黄芪、当归药对及当归补血汤对小鼠巨噬细胞吞噬氧化低密度脂蛋白的作用

【目的】研究不同比例的黄芪、当归药对及当归补血汤含药血清对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)吞噬氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)的作用。【方法】(1)实验设6组:正常对照组,空白血清组,1∶1、2∶1、3∶1、5∶1(芪、归质量比)含药血清组,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测作用于RAW264.7细胞24 h后的吸光度(D)值;(2)实验设7组:正常对照组,OX-LDL组,空白血清组,1∶1、2∶1、3∶1、5∶1含药血清组,除正常对照组外,各组均与50 mg/L的OX-LDL作用48 h后,采用油红O染色鉴定细胞对脂质的吞噬。【结果】MTT检测结果表明不同比例含药血清组均可显著降低D值(P<0.05或P<0.01);油红O染色发现不同比例含药血清组细胞内可见大量红染脂滴,吞噬了OX-LDL的巨噬细胞(即泡沫细胞)大量破裂死亡,尤以5∶1组最为明显。【结论】当归补血汤(芪、归质量比5∶1)可通过抑制巨噬细胞吞噬OX-LDL形成泡沫细胞、减少泡沫细胞形成来达到减小或消除动脉粥样硬化斑块的作用。

加味当归补血汤对TGFβ_1诱导的肾小管上皮细胞JNK_1信号转导通路的调控作用

目的：观察加味当归补血汤对转化生长因子β_1(TGFβ_1)刺激的小鼠肾小管上皮细胞丝裂原活化蛋白激酶信号C-Jun N端激酶1(JNK_1)的影响,探讨该方防治肾间质纤雏化的部分细胞生物学机制。方法：取原代培养的BALB/C小鼠肾小管上皮细胞,用TGβ_1刺激24小时,不同剂量组加味当归补血汤(中药)及洛汀新含药血清干预。观察各组细胞形态学变化,PT-PCR、Westem-Blotting技术检测细胞JNK_1 mRNA的和蛋白质表达情况。结果：①TGFβ_1刺激后,肾小管上皮细胞部分形态发生变大,伸长,呈梭形,经中药和洛汀新血清干预后,细胞形态又恢复为正常的鹅卵石样形态特征,②模型组肾小管上皮细胞JNK_1 mRNA和蛋白表达水平显著上调,各浓度中药能显著下调细胞JNK_1基因和蛋白表述(P＜0．01～0．05),洛汀新仅能显著下调JNK_1蛋白水平,对JNK_1 mRNA下调不显著。结论：加味当归补血汤防治肾间质纤维化可能与调控肾小管上皮细胞TGFβ1—JNK_1信号转导途径相关。

当归补血汤对氧化低密度脂蛋白激活RAW264.7细胞中核转录因子-κBp65 mRNA表达的影响

【目的】观察当归补血汤含药血清对氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)激活小鼠单核细胞系RAW264.7细胞中核转录因子-κBp65(NF-κBp65)mRNA表达的影响。【方法】将新西兰兔8只随机分为空白血清组和含药血清组,每组各4只,分别灌胃生理盐水和当归补血汤水煎液(剂量为8.4g·kg-1·d-1),分离血清。将RAW264.7细胞悬液接种于培养瓶中,培养24h,分为空白对照组、Ox-LDL组、PAR组(终浓度为10μmol/L的小菊白内酯)、体积分数10%的含药血清组。除空白对照组外,其他各组分别加入100μg/mLOx-LDL刺激4h,收集细胞。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞NF-κBp65 mRNA的表达量。【结果】Ox-LDL组与空白对照组比较,NF-κBp65 mRNA的表达量增加(P<0.05);含药血清组与Ox-LDL组比较,NF-κBp65 mRNA的表达量减少(P<0.05)。【结论】当归补血汤含药血清能下调NF-κBp65 mRNA的表达量,抑制、阻断NF-κBp65的表达可能是当归补血汤抗动脉粥样硬化的作用机制之一。