冷冻切片弹力纤维染色在肺癌诊断中的应用探讨

肺癌发病率位居我国恶性肿瘤之首,并呈逐年递增趋势。2011年2月新的IASLC/ATS/ERS肺腺癌分类中,提出肺腺癌的病理类型可作为其预后的独立预测因子,其中原位腺癌和微浸润性腺癌预后较好,而浸润性腺癌因更易发生肺膜侵犯和淋巴结转移而预后较差[1]。弹力纤维是肺内支气管和肺泡的主要骨架,通过对肺膜的弹力纤维进行染色,可镜下观察肿瘤细胞是否侵犯至肺膜层。

免疫组化联合弹力纤维染色在评估肺腺癌胸膜侵犯中的临床应用价值

目的比较免疫组化联合弹力纤维染色评估肺癌胸膜侵犯的效果。方法回顾性分析本院2018年12月至2023年3月经术后病理确诊肺癌且HE染色后无法排除出现胸膜侵犯的患者58例,使用弹力纤维及免疫组化双重染色和单纯弹力纤维染色进行病理分析。结果经病理学观察显示,98.28%(57/58)为非黏液型腺癌,1.72%(1/58)为黏液型腺癌。使用维多利亚蓝染色分析胸膜侵犯的阳性率为44.83%(26/58),使用免疫组化联合弹力纤维双重染色分析胸膜侵犯的阳性率为60.34%(35/58),P<0.01。9例T1期肿瘤经免疫组化联合弹力纤维染色分析提升为T2期,进一步研究发现,使用单纯弹力纤维染色法与双重染色法分析结果不符的病例,主要表现为为单个或数个免疫组化阳性的腺癌细胞穿透弹力纤维层,突破胸膜。结论相对于单纯维多利亚蓝弹力染色,免疫组化联合弹力纤维染色能够更好地判断胸膜侵犯合并情况以及肿瘤TNM分期,,双重染色法可以针对性地显示胸膜弹力纤维层与肿瘤细胞的浸润程度,同时具有操作简便,试剂稳定,显色清晰等特点,该技术的推广与发展在病理诊断及科研方面发挥了重要作用。

弹力纤维及广谱型角蛋白双重染色与单纯弹力纤维染色在肺癌可疑胸膜侵犯病例中的比较

目的比较弹力纤维及广谱型角蛋白双重染色与单纯弹力纤维染色评估肺癌胸膜侵犯的效果。方法回顾性分析江苏省人民医院2015年6月~2016年7月经术后病理证实为肺癌病例的临床病理资料,选取HE染色后不能明确是否侵犯胸膜的104例使用弹力纤维及广谱型角蛋白双重染色和单纯弹力纤维染色进行病理分析。结果 104例患者中,使用单纯维多利亚蓝染色分析胸膜侵犯阳性患者46例,而使用双重染色法分析胸膜侵犯阳性患者63例,采用双重染色法评估胸膜侵犯阳性率高于单纯弹力纤维染色(P<0.05)。进一步病理学观察发现,使用双重染色法与单纯弹力纤维染色法分析结果矛盾的患者,大部分为单个或数个广谱角蛋白染色阳性的肿瘤细胞突破胸膜。结论相对于单一方法染色,弹力纤维及广谱型角蛋白双重染色结合了两者的优点并可同步显像胸膜及肿瘤细胞,能更好的观察肿瘤细胞与周围胸膜之间的毗邻关系,对于明确病理诊断及制定临床治疗方案具有积极意义。

皮肤色素痣与黑素瘤标本中弹力纤维染色对比观察

目的探讨皮肤黑素瘤、色素痣及Spitz痣组织中弹力纤维的表达情况及其意义。方法应用Weigert间二苯酚—碱性品红染色法检测皮肤黑素瘤、色素痣及Spitz痣中弹力纤维的表达。结果 51例色素痣中见弹力纤维广泛散布于痣细胞团间;30例Spitz痣中,28例见弹性纤维广泛散布于痣细胞团间,2例弹力纤维减少;53例皮肤黑素瘤中,50例肿瘤团块内弹力纤维基本消失,3例存在少量且散在弹力纤维,弹力纤维在皮肤黑素瘤中的表达显著低于色素痣组与Spitz痣组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论弹力纤维染色有助于皮肤黑素瘤与色素痣及Spitz痣的鉴别诊断。

弹力纤维染色在肺癌胸膜侵犯中的诊断作用

弹力纤维（EFs）染色可用于多种疾病的诊断，如观察动脉粥样硬化动脉壁的改变来诊断心血管疾病；鉴别肌上皮瘤与涎腺多形性腺瘤；诊断皮肤弹力纤维病变等[1]。同时弹力纤维也是肺泡及支气管的构成骨架，与肺癌的分化、生长、预后及转移有着极为密切的联系[2]。本研究比较了100例贴近胸膜的肺癌肿块HE染色及EFs染色在判断胸膜侵犯中的结果，现报道如下。

弹力纤维染色在恶性肿瘤中的研究进展

弹力纤维广泛存在于肺、动静脉、结缔组织中,可被弹力纤维染色识别。弹力纤维染色在某些疾病如恶性肿瘤中对诊断、治疗及预后判断均有重要意义。该文对弹力纤维染色原理、方法及在肺癌、结直肠癌、黑色素瘤等恶性肿瘤中的研究进展进行综述。

弹力纤维染色在评估胸腺瘤对纵隔胸膜侵犯的应用

目的探讨弹力纤维染色(elastic fibers,EF)在评估胸腺瘤对纵隔胸膜侵犯的作用及其与Masaoka-Koga分期的关系。方法收集上海交通大学附属胸科医院病理科2016年手术切除的胸腺瘤标本100例,其肿瘤组织与纵隔胸膜或心包粘连。每例胸腺瘤标本连续石蜡切片2张,分别行HE染色和EF染色。按Masaoka-Koga分期标准,对100例胸腺瘤标本进行HE染色和EF染色。结果100例胸腺瘤中肿瘤细胞未突破弹力层46例,突破弹力层54例,其中HE染色中有14例无法进行准确判断,最后经EF染色才能进一步更加准确的判断。结论EF染色可直接观察肿瘤细胞是否到达或突破纵隔胸膜弹力层,有助于准确判断胸腺瘤的纵隔胸膜侵犯和Masaoka-Koga分期。

弹力纤维染色在皮肤毛母细胞瘤与基底细胞癌鉴别诊断中的价值

目的探讨弹力纤维染色对鉴别皮肤毛母细胞瘤与基底细胞癌的意义。方法应用醛品红染色法检测皮肤毛母细胞瘤、基底细胞癌中弹力纤维的分布及数量,并进行比较。结果 20例皮肤毛母细胞瘤标本见较多弹力纤维;25例皮肤基底细胞癌标本中,22例未见弹力纤维着色,仅3例标本中有少量弹力纤维。弹力纤维条数在皮肤毛母细胞瘤组为(36.85±9.72)条,在皮肤基底细胞癌组为(4.33±1.53)条,皮肤毛母细胞瘤组弹力纤维数量显著高于皮肤基底细胞癌组,差异有统计学意义(F=4.534,P<0.05)。结论弹力纤维染色对皮肤毛母细胞瘤与皮肤基底细胞癌具有鉴别意义。

细支气管肺泡癌与肺腺癌鉴别诊断中弹力纤维染色法的临床应用价值

目的探讨弹力纤维染色在细支气管肺泡癌与肺腺癌鉴别诊断及分型中的临床应用价值。方法筛选肺腺癌、细支气管肺泡癌及肺腺癌合并细支气管肺泡癌病例标本72例,作为研究对象。采用常规苏木精-伊红染色法(HE染色)和弹力纤维染色对所有研究对象进行染色,比较观察各组染色结果。结果肺腺癌、细支气管肺泡癌的弹力纤维染色结果差异具有统计学意义(P<0.05);根据胸膜是否发生侵犯进行分型,弹力纤维染色结果与临床手术证实结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论根据肺腺癌、细支气管肺泡癌的弹力纤维染色特点可进行准确的鉴别诊断,有助于提高临床鉴别诊断能力。同时可根据病变表现对细支气管肺泡癌进行分型,检测结果准确、可靠。

一种改良的弹力纤维染色提高肺癌脏胸膜侵犯(VPI)的诊断率

病理医师清晰解读周围型肺癌与脏层胸膜的弹力纤维关系,准确判读肿瘤是否侵犯脏层胸膜,对制定治疗方案具有重要的指导意义[1-2];第7版TNM分类中也说明了肺胸膜侵犯(visceral pleural invasion,VPI)可以作为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)预后不良的因素[3]。已有文献[4]报道采用特殊染色法和免疫组化法先后标记弹力纤维和肿瘤细胞,能更好的观察肿瘤细胞与周围胸膜之间的毗邻关系。

2种不同弹力纤维染色方法对肿瘤侵犯判读结果的对比研究

目的比较Victoria blue法(A组)和Verhoeff法(B组)弹力纤维染色在染色过程、染色时间、染色效果方面对肺癌胸膜侵犯和结直肠癌浆膜或静脉侵犯判读的差异。方法A组、B组均分别纳入肺癌怀疑胸膜侵犯标本50例和结直肠癌怀疑浆膜或静脉侵犯标本20例,进行弹力纤维染色。对比2组染色过程、染色时间、染色效果;根据染色稳定性、清晰度、对比度等综合评价胸膜侵犯和浆膜或静脉侵犯情况,并对染色质量及判读准确性进行评分。结果A组比B组操作简单,染色质量稳定,肿瘤细胞与脏层胸膜、浆膜或静脉的关系显示更清晰。A组判读评分高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Victoria blue法染色有助于准确评估肺癌的胸膜侵犯和结直肠癌浆膜或静脉的侵犯,提高判读准确性。

弹力纤维染色与双重免疫组化染色在肺腺癌胸膜侵犯判断的应用及体会

肺癌是严重威胁人类生命健康的恶性肿瘤之一。患者的5年生存率低于20%,主要死亡原因是复发和转移。根据NCCN指南TNM分期标准,即使肿瘤直径≤3 cm,只要侵犯脏层胸膜,应归为T2期,而非T1期。因此对肺癌患者进行准确临床分期具有重要意义,正确判断肿瘤是否侵犯脏层胸膜尤为重要[1-2]。本科室在实际工作过程中采用维多利亚蓝弹力纤维染色结合免疫组化双重染色,能清楚地显示肺癌组织弹力纤维与肿瘤细胞间的关系,以准确判断是否存在胸膜侵犯。

术中冰冻优化弹力纤维染色在肺癌浸润程度诊断中的成效分析

目的比较术中冰冻优化弹力纤维染色与术后石蜡切片弹力纤维Gomori醛复红染色在诊断肺癌浸润程度中的效果。方法2018年1-12月,采用术中冰冻优化弹力纤维染色技术对肺癌组织进行制片,并读片诊断,与常规术后石蜡切片弹力纤维Gomori醛复红染色制片的诊断结果比较,并分析。结果采用配对计数资料的χ^2检验分析两种染色方法的诊断符合程度,McNemar检验结果为P=0.063,诊断结果无显著差异。结论针对肺癌手术患者,保证病理切片和诊断质量前提下,采用术中冰冻优化弹力纤维染色,其准确率高,为临床医生的手术方式提供有力依据,增加手术医生信心,避免患者二次手术,提高患者预后。

弹力纤维染色对非小细胞肺癌的诊断意义

肺癌（lung cancer,LC）包括非小细胞肺癌（non-small cell lung,NSCLC）和小细胞肺癌（SCLC）,其中非小细胞肺癌（鳞癌、腺癌和大细胞未分化癌）占肺癌的80%以上。非小细胞肺癌按照TNM分期,临床上根据不同的病理分期采用相应的治疗方案,

肺癌标本冰冻组织与冰剩组织弹力纤维染色质量比较分析

目的分析肺癌标本术中冰冻组织与术后冰剩组织石蜡切片染弹力纤维染色情况,确定是否存在脏层胸膜侵犯.方法选取临床诊断肺癌患者术中冰冻切片与术后冰剩组织石蜡切片进行改良Gomori醛品红弹力纤维染色,比较肺癌标本冰冻前后弹力纤维染色结果与脏层胸膜侵犯诊断的符合程度.结果改良Gomori醛品红弹力纤维染色显示冰冻组织中弹力纤维清晰可见,呈细丝样、波浪状,呈深紫色,背景染色几乎无着色或浅着色;冰剩组织中弹力纤维呈不连续着色,背景着色深,对比度模糊.术中冰冻组织弹力纤维染色(6.05±2.04)分,冰剩组织弹力纤维染色(4.61±1.41)分,两者比较,差异有统计学意义(t=6.49,P<0.05).结论采用术中冰冻组织切片弹力纤维染色对提高肺癌脏层胸膜侵犯诊断具有积极意义,值得推广.

CK-pan免疫组织化学染色联合弹力纤维染色时不同孵育方法对染色结果的影响

目的探讨CK-pan免疫组织化学染色联合弹力纤维染色时不同孵育方法对染色质量、染色时间及试剂成本的影响。方法选取温州医科大学附属台州医院2018年1至3月诊断为肺癌胸膜侵犯并符合质控要求的30例患者的病变组织蜡块30个,所有蜡块均连续3μm切片3张,各取1张归入A、B、C组。全部切片先行CK-pan免疫组织化学染色至DAB显色,再滴加Elastin染液进行弹力纤维染色,3组切片根据不同方法孵育:A组室温过夜孵育(约18 h);B组60℃烤箱孵育30 min;C组覆盖罗氏液体封盖膜微波高档孵育60 s。比较3组切片双重染色后Elastin染液干涸情况、双重染色评分和染色总时间。结果所有切片肺组织肿瘤细胞呈棕色,准确定位于细胞质,背景清晰。A组所有切片Elastin染液均完全干涸;B组中29张切片Elastin染液未干涸,仅稍有挥发,1张切片Elastin染液小部分干涸;C组中28张切片Elastin染液均匀覆盖,未见挥发,2张切片Elastin染液大部分干涸。A组30张切片均较难分化,整个背景非特异着色明显;B组29张切片容易分化,背景干净,1张切片稍难分化,局部轻微背景着色;C组28张切片,易分化,背景干净,2张切片较难分化,出现较大范围背景着色。A组双重染色评分(9.15±0.17)分,B组(9.39±0.13)分,C组(9.27±0.17)分,3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。A组染色总时间(21.5 h)>B组染色总时间(4 h)>C组染色总时间(3.5 h)。结论Elastin染液60℃烤箱孵育对于提高双重染色的染色质量、缩短染色时间及节约试剂成本均有积极意义,值得推广。

TTF1免疫组化与弹力纤维双染技术在肺腺癌胸膜及血管侵犯诊断中的应用

肺癌是我国最常见恶性肿瘤,组织学类型以腺癌为主[1-2]。弹力纤维染色常用于评估肺癌的胸膜及血管侵犯,便于进行TNM分期和判断预后,近些年其在肺癌中的研究逐渐增多[3-4]。但单纯弹力纤维染色肿瘤细胞显示不清,工作中需反复切换HE或免疫组化切片进行对比,不利于观察和定位。