的异鼠李素 - 3 ,7-二 - O-β- D-葡萄糖苷 ,配成一定浓度的溶液 ,通过保肝降酶试验 (D-氨基半乳糖致小鼠急性肝损伤 ) ,考察其活性。结果 :和模型组比较 ,该成分具有一定的保肝降酶活性 ,高剂量组更加明显。结论 :异鼠李素 - 3 ,7-二 - O-β-

HPLC法同时测定红藤颗粒中苦杏仁苷、香蒲新苷及异鼠李素-3-O-新橙皮苷

目的建立同时测定红藤颗粒(红藤、蒲黄、桃仁等)中苦杏仁苷、香蒲新苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷的HPLC方法。方法采用ACE C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,检测波长为210 nm,柱温20℃。结果 3种成分均达到基线分离,且线性良好,日内、日间精密度RSD<1.0%。苦杏仁苷、香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮苷线性范围分别为0.23～11.55μg、0.075～3.744μg和0.064～3.214μg。平均回收率(n=6)分别为99.4%、99.1%和99.9%。结论该法简便、准确,具有较好的重复性和稳定性,可用于同时测定红藤颗粒中的苦杏仁苷、香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮苷。

香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷热稳定性初步研究

目的：研究加热温度和时间对香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷稳定性的影响。方法：将香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷分别在不同温度下加热不同时间，对各样品进行HPLC分析。结果：香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷在加热过程中，生成一系列分解产物，其中异鼠李素为二者所共有。140oC加热3h或160℃加热1h，香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷无明显变化；180℃加热10min，可检出分解产物，加热3h后仍能检测到香蒲新苷、异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷及其分解产物；200℃或220℃加热1h，香蒲新苷、异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷及其分解产物均不能被检测。结论：在烘制蒲黄炭时，烘制温度宜控制在160～180℃（170℃），而加热时间也应相应控制在3～1h（2h）。

从布渣叶中制备异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷的研究

目的从布渣叶中分离制备高纯度异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷。方法采用大孔吸附树脂富集布渣叶总黄酮,用Sephadex LH-20凝胶柱从布渣叶总黄酮中分离化合物单体,并采用IR、MS和1H-NMR、13C-NMR对其进行结构鉴定,利用TLC和HPLC对其纯度进行测定。结果从布渣叶中分离出异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷,其质量分数大于98.0%。结论该方法简便有效,可以从布渣叶中制备异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷对照品。

HPLC法测定五灵止痛胶囊中异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的含量

目的：建立HPLC法测定五灵止痛胶囊中异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷含量的方法。方法：色谱条件为：C18柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-水（14：86），检测波长为254nm，进样量10μl，流速1．0ml／min，柱温30℃。结果：此方法线性范围为0．252～12．6μg（r=0．9998），平均回收率为99．05％，RSD=0．89％（n=6）。结论：所用方法测定分离效果好，重复性好，灵敏度高。

金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷对照品的制备方法

目的建立金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷对照品的制备方法。方法结合萃取、聚酰胺柱层析、重结晶等方法对吴茱萸甲醇提取物进行分离纯化,通过MS、1HNMR、13CNMR、HPLC等波谱学方法对其分离产物进行结构鉴定和含量测定。结果该法分离所得金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷的纯度分别为99.6%和98.0%。结论该方法简便,产品纯度高,可作为中药药效物质基础研究中的对照品。

骆驼刺中异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品的制备研究

目的建立骆驼刺中异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品的制备分离方法。方法取骆驼刺药材醇提浸膏的正丁醇萃取部分，用硅胶柱色谱分离，依次用氯仿-甲醇（90：10～70：30）、氯仿-甲醇-水（70：30：10～60：40：10）梯度洗脱，收集异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷富集流份，继续采用凝胶柱色谱及制备HPLC进行分离纯化，通过NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构，经TLC、HPLC等技术进行质量分数检测。结果从骆驼刺中制备分离的异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品，质量分数〉99％。结论本法得到的异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品符合中药化学对照品的相关技术要求，为骆驼刺药材和的骆驼刺成方制剂的质量控制及药效物质基础研究提供化学对照品。

异鼠李素和异鼠李素-3-O-葡萄糖苷的抗氧化活性分析

槲皮素类化合物是众多黄酮类中活性最高的化合物之一,在医药方面有很强的药效功效。本研究选取两种槲皮素类黄酮化合物异鼠李素和异鼠李素-3-O-葡萄糖苷作为目标化合物,运用Gaussian 09软件密度泛函(DFT)方法从分子总能量、OH解离焓(BDE)的理论表征、前线分子轨道及其轨道能级、原子的净电荷布居等方面研究异鼠李素和异鼠李素-3-O-葡萄糖苷的抗氧化活性。结果表明,异鼠李素活性大于异鼠李素-3-O-葡萄糖苷,两类分子4'位的酚羟基失去氢之后对抗氧化活性的整体影响是最大的,酚羟基在这个位置上就具有较明显的高活性特征,分子中引入的糖苷不参与前线分子轨道的形成,不具有消除自由基活性的作用,但它对于分子本身的极性有很大的影响,可以改变分子在机体反应时的溶解度和吸收度。这对进一步深入研究槲皮素类黄酮化合物的抗氧化活性以及抗氧化剂的结构改良等提供了重要的科学依据。

异鼠李素-3-O-葡萄糖苷抑制MPP^+诱导的PC-12细胞线粒体损伤和细胞凋亡

目的探讨异鼠李素-3-O-葡萄糖苷(isorhamnetin-3-O-glucoside,IR3G)抑制MPP+诱导的PC-12细胞线粒体损伤和细胞凋亡的分子机制。方法应用不同浓度MPP+作用于PC-12细胞,选取最佳浓度0. 75mmol/L建立帕金森病体外细胞模型。实验分组:对照组、IR3G组、MPP+组、IR3G+MPP+组。采用MTT法测定细胞存活率; AnnexinV/PI双染和流式分析法检测细胞凋亡; Western blot检测凋亡相关蛋白PARP1、cleaved-Caspase 3、cleaved-Caspase 9以及Bcl-2、Bax、Bim的表达水平和细胞色素C(Cyto C)的释放; JC-1荧光探针流式检测线粒体膜电位;激光共聚焦显微镜观察线粒体形态的变化。结果 IR3G可以明显降低MPP+对细胞活性的抑制作用,呈明显的量效关系; IR3G可明显阻断MPP+诱导的细胞凋亡[(43. 59±1. 57)%vs (14. 93±0. 82)%,P <0. 01]; IR3G可以阻断MPP+引起的凋亡相关蛋白PARP1的降解,Caspase 3和Caspase 9的激活以及Bcl-2的下调,Bim的上调,Bax的线粒体转位和Cyto C的释放; IR3G可以显著逆转MPP+引起的线粒体膜电位降低[(7. 146±0. 496)%vs(15. 780±0. 518)%,P <0. 01];同时IR3G能够阻断MPP+诱导的线粒体分裂。结论异鼠李素-3-O-葡萄糖苷能通过抑制MPP+诱导的细胞线粒体损伤来阻断PC-12细胞凋亡。

高效液相色谱法测定红藤方中间体中异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷含量

目的：建立高效液相色谱法测定红藤方中间体中异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的含量。方法：采用高效液相色谱法,ACER○C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：乙腈-水-冰醋酸（14∶79.4∶0.6）,流速：1.0 mL.min^-1;检测波长：254 nm;柱温：20℃。结果：异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的线性为（0.040 4-2.02）μg,r=0.999 95,平均回收率为99.78%,RSD为1.09%。结论：方法简便,结果准确。

HPLC同时测定枸骨叶提取物中异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素的含量

目的建立枸骨叶提取物中异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素的高效液相色谱同时测定方法。方法采用高效液相色谱法,Phenomenex C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-0.15%醋酸水为流动相梯度洗脱,检测波长:254 nm,流速:1 m L·min^(-1),柱温:30℃。结果异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素分别在6.97~278.8μg·m L^(-1)范围和2.96~118.4μg·m L^(-1)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.41%和97.43%。结论该方法准确、可靠、重复性好,可用于枸骨叶提取物的质量评价与控制标准。

异鼠李素-3-β-D-葡萄糖苷、异槲皮苷与牛血清白蛋白相互作用的研究

目的研究异鼠李素-3-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)、异槲皮苷(Ⅱ)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。方法主要应用荧光猝灭法和紫外吸收光谱法。结果确定两化合物与牛血清白蛋白的猝灭机制主要为静态猝灭和非辐射能量转移。结论异鼠李素-3-β-D-葡萄糖苷、异槲皮苷与牛血清白蛋白有较强的相互作用,作用力主要为静电引力与疏水作用力;3′-OH比3′-OCH3更能增进黄酮与牛血清白蛋白的作用。

不同厂家蒲黄药材中异鼠李素-3-O-新橙皮苷和香蒲新苷的含量分析

目的分析从不同来源处收集的蒲黄药材中两种化学成分香蒲新苷与异鼠李素-3-O-新橙皮苷含量的差异,为临床安全、有效和合理用药提供参考。方法以2020年版《中国药典》一部收载的蒲黄药材质量标准为主要依据,结合参考文献,采用高效液相色谱法测定蒲黄中香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮苷两种化学成分的含量并进行比较。结果通过外标法计算可知,两种化学成分含量存在差异,且总含量也各不相同。结论从不同来源处收集的蒲黄中两种化学成分含量不同,质量存在差异,可结合性状、鉴别和检查等项目进行综合的质量分析,评价蒲黄的整体质量,为临床合理用药提供参考。

HPLC测定莲不同部位紫云英苷及异鼠李素-3-O-葡萄糖苷含量

目的建立莲不同部位中紫云英苷及异鼠李素-3-O-葡萄糖苷含量的HPLC测定方法。方法采用Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.5%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长347 nm,流速0.8 mL/min,柱温30℃,进样量10μL。结果在上述色谱条件下,紫云英苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷与相邻色谱峰的分离度良好。紫云英苷在0.1005~2.01μg范围内有良好的线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为100.96%(RSD=2.68%);异鼠李素-3-O-葡萄糖苷在0.026~0.52μg范围内有良好的线性关系(r=0.9994),平均加样回收率为98.91%(RSD=2.34%)。结论本研究建立的方法操作简便,结果可靠,可为莲相关药材的质量控制及资源开发提供依据。

HPLC法同时测定结肠宁(灌肠剂)中香蒲新苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷的含量

目的:建立HPLC法测定结肠宁(灌肠剂)中香蒲新苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷的含量。方法:色谱柱为Welch-C_(18)柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),以乙腈-0. 1%磷酸(13∶87)为流动相,流速为1. 0 ml·min^(-1),检测波长为353 nm,柱温为35℃。结果:香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮苷分别在进样量为26. 5～4 430. 9 ng(r=0. 999 9),26. 1～4 376. 6 ng(r=0. 999 9)范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为101. 63%、102. 03%,RSD分别为1. 37%、1. 56%(n=6)。结论:该方法简便、准确、重复性好,可作为结肠宁(灌肠剂)中香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮苷含量控制方法。

五灵止痛胶囊中异鼠李素-3-O-新橙皮苷的含量测定

目的:采用高效液相色谱法测定五灵止痛胶囊中异鼠李素-3-O-新橙皮苷(C28H32O16)的含量。方法:色谱柱:Hypersill BDS C18 5μm,以乙腈-水(15:85)为流动相,流速1．0m·1min1,检测波长254nm。结果:异鼠李素-3-O-新橙皮苷进样量在0．2 -1．0μg范围内与峰面积具有良好的线性关系,相关系数0．9995,回收率99．72％。结论:本方法操作简便,精密度好,结果准确可靠,可以作为该药品的质量检测标准。

HPLC法同时测定少腹逐瘀丸中芍药苷、阿魏酸、桂皮醛和异鼠李素-3-0-新橙皮苷含量

目的：采用 HPLC 一个条件同时测定少腹逐瘀丸中赤芍、当归、川芎、肉桂和蒲黄中指标成分芍药苷、阿魏酸、桂皮醛和异鼠李素-3-0-新橙皮苷的含量。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为自装 C18柱（富士填料，5μm，4．6 mm x250 mm）；流动相采用梯度洗脱（A 为乙腈，B 为0．1%磷酸溶液），流速：1．0 mL·min -1；柱温：室温；检测波长280 nm，进样量10μL。结果：芍药苷在0．8088-6．0660μg范围内，峰面积与进样量线性关系良好（r2=0．999），平均回收率为97．9%，RSD 为2．5%；阿魏酸在0．0625-0．6252μg范围内，峰面积值与进样量线性关系良好（r2=0．999），平均回收率为99．5%，RSD 为2．7%；异鼠李素-3-0-新橙皮苷在0．11-1．68μg范围内，峰面积值与进样量线性关系良好（r2=0．999），平均回收率为99．2%，RSD 为1．9%；桂皮醛在0．05-0．96μg范围内，峰面积值与进样量线性关系良好（r2=0．999），平均回收率为99．5%，RSD 为1．7%。精密度和重现性 RSD 均小于2．0%。结论：该方法简便、灵敏、准确，分离效果好，可用于少腹逐瘀丸的质量控制。

HPLC法测定金钱草中紫云英苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和异鼠李素

目的建立HPLC-UV法测定金钱草中紫云英苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚和异鼠李素。方法采用Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为甲醇–0.4%磷酸水,梯度洗脱,检测波长360 nm,体积流量0.5 mL/min,柱温30℃,进样量10μL。结果紫云英苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素分别在22.10~176.80、21.14~169.12、17.40~174.00、51.12~408.96、23.30~186.40μg/mL呈现良好线性关系(R^(2)>0.9991);平均加样回收率分别为99.50%、100.39%、99.93%、105.58%、98.96%,RSD值分别为1.07%、1.44%、0.57%、0.24%、0.65%(n=6)。结论方法的重复性好,操作简单,结果准确,可以用来控制金钱草药材及其制剂的质量。