艾滋病患者T淋巴细胞表面归巢分子的表达在抗病毒治疗后升高

目的探讨艾滋病（AIDS）患者高效抗反转录病毒治疗（HAART）前后T淋巴细胞表面归巢分子CD49d、CCR9、CD62I．表达的变化情况。方法采用流式细胞术检测42例艾滋病患者和18例HIV阴性健康对照的外周血T淋巴细胞表面CD49d、CCR9和CD62L表达，用BDFACSDiva软件分析计算各组细胞表达的百分率。结果治疗后组外周血的平均CD4^＋T淋巴细胞明显高于治疗前组（P〈0．01）；治疗前组CD3^＋CD49d^＋、CD3^＋CCR9^＋、CD3^＋CD62L^＋、CD3^＋CD4^＋、CD4^＋CD49d^＋、CD4^＋CCR9^＋、CD4^＋CD62L^＋、CD8^＋CD49d^＋、CD8^＋CD62L^＋T淋巴细胞的百分率显著低于治疗后组和阴性对照组（P〈0．05）；CD3^＋CD8^＋T淋巴细胞的百分率高于治疗后组（P〈0．05）。治疗后组CD3^＋CCR9^＋、CD8^＋CCR9^＋、CD8^＋CD62L^＋T淋巴细胞的百分率均低于阴性对照组（P均〈0．001）。结论AIDS患者外周血T淋巴细胞亚群不仅比例失调，而且其表面表达肠道归巢分子CD49d、CCR9，淋巴结归巢分子CD62L的数量发生异常改变。抗病毒治疗可以逆转以上部分免疫病理变化。建议肠道归巢分子CD49d、CCR9和淋巴结归巢分子CD62L可作为艾滋病疾病进展和评价机体HAART后免疫重建的指标。

艾滋病患者HAART治疗前后CD4^＋T细胞表面某些归巢分子和辅助受体表达变化分析

目的探讨艾滋病（AIDS）患者高效抗逆转录病毒治疗（HAART）治疗前后CD4^＋T细胞表面CD49d、CCR9、CD62L和CCR5表达的变化情况。方法采用流式细胞术检测42例艾滋病患者和18例HIV阴性健康对照的外周血CD4^＋T细胞表面CD49d、CD62L、CCR9和CCR5的表达，并对CD4^＋CCR9^＋和CD4^＋CCR5^＋T细胞进一步进行CD45RO表型分析，采用BDFACSDiva软件分析计算各组细胞表达的百分率。结果艾滋病患者尚未开始HAART治疗组（pre—HAART组）外周血CD4^＋细胞计数明显低于HAART治疗组（HAART组）（P〈0．01）；pre-HAART组外周血单个核细胞（PBMC）中CD3^＋CD4^＋，CD4^＋CCR9^＋，CD4^＋CCR5^＋T细胞的百分率均明显低于HAART组（P〈0．01），pre—HAART组CD4^＋CIM9d^＋，CD4^＋CD62L^＋，CD4^＋CCR9^＋CIM5RO^＋，CD4^＋CCR9^＋CD45RO^-，CD4^＋CCR5^＋CIM5RO^＋，CD4^＋CCR5^＋CIM5RO—T细胞的百分率显著低于HAART组（P〈0．001）；HAART组PBMC中CD3^＋CD4^＋，CD4^＋CD62L^＋，CD4^＋CCR5^＋T细胞的百分率均显著低于HIV阴性对照（HIV—neg组）（P〈0．001）；pre—HAART组以上各组细胞群的百分率均显著低于HIV—neg组（P〈0．05）。结论AIDS患者外周血CD4^＋T细胞表面肠道归巢分子CD49d、CCR9，淋巴结归巢分子CD62L，辅助受体CCR5异常改变，但HAART可以逆转以上部分病理变化。肠道归巢分子CD49d、CCR9和淋巴结归巢分子CD62L可作为艾滋病疾病进展和评价机体HAART后免疫重建情况的指标。

深低温冻存的外周血单个核细胞活性氧水平与造血干/祖细胞归巢黏附分子表达之间关系的研究

本研究通过检测经程控降温液氮保存前后的富集造血干/祖细胞的外周血单个核细胞(PBMNC)的活性氧(ROS)水平及造血干/祖细胞归巢分子的表达,分析二者之间的相关性。以冻存PBMNC为实验组,以新分离PBMNC为对照组,通过台盼蓝染色方法检测2组细胞的存活率;通过流式细胞分析法检测2组细胞ROS水平;通过流式细胞分析法检测造血干/祖细胞表面抗原CD34、CD133以及归巢相关分子VLA4、CXCR4、CD44的表达;通过相关系数分析ROS水平与归巢分子表达之间的相关性。结果表明:PBMNC随冻存时间延长存活率逐渐降低,冻存3、6、9、12个月的细胞存活率比冻前显著降低(P<0.05);造血干/祖细胞表面标志性抗原CD34、CD133及归巢相关分子CD44、VLA4、CXCR4表达率随冻存时间的延长有所下降,冷冻保存1年后的表达率比冻存前显著降低(P<0.05);随着冷冻保存时间的延长,细胞内ROS水平逐渐升高,冻存6、9、12个月后细胞内ROS水平比冻存前显著升高(P<0.05)。PBMNC内ROS水平与造血干/祖细胞CD34+VLA4+、CD34+CXCR4+、CD34+CD44+双阳性表达率均呈负相关(相关系数分别为-0.503、-0.457、-0.465)。结论:造血干/祖细胞的归巢黏附分子表达随冻存时间延长而逐渐下降;冻存的PBMNC中的ROS水平与造血干/祖细胞归巢黏附分子表达率成显著负相关;ROS水平增高可能是冻存外周血造血干/祖细胞归巢功能降低的原因之一。

IL-6对肝癌细胞增殖、侵袭和转移的影响

目的观察白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对肝癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭和转移的影响并探究其作用机制。方法体外培养SMMC-7721细胞,分别加入不同浓度IL-6(0、5、10、20、40 ng/ml)和(或)AKT抑制剂LY294002。MTT、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验、细胞黏附实验分别检测细胞的增殖、转移和侵袭能力的变化;Western blot方法检测AKT、p-AKT、MMP-9、CD44、Ezrin蛋白的表达量。结果 IL-6组(5、10、20 ng/ml)浓度依赖性促进细胞增殖率、划痕愈合率、侵袭细胞数目和黏附细胞吸光度值增加(P<0.05);IL-6浓度20 ng/ml与40 ng/ml之间差异无统计学意义(P>0.05)。IL-6最佳作用浓度组(20 ng/ml)细胞增殖率(62.76%±6.86%)、划痕愈合率(92.37%±9.38%)、侵袭细胞数目(174.41±15.14)、黏附细胞吸光度值(0.531±0.055),P-AKT、MMP-9、CD44、Ezrin蛋白的表达量均高于对照组和IL-6(20ng/ml)+LY296002(20μmol/L)组(P<0.05)。各组AKT蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-6可能通过AKT通路影响MMP-9、CD44、Ezrin蛋白的表达,促进肝癌细胞的增殖、侵袭和转移。