RhD变异体Type33型受血者同种免疫产生抗-D合并抗-E混合抗体的研究

目的:探讨1例RhD阳性患者免疫产生抗-D合并抗-E混合抗体的原因。方法:用常规血清学方法鉴定ABO/Rh血型和不规则抗体特异性,采用序列特异性引物聚合酶链式反应(PCR-SSP)检测患者的RHD基因外显子1-10区域并进行杂合性分析,利用一代测序方法分析全外显子序列。结果:患者Rh血型为弱D Type33型,其RHD等位基因为RHD01W.33,患者表现为RHD+/RHD-杂合型,Rh分型为Ccee,产生了抗-D合并抗-E混合抗体。结论:该患者RHD基因外显子4发生了c.520G>A的突变,这一变异导致了红细胞上RhD抗原的表达减弱。

血清学弱D表型的分子生物学鉴定分析2例

目的分析2例Rh血型弱D表型献血者的血清学表现及分子机制。方法采用血清学方法进行RhD确认和Rh表现型检测;利用PCR-SSP法进行RHD基因的初步分型,对RHD基因全部外显子测序并分析RHD基因的杂合性;通过Swiss Model对部分区域进行蛋白三级结构模拟。结果2例献血者均为血清学弱D表型,Rh表现型分别为Ccee和CCee。RHD基因的初步分型结果说明均存在RHD基因。对RHD基因1~10外显子进行测序,发现标本1在第365位存在C>T(Exon3)的突变,使第122位氨基酸由丝氨酸转变为亮氨酸(122S>L);标本2在RhD基因第520位存在G>A(Exon4)的突变,使第174位氨基酸由缬氨酸转变为甲硫氨酸(174V>M);通过Swiss Model对相应的外显子进行三维建模,发现122位和174位氨基酸均为α螺旋结构,位于RhD蛋白的跨膜区,氨基酸的改变未见对蛋白二级结构造成影响。结论2例献血者分别为弱D型54和弱D型33,氨基酸的改变均位于跨膜区。

汉中地区Rh阴性个体D基因多态性的研究

目的研究汉中地区血清学方法检测表现RhD阴性个体的RHD基因多态性分布状况。方法应用PCR方法检测RhD阴性表型的个体，对特殊样本进行测序分析。结果在351例样本中，检出d／d基因型248例，占70．7％；DEL型67例，占19．1％；RHD-CE（2—9）-D／d融合基因型22例，占6．3％；DⅥ，Ⅲ型7例，占2．0％，高于国内其他地区；弱D-15型、弱D25型和Dva型各1例；弱D33型和RHD71ldelC各2例；DEL血型个体中具有C抗原者比例较高，但亦有C抗原阴性表型存在；首次在中国报道发现弱D25型和弱D33型。结论阴性表型个体中最主要的RHD基因阳性个体是DEL型，对汉中地区Rh阴性无偿献血者D基因多态性进行研究，揭示了Rh阴性个体D基因多态性，既有临床意义。也有遗传学意义。