空肠弯曲菌毒素对周围神经的损伤作用研究

目的 探讨空肠弯曲菌毒素致周围神经损伤的作用机理。方法 (1)将PEN 19 CJ毒素 (CJT)免疫后的Wistar大鼠血清 ,以及体外激活的该鼠PBMC上清液 ,分别注入健康大鼠神经外膜下及静脉内。 (2 )取大鼠坐骨神经进行单纤维分离 ,甲苯胺蓝光镜和电镜超微组织病理学检测。 (3)用SABC及FITC 免疫荧光法对与CJT共同作用后的正常大鼠和人坐骨神经 ,以及CJT致病变神经组织标本进行免疫酶组织化学和免疫荧光检测 ,并以核酸杂交技术检测其TNF αmRNA表达。结果 (1)CJT经外膜下及静脉注射均可诱发坐骨神经明显轴索变性及髓鞘脱失病理学改变。外膜下注射组原纤维病变率为 76 8% (2 76 3/ 36 0 0 ) ,对照组仅为 9 6 % (2 30 / 2 4 0 0 ) (P <0 0 1)。静脉注射后病变原纤维发生率于第 3天达高峰 ,为 19 5 % (390 / 2 0 0 0 ) ,持续至第 14天时病变仍为 15 5 % (310 / 20 0 0 ) ,而对照组始终无病变发生 (P <0 0 1)。CJT免疫血清及其PBMC上清液外膜下注射原纤维病变率与对照组无明显差异 (P >0 0 5 )。 (2 )CJT与正常大鼠和人坐骨神经共同孵育后 ,以及CJT致周围神经病变组织免疫化学检测显示不同程度的CJT结合阳性反应。 (3)CJT静脉注射后 ,在周围神经已出现明显病变时 ,其他脏器未见明显组织学异常。结论 (1)

Penner19空肠弯曲菌毒素的细胞毒性作用研究

目的 探讨Penner 19空肠弯曲菌毒素 (CJT)对细胞毒性的影响。方法 (1)应用CHO及Vero细胞检测CJT毒性效应 ,以及CJT抗血清和GM1中和 /抑制作用 ;(2 )ELISA检测CJT结合GM1、CHO细胞受体 ,评价CJT抗血清及GM1中和或抑制作用。结果 (1)CJT对CHO和Vero细胞均具毒性 ,效应最低CJT量均为 3 12 5mg/L ,细胞变形率分别为 (5 7 3± 5 6 ) %及 (5 8 6± 5 2 ) % ,变形细胞中死亡率分别为 (5 3 8± 6 2 ) %及 (37 2± 6 9) %。对照组细胞变形率分别为 (8 6± 2 1) %及 (7 3±2 4 ) % ,显著低于CJT组 (P <0 0 1)。 (2 )与GM1呈阳性反应的CJT最低量为 1 5 6 3mg/L ,吸光度差值(P -N)为 0 2 4± 0 0 1(P >0 2 0 )。 (3)CJT抗血清可中和CJT毒性效应 ,其 1∶8及 1∶1倍稀释时 ,细胞变形率分别 <5 0 %和 <10 % ,与对照组比较差异有显著意义 (P <0 0 1)。 (4)GM1由 0 0 1增至 0 0 8μg/10 0 μl时 ,CJT致细胞形变率逐渐下降 ,继续增加GM1剂量 (0 0 8～ 0 6 4 μg/10 0 μl) ,细胞变形率却维持不变 ,且始终大于 5 0 %。 (5 )CJT结合CHO于作用后 3min最明显。CJT抗血清及GM1均可导致CJT结合CHO细胞能力减低。CJT抗血清完全抑制 ;而GM1部分抑制。结论 CJT对细胞可产生形态及致死?