形觉剥夺性弱视儿童脑灰质的变化:基于体素的形态测量研究

目的 探讨形觉剥夺性弱视儿童全脑灰质体积(GMV)的变化。方法 收集2020年8月至2022年1月于本院眼科中心就诊的形觉剥夺性弱视儿童25例35眼,其中单眼形觉剥夺性弱视组15例15眼、双眼形觉剥夺性弱视组10例20眼。同期门诊招募年龄、性别匹配的正常对照组受检者11名22眼。单眼形觉剥夺性弱视组、双眼形觉剥夺性弱视组和正常对照组受检者进行3.0T磁共振成像(MRI)扫描以获得结构像MRI图。应用基于体素的形态测量学(VBM)方法及脑成像数据处理和分析软件进行结构像MRI数据处理和统计分析,采用单因素方差分析对三组受检者之间的GMV进行比较。结果 三组受检者之间总颅内容积的差异无统计学意义(P=0.379)。三组受检者之间GMV的差异有统计学意义(P=0.009);其中单眼形觉剥夺性弱视组、双眼形觉剥夺性弱视组与正常对照组受检者之间GMV的差异均有统计学意义(P=0.004、0.019),而单眼形觉剥夺性弱视组、双眼形觉剥夺性弱视组患者之间GMV的差异无统计学意义(P=0.673)。与正常对照组相比,单眼形觉剥夺性弱视组患者在左侧颞中回、左侧楔叶和左侧额中回的GMV均减少(均为P<0.05),在左侧额上回、左侧额下回岛盖部、左侧顶上小叶、右侧颞下回和右侧小脑前叶的GMV均增加(均为P<0.05)。与正常对照组相比,双眼形觉剥夺性弱视组患者在右侧额叶、双侧小脑后叶、双侧小脑前叶和双侧海马旁回的GMV减少(均为P<0.05),在左侧颞上回和右侧顶上小叶的GMV增加(均为P<0.05)。与双眼形觉剥夺性弱视组相比,单眼形觉剥夺性弱视组患者在右侧楔前叶、右侧颞中回、右侧辅助运动区、左侧额中回、左侧前扣带回、左侧中央前回、双侧中扣带回、双侧岛叶和双侧中央后回的GMV增加(均为P<0.05),未见GMV显著减少的脑区(P>0.05)。结论 形觉剥夺性弱视儿童脑灰质的改变不仅局限于初、高级视皮层,也涉及其他皮层及联络通路,且单、双眼弱视变化具有差异性。

树鼩形觉剥夺性弱视模型的视网膜形态变化

目的 建立形觉剥夺性树鼩弱视模型,从形态学方面观察弱视形成及恢复过程中视网膜的变化,为进一步探究弱视形成及恢复机制提供理论依据。方法 30只出生18 d的树鼩幼崽随机被分为6组(每组5只):弱视模型N1组(左眼缝合2个月);弱视模型N2组(左眼缝合1个月);弱视恢复模型N3组(左眼缝合1个月后打开1个月);弱视恢复模型N4组(左眼缝合1个月后打开换缝合右眼1个月);C1对照组(双眼正常视物2个月);C2对照组(双眼正常视物1个月)。模型建立成功后取视网膜行HE染色和透射电镜检查,观察在不同干预条件下树鼩视网膜各层组织学和超微结构变化。结果 HE染色结果显示,与C2对照组相比,弱视模型N2组树鼩视网膜神经节细胞、双极细胞、视锥视杆细胞数量均明显减少(均为P<0.05),神经纤维层及各层细胞形态均有不同程度损伤。透射电镜结果显示,弱视模型N2组树鼩视网膜各细胞出现细胞核体积缩小、核不规则、异染色质增多、线粒体肿胀、嵴溶解消失、内质网池形成等现象。在形觉剥夺时间更长的弱视模型N1组树鼩中,视网膜细胞数量较弱视模型N2组明显下降(P<0.05),形态损伤更加严重。去除剥夺后,弱视恢复模型N3组树鼩视网膜各层细胞数量均明显增多(均为P<0.05),细胞形态与超微结构出现一定程度的恢复,但与C1、C2对照组相比仍有差距。结论 形觉剥夺性弱视可引起弱视眼视网膜细胞出现病理性变化。形觉剥夺性弱视所引起的视网膜损伤具有可塑性。

儿童单眼先天性白内障术后形觉剥夺性弱视眼视盘周围RNFL和黄斑厚度检测

目的:检测儿童单眼先天性白内障术后形觉剥夺性弱视眼视盘周围视神经纤维层(RNFL)和黄斑厚度。方法:观察组为先天性白内障术后形觉剥夺性弱视眼19眼,自身对照和正常对照分别为形觉剥夺性弱视患者的对侧非弱视眼19眼及正常同龄人眼19眼,应用OCT测量上述各组视盘周围RNFL和黄斑厚度。结果:观察组视盘鼻侧RNFL厚度为(71.63±10.55)μm,高于自身对照[(65.00±12.54)μm]和正常对照[(65.21±8.29)μm](t=2.396和2.240,P<0.05)。观察组黄斑厚度[(196.68±15.13)μm]较自身对照组[(184.74±13.84)μm]和正常对照组[(185.16±15.05)μm]增加(t=2.135和2.131,P<0.05)。结论:儿童单眼先天性白内障术后形觉剥夺性弱视眼视盘鼻侧RNFL和黄斑中心区厚度比对侧非弱视眼及正常同龄人眼增厚,其视网膜结构可能存在异常。

左旋多巴对形觉剥夺性弱视猫视皮层17区神经生长因子的影响

目的观察左旋多巴对猫形觉剥夺性弱视的治疗作用及其对视皮层17区神经生长因子(NGF)表达的影响。方法18只4周龄幼猫分为正常组、单眼剥夺组、左旋多巴组,每组6只。通过单眼眼睑缝合制备形觉剥夺弱视模型,观察不同干预条件下各组视觉诱发电位(P-VEP)的P1隐含值及波幅,应用免疫组织化学法测定各组视皮层17区NGF的差异。结果单眼剥夺组剥夺眼P100波隐含值延长,波幅降低,与正常组及对侧眼比较,差异均有统计学意义(P<0.01),左旋多巴组双眼P-VEP各指标与正常组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。剥夺组视皮层NGF免疫阳性细胞密度为80.23±9.54,正常组为111.83±7.49,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);左旋多巴组为118.06±12.37,与正常组比较差异无统计学意义(P=0.94)。结论敏感期内剥夺性弱视幼猫视皮层17区NGF的表达减弱。左旋多巴干预治疗后,NGF表达明显增加,弱视眼P-VEP明显改善,左旋多巴能促进实验猫弱视眼的视功能改善。

睫状神经营养因子在形觉剥夺性弱视猫大脑视皮层的表达及其作用

背景研究证实，睫状神经营养因子（CNTF）能够增强多种神经元的存活能力，影响神经元的分化，参与视神经损伤后的修复，并在视路发育过程中具有重要作用。但目前关于CNTF与视觉发育期弱视形成问关系的研究尚少。目的检测CNTF在形觉剥夺性弱视猫大脑视皮层中的表达及其与弱视眼形成的关系。方法选取4周龄清洁级健康家猫12只，按配对比较法随机平均分为正常组和单眼形觉剥夺性弱视组。单眼形觉剥夺性弱视组猫采用单眼（右眼）上下睑缘缝合法建立形觉剥夺性弱视模型，眼睑缝合16周后利用图形视觉诱发电位（P—VEP）鉴定弱视造模是否成功。然后在猫过度麻醉下沿垂直脑矢状轴切取两侧视皮层组织块制备成标本，用Nissl染色法观察视皮质中神经元形态，采用免疫组织化学法对2个组猫大脑视皮层17区CNTF在视皮层I～Ⅵ层中的表达进行定位和定量研究。结果P—VEP结果显示，与正常猫相比，剥夺眼P—VEP检查P1波振幅明显下降[（6．11±1．56）μV vs．（11．42±1．92）μV，隐含时明显延长[（75．77±9．83）ms vs．（58．56±7．17）ms]，差异均有统计学意义（t=5．272、3．464，P〈0．05），证实剥夺眼已产生弱视。Nissl染色表明，单眼形觉剥夺性弱视组视皮层神经元数目较正常组减少，细胞变圆、体积变小、细胞质突起变短，部分细胞核变小、变暗，Nissl小体的表达不如正常组清晰。免疫组织化学检测表明，正常组和单眼形觉剥夺性弱视组视皮层17区Ⅰ～Ⅵ层均可见CNTF免疫阳性神经元存在，而以Ⅱ～Ⅳ层表达量较多。单眼形觉剥夺性弱视组视皮层17区Ⅱ～Ⅳ层的CNTF阳性细胞数较正常组明显下降[Ⅱ层：（95．93±8．24）个vs．（116．25±6．52）个；Ⅲ层：（102．65±7．45）个vs．（125．23±8．21）个；Ⅳ层：（110．65±6．85）个vs．（139．54±4．26）个l，差异均有统计学意义（t=4．737、4．989、8．773，P〈0．05）；单眼形觉剥夺性弱视组视皮层17区Ⅱ～Ⅳ层的CNTF阳性细胞灰度值明显低于正常组（Ⅱ层：106．98±8．86vs．138．65±6．38；Ⅲ层：109．56±8．69vs．149．59±8．55；Ⅳ层：116．65±9．52vs．155．76±9．87），差异均有统计学意义（t=7．105、8．043、6．986，P〈0．05），而2个组视皮质17区Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ层CNTF阳性细胞数和细胞灰度值的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论CNTF在单眼形觉剥夺性弱视猫大脑视皮层17区表达下降，可能参与弱视的发生发展过程。

左旋多巴对形觉剥夺性弱视鼠VEP及视网膜内多巴胺含量的影响

目的观察不同剂量左旋多巴对形觉剥夺性弱视大鼠视觉诱发电位(VEP)及视网膜内多巴胺质量分数的影响,探讨其治疗弱视的可能机制。方法30只14日龄SD大鼠建立单眼形觉剥夺性弱视鼠模型,按随机数字表法随机分为弱视对照组、小剂量给药组、大剂量给药组,每组10只,分别给予8%淀粉溶液及20mg/kg、80mg/kg左旋多巴灌胃,于给药前(45日龄)和给药后(75日龄)测量闪光视觉诱发电位(F-VEP),并于75日龄时检测各组大鼠视网膜内多巴胺的质量分数。结果给药前剥夺眼P1波潜伏期较未剥夺眼明显延长,差异有统计学意义(P<0.05);给药后左旋多巴组剥夺眼P1波潜伏期较给药前以及对照组剥夺眼均明显缩短(P<0.05),且大剂量给药组较小剂量给药组P1波潜伏期更短(P<0.05),未剥夺眼P1波潜伏期各组比较差异无统计学意义(P>0.05);剥夺眼视网膜内多巴胺的质量分数较未剥夺眼低(P<0.05),给药后剥夺眼视网膜内多巴胺的质量分数较未剥夺眼及对照组剥夺眼明显增高,且随药物剂量的增加多巴胺质量分数提高,二者比较差异有统计学意义(P<0.05);未剥夺眼给药前后视网膜多巴胺质量分数差异无统计学意义(P>0.05)。结论左旋多巴能显著提高形觉剥夺性弱视鼠弱视模型眼的视网膜内多巴胺质量分数,改善弱视眼视觉传导功能,并由此影响视觉系统发育可塑性敏感期。

不同剂量左旋多巴对形觉剥夺性弱视鼠闪光视觉诱发电位的影响

目的探讨不同剂量左旋多巴对形觉剥夺性弱视大鼠视觉诱发电位的影响及其可能的作用机制。方法30只14日龄SD大鼠幼鼠,随机分为3组,每组10只,分别为弱视对照组、小剂量给药组及大剂量给药组。3组SD大鼠采用单眼睑缝合30d建立形觉剥夺眼弱视模型。弱视对照组予以生理盐水灌胃,小剂量给药组与大剂量给药组分别予以20mg/kg、80mg/kg左旋多巴溶液灌胃给药。分别于给药前(45日龄)和给药后(75日龄)测量弱视大鼠模型的闪光视觉诱发电位(flash visual evoked potential,FVEP),并对所测得的数据进行统计学分析。结果给药前,各组剥夺眼较未剥夺眼FVEP的P1波潜伏期均明显延长(P<0.05)。给药后,小剂量组和大剂量组剥夺眼的P1波潜伏期较弱视对照组剥夺眼明显缩短(P<0.05),差异有统计学意义(P<0.05),且大剂量组较小剂量组P1波潜伏期缩短更明显(P<0.05);而各组未剥夺眼的P1波潜伏期比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。各组剥夺眼与未剥夺眼N1P1和P1N2波振幅比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论左旋多巴能缩短弱视鼠弱视眼的P1波潜伏期,而对振幅N1P1和P1N2无明显作用。它可能通过改变视网膜内及整个视路的多巴胺含量而影响视功能。

左旋多巴对形觉剥夺性弱视幼猫图形视觉诱发电位的影响

目的观察左旋多巴对形觉剥夺弱视幼猫图形视觉诱发电位的影响.方法 40只4周龄幼猫分为正常组、单眼剥夺组、对照组、左旋多巴组,每组10只,通过单眼眼睑缝合制备形觉剥夺的弱视模型,观察不同干预条件下各组图形视觉诱发电位(PVEP)的P100波的峰时及振幅的变化.结果剥夺组、对照组剥夺眼P100波峰时值延长,振幅降低,与正常组及对侧眼比较,差异有统计学意义(P<0.05),左旋多巴组双眼P-VEP各项指标与正常组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论左旋多巴能缩短弱视眼的P100波峰时及提高P100波的振幅,能促进弱视眼传导和感觉功能的改善.

视明宝颗粒对形觉剥夺性弱视猫视皮层谷氨酸受体(NMDAR1)表达的影响

目的观察视明宝颗粒对形觉剥夺性弱视猫视皮质17区、21a区N-甲基-D-天冬氨酸受体1（NMDAR1）mRNA表达的影响。方法家养幼猫（4～6周龄）30只，随机分为正常组、模型组、生理盐水对照组以及视明宝低、中、高剂量组，每组5只。除正常组外其余各组均左侧眼睑缝合制作形觉剥夺弱视模型，应用视觉诱发电位（P—VEP）验证造模是否成功。采用实时定量PCR（real—timePCR）技术，检测各组幼猫双侧视皮质17区和21a区NMDAR1mRNA的相对表达量。结果1．弱视模型幼猫左眼P—VEP与同期正常幼猫左眼P—VEP比较。P波潜伏期延长，波幅降低（P〈0．001）。2．模型组双侧17区、21a区的NMDAR1mRNA表达均较正常组明显降低（P〈0．05），生理盐水对照组、视明宝低剂量组各脑区指标与模型组接近（P〉0．05）；中剂量组左侧21a区的表达与正常组接近（P〉0．05），其他检测部位数值与模型组、生理盐水对照组及视明宝低剂量组相当（P〉0．05）；高剂量组双侧21a区NMDAR1mRNA表达高于其他干预组并与正常组接近（P〉0．05），左侧17区数值与各干预组大致相同（P〉0．05），低于正常组（P〈0．05），右侧17区数值高于正常组（P〈0．05）。3．双侧自身比较，在17区，视明宝高剂量组的右侧NMDAR1mRNA表达明显高于左侧（P=0．043），其他各组双侧差异不明显（P〉0．05）；21a区，正常组、模型组、生理盐水对照组、视明宝低剂量组，右侧高于左侧（P〈0．05），高剂量组右侧低于左侧（P〈0．05）。结论视明宝颗粒可以提高形觉剥夺性弱视猫视皮质NMDAR1的表达，高剂量组作用最明显。

氟西汀治疗形觉剥夺性弱视猫的视觉电生理研究

目的研究新生猫制作形觉剥夺性弱视模型,采用图形视觉诱发电位检测氟西汀治疗前后的弱视猫,了解特征峰潜伏期和波幅的变化,进而观察氟西汀治疗形觉剥夺弱视猫的效果。方法采用德国Roland视觉电生理仪,对3例正常对照组猫和15例形觉剥夺性弱视猫建模12周,喂养氟西汀后4、8、12、16、20周进行图形视觉诱发电位的检测,对特征峰进行潜伏期和波幅的比较。结果正常对照组P波的潜伏期(48.33±3.51)ms,波幅(55.69±3.52)nV,单眼形觉剥夺猫P波的潜伏期(58.23±4.62)ms,波幅(38.24±2.96)nV,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。氟西汀治疗4、8周时,P波的潜伏期较治疗前稍缩短,波幅稍增加,与氟西汀治疗前之间差异无统计学意义。治疗12、16、20周时,P波的潜伏期缩短,波幅增加,与氟西汀治疗前的形觉剥夺猫之间差异有统计学意义。结论氟西汀治疗形觉剥夺弱视猫能使其视觉电生理P波的潜伏期缩短,波幅增加,其变化过程类同于人类儿童弱视治愈过程中视觉电生理P波的潜伏期和波幅的变化趋势。

形觉剥夺性弱视大鼠视网膜神经纤维层及视网膜厚度的OCT检测与分析

目的应用相干光断层扫描(OCT)观察分析形觉剥夺性弱视大鼠视网膜神经纤维层(RNFL)及视网膜厚度(RT)的变化规律。方法选取健康SD大鼠,将其鼠眼随机分为单眼视觉剥夺组、单眼对照组、双眼视觉剥夺组和正常双眼对照组,应用OCT检查观察分析单眼视觉剥夺组(11只眼)、双眼视觉剥夺组(29只眼)和对照组(20只眼)大鼠(视盘周围)RNFL的厚度及单眼视觉剥夺组(12只眼)、双眼视觉剥夺组(15只眼)和对照组(24只眼)大鼠(视盘周围)RT厚度的变化。结果在视网膜神经纤维层厚度的比较中,各组两两比较,双眼剥夺组视网膜神经纤维层厚度[(51.50±4.54)μm]小于单眼剥夺组[(57.73±6.90)μm],差异有统计学意义(P<0.05);双眼剥夺组视网膜神经纤维层厚度[(51.50±4.54)μm]小于对照组[(56.75±8.41)μm],差异无统计学意义(P>0.05);单眼剥夺组视网膜神经纤维层厚度[(57.73±6.90)μm]大于对照组[(56.75±8.41)μm],差异无统计学意义(P>0.05)。在视网膜厚度的比较中,各组两两比较,单眼剥夺组网膜厚度[(212.40±11.66)μm]大于双眼视觉剥夺组[(198.36±13.60)μm],差异有统计学意义(P<0.05);单眼剥夺组视网膜厚度[(212.40±11.66)μm]大于对照组[(195.61±10.89)μm],差异有统计学意义(P<0.05);双眼剥夺组视网膜视网膜厚度[(198.36±13.60)μm]大于对照组[(195.61±10.89)μm],差异无统计学意义(P>0.05)。结论形觉剥夺性弱视大鼠视网膜神经纤维层和视网膜厚度均发生变化,两者发生的变化不完全相同;且单眼和双眼形觉剥夺对两者的变化存在不同影响。

单侧先天性白内障形觉剥夺性弱视眼、对侧眼与同龄正常眼黄斑区血流密度特征对比分析

目的应用OCTA对比分析单侧先天性白内障形觉剥夺性弱视眼、对侧眼与同龄正常眼黄斑区血流密度特征。方法选取2014年1月至2019年12月在我院行单侧先天性白内障摘出术,且伴有形觉剥夺性弱视的患者20例20眼。本研究受试对象分为3组,观察组为单侧先天性白内障形觉剥夺性弱视眼,自身对照组为其对侧眼,正常对照组受试者为在我院眼科进行视力检查的正常人20人20眼。应用蔡司公司Cirrus 5000-HD-OCT仪对患者进行OCTA检测,测量受试眼视网膜浅层黄斑区血管长度密度、血管灌注密度及黄斑中心凹无血管区(FAZ)面积、周长、形态指数等参数。比较三组受试眼各参数的差异,并分析弱视眼最佳矫正视力(BCVA)与双眼血流各参数差值之间的相关性。结果观察组受试眼BCVA明显低于自身对照组、正常对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。观察组受试眼视网膜浅层黄斑区中心、内层、外层、完整区域血管长度密度、血管灌注密度均明显低于自身对照组、正常对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。自身对照组与正常对照组相比,受试眼视网膜浅层黄斑区中心、内层、外层、完整区域血管长度密度、血管灌注密度,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。观察组受试眼视网膜浅层FAZ面积、周长均明显小于自身对照组、正常对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。自身对照组与正常对照组相比,受试眼视网膜浅层FAZ面积、周长差异均无统计学意义(均为P>0.05)。三组间视网膜浅层FAZ形态指数差异均无统计学意义(均为P>0.05)。单侧先天性白内障形觉剥夺性弱视眼BCVA与双眼FAZ面积差值、周长差值均呈负相关(r=-0.464,P=0.045;r=-0.548,P=0.015)。结论单侧先天性白内障形觉剥夺性弱视眼血流密度明显低于对侧眼及正常同龄眼,FAZ面积、周长明显小于对侧眼及正常同龄眼。双眼视网膜浅层FAZ面积差值及周长差值越大,弱视眼BCVA越差。

Caspase-3在形觉剥夺性弱视大鼠大脑视皮层的表达

目的:检测凋亡相关因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)在形觉剥夺性弱视大鼠大脑视皮层中的表达及意义。方法:建立形觉剥夺弱视大鼠模型,对10只正常大鼠和10只单眼形觉剥夺弱视大鼠大脑视皮层17区进行HE染色观察形态学变化,采用免疫组化法以及图像分析系统对Caspase-3免疫阳性神经元进行定位观察并定量研究其变化。结果:正常大鼠和单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮层17区各层次均可见Caspase-3免疫阳性神经元存在,而以Ⅱ!Ⅳ层较多。与正常大鼠相比,Caspase-3在单眼剥夺性弱视大鼠组视皮层17区Ⅱ!Ⅳ层的表达比正常组明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Caspase-3在单眼剥夺弱视大鼠大脑视皮层17区表达升高,可能参与弱视的发生、发展过程。

先天性白内障术后形觉剥夺性弱视眼黄斑中心凹下脉络膜厚度的变化

目的研究儿童先天性白内障术后形觉剥夺性弱视眼黄斑中心凹下脉络膜厚度(SFCT)的变化,分析与最佳矫正视力(BCVA)、眼轴长度(AL)的相关性,从而探究先天性白内障术后形觉剥夺性弱视眼的脉络膜结构变化机制。方法选择2016至2019年在我院行先天性白内障手术且术后BCVA<0.8的患儿40例(58只眼)作为观察组,对照组选择正常同龄儿童,按末次随访年龄分为3组:3~6岁14例(20只眼)、7~10岁13例(19只眼)、11~18岁13例(19只眼)。记录术前及术后末次随访时BCVA、AL、SFCT,进行统计学分析。结果3~6岁患儿术前及术后末次随访时SFCT与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);7~10岁、11~18岁患儿术前及术后末次随访SFCT与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。3个年龄组患儿术后SFCT与术前相比,差异无统计学意义(P>0.05);术后末次随访时SFCT与BCVA呈正相关(P<0.05),与AL呈负相关(P<0.05)。结论儿童先天性白内障术后形觉剥夺性弱视眼的SFCT较正常儿童增厚,与BCVA、AL有关。

脑衰反应调节蛋白2在单眼形觉剥夺性弱视大鼠视皮层的表达

目的研究脑衰反应调节蛋白2(CRMP-2)在单眼形觉剥夺性弱视大鼠视皮层的表达。方法出生后14d的SD健康大鼠64只,采用随机数字表法分为单眼形觉剥夺性弱视组和正常对照组。单眼形觉剥夺性弱视组于出生后14d行右眼睑缘缝合术,单眼形觉剥夺性弱视组和正常对照组分别于出生后14、21、45和120d各取8只大鼠进行观察。在出生后21d(单眼剥夺7d)对大鼠行闪光视觉诱发电位(F-VEP)检测,记录P1波的潜伏期和波幅值。利用免疫组织化学检测法观察2个组大鼠视皮层中CRMP-2免疫阳性神经元的表达变化,通过图像分析系统测定平均吸光度(A)值。结果F-VEP检查结果显示,与正常对照组相比,形觉剥夺性弱视组P1波潜伏期延长,波幅降低,差异均有统计学意义(t=16.760,P=0.000;t=-22.919,P=0.000)。免疫组织化学检测显示,单眼形觉剥夺性弱视组和正常对照组大鼠出生后不同时间点视皮层中CRMP-2的表达量比较,差异均有统计学意义(F分组=8.855,P=0.010;F时间=63.091,P=0.000),其中出生后21、45和120d单眼形觉剥夺性弱视组CRMP-2的表达量较正常对照组明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论CRMP-2可能参与单眼形觉剥夺性弱视的发生和发展过程,但其具体作用机制还有待进一步研究。

Wnt信号通路蛋白β-链蛋白和糖原合成酶激酶3β在单眼形觉剥夺性弱视大鼠视皮层的表达变化

目的研究Wnt信号通路蛋白β-链蛋白(β-catenin)和糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)在单眼形觉剥夺性弱视(monocular deprivation amblyopia,MD)大鼠视皮层的表达变化。方法出生后14 d的健康SD大鼠64只,随机分为MD组和正常(normal postnatal,NP)组。MD组行单眼睑缘缝合术,根据剥夺时间又分为单眼剥夺7 d、21 d、45 d、90 d 4个小组,每小组8只;NP组不作任何处理,相应分为7 d、21 d、45 d、90 d 4个小组,每小组8只。行闪光视觉诱发电位检测,确定MD模型建立成功。免疫组织化学染色观察MD组和NP组大鼠视皮层β-catenin和GSK-3β的表达变化,通过图像分析系统测定平均光密度值并进行统计学分析。结果免疫组织化学染色结果显示,与NP组大鼠相比,MD组大鼠各时间点视皮层GSK-3β的表达均明显增高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);且随剥夺时间延长,GSK-3β的表达逐渐增加,MD组内各时间点之间两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。MD组各时间点大鼠视皮层β-catenin的表达比NP组均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);且随剥夺时间延长,β-catenin的表达逐渐减少,MD组内各时间点之间两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 Wnt信号通路蛋白可能参与了视觉发育可塑性的调控和弱视的形成,但其具体作用机制还有待进一步研究。

形觉剥夺性弱视成年大鼠视皮质c-fos表达的研究

目的研究双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光刺激诱导视皮质神经元c-fos表达情况。方法缝合14日龄SD大鼠双侧眼睑建立双眼形觉剥夺性弱视模型9只,正常对照组5只。饲养至100日龄两组成年大鼠均暴露于外界自然光线中0.5 h后取材,对两组视皮质组织进行Nissl染色和c-fos蛋白免疫组化染色,并对染色结果进行计算机图像分析。结果弱视组大鼠视皮质表达c-fos蛋白阳性神经元较正常对照组多,两组差异有显著性(P<0.05)。结论双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠视皮质经光刺激诱导c-fos表达增加,提示已过视觉发育敏感期成年大鼠的视皮质仍存留一定程度的视觉可塑性。

氟西汀对单眼形觉剥夺性弱视大鼠视觉功能及视皮质突触可塑性的影响

目的观察氟西汀对单眼形觉剥夺性弱视大鼠视觉功能及视皮质突触可塑性的影响,探讨其可能机制。方法SD大鼠45只,随机选取10只为正常组,不作处理,余35只行左侧眼睑缝合术制备单眼形觉剥夺性弱视大鼠模型。将造模成功30只大鼠随机分为模型组、氟西汀组、氟西汀+舒林酸组各10只。氟西汀组腹腔注射氟西汀生理盐水溶液10 mg/kg,氟西汀+舒林酸组腹腔注射氟西汀生理盐水溶液10 mg/kg+舒林酸生理盐水溶液5 mg/kg,模型组、正常组腹腔注射等量生理盐水,均1次/d,持续2周。给药2周后测定4组大鼠剥夺眼闪光视觉诱发电位,记录P波潜伏期及振幅。4组大鼠处死后取剥夺眼侧视皮质,测定视皮质突触数量、突触间隙宽度、突触后致密带厚度;行HE染色观察视皮质组织形态;采用Western blot法检测视皮质糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、p-β-catenin、β-catenin蛋白相对表达量,计算p-β-catenin/β-catenin。结果模型组剥夺眼P波潜伏期[(113.35±12.64)ms]长于正常组[(77.62±11.57)ms](P<0.05),振幅[(5.66±1.47)μV]低于正常组[(21.53±3.61)μV](P<0.05),视皮质突触数量[(39.80±5.07)个/200μm^(2)]少于正常组[(61.60±8.53)个/200μm^(2)](P<0.05),突触间隙宽度[(26.37±3.18)nm]和突触后致密带厚度[(77.01±7.76)nm]均大于正常组[(15.56±2.37)、(49.93±5.14)nm](P<0.05);氟西汀组剥夺眼P波潜伏期[(87.81±14.53)ms]短于模型组(P<0.05),振幅[(14.89±2.73)μV]高于模型组(P<0.05),视皮质突触数量[(53.20±6.14)个/200μm^(2)]多于模型组(P<0.05),突触间隙宽度[(18.34±2.88)nm]和突触后致密带厚度[(59.08±6.03)nm]均小于模型组(P<0.05);氟西汀+舒林酸组剥夺眼P波潜伏期[(104.23±13.61)ms]长于氟西汀组(P<0.05),振幅[(10.17±1.95)μV]低于氟西汀组(P<0.05),视皮质突触数量[(45.80±5.89)个/200μm^(2)]少于氟西汀组(P<0.05),突触间隙宽度[(21.19±3.07)nm]和突触后致密带厚度[(65.42±7.15)nm]均大于氟西汀组(P<0.05)。HE染色结果显示,正常组剥夺眼侧视皮质神经元体积大、数目多、胞体饱满、胞质丰富,着色深;与正常组比较,模型组细胞体积减小、数目减少、胞体干瘪、着色变浅;与模型组比较,氟西汀组细胞形态改善,接近正常组;与氟西汀组比较,氟西汀+舒林酸组细胞体积减小、数目减少。模型组剥夺眼侧视皮质GSK-3β蛋白相对表达量(0.51±0.07)高于正常组(0.17±0.02)(P<0.05),p-β-catenin/β-catenin(0.13±0.01)低于正常组(0.71±0.08)(P<0.05);氟西汀组剥夺眼侧视皮质GSK-3β蛋白相对表达量(0.27±0.03)低于模型组(P<0.05),p-β-catenin/β-catenin(0.43±0.04)高于模型组(P<0.05);氟西汀+舒林酸组剥夺眼侧视皮质GSK-3β蛋白相对表达量(0.39±0.04)高于氟西汀组(P<0.05),p-β-catenin/β-catenin(0.32±0.03)低于氟西汀组(P<0.05)。结论氟西汀可改善单眼形觉剥夺性弱视大鼠视觉功能及视皮质突触可塑性,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

先天性白内障形觉剥夺性弱视眼视网膜神经纤维层厚度的研究

近年来采用OCT对先天性白内障形觉剥夺性弱视眼的视网膜神经纤维层厚度(retinal nerve fiber layer thickness,RNFLT)进行研究,对不同种族、不同年龄、白内障术后不同时间的RNFLT进行测量分析,发现白内障术后短期内RNFLT变薄,术后长期RNFLT较对照组更厚,因此认为先天性白内障形觉剥夺性弱视眼的RNFLT可能存在异常增厚。

先天性白内障所致形觉剥夺性弱视的视网膜机制研究

先天性白内障导致形觉剥夺性弱视的视网膜机制研究着眼于先天性白内障形觉剥夺性弱视对人眼视网膜中心凹发育和视盘周围神经纤维层的发育和视觉电生理的影响,以及采取黑暗饲养动物模型进行视网膜神经元环路研究。形觉剥夺影响了视网膜神经环路的发育,包括影响视网膜神经节细胞的发育与突触生长,造成视觉传入通路的兴奋性和抑制性输入的失衡,以及造成视网膜内层和外层视锥细胞相关的视网膜细胞功能受损,并可能永久地影响视网膜修复功能。(国际眼科纵览,2018,42:414-417)