原生质体融合技术选育弱后酸化乳酸菌菌株的研究

对新疆地方乳酸菌Lactobacillus bulgaricus LN1#进行原生质体融合,应用均匀设计的方法得到L.bulgaricus LN1#的原生质体制备条件:溶菌酶质量浓度为15.00 g/L,酶解细胞壁的时间为60 min,酶解温度为44℃。对原生质体进行灭活,致死率达到100%的条件:紫外线灭菌为120 s;高温为53℃,60 min。应用青霉素对融合子进行筛选,最终得到37℃培养时产乳酸量与出发菌株相同,10℃贮藏时,产乳酸量明显减少的目标菌株NO2#和NO3#。

弱后酸化酸奶发酵剂及高品质酸奶研究

60Co-γ射线诱变选育的保加利亚乳杆菌G4-1与嗜热链球菌X7的比例1∶1,在接种量5%、温度43℃的发酵条件下,酸奶表现出良好的感官及弱后酸化特性,在4℃和10℃下储藏21 d,酸奶的pH值变化较小,货架期得到有效延长。

硫酸二乙酯诱变选育弱后酸化保加利亚乳杆菌

对保加利亚乳杆菌进行硫酸二乙酯(DES)诱变,应用正交试验得到DES法诱变的最佳条件为:菌液浓度为107个/mL,DES剂量为0.8%,诱变时间为30min,诱变温度为37℃。应用青霉素对突变菌株进行筛选,最终得到37℃培养时产乳酸量与出发菌株一样,10℃贮藏时,突变菌株产乳酸量明显减少的菌株N01#。

酸奶弱后酸化菌株摇瓶增菌工艺及发酵罐扩培试验

针对目前我国高效直投式发酵剂技术水平落后以及在应用中普遍存在酸奶后酸化的问题,研制开发具有自主知识产权的弱后酸化高效直投式发酵剂,势在必行。本文采用自行选育的弱后酸化保加利亚乳杆菌Lb-s1 rp-1为出发菌株,在优化的胡萝卜汁复合增菌培养基上增殖培养。首先研究了培养温度、培养方式、培养基起始pH值、接种量等单因素对弱后酸化菌株生长的影响,然后通过L9(33)正交试验优化了摇瓶分批式培养的增菌工艺条件;通过50 L发酵罐分批补料式扩大培养试验,并以分批式扩大培养为对照,研究了调节pH值、流加葡萄糖补料以及调节pH值且流加葡萄糖补料对弱后酸化菌株生长的影响。结果表明,弱后酸化保加利亚乳杆菌Lb-s1 rp-1实验室摇瓶分批式培养的最适增菌工艺条件:培养温度37℃,培养基起始pH 6.5,接菌量1.0%,静置培养,在此工艺条件下培养该菌株,6 h到达对数生长末期,稳定期活菌数为2.28×10^(10)CFU/mL。在50 L发酵罐中,3种补料方式培养菌株到达对数生长末期的时间分别是8,6,8 h,稳定期活菌数分别为2.29×10^(10),2.39×10^(10),2.48×10^(10)CFU/mL,与分批式扩大培养的活菌数差异不显著(P>0.05)。因此,采用50 L发酵罐分批式扩大培养弱后酸化保加利亚乳杆菌Lb-s1 rp-1的工艺是可行的。本研究为工业化生产弱后酸化保加利亚乳杆菌高效直投式酸奶发酵剂提供了细胞廉价增殖培养技术,也为研究其它弱后酸化益生乳酸菌的细胞培养技术提供了参考借鉴。

弱后酸化德氏乳杆菌保加利亚亚种生理特性的探究

以实验室筛选出的后酸化能力最弱的两株德氏乳杆菌保加利亚亚种为出发菌,详细研究了它们的生长能力、最适生长温度、耐酸和耐冷冻能力,并且分析了这些性质与后酸化之间的关系。结果表明:菌株的生长能力与后酸化之间存在紧密联系。其中,菌株的生长速度与后酸化成正比;对酸较敏感菌株的后酸化也较弱;42℃为两株菌的最适生长温度;冻干处理后,试验菌株的存活率高于对照菌。

^(60)Co-γ射线诱变选育弱后酸化乳酸菌株

选择剂量为60、80、100 kR的60Co-γ射线对保加利亚乳杆菌G4进行诱变处理,根据突变株的生长情况及产酸特性筛选出G4-1、G4-2、G4-3三株弱后酸化乳酸菌。此3株突变菌在酸奶的贮藏试验中表现出良好的弱后酸化特性,在4℃和10℃下贮藏25 d,酸奶的pH值变化很小。

弱后酸发酵剂菌株筛选及复配应用研究

开发具有良好弱后酸特性的酸奶复配发酵剂。从自有菌种库JMCC中筛选出13株发酵菌株(其中德氏乳杆菌保加利亚亚种3株,嗜热链球菌10株),评价了单菌株的pH值、结构、风味等特性,优选出3株嗜热链球菌、1株德氏乳杆菌保加利亚亚种。将单菌株进行复配,制备3种发酵剂,通过感官评价筛选出菌种复配的最佳配比,命名为JLB-1510。与商业发酵剂对比,评价了JLB-1510发酵产酸情况、产香气物质情况、不同条件下贮藏内活菌数和酸度以及感官等指数。该发酵剂制备的酸奶保质期内弱后酸,并且香气适宜,口感风味佳,可用于工业化生产,制备高品质发酵乳。

酸奶弱后酸化发酵剂乳酸菌育种技术研究进展

后酸化是影响酸奶贮藏期间感官品质和风味特性的重要因素,是决定产品货架期的重要指标。弱后酸化发酵剂菌种的选育是优良发酵剂开发的重要技术手段。通过诱变育种筛选出具有弱后酸化特性的菌株,是延缓酸奶贮藏期间后酸化的技术途径之一。国内外围绕弱后酸化发酵菌株选育,采用诱变育种方法开展了大量卓有成效的研究。本研究针对诱变育种的方法、原理与研究现状,结合本课题组近几年关于发酵剂菌种弱后酸化的研究工作,对弱后酸化乳酸菌菌种的诱变育种进行了简要阐述与展望。

新型酸奶发酵剂及高品质益生菌酸奶研究

选择^(60)Co-γ射线对保加利亚乳杆菌G4进行诱变处理,根据突变株的生长情况及产酸特性筛选出G4-1、G4-2、G4-3等3株弱后酸化乳酸菌。突变株与嗜热链球菌组合的新型发酵剂发酵生产的益生菌酸奶保质期长,储藏期间益生菌的活菌数存活量维持在一定的数量基本不变,高于同类的酸奶制品。