强骨通痹胶囊对大鼠骨关节炎炎症因子的影响及作用机制

目的探讨强骨通痹胶囊对大鼠骨关节炎炎症因子的影响及作用机制。方法使用前交叉韧带切断法构建骨关节炎(osteoarthritis,OA)大鼠模型。将大鼠随机分为对照组、模型组、强骨通痹胶囊组和葡萄糖胺组。苏木精-伊红(HE)染色进行模型鉴定;甲苯胺蓝染色观察软骨组织变化;qRT-PCR检测大鼠关节炎软骨组织中Toll样受体4(TLR4)和核因子κB(NF-κB)mRNA的表达水平;酶联免疫(ELISA)试剂盒检测IL-1β、TNF-α和IL-6水平;免疫组化法检测TLR4、p-NF-κB水平。结果HE染色表明,与对照组相比,模型组膝关节内可见大量炎性细胞浸润,滑膜组织明显增厚,而强骨通痹胶囊和葡萄糖胺组的炎性细胞浸润和滑膜组织增厚不明显。甲苯胺蓝染色结果表明,与对照组相比,模型组软骨组织中的硫酸软骨素明显减少,而强骨通痹胶囊组和葡萄糖胺组的硫酸软骨素较模型组明显增加。与对照组相比,模型组的TLR4和NF-κB的mRNA表达水平和组织中蛋白含量以及组织IL-1β、TNF-α和IL-6水平均显著上升(均P<0.05);与模型组相比,强骨通痹胶囊组和葡萄糖胺组的TLR4和NF-κB的mRNA和蛋白表达水平以及组织IL-1β、TNF-α和IL-6水平均显著下降(均P<0.05)。结论强骨通痹胶囊能够通过抑制TLR4和NF-κB的表达,从而抑制炎症因子的产生,达到治疗骨关节炎的效果。

强骨通痹胶囊对大鼠骨关节炎氧化应激的影响及作用机制

目的:探讨强骨通痹胶囊对大鼠骨关节炎氧化应激的影响及作用机制。方法:将24只SD大鼠随机分为2组,其中6只作为对照组,18只进行建模;建模完把18只大鼠随机分为模型组、强骨通痹胶囊组和葡萄糖胺组,并对应用药处理;苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining,HE)观察软骨组织变化;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)测定试剂盒,微量丙二醛(malondialdehyde,MDA)测定试剂盒和一氧化氮(nitric oxide,NO)测定试剂盒检测血清中SOD,MDA和NO水平;实时聚合酶链式反应(real time-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测大鼠关节炎软骨组织中核因子NF-E2相关因子(nuclear factorerythroid 2-relaxed factor 2,Nrf2)、Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、巨噬细胞激活因子(macrophage activation factor,Maf)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和醌氧化还原酶1(NADPH quinone oxidoreductase 1,NQO1)mRNA表达水平;Western blot法检测Nrf2,Keap1,Maf,HO-1和NQO1的蛋白表达水平。结果:HE染色结果表明,与空白对照组相比,模型组的软骨组织中有明显的致密炎性细胞浸润,而强骨通痹胶囊组和葡萄糖胺组的炎症细胞明显减少;和模型组相比,强骨通痹胶囊组和葡萄糖胺组的抗氧化指标浓度显著上升,自由基浓度显著下降(P<0.05);和模型组相比,强骨通痹胶囊组和葡萄糖胺组的Nrf2,Maf,HO-1和NQO1的mRNA和蛋白表达水平都有明显上调(P<0.05),而Keap1的mRNA和蛋白表达水平下调。结论:强骨通痹胶囊能通过激活被负调控的Nrf2-Keap1/抗氧化反应元件(antioxidant responsive element,ARE)通路的相关蛋白及其mRNA的表达来改变血清中的抗氧化指标,从而恢复大鼠骨关节炎抗氧化应激的功能。