从“髓充骨”理论初探干细胞归巢改善绝经后骨质疏松症骨代谢紊乱的机制

绝经后骨质疏松症是全身性骨代谢紊乱性疾病,属中医学“骨痿”范畴,病在骨,本在肾。“髓充骨”源于《黄帝内经》,肾藏精、精生髓、髓充骨;女子增龄衰老,肾虚髓亏,骨髓生化乏源,骨失所养,则为骨痿。骨髓间充质干细胞属中医学“精”“髓”范畴,是骨髓中的重要细胞群之一,具有多向分化潜能,能分化为成骨细胞,参与调节骨形成-骨吸收耦联,在绝经后骨质疏松症病理过程发挥重要的调节作用。基于中医“髓充骨”理论,探讨肾、精、髓、骨在骨痿过程中的作用,并阐释精、髓现代内涵及骨髓间充质干细胞在绝经后骨质疏松症骨代谢紊乱中的角色,为临床治疗绝经后骨质疏松症提供新的防治策略。

基于SDF-1/CXCR4轴探讨补肾壮筋汤促进小鼠BMSCs归巢和保护关节软骨的机制研究

目的探讨补肾壮筋汤调控SDF-1/CXCR4轴促进小鼠BMSCs归巢和保护关节软骨的作用机制,为膝骨关节炎(KOA)的康复治疗提供实验依据。方法①动物实验中,选用8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠30只,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、补肾壮筋汤组,每组10只,干预12周。采用micro-CT、HE染色观察各组软骨形态变化;激光共聚焦显微镜观察骨组织SDF-1荧光强度;qPCR、Western blot检测各组归巢相关调控因子mRNA转录水平和蛋白相对表达量。②细胞实验中,选用4周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠,采用全骨髓贴壁法提取原代BMSCs,流式细胞术对所提取的细胞进行鉴定后,筛选最佳慢病毒MOI值;随机将细胞分为空白组、空载组、补肾壮筋汤组、sh-SDF-1组、sh-SDF-1+补肾壮筋汤组5组,采用划痕实验观察各组BMSCs迁移情况;阿利新蓝、CollagenⅡ免疫细胞学染色观察各组细胞成软骨分化能力;激光共聚焦显微镜观察各组SDF-1、CXCR4的荧光强度;qPCR检测各组归巢相关调控因子mRNA转录水平。结果①动物实验中,关节组织形态学结果(micro-CT、HE染色)显示:与假手术组比较,模型组股骨髁间可见一圆形缺损,骨皮质失连,软骨细胞缺失;与模型组比较,补肾壮筋汤组股骨髁间环形缺损好转,软骨细胞排列稍紊乱。关节组织免疫荧光显示:与假手术组比较,模型组SDF-1蛋白相对表达量升高;与模型组比较,补肾壮筋汤组SDF-1的蛋白相对表达量升高(P<0.05)。qPCR与Western blot结果显示:与假手术组比较,模型组归巢关键调控因子(SDF-1、CXCR4、MIP-1α、MCP-1、MIP-1β、RANTES、VEGF、G-CSF、NCAM-1、MMP-2)的mRNA转录水平和蛋白相对表达量升高(P<0.05);与模型组比较,补肾壮筋汤组归巢关键调控因子mRNA转录水平和蛋白相对表达量升高(P<0.05)。②细胞实验中,BMSCs经细胞流式术鉴定:CD44、CD105呈阳性表达,CD34呈阴性表达。当病毒MOI值为100时,SDF-1基因感染率最高。BMSCs迁移和成软骨分化能力检测结果显示:与空白组比较,sh-SDF-1组细胞向划痕区域迁移的细胞数量、酸性黏多糖及CollagenⅡ蛋白相对表达量显著减少(P<0.05);补肾壮筋汤组和sh-SDF-1+补肾壮筋汤组迁移的细胞数量、阿利新蓝染色及CollagenⅡ蛋白相对表达量显著增多(P<0.05)。细胞免疫荧光显示:与空白组比较,sh-SDF-1组细胞SDF-1、CXCR4蛋白相对表达量显著减少;补肾壮筋汤组和sh-SDF-1+补肾壮筋汤组细胞SDF-1、CXCR4蛋白相对表达量显著增多(P<0.05)。qPCR结果显示:与空白组比较,sh-SDF-1组归巢关键调控因子的mRNA转录水平降低(P<0.05),补肾壮筋汤组归巢关键调控因子的mRNA转录水平升高(P<0.05)。结论补肾壮筋汤可通过上调SDF-1/CXCR4轴促进小鼠BMSCs归巢保护关节软骨。

附子理中汤对变应性鼻炎大鼠骨髓干细胞鼻腔归巢的影响

目的研究附子理中汤对变应性鼻炎大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)和内皮祖细胞(EPCs)归巢的影响及意义。方法复制变应性鼻炎的疾病模型,将12只模型大鼠分为治疗组(附子理中汤干预)和空白组,雌雄各半,每组6只。在模型建立后的7 d分别评价两组的症状积分及鼻腔黏膜取材免疫荧光检测鼻腔黏膜MSCs和EPCs的阳性率。结果空白组0、7天的积分比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组在治疗后积分减少(P<0.05)。两组间同期比较,第0天时积分比较差异无统计学意义(P>0.05)。第7天的积分差异有统计学意义(P<0.05)。变应性鼻炎造模成功后,骨髓MSCs和EPCs都能够从循环系统向鼻腔黏膜归巢,在鼻腔黏膜都有阳性表达。经χ2检验,治疗组在治疗后鼻腔黏膜的MSCs和EPCs阳性率均较空白组提高(P<0.05)。说明治疗组附子理中汤能有效改善变应性鼻炎大鼠的症状,且能促进变应性鼻炎大鼠的骨髓MSCs和EPCs向鼻腔归巢。结论骨髓MSCs和EPCs能够向变应性鼻炎的鼻腔黏膜归巢,而附子理中汤能够促进骨髓MSCs和EPCs的鼻腔归巢。

应用归巢模式管理对残疾人功能、残疾状况、康复需求与服务发展实证研究

探讨应用归巢模式管理结合社区互联网+慢病管理平台对残疾人信息进行分析研究。方法 根据残疾人相关文献数据及社区互联网+慢病管理平台的便捷模式,制定与相关知识点的支撑理论,选取2020年长沙市6个社区服务中心残疾人的相关详细基线信息及特定内容的调查并进行数据整理。结果 1.长沙市6个社区服务中心残疾人中基本情况:0~18岁残疾儿童人数占10.03%,60岁以上占比较大为34.37%;马王堆社区残疾人数最多799人次,占22.33%,恒达社区残疾人数最少399人次,占11.15%。2.残疾人功能和残疾状况情况:肢体残疾人数最多1257人次,占35.13%,多重残疾人数最少243人次,占6.79%,一、二级残疾超过总数的55.57%。3.比较长沙市社区卫生服务中心残疾人分类需求,从2大块各4个维度统计显示:分析角度不同占比较大为需要康复医疗知识方面,对后天造成的残疾意义较大, 先天性造成的残疾人对康复需求占比较小。结论 研究应用归巢模式管理模式,确认了长沙社区服务中心残疾人的致残原因、疾病需求康复、提供康复服务内容覆盖率。总结显示长沙市社区服务中心残疾人汇总给予康复服务需求与供给途径仍有明显差距。建议各社区构建更加精细化康复服务项目,提高残疾人康复服务覆盖率和服务质量。

间充质干细胞归巢机制及影响因素研究进展

间充质干细胞(MSCs)是一种能够从多种生物组织中分离出来的非造血干细胞,因其具有多向分化潜能及组织修复能力故被广泛应用于组织工程以及再生医学治疗中。然而MSCs归巢效率低下,无法在靶组织中达到足够的归巢数量。这一缺点明显影响其治疗效果。提高MSCs的归巢率进而提升其疗效是当下研究以及应用再生医学治疗的重点所在。本文对MSCs的归巢机制和影响因素做一综述。

过表达NKx2.5基因间充质干细胞增强SDF-1/CXCR4轴促归巢改善心梗心功能

目的探讨过表达NKx2.5基因骨髓间充质干细胞(BMSC)通过增强SDF-1/CXCR4轴促BMSC归巢改善心梗后心功能。方法采用慢病毒使骨髓间充质干细胞内过表达NKx2.5(BMSC^(NKx2.5)),将空载体组及BMSC组作为对照组。采用RT-PCR检测各组细胞SDF-1、CXCR4及NKx2.5的表达及同时采用western-blot检测NKx2.5及SDF-1、CXCR4蛋白的表达。将BMSC^(NKx2.5)、BMSC、及BMSC空载体经尾静脉注射入小鼠心梗模型,同时设立BMSC^(NKx2.5)+AMD3100组,将心梗未处理组、假手术组、正常小鼠组作为对照组。采用心脏彩超检测心梗小鼠心功能的变化及采用western blot检测NKx2.5及SDF-1、CXCR4蛋白的表达。结果体外BMSC^(NKx2.5)组SDF-1及CXCR4及转录因子NKx2.5的表达最高(P<0.05)。体内实验证实BMSC^(NKx2.5)组心梗心功能改善最为明显(P<0.05),但当加入SDF-1-CXCR4轴抑制剂AMD3100后,心功能改善不明显。BMSC^(NKx2.5)组转录因子NKx2.5及SDF-1及CXCR4因子的表达最高(P<0.05),但加入AMD3100组后SDF-1及CXCR4的表达明显下降。结论BMSC^(NKx2.5)可以通过增强SDF-1/CXCR4轴促BMSC归巢改善心梗心功能。

肠淋巴细胞归巢及中医药干预相关性研究

肠淋巴细胞归巢相关概念 肠道是机体最大的免疫器官,通过其免疫监视和免疫应答功能,坚守着肠黏膜免疫屏障（gut mucosal immunobarrier）,能够在肠黏膜发挥免疫效应的淋巴细胞是从流动血液中定向迁移（traffic）到黏膜部位的淋巴细胞,即通过肠淋巴细胞归巢（lymphocyte homing）而来,可以说,淋巴细胞归巢过程的正常决定了肠黏膜免疫屏障功能的坚固。

PD-1/PD-L1参与骨髓间充质干细胞归巢修复慢阻肺大鼠的肺损伤

目的 研究程序性死亡蛋白1(programmed death-1, PD-1)/程序性死亡蛋白配体1(programmed death ligand-1,PD-L1)在间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)归巢修复慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)中的影响。方法 分离纯化骨髓来源MSCs,流式细胞术检测细胞表面分子表达,油红O染色、碱性磷酸酶染色分别观察MSCs成脂及成骨分化情况。采用烟气暴露法构建COPD大鼠模型,造模完成后将绿色荧光蛋白(GFP)标记的MSCs经尾静脉分别注射入正常及COPD大鼠模型中,通过观察肺部荧光评价MSCs的归巢效果;经尾静脉向COPD模型大鼠注射MSCs作为MSCs治疗组,模型组和正常对照组注射等体积生理盐水,HE染色观察各组大鼠肺脏组织病理改变,qRT-PCR比较各组大鼠肺脏组织PD-1的表达情况;体外qRT-PCR检测PD-L1在MSCs的表达,Transwell实验法观察PD-1及PD-L1抗体对MSCs定向迁移(归巢)的影响。结果 大鼠骨髓来源MSCs提取分离后,细胞贴壁生长,呈长梭形,流式细胞术结果显示MSCs上CD29、CD44呈阳性表达,CD34、CD45阴性表达,油红O染色可见呈深橙红色的脂滴,碱性磷酸酶染色可见典型的成骨表现;GFP标记的MSCs能够有效到达正常及COPD损伤肺组织中,荧光信号在COPD肺组织中明显强于正常肺组织,且PD-1在COPD肺组织中表达强于正常组织;与正常对照组相比,COPD模型组HE染色可见明显COPD肺损伤改变,移植MSCs细胞治疗后,肺损伤得到明显改善;分离培养的MSCs表达PD-L1;体外Transwell迁移实验表明,与对照组相比,加入PD-1可增加MSCs定向迁移,PD-L1抗体组相较于PD-1组,MSCs迁移数量明显减低。结论 PD-1/PDL1参与MSCs定向归巢到COPD大鼠肺部并达到较好的损伤修复作用。

促进造血干细胞归巢和植入的新策略研究进展

造血干细胞(HSC)归巢到骨髓并植入是临床造血干细移植(HSCT)成功的关键步骤。SDF-1/CXCR4轴被认为是促进HSC归巢的一种非常有前景的靶点。近年来,随着对HSC归巢机制研究的不断深入,学者们探索了核激素受体、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、前列腺素以及代谢调节等多种促进HSC归巢和植入的新方法,以提高HSCT的成功率、改善患者的生存。本文就HSC归巢的机制以及促进HSC归巢和植入策略的最新研究进展作一综述。

淋巴归巢受体P选择素、CD44、α6β1在宫颈癌中表达与淋巴转移关系研究

目的探讨P选择素(P-selectin)、CD44、整合素α6β1对宫颈癌淋巴转移的作用。方法应用免疫组织化学方法对比检测35例宫颈鳞状细胞癌原发灶及其淋巴转移灶中P-selectin、CD44、α6β1的表达。结果与原发灶相比,淋巴转移灶中P-selectin阳性率显著降低(P<0.05),CD44阳性率无显著变化(P=1.2305),ICAM-1阳性率则显著增高(P<0.01)。原发灶中P-selectin与CD44、P-selectin与ICAM-1表达水平均存在显著正相关性(r=0.8737,P<0.01;r=0.7957,P<0.01),而CD44与α6β1则呈明显负相关(r=-0.6583,P<0.01);淋巴转移灶中P-selectin、CD44、α6β1表达水平之间均不存在相关关系;P-selectin原发灶与淋巴转移中表达水平存在明显正相关(r=0.7534,P<0.01),CD44原发灶与淋巴转移中表达水平之间无明显相关,α6β1原发灶与淋巴转移中表达水平之间存在明显负相关(r=-0.5361,P<0.01)。原发灶中P-selectin表达与肿瘤分化、淋巴结转移存在正相关(r=0.8420,P<0.01和r=0.7689,P<0.01);CD44表达与肿瘤侵犯深度、淋巴结转移之间存在正相关(r=0.6782,P<0.01;r=0.8634,P<0.01);α6β1表达与淋巴结转移存在正相关(r=0.6548,P<0.01)。结论P-selectin、CD44、α6β1都与宫颈癌淋巴转移相关,其中P-selectin、CD44在淋巴转移的始动阶段发挥重要作用。

干细胞因子动员骨髓干细胞归巢梗死心肌的特性变化

目的:观察应用干细胞因子动员后骨髓干细胞归巢于梗死心肌组织及其进一步分化的能力,以及激素干预后其归巢特性的变化。方法:实验于2003-09/2004-09在汕头大学医学院第一附属医院心血管病研究室完成。选用10～12周龄的雄性Wistar大鼠60只。随机分为3组,每组20只,分别为心肌梗死+动员组、心肌梗死+激素+动员组以及心肌梗死组。①结扎Wistar大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死模型。②动物分组干预:心肌梗死+激素+动员组大鼠于造模后即刻按30mg/kg剂量经尾静脉注射甲基强的松龙注射液。心肌梗死+动员组和心肌梗死+激素+动员组大鼠在造模3h后按30μg/(kg·d)剂量皮下注射重组人干细胞因子,共5d,心肌梗死组大鼠则于造模后,不作任何处理。③于造模前和造模后24h和4周应用流式细胞仪计数各组大鼠制模前后外周血中CD34阳性细胞(骨髓干细胞表面标记)表达百分率。④随后杀死大鼠,取出心脏,免疫组织化学染色法鉴定检测造模后24h各组大鼠心肌梗死区、边缘区组织中是否存在CD34阳性细胞;检测造模后24h、4周各组大鼠梗死心肌组织中基质细胞衍生因子1的表达。⑤采用BI-2000医学图像分析系统分析造模后24h和4周各组大鼠梗死心肌组织中基质细胞衍生因子1的表达量。对图像进行平均灰度值测定,以此代表该组织切片内基质细胞衍生因子1的相对含量。灰度值的高低与表达量成反比关系。⑥苏木精-伊红染色观察造模后24h和4周各组大鼠心肌细胞形态特征及细胞排列方向等组织学变化。结果:大鼠60只均进入结果分析。①造模后24h和4周大鼠外周血单个核细胞中CD34表达百分率:心肌梗死+动员组和心肌梗死+激素+动员组明显高于造模前犤(0.919±0.187)%,(0.834±0.110)%;(0.886±0.104)%,(0.794±0.296)%;(0.043±0.023)%,(0.041±0.028)%,t=2.679,2.354,2.413,2.208,P<0.05犦。②造模后24h大鼠归巢于梗死灶内心肌组织中CD34阳性细胞数量:心肌梗死+动员组明显多于心肌梗死+激素+动员组和心肌梗死组(t=2.607,2.816,P<0.05)。(3)造模后24h大鼠梗死灶内基质细胞衍生因子1表达量:心肌梗死+动员组明显大于心肌梗死+激素+动员组和心肌梗死组(t=2.825,2.341,P<0.05),心肌梗死+激素+动员组最少。④心肌组织学变化:心肌梗死+动员组大鼠心肌梗死程度轻,可见CD34阳性的幼稚心肌细胞样细胞,缺血心肌基本结构得到保护。在动员干细胞24h后,心肌梗死+动员组大鼠心肌梗死灶中有大量CD34阳性单个核细胞浸润,为骨髓源干细胞(包括造血干细胞、内皮干细胞等),同时还发现有与浸润的单个核细胞的胞核相似,但较大而圆,位于细胞中央,胞浆少而深染的细胞,其免疫组化检测CD34也呈阳性,考虑可能是浸润的骨髓干细胞正向心肌细胞分化早期,故形态幼稚。心肌梗死+激素+动员组大鼠由于激素治疗的影响,归巢梗死灶的干细胞数量少,因此骨髓动员4周后,心肌梗死+激素+动员组大鼠缺血心肌细胞变性,融合成片,心肌组织排列有序的基本结构遭到破坏而瘢痕化;而心肌梗死+动员组大鼠由于归巢的干细胞数量多,动员治疗4周时的病理切片可见核大、胞浆丰富、深染的心肌细胞,其缺血心肌的基本结构得到保护,组织结构排列基本处于有序状态。结论:①应用干细胞因子动员急性心肌梗死大鼠骨髓干细胞后,有较多干细胞向梗死灶迁移存活,在心肌微环境作用下向心肌细胞、血管内皮细胞等方向分化,保护缺血心肌基本结构。②骨髓干细胞动员后,心肌梗死灶内基质细胞衍生因子1表达量上调,可能是吸引骨髓干细胞归巢于梗死灶的原因之一。③骨髓干细胞归巢于梗死灶内不依赖于冠状动脉血流的再通。④激素可阻断炎症反应过程,但同时也抑制了骨髓干细胞向梗死灶归巢。

青燕归巢项目推进大学生返乡就业路径研究

随着经济社会的快速发展,大学生返乡已经成为当前中国乃至全球许多地区突出的社会现象。大学生返乡带来的不仅仅是人口的迁移,还是知识、技能和创新的回归,更是国家和地区发展战略的一部分。这一现象在浙江省得到了特别的关注,而“浙里青年青燕归巢”项目作为一项重要的政策措施,为大学生提供了返乡实践、实习和就业的机会,也为当地的经济发展和社会进步注入了新的活力。然而,返乡之路并不平坦,大学生面临着种种挑战,包括就业机会的匮乏、适应新环境的困难等,浙江省“浙里青年青燕归巢”项目依托此现状聚焦大学生返乡实践中的作用和影响,通过对该项目的政策措施、参与大学生的特征、实践路径和成功案例的分析研究,深入了解大学生返乡的实践经验,总结成功案例和项目建议。

关注农村老年婚姻 奏响美好幸福乐曲——观小戏《鸟归巢》有感

扎根生活沃土,贴近基层实际,从深厚的泥土芬芳中汲取艺术创作的素材,让剧作家的笔下充满活力,从而让一个个鲜活的戏剧在舞台上呈现,为全面建成小康社会吟唱昂扬的颂歌,这也是新时代基层文艺工作者的责任使命。不久前参加由省文旅厅组织的“精彩江苏”全省南北基层巡演中,一个由滨海县文化馆、滨海县淮剧团创作演出的小戏《鸟归巢》,在获得省五星工程奖后,被选调在全省巡回演出,剧中独特的艺术视角,深刻的思想内涵,充满哲理的发问,旗帜鲜明的导向,加上三名国家一级演员的联手演绎,让这台小戏充满别样的风情,不少业内人士评价,这是多年来为数不多的一出以农村老年黄昏恋为题材的好戏,剧中所揭示的思想内涵与启迪.

宫颈癌及其淋巴转移灶淋巴归巢受体L-selectin、CD44、ICAM-1表达的对比研究

目的探讨L-selectin、CD44、ICAM-1对宫颈癌淋巴转移的作用。方法应用免疫组织化学方法对比检测35例宫颈鳞状细胞癌原发灶及其淋巴转移灶中L-selectin、CD44、ICAM-1的表达。结果L-selectin淋巴转移灶中阳性率明显低于原发灶(P<0.05);CD44淋巴转移灶中阳性率与原发灶无明显区别(P>0.05);ICAM-1淋巴转移灶中阳性率明显高于原发灶(P<0.01);L-selectin与CD44、L-selectin与ICAM-1在原发灶中表达水平之间存在明显相关(r=0.8737,P<0.01;r=0.795,P<0.01),CD44、ICAM-1在原发灶中表达水平呈明显负相关(r=-0.6583,P<0.01);淋巴转移灶中L-selectin、CD44、ICAM-1表达水平之间均不存在相关;L-selectin原发灶与淋巴转移中表达水平之间存在明显相关(r=0.7534,P<0.01),CD44原发灶与淋巴转移中表达水平之间无明显相关,ICAM-1原发灶与淋巴转移中表达水平之间存在明显负相关(r=-0.5361,P<0.01)。原发灶中L-selectin表达与肿瘤分化、淋巴结转移存在相关(r=0.8420,P<0.01;r=0.7689,P<0.01);CD44表达与肿瘤侵犯深度、淋巴结转移之间存在相关(r=0.6782,P<0.01;r=0.8634,P<0.01);ICAM-1表达与淋巴结转移存在相关(r=0.6548,P<0.01)。结论L-selectin、CD44、ICAM-1都与宫颈癌淋巴转移相关,其中L-selectin、CD44在淋巴转移的始动阶段发挥重要作用。

间充质干细胞“归巢”研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有多向分化潜能的非造血干细胞,已广泛应用于干细胞移植、组织工程和器官移植免疫治疗等方面,但MSC回输体内后的分布和分化直接影响其应用,本文就MSC体内"归巢"特点、"归巢"机制及"归巢"的意义作一综述。

脐带间充质干细胞的归巢机制

背景:脐带间充质干细胞因其具有取材方便、无污染、易扩增、无伦理学差异、多向分化等优点被作为用于组织工程学及再生医学的理想种子细胞。目的:对脐带间充质干细胞的归巢机制进行阐述。方法:以"Umbilicalcordmesenchymalstemcells,homingmechanismorhome,脐带间充质干细胞,归巢机制,归巢特点"为关键词应用计算机检索Pubmed数据库、CNKI数据库2003至2012年,选择内容与脐带间充质干细胞、归巢机制、临床应用相关的文章,这些文献为近期发表或发表在权威杂志,共纳入31篇文献。结果与结论:脐带间充质干细胞的免疫调节、多向分化等优势使其作为一种新的治疗手段应用于临床,使众多疾病的治愈成为可能,其中向缺血或损伤组织炎性归巢的特征是脐带间充质干细胞安全有效的应用于临床的关键。了解脐带间充质干细胞归巢特点,研究其归巢机制,使其高效归巢是脐带间充质干细胞应用于细胞治疗的关键问题。

芪黄煎剂对大鼠胃切除术后免疫相关性肠淋巴细胞归巢数量的影响

目的:通过观察大鼠胃切除术后小肠内滴注芪黄煎剂对免疫相关性肠淋巴细胞归巢数量的影响,探讨肠淋巴细胞归巢过程及相关肠保护免疫机制。方法:选取清洁型雄性SD大鼠60只,建立模型后,将大鼠随机分为三组:对照组:大鼠胃切除手术创伤模型建立后,单纯滴注肠内营养;芪黄煎剂组:滴注的营养制剂、热量、方法、疗程均同对照组,同时滴注中药芪黄煎剂;假手术组:仅给予腹部正中切开后缝合,术后自由饮水进食。疗程结束后,除去感染死亡的模型,从假手术组、对照组、芪黄煎剂组中随机抽取15只,分别观察大鼠标本肠淋巴液中T淋巴细胞、PP结Ig A+B细胞。结果:(1)淋巴细胞归巢T细胞数量:1)CD3+T细胞:对照组低于假手术组,差异具有明显显著性(P<0.01);芪黄煎剂组同假手术组相比,差异具有显著性(P<0.05);芪黄煎剂组同对照组相比,差异具有明显显著性(P<0.01)。2)CD4+T细胞:对照组低于假手术组,差异具有明显显著性(P<0.01);芪黄煎剂组同假手术组相比,差异具有显著性(P<0.05);芪黄煎剂组同对照组相比,未见明显差异,无统计学意义(P>0.05)。3)CD8+T细胞:对照组低于假手术组,差异具有显著性(P<0.05);芪黄煎剂组同假手术组及对照组相比,均未见明显差异,无统计学意义(P>0.05)。(2)淋巴细胞归巢B细胞数量:对照组同假手术组相比较,差异具有显著性(P<0.01);芪黄煎剂组同假手术组比较,比较差异有统计学意义(P<0.05);芪黄煎剂组高于对照组,比较有显著差异(P<0.01)。结论:芪黄煎剂可以增加淋巴细胞归巢T细胞及B细胞数量,促进完成胃切除术后肠淋巴细胞归巢过程,从而保护肠黏膜免疫屏障。

人脐带来源间充质干细胞向HepG2肝癌细胞原位移植瘤的归巢及分化

目的:观察人脐带来源的间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cell,HUMSC)向HepG2肝癌细胞原位移植瘤的归巢及分化。方法:二步法体外诱导HUMSC向肝细胞分化,通过Real-time PCR和Western blotting检测不同时间点HUMSC中肝细胞特异性基因甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)及白蛋白(albumin,ALB)mRNA和蛋白水平的变化;Transwell实验观察HUMSC在HepG2肝癌细胞条件培养基作用下的趋化现象;采用皮下-原位移植的方法建立BALB/c裸鼠的HepG2肝癌细胞原位移植瘤模型,利用慢病毒感染的方法将HUMSC标记CMV或AFP启动子驱动的f Luc,制备成MSC.CMVLuc或MSC.AFPLuc,并将其注射入荷瘤肝组织,IVIS成像系统观察MSC.CMVLuc向肿瘤部位的迁移归巢及MSC.AFPLuc在肝癌微环境中向肝细胞分化。结果:HUMSC在体外诱导培养过程中出现细胞形态学变化证明其向肝细胞分化,同时诱导培养后AFP、ALB mRNA和蛋白的表达明显升高(均P<0.05);HUMSC向HepG2肝癌细胞的趋化呈瘤细胞密度依赖性(P<0.01);MSC.CMVLuc注射后2 d迁移并聚集于肝脏,注射后5 d肝脏内发光信号进一步增强;MSC.AFPLuc肝内注射后24 h已向肝细胞分化,注射第7天AFP启动子活性最强,注射第9天活性消失。结论:在小鼠体内外证明了HUMSC具有向肝脏归巢及分化的能力,为今后MSC应用于肝癌基因靶向治疗提供了一种新的策略。

小鼠肝癌微波消融对瘤内注射树突状细胞归巢的影响

目的:小鼠肝癌微波消融后检测树突状细胞归巢,探讨热消融治疗激发抗肿瘤免疫效应的可能性。方法:建立C57BL/6J小鼠Hepa1-6肝癌皮下移植瘤模型,不同温度微波消融后,瘤内注射荧光标记的未成熟树突状细胞(PKH26-DC),检测PKH26-DC归巢的数量、成熟情况及对淋巴细胞的刺激作用。结果:(65±5)℃和(90±5)℃消融组未发现PKH26-DC归巢和CCR7表达。(50±5)℃消融组和未消融组比较,归巢DC的数量为32±8vs21±6,CCR7表达率为100%vs90%,100倍视野下淋巴细胞形成免疫突触的数量为8-12簇vs4-6簇,每簇内淋巴细胞数目为12-25vs3-10。结论:肝癌热消融能促进树突状细胞成熟和归巢,刺激淋巴细胞免疫应答,但消融温度须适当。

子宫颈癌淋巴归巢受体及相关因子的表达与淋巴转移关系的研究进展

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤,发病率居妇科肿瘤的第二位,近年来呈现上升和发病年轻化趋势,系统研究该疾病的发生机制具有现实意义。每年全球约有50万例宫颈癌新发病例,80%发生于发展中国家[1]。尽管对宫颈癌病因学研究有了突破性进展,浸润性生长和转移仍是宫颈癌晚期患者死亡的重要原因,放化疗和新辅助化疗的应用降低了临床分期,增加了手术机会,但子宫颈癌的淋巴结转移依旧严重影响患者的治疗效果和预后,肿瘤的侵袭与转移是导致子宫颈癌患者死亡的主要原因。