DNA条形码技术在鉴定绥芬河口岸日本血蜱和嗜群血蜱中的应用

目的建立用DNA条码技术对绥芬河口岸两种形态学特征非常相近的嗜群血蜱和日本血蜱的鉴定方法,探讨DNA条形码在蜱类鉴定中的实用性。方法在黑龙江绥芬河口岸采集游离血蜱103只,形态学鉴定完毕后,提取蜱样本基因组DNA,采用PCR方法从2种血蜱基因组中扩增线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因,测序后进行同源性分析,用Mega6.0软件构建系统发生树并进行系统进化分析。结果经形态学鉴定嗜群血蜱89只,日本血蜱14只;2种血蜱COⅠ基因之间的同源性为87.5%,嗜群血蜱与GenBank中编号KR108867.1公布的嗜群血蜱CO Ⅰ序列相似性为99.8%;日本血蜱与GenBank中编号KR108879.1公布的日本血蜱CO Ⅰ序列相似性为99.8%,与形态学鉴定结果一致。结论对于形态学特征相近蜱种的鉴定,在传统形态学分类的基础上结合DNA条码技术鉴定方法能更准确地鉴定蜱的种类,也能更好地了解其进化关系,为蜱传播疾病的预防控制提供依据。

DNA条形码技术在黑瞎子岛蜱类鉴别中的应用

目的应用DNA条码技术对黑瞎子岛蜱样本进行鉴定,为蜱的种类鉴定提供更加准确快速的依据。方法对捕获的557只蜱样本完成形态学鉴定后,提取蜱样本基因组DNA,采用PCR方法从蜱基因组中扩增线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因,测序后用Mega6.0软件构建系统进化树。结果经形态学鉴定为1科3属4种,分别是森林革蜱(DS1和DS2)、全沟硬蜱(IP1和IP2)、嗜群血蜱(HC1和HC2)和日本血蜱(HJ)。编号IP1和IP2样本与GenBank中编号JQ737101.1和编号KU935457.1公布的全沟硬蜱COⅠ序列相似性为99.85%~100.00%;编号HC1和HC2样本与GenBank中编号KR108861.1公布的嗜群血蜱COⅠ序列相似性为99.84%;编号HJ样本与GenBank中编号KR108879.1公布的日本血蜱COⅠ序列相似性为99.84%;以上结果均与形态学鉴定结果一致。编号DS1和DS2样本与GenBank中编号KU594270.1公布的草原革蜱COⅠ序列相似性为99.84%,与编号MH079424.1公布的森林革蜱COⅠ序列相似性为99.22%,二者虽均符合可直接鉴定标准,但综合草原革蜱和森林革蜱的形态学特征,可以确定样本均为森林革蜱。结论在传统形态学鉴定分类的基础上,结合DNA条码技术,能准确快速鉴定蜱的种类。