骨形成蛋白7对糖皮质激素诱导PC12细胞凋亡的作用研究

目的探究骨形成蛋白7(BMP-7)对糖皮质激素(GC)诱导PC12细胞凋亡的作用。方法采用不同浓度GC干预PC12细胞,明确不同浓度GC对PC12细胞凋亡的影响;在PC12细胞中感染BMP-7过表达/敲低慢病毒和对照病毒,然后采用DMSO或GC干预细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Bax基因表达,Western blotting法检测Cleaved-Caspase-3蛋白表达。结果不同浓度GC处理后的细胞凋亡率、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);与0μmol/L GC比较,GC浓度为10μmol/L时,PC12细胞凋亡率明显升高(P<0.05);GC浓度为50μmol/L时,PC12细胞Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05)。过表达或敲低BMP-7后4组细胞的细胞凋亡率、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);与GC-NC组比较,GC-oe BMP-7组细胞凋亡率、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达均降低(P<0.05);与DMSO-NC组比较,GC-oe BMP-7组细胞凋亡水平、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。与DMSO-NC组比较,DMSO-sh BMP-7组细胞凋水平、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达均增加(P<0.05);与GC-NC组比较,GC-sh BMP-7组细胞凋水平、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论高水平GC激素诱导PC12细胞凋亡增加,BMP-7可以拮抗GC诱导的细胞凋亡增加。

2种Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶对经皮冠状动脉介入治疗无复流的预测价值

目的探讨Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)1和ROCK2对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)无复流的预测价值。方法选取168例接受PCI的STEMI患者作为研究对象,根据是否发生无复流分为无复流组和血流正常组,并分别根据ROCK1、ROCK2表达情况分为高表达组和低表达组。使用酶联免疫吸附试剂盒检测患者血清ROCK1、ROCK2水平,分析无复流组与血流正常组的血清ROCK1、ROCK2水平差异,分析STEMI患者PCI无复流的危险因素,并分析ROCK1、ROCK2对STEMI患者PCI无复流的预测价值。结果168例STEMI患者中,46例发生无复流,发生率为27.38%。无复流组的Killip分级、发病至入院时间、未使用预防性无复流药物者占比、血清ROCK1水平、血清ROCK2水平高于或长于血流正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROCK1高表达组的无复流发生率高于ROCK1低表达组,ROCK2高表达组的无复流发生率高于ROCK2低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logsitic回归分析显示,Killip分级为Ⅲ~Ⅳ级、发病至入院时间较长、未使用预防性无复流药物、血清ROCK1水平较高、血清ROCK2水平较高均为STEMI患者PCI无复流的独立危险因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线显示,ROCK1、ROCK2对STEMI患者PCI无复流的预测价值较高,且两者联用后预测价值提升,曲线下面积为0.789(95%CI:0.711~0.867)。结论血清ROCK1、ROCK2水平较高是STEMI患者PCI无复流的危险因素,两者联合检测对PCI无复流具有较高的预测价值。

骨形成蛋白2基因多态性与冠脉钙化相关性研究

目的:研究骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)基因多态性在重庆汉族人群中的分布及与冠脉钙化(coronary artery calcification,CAC)的相关性。方法:收集2019年3月至2019年5月260例重庆医科大学附属第一医院心内科重庆汉族冠脉造影患者临床资料及血液样本,通过测序检测患者BMP2 rs961253、rs235768、rs1049007,OPG rs2073617、rs2073618,S100A12 rs2916191基因位点序列,应用ELISA法检测血清BMP2、OPG、S100A12水平。结果:CAC组167例,年龄(67.13±9.64)岁;对照组93例,年龄(60.46±9.89)岁。高血压、糖尿病、肥胖患者更容易发生CAC,CAC组男性发病率、载脂蛋白A1、C反应蛋白、白细胞数以及血清BMP2、S100A12、OPG水平明显高于对照组(P<0.05)。BMP2 rs961253基因型频率及等位基因频率分布在CAC组和对照组之间有统计学差异(P<0.05)。钙化组中,BMP2 TT基因型血清BMP2水平明显高于非TT型(P<0.05)。通过校正性别、年龄、体质指数、高血压、糖尿病等影响因素后,多因素逐步logistic回归分析发现BMP2 rs961253 TT基因型人群患CAC风险较高。结论:血清BMP2水平可作为预测CAC的指标之一。BMP2 rs961253基因多态性与CAC显著相关,BMP2 rs961253 T等位基因或TT基因型是CAC的高危因素。

骨形成蛋白及其信号通路在近视发病机制中作用的研究进展

近视严重危害儿童青少年视力健康,其发病率逐年上升,已经成为世界性的公共卫生问题。骨形成蛋白(BMP)是一种多功能生长因子,属于转化生长因子-β(TGF-β)中的一员,在动物和人眼组织中广泛表达,与近视发生发展密切相关。因此,本文主要阐述BMP信号通路分子机制及其在近视发病机制中作用的研究进展。

非酒精性脂肪性肝病患者血清淀粉样蛋白A、血浆血红素氧合酶1和骨形成蛋白9水平变化及其临床意义探讨

目的 探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清淀粉样蛋白A(SAA)、血浆血红素氧合酶1(HO-1)和骨形成蛋白9(BMP-9)水平变化及其意义。方法 2018年7月~2022年3月我院诊治的87例NAFLD患者,行肝活检,根据病理学表现的不同将NAFLD组分为单纯性脂肪肝(SFL)28例、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)48例和肝硬化11例,并根据病理学表现,将NASH分为早期10例和伴有肝纤维化的NASH 38例。另选择56例健康人作为对照。采用免疫比浊法检测血清SAA水平,采用双抗体夹心ELISA法检测血浆HO-1和BMP-9水平。结果 NAFLD组血清SAA和血浆HO-1水平分别为(8.2±1.5)mg/L和(14.9±2.3)ng/ml,显著高于健康人【分别为(3.3±0.6) mg/L和(10.1±2.1)ng/ml,P<0.05】,而血浆BMP-9水平为(95.1±6.1)pg/ml,显著低于健康人【(153.7±10.8)pg/ml,P<0.05】;肝硬化组血清SAA和血浆HO-1水平分别为(9.9±1.5)mg/L和(17.2±2.6)ng/ml,显著高于NASH组【分别为(8.3±1.1)mg/L和(15.2±2.4)ng/ml,P<0.05】或SFL组【分别为(7.5±0.9)mg/L和(13.7±2.1)ng/ml,P<0.05】,而血浆BMP-9水平为(81.8±6.9)pg/ml,显著低于NASH组【(93.6±7.3)pg/ml,P<0.05】或SFL组【(101.7±5.1)pg/ml,P<0.05】;伴有肝纤维化的NASH组血清SAA和血浆HO-1水平分别为(9.0±1.8)mg/L和(16.4±2.5)ng/ml,显著高于早期NASH组【分别为(6.6±1.9)mg/L和(12.0±2.8)ng/ml,P<0.05】,而血浆BMP-9水平为(87.5±4.7)pg/ml,显著低于早期NASH组【(98.8±5.1)pg/ml,P<0.05】。结论 NAFLD患者血清SAA、血浆HO-1和BMP-9水平变化可能与肝组织脂肪变和纤维化程度有关,值得进一步研究。

颈部血管超声联合血清凝血酶抗凝血酶复合物骨形成蛋白6在老年冠心病颈动脉狭窄诊断中的临床价值

目的分析颈部血管超声联合血清凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)、骨形成蛋白6(BMP6)在老年冠心病颈动脉狭窄诊断中的临床价值。方法选择2022年1月至8月于我院收治的老年冠心病患者180例,根据DSA检查结果分为对照组(无颈动脉狭窄,62例)及观察组(颈动脉狭窄,118例),2组患者均行颈部血管超声检查,比较2组患者颈总动脉收缩期最大流速(PSV)、舒张末期流速(EDV)、血流阻力指数(RI);采集2组患者空腹静脉血,酶联免疫吸附法检测TAT、BMP6水平,比较2组患者TAT、BMP6水平,采用一致性检验法检测颈部血管超声检查与DSA检查诊断颈动脉狭窄的一致性;采用四格表法检测颈部血管超声检查诊断颈动脉狭窄的灵敏度、特异度。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估颈部血管超声联合TAT、BMP6诊断老年冠心病患者颈动脉狭窄价值。结果观察组患者PSV、EDV水平明显低于对照组,RI水平明显高于对照组(P<0.05)。四格表法显示,颈部血管超声检查诊断颈动脉狭窄的灵敏度为81.4%,特异度为75.8%。一致性检验法检测显示,颈部血管超声检查与DSA检查诊断颈动脉狭窄的Kappa为0.784(P<0.001)。观察组患者血清TAT、BMP6水平明显高于对照组(P<0.05)。ROC曲线显示,TAT、BMP6、颈部血管超声诊断老年冠心病患者颈动脉狭窄的曲线下面积(AUC)分别为0.727、0.769、0.822,TAT+BMP6+颈部血管超声诊断老年冠心病患者颈动脉狭窄的AUC为0.909,联合检测预测价值较高。结论颈部血管超声检查可准确显示冠心病患者颈动脉血流动力学变化,血清TAT、BMP6在冠心病合并颈动脉狭窄患者明显异常表达,三者联合在预测冠心病颈动脉狭窄方面具有一定价值,对临床诊断与治疗具有重要意义。

IgA肾病患者血清Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2、视黄醇结合蛋白4表达水平及在评估病情和预测预后中的价值研究

目的检测IgA肾病(immunoglobulin A nephropathy,IgAN)患者血清Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(rho associated coiled coil containing protein kinase 2,ROCK2)、视黄醇结合蛋白4(retinol-binding protein 4,RBP4)表达水平,分析二者在评估患者病情及预测预后中的价值。方法选取2016年6月至2019年6月98例中国贵航集团302医院已确诊收治的IgAN患者为IgAN组,其中轻度IgAN 36例、中度IgAN 32例、重度IgAN 30例;同期选择在中国贵航集团302医院体检的健康者100名为对照组。酶联免疫吸附法检测血清中ROCK2、RBP4水平;采用Kaplan-Meier生存曲线分析ROCK2、RBP4表达水平与IgAN患者预后的关系;Pearson相关性分析ROCK2与RBP4表达相关性;受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析ROCK2、RBP4对IgAN的诊断价值;比例风险回归模型法分析IgAN患者预后的影响因素。结果IgAN组血清中ROCK2、RBP4表达水平分别为(24.25±5.31)μg/L、(59.70±9.43)μg/L,显著高于对照组的(15.57±4.16)μg/L、(32.14±7.82)μg/L,差异具有统计学意义(t=12.818、22.404,均P<0.001);轻度、中度、重度IgAN患者血清中ROCK2水平分别为(18.69±4.36)μg/L、(23.75±5.31)μg/L、(31.46±5.62)μg/L,RBP4表达水平分别为(45.37±7.86)μg/L、(62.48±8.12)μg/L、(73.94±8.65)μg/L。随着病情的加重,IgAN患者血清ROCK2、RBP4表达水平逐渐升高,差异具有统计学意义(F=51.854、102.234,均P<0.05);IgAN患者血清中ROCK2、RBP4表达水平与Lee氏分级、IgA/C3比值、病情程度有关(P<0.05);ROCK2、RBP4高表达组患者预后生存率分别为60.00%、74.19%,均显著低于低表达组的89.71%、91.67%,差异具有统计学意义(log rankχ^(2)=4.674,P=0.031);ROC曲线结果显示,血清ROCK2诊断IgAN的曲线下面积(area under curve,AUC)为0.889,敏感度为80.61%,特异性为80.00%,截断值为18.79μg/L;RBP4诊断IgAN的AUC为0.986,敏感度为96.94%,特异性为95.00%,截断值为41.31μg/L;二者联合检测的AUC为0.997,敏感度为98.98%,特异性为94.86%。Pearson相关性分析显示,IgAN患者血清ROCK2与RBP4表达水平呈显著正相关(r=0.701,P<0.001);多因素比例风险回归模型法分析表明,IgA/C3(OR=2.683,95%CI:1.060~6.794)、ROCK2(OR=1.831,95%CI:1.027~3.264)、RBP4(OR=1.517,95%CI:1.104~2.084)均是IgAN患者预后生存的影响因素(均P<0.05)。结论ROCK2、RBP4在IgAN患者血清中高表达,二者与IgAN患者的临床病理特征、病情严重程度及预后关系密切,ROCK2、RBP4表达水平对IgAN的诊断具有一定的价值。

骨形成蛋白7通过激活I型受体BMPR1A、BMPR1B抑制肺大细胞癌NCI-H460细胞的增殖

背景与目的已有的研究发现骨形成蛋白7(bone morphogenetic protein7,BMP7)具有抑制和促进多种肿瘤发生发展的双重作用,但其对肺癌细胞增殖的影响及其具体机制尚不明确。本实验首先检测了外源性BMP7对肺癌细胞增殖的影响,然后通过在肺癌细胞系中阻断不同的I型受体,观察其对BMP7生物学作用的影响,以探讨不同的I型受体在BMP7信号传导过程中的作用。方法应用RT-PCR及MTT方法分别检测4种非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞系和人支气管上皮细胞系(HBE)中BMP7I型受体的表达情况及外源性BMP7对肺癌细胞增殖能力的影响,并联合运用抗体阻断的方法阻断NCI-H460细胞中内源性I型抗体,采用MTT法检测BMP7对NCI-H460细胞增殖的影响,分析不同的I型受体在BMP7信号传导过程中的作用。结果NCI-H460细胞系中三种I型受体均有表达。外源性BMP7抑制了肺大细胞癌NCI-H460细胞的增殖(P=0.002)。运用特异性抗体阻断NCI-H460细胞内源性BMPR1A、BMPR1B、BMPR1A+BMPR1B后BMP7对NCI-H460增殖的抑制作用明显减弱(P=0.003,P=0.014,P<0.001),而阻断ACVR1A后BMP7对NCI-H460增殖的抑制作用无明显变化(P=0.074)。结论BMP7通过激活BMPR1A、BM-PR1B两种I型受体抑制NCI-H460细胞的增殖。

基因重组人骨形成蛋白-2和牛骨形成蛋白异位诱导成骨的比较

目的 :观察基因重组人骨形成蛋白 2 (rhBMP 2 )和牛骨形成蛋白 (bBMP)分别与珊瑚 /聚乳酸形成复合人工骨的异位诱导成骨活性 ,同时比较两种骨形成蛋白的成骨效率。方法 :把rhBMP 2和bBMP分别与珊瑚 /聚乳酸形成复合人工骨 ,进行小鼠肌内种植 1、3、6周后 ,组织学观察和组织形态测量 ,比较其异位诱导成骨活性。结果 :rhBMP 2和bBMP存在骨诱导差异 ,rhBMP 2诱导成骨量相对较少但血管、骨髓含量丰富 ,bBMP则相反。结论 :两种BMP都具有良好的诱骨活性 ,但在成骨量和血管。

人骨形成蛋白3基因cDNA部分序列的RT-PCR克隆

针对人骨形成蛋白 3基因的 c DNA序列设计引物 ,通过反转录 PCR技术 ,从人骨纤维肉瘤组织中扩增出目的片段。从胶中回收目的片段 ,将其与 p MD18- T载体连接 ,转化大肠杆菌 DH 5α后 ,经 H ind 酶切鉴定 ,进行测序。结果显示所得到的片段大小为 84 5 bp,与所设计的序列同源性为 10 0 % ,说明已经成功地扩增、克隆了人骨形成蛋白 3(h BMP- 3)基因 c DNA的大部分序列。

骨形成蛋白信号转导及调控

背景:骨形成蛋白属于转化生长因子β超家族成员,具有很强的诱导成骨能力。目的:对骨形成蛋白功能、信号转导及调控机制及其信号通路异常与人类疾病的关系进行综述。方法:由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI:2010)Medline(1999/2010)数据库,检索词分别为"骨形成蛋白、骨形成蛋白受体、Smad蛋白、信号转导、信号调控"和"Bone morphogenetic proteins,Bone morphogenetic proteins receptors,Smads,Signal transduction,Signaling regulation"。从骨形成蛋白的结构与功能,骨形成蛋白信号传导通路及调控,骨形成蛋白信号通路异常与人类疾病3方面进行总结。共检索到110篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入47篇文章。结果与结论:骨形成蛋白主要通过Smad依赖性和Smad非依赖性2条信号转导途径发挥作用,此过程受到细胞内外许多蛋白的调控,此外骨形成蛋白信号通路异常与人类某些疾病密切相关。

复合牛骨形成蛋白多孔中空种植体成骨效应的研究

目的 利用激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)观察牛骨形成蛋白复合种植体成骨效应。方法 将天然提取的牛骨形成蛋白 (bBMP)与多孔中空钛种植体相复合形成人工复合种植体 ,植入狗下颌骨 ,并设同等规格的实心柱状钛种植体及不复合bBMP的多孔中空柱状钛种植体植入狗下颌骨为对照组。应用三色荧光标记LSCM观察复合种植体周围骨整合情况。结果 实验组复合种植体在各时期成骨能力和成骨量均明显优于对照组。结论 复合种植体可诱导早期、大量、较持久的成骨 ;LSCM对种植体周围成骨行为进行观察是一种准确、有效的手段。

骨形成蛋白7及骨形成蛋白受体IA在脑胶质瘤中的表达

目的探讨骨形成蛋白7(BMP-7)及骨形成蛋白受体IA(BMPR-IA)在胶质瘤中的表达及其与预后的相关性。方法应用免疫组织化学方法检测60例脑胶质瘤标本(Ⅰ型8例、Ⅱ型24例、Ⅲ型16例、Ⅳ型12例)和5例正常脑组织标本BMP-7和BMPR-IA表达情况,对表达丰度进行半定量差异分析。结果BMP-7和BMPR-IA在脑胶质瘤中表达丰度均随肿瘤恶性程度增加而增加。肿瘤1年生存率与BMP-7和BMPR-IA表达呈负相关。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型组的1年生存率分别为100.0%、66.6%、43.7%和25.0%。结论BMP-7和BMPR-IA在脑胶质瘤中表达丰度随着恶性程度增加而增加,且与预后呈负相关,提示BMP-7和BMPR-IA与脑胶质瘤的形成、生物学行为相关。

骨形成蛋白15基因的研究进展

骨形成蛋白是属于转移生长因子 β超家族生长因子的一种分泌型信号分子。迄今为止,已有30多个骨形成蛋白被确定,骨形成蛋白15基因在卵母细胞中表达,具有推动卵泡生长,阻止黄体早熟的作用。本文综述了骨形成蛋白15基因的研究现状。

人骨形成蛋白2和人骨形成蛋白7成熟肽编码区基因克隆和真核表达载体的构建

目的克隆和构建人骨形成蛋白2(BMP-2)和人骨形成蛋白7(BMP-7)成熟肽真核表达载体。方法采用Trizol法从人骨肉瘤细胞中提取制备总RNA,利用RT-PCR、PCR转录、扩增BMP-2和BMP-7获得成熟肽基因,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建真核表达重组子pcDNA3.1(+)/BMP-2MP和pcDNA3.1(+)/BMP-7MP。结果总RNA提取液电泳可见在28S、18S和5S处出现明显的条带,PCR和酶切可在439bp和364bp出现条带,阳性克隆测序结果与Genebank中登录的序列一致。结论成功克隆出人BMP-2MP和BMP-7MP基因,成熟肽基因已与pcDNA3.1(+)连接,成功构建其真核表达重组子pcDNA3.1/BMP-2MP和pcDNA3.1/BMP-7MP,为进一步研究BMP-2、BMP-7的功能及其成熟肽基因在骨髓间充质细胞(hMSCs)中表达以及在骨组织工程中的应用研究奠定了基础。

人骨形成蛋白-4和人骨形成蛋白-7在毕赤酵母中的共表达

利用人骨形成蛋白-4(hBM P 4)与人骨形成蛋白-7(hBM P 7)的成熟肽cDNA片段制备转基因毕赤酵母菌株,实现了hBM P 4与hBM P 7在巴斯德毕赤酵母细胞中的共表达.W estern-b lotting分析表明,表达产物含有hBM P 4与hBM P 7,片段大小分别为26 kD和17 kD,均为单体蛋白.

骨形成蛋白-2/4、-5及Ⅰ型、Ⅱ型BMP受体在舌癌细胞系Tca8113细胞中的表达及意义

目的 探讨骨形成蛋白 (BMP)及其受体与口腔鳞癌发生、发展的可能关系。方法 用免疫组织化学、原位杂交方法分析 BMP- 2 /4、 - 5及 型、 型 BMP受体在 Tca8113细胞中的表达。结果 Tca8113细胞能不同程度表达BMP- 2 /4、 - 5及 、 型 BMP受体 ,其阳性信号定位于癌细胞胞浆。结论 BMP及其受体与口腔鳞癌发生。

骨形成蛋白2及骨形成蛋白4在牙胚发育中的时空表达及意义

牙齿发育初期和后期起调节作用的一些信号分子中,骨形成蛋白是与骨和牙齿形成相关的生长因子,作为形态生成信号在牙齿发育不同时期调控上皮与间充质间相互作用。牙胚发育过程中,BMP-2、BMP-4在牙胚发育各个时期的表达提示其在牙胚发育中的作用。研究表明,BMP-2、BMP-4作为上皮-间充质相互作用的继发调节信号参与牙齿发育,BMP-2参与调控牙乳头细胞分化形成成牙本质细胞;BMP-4与多种细胞因子相互作用参与调控牙型的形成。

软骨形成蛋白与软骨形成

对于骨骼的发育和维持来说 ,软骨形成是关键的一步 ,引发软骨形态发育的信号是一热门话题 ,本文结合生物化学与分子生物学的方法 ,对与软骨发育密切相关的骨形成蛋白和软骨形成蛋白的研究进展作一综述。

骨形成蛋白诱导成骨信号转导机制研究进展

骨形成蛋白具有明确的诱导成骨能力,对其诱导成骨作用的细胞和分子机制也有了深入的研究。骨形成蛋白信号首先通过靶细胞表面的受体,经Smads蛋白介导,传导至细胞核内,在Cbfal等辅助调节因子的作用下,启动成骨基因的表达。本文就骨形成蛋白诱导成骨信号转导机制的研究进展作一综述。