当归芪枣精及其拆方对气血两虚模型小鼠的药效作用研究

目的:探讨当归芪枣精及其拆方对气血两虚模型小鼠的影响及其可能的作用机制。方法:24只SPF级小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、芪归组和当归芪枣精组,每组6只。除对照组外,其余各组小鼠均采用腹腔注射环磷酰胺(CTX)+尾部放血复制气血两虚小鼠模型。造模结束后,芪归组和当归芪枣精组小鼠分别给予相应药物灌胃,对照组与模型组小鼠给予生理盐水灌胃,连续7 d。末次给药后,检测小鼠负重游泳时间;处死小鼠前,剪尾法取血检测血常规指标,ELISA法检测血清中IL-6、IL-1β含量;摘取胸腺用苏木精-伊红(HE)染色观察病理组织学变化,RT-PCR法检测骨髓细胞中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)mRNA、促红细胞生成素(EPO)mRNA表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠出现胸腺组织皮质变薄、分界模糊等症状,负重游泳时间明显缩短(P<0.01),RBC、WBC、PLT计数及HGB、IL-6、IL-1β含量均明显降低(P<0.01),骨髓细胞中GM-CSF mRNA、EPO mRNA表达下调(P<0.01)。与模型组比较,芪归组、当归芪枣精组小鼠胸腺皮质厚度、皮质细胞数均明显升高(P<0.01),病理状态得到改善,当归芪枣精组小鼠负重游泳时间延长(P<0.05),RBC、WBC、PLT计数及HGB含量均明显升高(P<0.01),但芪归组小鼠仅PLT计数明显升高(P<0.05),芪归组小鼠血清IL-6、IL-1β含量均明显升高(P<0.01);当归芪枣精组小鼠骨髓中GM-CSF mRNA、EPO mRNA表达明显上调(P<0.01)。结论:当归芪枣精能通过提高骨髓造血和免疫功能来改善气血两虚证候,组方中的大枣更利于提升气血,协同增强补血和免疫功能。

当归芪枣精的质量标准研究

当归芪枣精是本院自制制剂，由当归、黄芪、大枣三味中药组成，具有养血、活血、益气的功效，用于气血两虚、疲倦力乏、久病体虚等证。该制剂中当归为君药，其有效成分有机酸类（阿魏酸）、苯酞类化合物、黄酮类等。为有效控制该制剂的质量，

基于网络药理学预测和验证当归芪枣精“一方多效”的作用机制

目的:采用网络药理学方法,探索当归芪枣精“一方多效”的作用机制,并对该方改善气血双虚证候的相关靶点蛋白进行验证。方法:在数据库检索的基础上,构建了蛋白-蛋白相互作用网络和成分-靶点-疾病网络,并对靶点进行基因本体(GO)富集分析和京都基因组百科全书(KEGG)通路分析。同时,采用放血和环磷酰胺并用建立气血双虚小鼠模型,以当归芪枣精低剂量组(4.0 g·kg)和高剂量组(8.0 g·kg)连续干预7 d,采用蛋白质免疫印迹(Western blot)法,检测骨髓中表皮生长因子受体(EGFR)、信号转导和转录激活因子1(STAT1)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及其磷酸化蛋白的表达。结果:筛选出53种活性成分,作用于110个潜在靶点,包括RB1、EGFR、ESR1等中枢蛋白,参与细胞增殖与凋亡、转录翻译和应激反应等生物过程,调控信号转导、免疫炎症以及癌症等信号通路,与变应性鼻炎、阿尔茨海默病、帕金森病、哮喘等307种疾病相关,尤以各类癌症为多。实验结果显示,与正常组相比,模型组小鼠骨髓组织EGFR、STAT1表达和p-MAPK/MAPK比值均显著降低(P<0.05);与模型组相比,当归芪枣精低剂量组、高剂量组小鼠骨髓组织EGFR、STAT1表达和p-MAPK/MAPK比值均显著升高(P<0.05);但两者在升高pMAPK/MAPK比值上有显著差异(P<0.05)。结论:当归芪枣精具有治疗神经系统、呼吸系统疾病,癌症等“一方多效”的治疗价值,EGFR、MAPK、STAT1等关键靶点共同参与调节气血双虚证候,可能是当归芪枣精气血双补的主要作用机制。

复方当归芪枣精口服液质量控制

目的:建立当归芪枣精的质量标准。方法:采用薄层色谱法鉴别当归芪枣精口服液中的当归;高效液相色谱法测定阿魏酸的含量。结果:TLC法中斑点清晰,阴性对照无干扰;阿魏酸质量浓度在0.06～1.20μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9998,n=5),平均加样回收率为96.89%,RSD为0.76%,阿魏酸的平均质量浓度为11.83μg/mL。结论:本方法简便、准确、易于操作,重现性好,结果稳定,可用于当归芪枣精口服液的质量控制。