RHCE基因编码区全长测序方法的建立

目的建立简易的RHCE基因编码区全长测序方法。方法依据RHCE基因序列的特异性,设计10对特异性引物分别扩增RHCE基因的10个外显子,同时再设计10条测序引物用于测序。将该方法用于检测3例Rh阳性标本、1例Rh阴性标本、1例D--表型标本及1例弱E表型标本。结果 10对特异性引物在统一的PCR条件下成功扩增出RHCE基因的10个外显子,3例Rh阳性标本及1例Rh阴性标本的测序序列与RHCE基因标准序列一致;D--标本PCR扩增和测序结果显示缺失第3、4和第5外显子,提示该个体携带一种新的由RHCE/RHD基因交换形成的等位基因RHCE-D(3-5)-CE;弱E标本测序结果发现在第5外显子存在一处碱基突变(762G>C),其他外显子测序结果未发现变异。结论 RHCE基因编码区全长测序方法可用于一般实验室进行RHCE基因测序。

禽多杀性巴氏杆菌G190E40弱毒菌种两种菌落制造疫苗的安全性及免疫效力比较试验

用禽多杀性巴氏杆菌抗体阴性健康鸡测定G190E40弱毒菌种两种菌落所制造疫苗的安全性及免疫效力。结果表明,用中菌落制造的疫苗安全检验4/4健活,符合规定;用大菌落制造的疫苗2/4～3/4健活,不符合规定。用大、中菌落制造的疫苗效力检验,均4/4健活,符合规定。

左消半群M与幂单半群N的Schüzenberger积

本文讨论了每个元都有幂等元作为右单位元的左消半群与幂单半群N的Schuzenberger积M◇N的ρ类,证明了这种半群M与N的Schuzenberger积M◇N的ρ类是右E-半适合半群和弱E-headged半群.

传染性法氏囊病病毒VP2基因在多杀性巴氏杆菌弱毒株中的表达及免疫原性研究

将重组质粒pET28 a-VP2转化禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40,探讨该转化菌表达的VP2是否具有免疫原性,以及重组表达质粒在转化菌内的稳定性。该转化菌在体外经IPTG或乳糖诱导,表达产物经AGP检测,VP2滴度可达1/4;经间接ELISA检测,VP2滴度可达1/512;经SDS-PAGE分析,出现VP2蛋白条带。结果表明,诱导表达的提取液中有一定量可溶性VP2。将pET28 a-VP2转化的禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40经诱导后,接种爱维茵肉仔鸡,21日龄及35日龄时,分别肌肉注射菌液0.1、0.2 m l/只(3×108个/m l活菌)。49日龄时,感染IBDV标准强毒株BC6/85。IBDVVP2血清抗体检测结果,不接种组(B)、0.1 m l接种组(C)、0.2 m l接种组(D)及空质粒转化菌接种组(E)的AGP抗体检测阳性率分别为0、65%、70%、0;间接ELISA抗体检测阳性率分别为0、80%、85%、0;IBDV强毒感染的免疫保护率分别为5%、75%、75%、5%。经t检验,B组与C组、B组与D组、E组与C组、E组与D组,P<0.05,差异均显著,但B组与E组、C组与D组,P>0.05,差异均不显著。免疫试验结果表明,诱导表达产物VP2可有效地刺激鸡体产生体液免疫应答,刺激鸡体建立的免疫力可以抵抗一定剂量强毒的攻击。在质粒稳定性测定中,第9代次及以后的3个代次,20个菌落的VP2目的基因PCR检测结果均为阴性,表明该质粒在禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40内是不稳定的。

Rh(D)阴性伴IgG类弱D强E联合抗体的研究

目的:分析1例Rh(D)阴性患者血清中弱D强E抗体产生的可能原因,并探索类似病例的安全输血方案。方法:回顾性分析1例ORh(D)阴性患者交叉配血试验结果及该患者的一般资料,后续系列血清学实验室相关方法。结果:证实该患者血清中IgG类抗-D、抗-E联合并存,且抗-D(效价1:64)弱于抗-E(效价1:512)。筛选Rh分型无D和E抗原的ABO同型红细胞悬液给予患者输注。结论:Rh分型检测符合临床发展的需求,对解决相关特殊群体的临床用血难题和降低疑难配血的频率意义重大。