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季节环境变化对中华蜜蜂形态遗传标记的影响 被引量:2
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作者 朱翔杰 周冰峰 +5 位作者 郑秀娟 王青 徐新建 巨骞 于瀛龙 夏晓翠 《中国蜂业》 2011年第Z1期3-6,共4页
形态学研究方法是种群遗传学和资源调查的重要研究方法之一,但有些形态标记容易受环境影响。本文以中华蜜蜂为研究对象,控制研究样本具有相同遗传背景,在不同月份选取刚出房的工蜂,研究30项形态遗传标记的稳定性。结果表明:翅脉角变化较... 形态学研究方法是种群遗传学和资源调查的重要研究方法之一,但有些形态标记容易受环境影响。本文以中华蜜蜂为研究对象,控制研究样本具有相同遗传背景,在不同月份选取刚出房的工蜂,研究30项形态遗传标记的稳定性。结果表明:翅脉角变化较小,具有一定的遗传稳定性;反映器官大小和个体大小的形态遗传标记变化明显,且形态标记的变化与发育环境密切相关。蜜粉源丰富气候适宜,蜜蜂发育良好,个体和器官大小均最大;越夏阶段是蜜蜂周年生存最困难的季节,在此期间发育的样本个体和器官大小均明显减小。本研究为中华蜜蜂形态遗传标记在中华蜜蜂种质资源调查和种群遗传学中合理应用具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 形态遗传标记 遗传稳定性 相关性
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蜜蜂样本处理对形态遗传标记的影响 被引量:1
2
作者 朱翔杰 周冰峰 +3 位作者 王媛 吴显达 陈晓雯 孙静静 《中国蜂业》 2011年第Z3期24-26,共3页
为了明确常用的蜜蜂样本伸吻处理方法和酒精保存方法,是否会对蜜蜂的形态遗传标记测定产生影响。我们分别进行了开水处理样本和酒精长期浸泡处理对形态遗传标记影响的对比实验。开水处理和酒精浸泡1年的各项形态标记与未经处理的标本差... 为了明确常用的蜜蜂样本伸吻处理方法和酒精保存方法,是否会对蜜蜂的形态遗传标记测定产生影响。我们分别进行了开水处理样本和酒精长期浸泡处理对形态遗传标记影响的对比实验。开水处理和酒精浸泡1年的各项形态标记与未经处理的标本差异均不显著(P>0.05)。本研究证明,为了使蜜蜂的吻完整伸出,准确测定,可以采用开水处理蜜蜂标本,用于形态测定的中华蜜蜂标本可以用酒精浸泡至少保存1年。 展开更多
关键词 蜜蜂 形态遗传标记 酒精浸泡 伸吻
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贵州东方蜜蜂形态遗传分析 被引量:7
3
作者 骆群 周姝婧 +3 位作者 徐新建 朱翔杰 经翩翩 周冰峰 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2015年第3期298-302,共5页
利用32个形态遗传标记,采用逐步判别分析-聚类分析、主成分分析以及单因素方差分析,对贵州省的8个样点和2个临近的广西省、重庆市的样点,共600只东方蜜蜂工蜂进行形态遗传分析.研究结果表明,未发现贵州省的东方蜜蜂发生种群分化,贵州省... 利用32个形态遗传标记,采用逐步判别分析-聚类分析、主成分分析以及单因素方差分析,对贵州省的8个样点和2个临近的广西省、重庆市的样点,共600只东方蜜蜂工蜂进行形态遗传分析.研究结果表明,未发现贵州省的东方蜜蜂发生种群分化,贵州省各样点的东方蜜蜂与广西南宁样点和重庆万州样点发生明显分化.与广西南宁、重庆万州的东方蜜蜂相比,贵州东方蜜蜂个体和吻、翅和足等指标均较大. 展开更多
关键词 东方蜜蜂 形态遗传 种群分化
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罗田垂枝杉种子园子代形态遗传研究
4
作者 李玲 邓全利 《湖北林业科技》 2012年第2期23-25,90,共4页
罗田垂枝杉是湖北省特有的速生优质用材树种,为大面积推广应用,并保证子代优良性状遗传的稳定性,笔者通过对湖北省红安县老君山林场罗田垂枝杉种子园的子代林遗传特性和遗传增益的研究,结果表明:罗田垂枝杉初级无性系种子园子代林所具... 罗田垂枝杉是湖北省特有的速生优质用材树种,为大面积推广应用,并保证子代优良性状遗传的稳定性,笔者通过对湖北省红安县老君山林场罗田垂枝杉种子园的子代林遗传特性和遗传增益的研究,结果表明:罗田垂枝杉初级无性系种子园子代林所具有的冠幅小、生长快、干形通直圆满等优良特性都能够稳定遗传;罗田垂枝杉适宜较高密度造林,单位面积产量明显提升,增益效果显著。 展开更多
关键词 罗田垂枝杉 种子园 子代 形态遗传
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牦牛遗传标记的研究 被引量:2
5
作者 钟金城 欧江涛 +1 位作者 陈智华 字向东 《西南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第2期179-182,共4页
本研究结果表明,四川、西藏的牦牛在染色体和血液蛋白2种遗传标记上具有较为丰富的遗传多样性;而在所研究的DNA分子标记中多样性相对较贫乏.这些遗传标记的这些差异是牦牛能够适应复杂多样的高原气候环境条件的物质基础,也为研究牦牛的... 本研究结果表明,四川、西藏的牦牛在染色体和血液蛋白2种遗传标记上具有较为丰富的遗传多样性;而在所研究的DNA分子标记中多样性相对较贫乏.这些遗传标记的这些差异是牦牛能够适应复杂多样的高原气候环境条件的物质基础,也为研究牦牛的起源、演化和分类,以及开展标记辅助选择提供了理论依据.同时,说明牦牛虽然是家养动物中地理分布范围极其有限的家畜,但由于其产区的自然生态环境和社会生态环境条件的不同,在长期人工选择和自然选择的作用下,遗传结构已发生了较大的变异,形成了不同的生态类型或地方品种. 展开更多
关键词 牦牛 遗传多样性 形态遗传标记 细胞遗传标记 生化遗传标记 分子遗传标记
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藏系绵羊遗传标记的研究进展 被引量:2
6
作者 信金伟 毛学荣 马志杰 《青海大学学报(自然科学版)》 2007年第1期78-82,共5页
对藏系绵羊形态遗传标记、细胞遗传标记、生化遗传标记和分子遗传标记等研究现状进行了系统的论述,并对当前存在的问题和发展趋势进行了探讨。
关键词 藏系绵羊 形态遗传标记 细胞遗传标记 生化遗传标记 分子遗传标记
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蜜蜂遗传标记研究进展
7
作者 孙亮先 《山东畜牧兽医》 2004年第2期41-42,共2页
关键词 蜜蜂 遗传标记 形态遗传标记 生化遗传标记 分子遗传标记 辅助育种
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短枝木麻黄在福建东山试点的种源试验结果分析与选择 被引量:15
8
作者 叶功富 罗美娟 林金木 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期6-11,共6页
对设在福建省东山试验点的41个短枝木麻黄种源的11个性状遗传分析表明,种源间在各个生长和形态性状上存在显著或极显著差异,遗传力在039~088之间,表明各性状的差异主要由遗传因素所致,具有较强的选择潜力.遗传相关分析结果表明,除冠幅... 对设在福建省东山试验点的41个短枝木麻黄种源的11个性状遗传分析表明,种源间在各个生长和形态性状上存在显著或极显著差异,遗传力在039~088之间,表明各性状的差异主要由遗传因素所致,具有较强的选择潜力.遗传相关分析结果表明,除冠幅与树高相关性不显著外,其他各生长性状之间的相关性达极显著水平,主干分叉习性与主干通直度间呈极显著相关.以用材林为培育目标,选择材积、胸径、树高为主要指标,同时考虑主干分叉习性、主干通直度等干形性状,从41个种源中筛选出7个优良种源,分别为18014(印度)、18154(菲律宾)、18157(马来西亚)、18153(巴布亚新几内亚)、18296(泰国)、18312(瓦努阿图)和广东湛江种源,这些优良种源的增产作用十分明显. 展开更多
关键词 短枝木麻黄 形态特征 遗传变异 遗传相关分析 种源选择
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骨髓增生异常综合征MIC异常和临床特点 被引量:6
9
作者 胡喜梅 樊志荣 +3 位作者 周水阳 韦薇 陆翠 曹云芳 《临床血液学杂志》 CAS 2005年第6期338-340,共3页
目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)形态学、免疫学、遗传学(MIC)异常变化及临床特点。方法对65例MDS患者的血液学、免疫学、遗传学异常改变资料进行了回顾性分析。结果65例中外周血象全血细胞减少36例(55.4%),2系细胞减少19例(29.2%),分... 目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)形态学、免疫学、遗传学(MIC)异常变化及临床特点。方法对65例MDS患者的血液学、免疫学、遗传学异常改变资料进行了回顾性分析。结果65例中外周血象全血细胞减少36例(55.4%),2系细胞减少19例(29.2%),分类可见幼红细胞35例(53.8%),幼粒细胞27例(41.5%)。贫血60例(92.3%),以中重度为主58例(89.2%),表现为大细胞或正细胞性贫血。白细胞异常56例(86.2%),以减少为主45例(69.2%)。血小板减少41例(63.1%)。65例行骨髓细胞学检查增生活跃至极度活跃55例(84.6%),1系或1系以上病态造血54例(83.1%),11例难治性质血患者病态造血不明显(16.9%)。59例行骨髓病理学检查3系不同程度病态造血30例(50.8%),粒系幼稚前体细胞异常定位(ALIP)29例(49.2%)。45例行骨髓细胞流式细胞仪(FCM)免疫表型测定,表现2系或2系以上异常40例(88.9%)。41例做FCM-DNA倍体分析,检出DNA非整倍体26例(63.4%)。32例做骨髓细胞染色体分析,发现异常克隆13例(40.6%)。结论MDS临床表现不典型,血液学改变复杂,缺乏特异性,部分RA病态造血不明显,仅依靠形态学难以做出正确诊断,应提倡MIC分型诊断。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 形态 免疫学 遗传学异常
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Morphology and Genetics of Rice in Response to High Temperature at Flowering Period
10
作者 谭江 李小湘 +4 位作者 潘孝武 刘文强 闵军 刘三雄 黎用朝 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第10期2117-2122,共6页
High temperature stress is one of major abiotic stresses limiting rice productivity,especially at the flowering period.Understanding mechanisms of rice adaptation to heat stress would facilitate the development of hea... High temperature stress is one of major abiotic stresses limiting rice productivity,especially at the flowering period.Understanding mechanisms of rice adaptation to heat stress would facilitate the development of heat-tolerance cultivars for improving yield in a warmer world.Rice heat stress responses are very complex.Interactions between structure,function and the environment need to be investigated at the apparent and molecular levels in order to obtain a full picture.In this review,we summarized the current knowledge on the morphology and genetic basis of heat tolerance in reproductive tissues of rice at the flowering time,and some morphologic characters for increasing thermotolerance in rice via conventional breeding are outlined. 展开更多
关键词 High temperature stress RICE FLOWERING MORPHOLOGY GENETICS
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骨形成发生蛋白-7成熟肽基因克隆及序列测定 被引量:1
11
作者 邵彩慧 刘瑞吉 廉红星 《中国误诊学杂志》 CAS 2007年第3期425-427,共3页
目的:克隆人骨形态发生蛋白-7成熟肽基因。方法:根据Genebank人骨形态发生蛋白-7基因序列合成两条引物,从培养的人胎儿软骨细胞中提取mRNA,利用OnestepRT-PCR技术扩增出人骨形态发生蛋白-7成熟肽的基因序列,将PCR扩增产物基因片段连接... 目的:克隆人骨形态发生蛋白-7成熟肽基因。方法:根据Genebank人骨形态发生蛋白-7基因序列合成两条引物,从培养的人胎儿软骨细胞中提取mRNA,利用OnestepRT-PCR技术扩增出人骨形态发生蛋白-7成熟肽的基因序列,将PCR扩增产物基因片段连接克隆载体质粒中转化大肠杆菌DH5α进行克隆筛选鉴定及测序。结果:琼脂糖凝胶电泳检测RT-PCR产物显示一长约456bp的条带,阳性克隆质粒经双酶切可切出约456bp的片段,DNA测序结果与Genebank中的序列相符。结论:利用RT-PCR技术可成功的从人胎儿软骨细胞中克隆出人BMP-7成熟肽基因。 展开更多
关键词 形态发生蛋白质类/遗传 克隆 分子 序列分析 DNA
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白血病分型进展 被引量:2
12
作者 吕晓东 《医学与哲学(B)》 2009年第11期46-47,75,共3页
白血病细胞因具有生物学的异质性、分化程度的差异性和细胞形态的多形性等特点,需要明确分型。而它的分型经历了FAB(法国、美国、英国协作组,French-American-BritishCo-operative group)分型、MIC(morphology,immunology and cytogenet... 白血病细胞因具有生物学的异质性、分化程度的差异性和细胞形态的多形性等特点,需要明确分型。而它的分型经历了FAB(法国、美国、英国协作组,French-American-BritishCo-operative group)分型、MIC(morphology,immunology and cytogenetic)分型,最后到MICM(morphology,immunology,cytogenetic and molecular)分型。 展开更多
关键词 白血病 形态 免疫学 细胞遗传 分子学
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2型糖尿病大鼠肝脏骨形成蛋白9基因表达的变化及意义 被引量:1
13
作者 方芳 郑宏庭 +3 位作者 刘理 冯晓丽 徐梓辉 徐静 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第32期66-68,共3页
目的:观察2型糖尿病大鼠肝细胞中糖、脂代谢调节因子骨形成蛋白9基因转录及表达的变化。方法:实验于2004年在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室进行。取20只Wistar大鼠单纯随机分为模型组(n=15)与正常对照组(n=5)2组,模型组又... 目的:观察2型糖尿病大鼠肝细胞中糖、脂代谢调节因子骨形成蛋白9基因转录及表达的变化。方法:实验于2004年在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室进行。取20只Wistar大鼠单纯随机分为模型组(n=15)与正常对照组(n=5)2组,模型组又按处死时间分为5,10,20d3个时间点,每个时间点5只。①模型组大鼠以高热量饲料喂养4周后,以30mg/kg剂量左下腹腹腔注射链脲佐菌素,继续饲以高热量饲料4周制备2型糖尿病模型,以随机血糖>11.1mmol/L作为糖尿病模型成功的标志;正常对照组则腹腔注射相同剂量的生理盐水,饲以普通饲料。②模型组于相应时间点处死,正常对照组与20d处死组同时处死,取肝组织,以反转录-聚合酶链反应及Western-blot技术对骨形成蛋白基因转录及蛋白表达水平进行了检测与分析。结果:20只大鼠全部进入结果分析。①反转录-聚合酶链反应产物的凝胶扫描分析定量结果显示模型组中5,10,20d处死大鼠肝骨形成蛋白9基因转录水平均低于正常对照组(0.767±0.004,0.445±0.012,0.426±0.007,0.909±0.006,t=22.016,45.417,68.364,P<0.05)。②Western-blot结果显示正常组提取的蛋白在Mr13000处可见一条清晰的骨形成蛋白9特异性杂交带,而在5,10,20d处死大鼠肝中骨形成蛋白9表达明显减弱或几乎未见表达。结论:2型糖尿病大鼠体内骨形成蛋白9基因转录及蛋白表达水平较正常均显著降低,这一变化可能与糖尿病的发生、发展有着紧密的联系。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 形态发生蛋白质类/^*遗传 逆转录聚合酶链 反应
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Molecular characters and morphological genetics of CAL gene in Chinese cabbage 被引量:5
14
作者 LI XIAO FANG RUI JUAN SHEN +2 位作者 PING LIN LIU ZHANG CHENG TANG YU KE HE (Shanghai Institute of Plant Physiology, Chinese Academy of Sciences, 300 Fenglin Road, Shanghai 200032) 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2000年第1期29-38,共10页
BcpCAL, the homologous gene of CAL, was isolated from Chinese cabbage. Unlike bobcat of cauliflower, BcpCAL did not hold the terminating mutation in the fifth e-con. After crosses of cauliflower with Chinese cabbage, ... BcpCAL, the homologous gene of CAL, was isolated from Chinese cabbage. Unlike bobcat of cauliflower, BcpCAL did not hold the terminating mutation in the fifth e-con. After crosses of cauliflower with Chinese cabbage, the resultant hybrids failed to form curd, which implicates the genetic complement of BcpCAL to the mutated Bob- CAL in the function of curd formation. One of CAL gene isolated from the hybrid apparently comes from the female parent (Chinese cabbage) even though there are a few of the biases substituted and deleted. The result offers the molecular and genetic evidences for the Study of biological function of CAL in morphological genetics of curd. 展开更多
关键词 CAL gene CURD Chinese cabbage hybrid.
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Genetic Diversity and Interrelationship Among Mulberry Genotypes 被引量:1
15
作者 Rita Banerjee Sukhen Roychowdhuri +3 位作者 Haradhan Sau Bimal Kumar Das Pannalal Ghosh Beera Saratchandra 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第8期691-697,共7页
Fourteen morphometric traits were used to examine the genetic divergence of 25 mulberry (Morus spp.) genotypes from varied agroclimatic conditions of India. Wide variation was observed for all the traits. The genoty... Fourteen morphometric traits were used to examine the genetic divergence of 25 mulberry (Morus spp.) genotypes from varied agroclimatic conditions of India. Wide variation was observed for all the traits. The genotypes irrespective of their place of collection were grouped into 10 different clusters. Seven accessions, that is, Baragura-2, Gorabandha-2, Kalimpong, Herbertpur, Kollegal, Resham majri-7, and UP-14 each a cluster of unique entries will be of useful for genetic resources. Nevertheless, the correlation and path analysis suggest the direct selection of lamina length, fresh leaf weight, leaf area, and single leaf weight will be rewarding for mulberry leaf yield improvement. 展开更多
关键词 MULBERRY morphometric traits genetic divergence CORRELATION path analysis
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Charaterization of Citrus Hybrid "Huangguogan" through the Combination of Morphological and Molecular Markers 被引量:3
16
作者 Xue-Fei Wang Xi-Rui Xiong Xue-Li Pu Qiao-Qiao Yan Bo Xiong Feng-Ling Liao Qian-Qian Fan Zhi-Hui Wang 《Journal of Life Sciences》 2013年第4期348-352,共5页
Huangguogan, an obvious Citrus hybrid, is suitable for transportation and export and ripens in March or April. Because of late season, it may playa significant role in fruit market. However, its origin is still unconf... Huangguogan, an obvious Citrus hybrid, is suitable for transportation and export and ripens in March or April. Because of late season, it may playa significant role in fruit market. However, its origin is still unconfirmed. The aim of this study was to clarify the possible parentage of Huangguogan via the combination of morphological and molecular markers including simple sequence repeat (SSR) and chloroplast simple sequence repeat (cpSSR). Analysis of morphological traits including leaf stalk length, phylliform index and fruit shape index indicated that Huangguogan had similarities in morphology with Sweet orange. The SSR Cluster Analysis showed that Huangguogan was clustered together with Hongju tangerine and revealed -80% genetic similarity. They illustrated a close genetic distance between Huangguogan and Hongju tangerine. In addition, the bands of2 polymorphic cpSSR were identical in Huangguoggan and Sweet orange. Consequently, it is likely that its female parentage was the sweet orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck) and its male parentage was the tangerine (Citrus reticulata Blanco). 展开更多
关键词 CITRUS natural hybrid huangguogan morphological and molecular markers.
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真核双表达载体pIRES-hVEGF_(121)cDNA/hBMP-4的构建与鉴定 被引量:6
17
作者 韩雷 汪春兰 +5 位作者 赵宇 何金生 王帮河 王兴宇 杨兵 周志林 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第2期133-136,共4页
目的构建人血管内皮生长因子(hVEGF121)和人骨形态发生蛋白-4(hBMP-4)的真核双表达质粒,转染COS-7细胞并表达。方法将hVEGF121 cDNA和hBMP-4通过非定向和定向克隆至真核双表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4,经酶切鉴定... 目的构建人血管内皮生长因子(hVEGF121)和人骨形态发生蛋白-4(hBMP-4)的真核双表达质粒,转染COS-7细胞并表达。方法将hVEGF121 cDNA和hBMP-4通过非定向和定向克隆至真核双表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4,经酶切鉴定后,转染COS-7细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测。结果真核双表达载体pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4构建成功且hVEGF121cDNA和hBMP-4在COS-7细胞中得到了有效表达。结论hVEGF121和hBMP-4在COS-7细胞中成功表达,为进一步研究打下良好基础。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子类/遗传 形态发生蛋白质类/遗传 遗传载体 基因表达
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Morphological,kinetic,membrane biochemical and genetic aspects of intestinal enteroplasticity 被引量:2
18
作者 Laurie A Drozdowski M Tom Clandinin Alan BR Thomson 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2009年第7期774-787,共14页
The process of intestinal adaptation("enteroplasticity") is complex and multifaceted.Although a number of trophic nutrients and non-nutritive factors have been identified in animal studies,successful,reprodu... The process of intestinal adaptation("enteroplasticity") is complex and multifaceted.Although a number of trophic nutrients and non-nutritive factors have been identified in animal studies,successful,reproducible clinical trials in humans are awaited.Understanding mechanisms underlying this adaptive process may direct research toward strategies that maximize intestinal function and impart a true clinical benefit to patients with short bowel syndrome,or to persons in whom nutrient absorption needs to be maximized.In this review,we consider the morphological,kinetic and membrane biochemical aspects of enteroplasticity,focus on the importance of nutritional factors,provide an overview of the many hormones that may alter the adaptive process,and consider some of the possible molecular profiles.While most of the data is derived from rodent studies,wherever possible,the results of human studies of intestinal enteroplasticity are provided. 展开更多
关键词 DIABETES DIET Hormonal regulation Intestinal resection Mechanisms Morphology Nutrientabsorption Short bowel syndrome Signals
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Object Extraction Based on Evolutionary Morphological Processing 被引量:1
19
作者 LIBin PANLi 《Geo-Spatial Information Science》 2004年第3期193-197,230,共6页
This paper introduces a novel technique for object detection using genetic algorithms and morphological processing. The method employs a kind of object oriented structure element, which is derived by genetic algorithm... This paper introduces a novel technique for object detection using genetic algorithms and morphological processing. The method employs a kind of object oriented structure element, which is derived by genetic algorithms. The population of morphological filters is iteratively evaluated according to a statistical performance index corresponding to object extraction ability, and evolves into an optimal structuring element using the evolution principles of genetic search. Experimental results of road extraction from high resolution satellite images are presented to illustrate the merit and feasibility of the proposed method. 展开更多
关键词 object extraction genetic algorithms morphological processing high resolution satellite images
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大鼠BMP-7重组腺病毒构建及在肾小管上皮细胞中表达
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作者 杨肃文 王伟 +1 位作者 徐再春 朱芸芸 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期71-78,共8页
目的:利用AdEasyTMsystem构建携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并鉴定其在原代肾小管上皮细胞中的表达。方法:将BMP-7全长序列分为46个片段分段合成,再采用PCR方法将合成的46个寡核苷酸片段拼接成BMP-7基因,并克隆到测序载体中测序鉴定。... 目的:利用AdEasyTMsystem构建携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并鉴定其在原代肾小管上皮细胞中的表达。方法:将BMP-7全长序列分为46个片段分段合成,再采用PCR方法将合成的46个寡核苷酸片段拼接成BMP-7基因,并克隆到测序载体中测序鉴定。经NotI和HindⅢ双酶切后接入pShuttle-CMV穿梭载体,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-BMP-7。EcoRI酶切重组pShuttle-BMP-7,与pAdEasyTMDNA电穿孔共转化BJ5183感受态菌,抽提重组AdBMP-7质粒,PacI酶切线性化重组质粒AdBMP-7后,转染Ad293细胞进行病毒包装和扩增,腺病毒荧光检测试剂盒测定其滴度。用AdBMP-7感染大鼠肾小管上皮细胞,以ELISA法和W estern-blot法检测BMP-7在大鼠肾小管上皮细胞中的表达。RT-PCR方法检测-αSMA mRNA的表达水平,以鉴定重组腺病毒AdBMP-7的生物学活性。结果:构建了BMP-7基因的重组腺病毒载体,并制备出高滴度重组腺病毒保存液。该重组腺病毒在体外能有效转染大鼠肾小管上皮细胞并高表达BMP-7蛋白,所表达的BMP-7蛋白能有效逆转由TGF-β1诱导的α-SMA表达增高。结论:成功地构建了携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并初步证实其具有一定的抗肾纤维化功能。 展开更多
关键词 形态发生蛋白质类/遗传 重组 遗传 转染 遗传载体 腺病毒科/遗传 肾小管/细胞学 上皮细胞/代谢 肾硬化症/治疗
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