“Grafting from”法制备高载量大孔弱阳离子交换层析介质

针对大孔聚合物层析介质孔径大、比表面积低而导致的蛋白结合容量低的问题,采用“graftingfrom”策略,以大孔聚丙烯酸酯微球为基质,通过氧化还原引发甲基丙烯酸在微球表面接枝聚合,制备了高载量弱阳离子交换层析介质.研究了单体浓度、过硫酸钾浓度及反应温度等因素对蛋白结合容量的影响.所得介质的蛋白静态结合容量和动态结合容量分别达到252.21和157.25mg/mL;同时发现具有一定离子交换容量的该类介质能够在0.2 mol/L NaCl缓冲液中保持100 mg/mL的蛋白结合容量.将该层析介质用于鸡卵清中溶菌酶的纯化,获得了较高的纯化效率.

基于QuEChERS前处理技术和弱阳离子交换色谱的牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速检测方法

应用QuEChERS前处理技术,并结合弱阳离子交换色谱,建立了牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速检测方法。样品使用医用酒精（乙醇含量75%）和一种新型脂肪吸附（LAS）材料超声振荡处理,在沉淀（吸附）蛋白质和脂肪的同时提取三聚氰胺,然后经8 000r/min离心,上清液过膜直接分析。色谱分析在弱阳离子交换色谱柱（WCX）上进行,采用2mmol/L pH为3.8的磷酸二氢钾水溶液为流动相,在5min内实现分离分析。结果表明,该方法在0.02~20mg/L内线性相关系数大于0.999 9。在1~50mg/kg添加浓度范围内,牛奶的平均回收率为98.9%~105.2%,相对标准偏差（RSD）为0.9%~3.4%;奶粉的平均回收率为86.4%~102.9%,RSD为1.5%~6.7%。本方法的检出限为0.05mg/kg（牛奶）和0.1mg/kg（奶粉）。整个分析检测过程没有使用有毒有害有机溶剂,是一种绿色的分析方法。

硅胶基质弱阳离子交换剂的合成及蛋清中溶菌酶的分离

用间接法合成了硅胶基质弱阳离子交换剂(XIDACE-WCX),详细研究了合成填料的色谱性能,并与商品柱(Shim-Pack WCX—1和Poly CATA)进行了比较。结果表明:合成柱比商品柱具有较高的分辨能力。通过考察合成填料的疏水性、蛋白质的保留值与等电点(pI)的关系、流动相的pH值和盐浓度对蛋白质保留行为的影响,论证了合成填料的离子交换特征。利用合成的色谱填料从蛋清中分离出纯度较高的溶菌酶(在排阻色谱上仅显示一条谱峰),酶在柱上的活性回收率为107％。

连续棒状弱阳离子交换柱的合成及其对蛋白质保留行为

以甲基丙烯酸缩水甘油酯为单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂在空管柱内就地 聚合制备了一种聚合物连续棒状色谱基质，并通过“在线”化学改性将其修饰为弱阳离子交换 柱。考察了该色谱柱的孔结构特征、表面亲水性能、对标准蛋白的分离效果和ｐＨ值对保留 行为的影响以及色谱柱的重现性。结果表明，该色谱柱对蛋白的分离性能及重现性良好，柱 寿命不短于半年。对溶菌酶的活性回收率达９６．２％。流动相流速为 ８．０ｍＬ／ｍｉｎ条件下，在 ３．５

单分散树脂基质的弱阳离子交换色谱固定相的制备及其在生物大分子分离中的应用研究

采用分散聚合法制备种子和'一步种子溶胀聚合法'制备了粒径为6～15 μm的单分散多孔氯甲基苯乙烯-二乙烯苯微球.该微球经化学改性后得到一种亲水性良好的新型高效弱阳离子交换色谱固定相.详细考察了该固定相的表面亲水性、对标准蛋白的分离性能和盐的种类对蛋白质保留行为的影响.考察结果表明该固定相是一种性能优异的弱阳离子交换色谱固定相.将其应用于鸡蛋清中溶菌酶的快速分离纯化,纯化后的溶菌酶纯度高于96%,比活高达71 184 U/mg.

一种混合模式反相弱阳离子交换色谱填料的制备及其保留机理

采用"点击化学"的合成方法制备了一种混合配体的辛基-羧基共同键合硅胶(OCS)材料,经元素分析和红外光谱表征,证明了辛基和羧基官能团均已成功键合到硅胶表面。将其作为混合模式反相弱阳离子交换(RP/W C X)的固定相填料,以3种同系物阳离子表面活性剂作为探针分子,定量研究了该固定相的混合模式保留机理,考察了溶质保留因子与盐浓度和溶质亚甲基数目的关系,验证了混合模式固定相的单点和两点保留机理的数学模型,并进一步将其应用于一系列标准碱性混合物的分离。结果表明:两点保留机理更加符合实验的结果;根据混合模式两点保留机理的数学方程,可以得到单一的疏水或离子交换作用力对总保留的影响,对混合模式色谱的实际分离应用提供了有价值的参考。本文建立了反相弱阳离子交换混合模式OCS固定相的保留机理的定量模型,并证明了该固定相在碱性化合物的分离中具有很大的应用前景。

单分散大孔亲水弱阳离子交换填料的制备及其对鱼精蛋白的分离纯化

以自制的5.0μm单分散大孔亲水交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA/EDMA)微球为基质,对其表面进行化学改性,合成弱阳离子交换色谱填料(WCX)。详细考察了该填料对标准蛋白质的分离性能、表面亲水性能、稳定性和重现性以及流速对蛋白保留的影响。实验结果表明,该色谱填料对蛋白的分离性能、重现性及稳定性良好;在流速为3mL/min时,采用线性梯度洗脱,6min内可分离4种标准碱性蛋白质,以溶菌酶测定的该填料的动力学吸附容量为29.86mg/g。将其用于鱼精蛋白的分离纯化,经反相高效液相色谱测定纯化后鱼精蛋白的纯度为99.2%;与商品Shodex IEC SP-825强阳离子交换色谱柱比较,纯化结果几乎一样。

亲水型高分子包敷大孔硅胶基质的弱阳离子交换填料用于蛋白质分离

报道用亲水型高分子包敷大孔硅胶基质的羧甲基型（ＣＭ）高效弱阳离子交换色谱分离蛋白质的工作。经ＣＭ柱纯化的溶菌酶比活性提高７倍，活性回收率高于９５％，ＣＭ填料对溶菌酶的容量达 ８０ ｍｇ／ｇ。

应用弱阳离子交换蛋白质芯片捕获的健康成人血清蛋白质/多肽谱分析

目的:分析健康成年人血清蛋白质/多肽谱特点,为人类血清蛋白质组研究提供基础性资料。方法:应用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX2)磁珠处理30例健康成年人血清,通过表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测血清蛋白质/多肽谱,描述性分析其种类、分子质量范围、丰度(用相对强度计量)、个体性差异等。结果:共检测到947种蛋白质/多肽,不同个体其种类数量在34～108不等,相对分子质量范围为1059～10265,表达丰度在95～35419之间;分别有570、154、71、36、32、26、18、16、14、5、2和3种相应血清蛋白质/多肽在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、14例个体血清中存在。结论:WCX2磁珠仅能捕获到数量较少的低丰度、低分子量人血清蛋白/多肽,在受检人群中这些蛋白/多肽呈现高度的个体差异性。

以涂敷型硅胶为基质的弱阳离子交换色谱固定相的制备及其在生物大分子分离中的应用

在大孔硅胶表面键合乙烯基硅烷化试剂,然后与甲基丙烯酸环氧丙酯、甲基丙烯酸乙二醇双酯共聚,制得聚合物涂敷硅胶,其表面经水解再与丁二酸酐反应,得到一种新型的弱阳离子交换色谱填料(Weak Cation Exchange,WCX),考察了该填料对标准蛋白的分离性能,以及流速、pH值对蛋白质保留的影响.实验结果表明,在流速为3 mL/min时,采用线性梯度洗脱,2 min内可快速分离肌红蛋白、核糖核酸酶、细胞色素-C和溶菌酶4种标准碱性蛋白质,蛋白质的保留符合阳离子交换色谱保留规律.

一种聚合型弱阳离子交换/亲水相互作用色谱固定相的制备及色谱性能

通过亲核取代反应将聚乙烯马来酸酐键合到氨基硅胶表面,然后将残余的马来酸酐水解,制备了一种弱阳离子交换/亲水相互作用高效液相色谱固定相(Sil-PolyCOOH),通过固体核磁、ζ-电势及元素分析对固定相进行了表征。选取核苷和核酸碱为模型化合物,通过考察流动相组成,离子强度和pH等因素对溶质保留的影响,探讨了固定相的分离性能和保留机理,结果表明,该固定相的保留机理同时涉及亲水分配相互作用和多重主客体作用力。该固定相还对糖类、敌草快与百草枯等化合物具有良好的分离性能。上述研究结果表明该固定相在极性化合物的分离上具有良好的应用前景。

分离蛋白质的硅胶基质弱阳离子交换剂的合成与性能

大孔硅胶与氨丙基三甲氧基硅烷反应 ,所得产物与聚琥珀酰亚胺反应 ,再经碱性水解制得高交换容量的分离蛋白质的弱阳离子交换剂 ;产物与丁二酸酐反应也可制得弱阳离子交换剂 ,其交换容量和蛋白质活性回收率都不如前者。

甲基丙烯酸—二乙烯苯大孔弱酸性阳离子交换树脂的合成

目的:通过大量实验和数据找出生产大孔树脂的最佳工艺。方法:采用悬浮聚合法,以水为分散相,DVB 为交联剂,BP0为引发剂,合成了大孔弱酸性阳离子交换树脂。结果:不同交联度,不同致孔剂对其结构和性能有 显著影响。结论:盐溶液浓度约为30％,交联刺14％,致孔剂甲苯为单体的0.1倍时,所得树脂性能良好。

弱酸性阳离子交换纤维及其对水中微量铁(Ⅲ)离子的富集

以聚丙烯无纺布为基体,通过γ射线共辐射接枝丙烯酸制备了弱酸性阳离子交换纤维(PP-g-AA),以该纤维作为固相萃取吸附剂,富集水中的微量铁(Ⅲ)离子.结果表明,PP-g-AA纤维对水中微量铁(Ⅲ)离子具有良好的吸附富集性能.在pH值为4.9、质量浓度为5 mg/L的Fe3+水溶液中静态吸附20 min后纤维的吸附率就达到93.3%,吸附量为2.80 mg/g,吸附活化能为79.78 kJ/mol;吸附Fe3+后的PP-g-AA纤维用1 mol/L的盐酸洗脱5 min后,洗脱率达到96.4%,洗脱液中Fe3+浓度为140 mg/L,是富集前的28倍.

蛋白质在合成阳离子交换剂上的色谱特性研究

用国产材料按间接法合成了螯合型弱阳离子交换剂,详细研究了合成填料的色谱性能,并与商品柱的分离效能进行了比较;在宽温度范围内研究了蛋白质在弱阳离子交换系统中的色谱热力学,测定了蛋白质在色谱过程变性时的热力学参数(△H0和△S0)和补偿温度β,提出用标准熵变△S0判断蛋白质的构象变化和用△H0与△S0的补偿关系鉴定蛋白质各变体在色谱系统保留机理的同一性。考察了螯合型弱阳离子交换剂与金属离子的作用,研究了蛋白质在金属螯合色谱中的保留机理。

利用反相阳离子交换混合模式色谱法同时检测10种β-内酰胺类抗生素

目的建立反相/弱阳离子交换混合模式色谱(C18/WCX)对10种β-内酰胺类抗生素(头孢羟氨苄、头孢替唑钠、头孢呋辛钠、头孢唑啉、头孢拉定、头孢西酮、头孢孟多酯钠、头孢噻吩、哌拉西林、氯唑西林钠)同时检测的方法。方法以C18/WCX为固定相,以乙腈:甲酸铵:水为流动相,流速为1 m L/min;温度为30℃;检测波长为254 nm,并以常规反相色谱分析柱Unitary C18为对照。结果结果表明,中性条件下优化流动相洗脱梯度,10种β-内酰胺类抗生素在C18/WCX具有较高的分离选择性。通过缓冲盐浓度和p H值的调控,发现C18/WCX与样品间分离机制由反相作用力与离子交换2种作用力共同作用。结论研究表明,混合模式色谱在β-内酰胺类抗生素的分离分析中具有较大的潜力。

治理含重金属废水的能手——D-152大孔径阳离子交换树脂

近年来,天津南开大学、天津市环境保护科学研究所和天津市电声器材厂、红旗化工厂等单位协作,用D-152型弱酸性阳离子交换树脂处理含锌、铅、镉等重金属废水,取得可喜成果.D-152树脂属交换基团为羧酸根的弱酸型大孔径阳离子交换树脂.其外观为粒度不均匀的乳白色圆球.经测定,D-

醇析法结合离子交换法提取分离卵转铁蛋白

乙醇析出法结合两步弱酸性阳离子交换层析可有效地从鸡蛋清中分离纯化卵转铁蛋白,结果表明:预处理后黏度降低的蛋清经两步醇析法(45%浓度乙醇沉淀杂蛋白、59%乙醇浓度沉淀获得OVT粗品),再经两步阳离子层析法(第一步:pH8.0,20 mmol/L磷酸盐缓冲液平衡,含0.5 mol/L NaCl的pH8.0,20 mmol/L磷酸盐缓冲液洗脱;第二步:pH5.2,10 mmol/L柠檬酸盐缓冲液平衡,含0.5 mol/L NaCl的pH5.2,10 mmol/L柠檬酸盐缓冲液洗脱)可得到纯度较高的卵转铁蛋白;SDS-PAGE电泳检测终产品的纯度大于96%。

用在线微型柱连续测定系统研究弱阳树脂的交换性能

用FIA-ISE测定痕量钠离子的系统与在线微型柱结合,考察了在动态条件下影响弱酸性阳离子交换树脂的交换性能的因素,得到了测定其交换容量的最佳参数:微型柱树脂填充量0.1762g(层高45mm),温度33℃,样品水为10mg/L钠离子溶液(NaOH),样品水流量0.92mL/min,再生剂HCl用量40mL,再生剂流量1.25mL/min,再生剂浓度4.0%(逆流再生)。在最佳条件下,利用本方法对不同厂家的大孔型弱阳树脂(D113)的交换性能进行了测定和比较。本方法实现了一次测定同时获得弱阳树脂的平衡交换容量、全交换容量、转型膨胀率和树脂利用率等多个指标,并与GB法进行对比实验,发现了二者具有良好的相关性(r=0.9904)。

离子交换法处理电镀含镍含铜废水

多年来的实践证明:采用离子交换法处理电镀含镍、酸性镀铜废水,在技术上是可行的,在经济上是有收益的,能够形成较为理想的封闭循环系统.但对这一技术的应用,由于在设备设计和操作管理上还有一些理论和实际问题认识不一致,所以还未发挥它应有的效果.在此谈谈我们对一些问题的认识和解决办法.