盐度胁迫对彩虹明樱蛤存活、抗氧化酶和Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性的影响

为探究彩虹明樱蛤(Moerella iribescens)对盐度胁迫的适应能力和调节机制,对其进行急性盐度胁迫实验,在盐度5~50之间设定10个盐度梯度(5,6,8,11,14,18,23,30,39,50),观察死亡情况。结果显示,盐度胁迫96 h后,盐度50组死亡率为100%,盐度39、30、23、6、5死亡率分别为43.3%、6.7%、3.3%、1.7%、8.3%,而盐度8~18之间的4个组中未发现死亡个体。根据急性胁迫实验结果设置5个盐度梯度(6、12、18、24、30),测定0、24、48、72、96 h鳃和消化腺超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性变化。结果显示,在同一盐度胁迫下,彩虹明樱蛤鳃和消化腺的SOD、CAT、GSH-Px和Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性随时间的变化呈先上升后下降并趋于稳定的变化趋势,不同盐度组SOD、CAT和GSH-Px活性在24 h或48 h达到高峰,不同盐度组Na^(+)/K^(+)-ATP活性在48 h或72 h达到高峰。研究表明,彩虹明樱蛤的适宜盐度为8~18,3种抗氧化酶对盐度胁迫响应时间短于Na^(+)/K^(+)-ATP酶。研究从生存适应和应激相关酶活性角度探讨了彩虹明樱蛤对盐度的响应,可为其养殖和保育提供科学依据。

4种重金属离子对彩虹明樱蛤(Moerella iridescens)的急性致毒效应

以彩虹明樱蛤养殖壳高优势组(平均壳高为17.35±1.01mm)为实验动物,进行4种重金属离子Hg2+、Cr6+、Cu2+、Zn2+对彩虹明樱蛤的急性毒性和加和等毒性强度联合毒性试验。结果表明,彩虹明樱蛤对重金属的耐药性均随实验时间延长而缓慢降低,4种重金属离子毒性大小依次为Cu2+、Hg2+、Zn2+、Cr6+,其对彩虹明樱蛤96h的半致死质量浓度分别为0.0554mg/L、0.1099mg/L、2.2605mg/L、19.6277mg/L;Hg2+、Cr6+、Cu2+、Zn2+离子两两组合在加和等毒性强度下对彩虹明樱蛤96h联合急性毒性所呈现的致毒特征与离子间毒性强度匹配情形密切相关。

彩虹明樱蛤的耗氧率与排氨率研究

研究了不同水温和不同规格下处于标准代谢状态的彩虹明樱蛤耗氧率与排氨率,并测定了窒息点.结果表明:在20℃时,水中DO大于临界值5.00mg/dm3时,彩虹明樱蛤的耗氧率和排氨率处于相对稳定的状态,分别为2.01×10-3(m/m)/h和16.73μmol/(g.h);当DO低于此值,则代谢出现异常,耗氧率随DO下降而下降,直到窒息为止,其窒息点为1.22mg/dm3,而排氨率也呈直线下降,随着耗氧停止而停止。

彩虹明樱蛤酸性多糖的提取与纯化

目的:优化彩虹明樱蛤酸性多糖的制备工艺。方法:采用碱提醇沉法,运用正交试验对彩虹明樱蛤多糖的分离过程进行优化,包括时间、温度、pH值和乙醇浓度4个因素;所获多糖经去蛋白、去色素、去离子后,用DEAE-纤维素离子交换柱纯化,以Sephadex G-100和醋酸纤维薄膜电泳鉴定及红外光谱初步研究。结果:优化的多糖提取制备工艺为:时间6 h、温度70℃、pH 8.0、乙醇浓度70%,获得纯白略带暗褐色的颗粒状固体;DEAE-纤维素离子交换柱分离洗脱后得到靶多糖组分彩虹明樱蛤酸性多糖(Moerella iridescens acidic polysaccharide,MIAP),经Sephadex G-100和醋酸纤维薄膜电泳鉴定,MIAP为均一多糖组分,呈乳白色绵柔絮状;红外光谱扫描,MIAP含α-D型吡喃葡萄糖。结论:正交试验法优化了MIP的提取工艺,分离纯化了MIAP。

杭州湾与海州湾彩虹明樱蛤群体形态差异分析

应用聚类分析、主成分分析和判别分析3种分析方法,通过测量彩虹明樱蛤的10个形态学比例性状,对来自海州湾连云港海区（LYG）和杭州湾南岸慈溪海区（CX）以及杭州湾北岸的平湖乍浦海区（ZP）3群体彩虹明樱蛤的形态差异进行了比较研究。聚类分析表明,海州湾群体与杭州湾群体形态差异最大,连云港与杭州湾的慈溪群体和乍浦2群体形态距离分别达到了4.92和5.58,而杭州湾慈溪群体和乍浦群体形态最为相似,形态距离仅为2.16。主成分分析构建了2个主成分,其贡献率：主成分1为54.40%,主成分2为13.50%,累积贡献率为67.90%;两个主成分的累积贡献率较高,这些因子主要是第1主成分中的性状AB、AD、AB、SW、EF、GH、AI和IJ以及主成分2中的AE。判别分析结果表明,3个海区群体之间的形态差异极显著（P〈0.01）;经6步判别分析后应用AF、IJ、AE、AB、SW和GH建立的判别函数,其判别准确率P1为80%~100%,P2为82.86%~100%,综合判别率为88.89%,说明判别方程可以有效的将上述群体区分开来。

彩虹明樱蛤多糖对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用

目的研究彩虹明樱蛤多糖(MIP)对CCl4致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用。方法 MIP对小鼠连续腹腔注射7 d,以0.1%CCl4橄榄油溶液经腹腔注射,建立小鼠急性化学性肝损伤模型,测定给药后模型小鼠肝指数,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,测定肝组织匀浆中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)的活性及观察肝脏病理学变化。结果 MIP中、高剂量组(80,160 mg/kg)均能显著降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性(P<0.01),降低肝脏MDA含量(P<0.01),增强SOD和GSH活力(P<0.01或0.05),并能明显改善肝组织的病理学损伤,但对肝指数无明显影响。结论 MIP对CCl4致小鼠急性化学性肝损伤有保护作用。

彩虹明樱蛤多糖对转染HBV的HepG2细胞表达功能的影响

目的研究彩虹明樱蛤多糖（MIP）对转染HBV的HepG2细胞表达功能的影响。方法以不同浓度（10^-3-104μg／m1）MIV作用于体外培养的HepG2．2．15细胞，采用MTT法、时问分辨免疫分析法（TRFIA）和ELISA法检测MIP对HepG2．2．15细胞的毒性作用及HBsAg、HBeAg、Pre-SlAg表达的影响，采用FQPCR检测MIP对HBVDNA复制的抑制作用。结果MIP在10^-2～10μg／ml浓度范围内对HepG2．2．1s细胞无毒性作用，TC50为4633μg／ml。MIP在10^-2～102μg／ml浓度范围内，对HBsAg、HBeAg、Pre-S1AgDA及HBVDNA均有一定抑制作用，相应的治疗指数分别为129、28、20和83。结论MIP具有一定的抗HBV活性。

杭州湾和海州湾彩虹明樱蛤体内重金属的富集状况及聚类分析

采用原子吸收法对杭州湾和海州湾内慈溪、乍浦、连云港3个彩虹明樱蛤地理群体的Cd、Cr、Pb、Ni、Cu和Zn这6种重金属的含量进行测定,并与相关标准进行比较评价。结果表明:Cd、Ni、Zn、Cu、Pb五种重金属在杭州湾的慈溪和乍浦彩虹明樱蛤体内的富积量要显著高于海州湾连云港群(P<0.05),而Cr则相反。这6种重金属中,海州湾与杭州湾彩虹明樱蛤体内主要的重金属污染物为Zn,为548.589～732.201μg/g;综合来看,3个群体中以连云港的污染最轻,而乍浦的污染较重;对这6种重金属的聚类分析结果表明杭州湾南北两岸彩虹明樱蛤重金属污染特性相近,欧氏距离最小89.79,而与海州湾连云港彩虹明樱蛤重金属污染特性区别较大,欧氏距离分别高达139.19和204.56,这一结果与地理距离一致。

杭州湾与海州湾彩虹明樱蛤遗传差异的ISSR分析

利用ISSR分子标记技术对慈溪、乍浦、连云港3个彩虹明樱蛤地理群体的遗传差异进行了研究。试验结果表明,乍浦、慈溪、连云港3个彩虹明樱蛤群体的遗传多样性指数分别为0.3987、0.3670、0.4084,以连云港群体遗传多样性较高,慈溪群体最低。群体遗传结构显示,大多数(94.75%)的遗传多样性是由群体内不同个体间的差异造成的,只有小部分(5.25%)的遗传多样性与群体间的遗传分化有关。Nei’s遗传多样性分析结果表明,群体结构水平较低而基因流水平较高(Gst=0.0525;Nm=9.0295),提示彩虹明樱蛤群体间可能发生过较强的基因交流。

彩虹明樱蛤同工酶组织特异性研究

采用聚丙烯凝胶垂直电泳技术和同工酶特异性染色方法,对彩虹明樱蛤(Moerella iridescens)的斧足、肝胰腺和外套膜3种组织的酯酶(EST)、苹果酸脱氢酶(MDH)和超氧化物歧化酶(SOD)3种同工酶进行了分析。结果表明,这3种酶在上述3种组织中均得到了表达,不同的酶既存在一定的组织特异性又有相似性的特点。EST在3种组织中分别产生7～8条酶带,分为4个带区,其中EST-3和EST-6在3种组织中均为保守存在的强带,而斧足中缺失EST-1、EST-8和EST-9,肝胰腺中缺失EST-1和EST-2,外套膜中缺失EST-2和EST-8;MDH在3种组织中有4～5条酶带,MDH-2在斧足中缺失,MDH-3在外套膜中缺失,而处于s-MDH的MDH-4和MDH-5在3种组织中保守存在。SOD在3种组织中共表现为4条酶带,酶谱无明显变化,组织间无明显差异,这一特殊性可以用其作为生化遗传标记对彩虹明樱蛤进行种质鉴定。

彩虹明樱蛤多糖对小鼠的免疫调节作用

目的研究彩虹明樱蛤多糖对正常小鼠免疫功能的影响。方法通过小鼠免疫器官重量测定、碳粒廓清试验、血清溶血素测定、迟发型超敏反应(DTH)和NK细胞活性测定研究彩虹明樱蛤多糖对小鼠免疫功能的影响。结果彩虹明樱蛤多糖能促进小鼠脾脏发育、增强单核-巨噬细胞功能、体液免疫功能和细胞免疫功能,与对照组比较有显著差异(P<0.05或0.01)。结论彩虹明樱蛤多糖对小鼠的免疫功能具有一定的调节作用,是一种良好的免疫调节剂。

彩虹明櫻蛤Moerella ifridescens (Benson)群体组成与生长的初步研究

彩虹明樱蛤种群的年龄组成以1^+、2^+龄为主,分别占总数的45.78％相36.65％。生长过程中壳形保持不变。各生长参数间的回归关系良好。彩虹明樱蛤的性成熟年龄为1足龄;属一次成熟分批产卵类型;在6月底至7月初和7月底至8月底有两次产卵高峰。属终生生长型贝类。采捕期应定为4～6月,采捕规格2^+龄,壳长约17mm。

彩虹明樱蛤Moerella iridescens人工育苗的初步研究

自1988年以来,我们在实验室内进行了彩虹明樱蛤的人工育苗试验。幼虫适宜生活环境是:pH:6.00—9.11;海水比重1.020—1.030;面盘幼虫期最适培养密度每毫升30—50个;壳顶期幼虫培养每毫升2—5个。附着后稚贝的生存适宜范围更大。本文还就亲贝的育肥、催产技术作了一些探讨。

浙江沿海彩虹明樱蛤营养物质积累的多元分析

为了研究环境与贝类的营养物质积累的关系,寻找影响贝类品质的主要因素、恢复经济贝类野生资源,本文研究了慈溪、六横、温岭和乐清等海区的彩虹明樱蛤的氨基酸、脂肪酸含量,利用SPSS软件对不同海区、不同生长时间的彩虹明樱蛤进行了差异性比较和主效因素分析。研究结果显示:5月份六横和乐清地区的彩虹明樱蛤群体间氨基酸差异最小,六横和慈溪最大,其主效成分为半胱氨酸。7月份慈溪和温岭彩虹明樱蛤群体间氨基酸差异最小,慈溪和乐清最大,主效成分为苏氨酸。9月份慈溪和六横的氨基酸差异最小,乐清和温岭最大,主效成分为蛋氨酸。5月份和7月份六横、乐清和温岭,9月份,温岭,乐清和慈溪地区的彩虹明樱蛤群体间脂肪酸差异最小,主效成分为C 14:0,C 22:6和C 22:5。

彩虹明樱蛤的低温保活研究

对彩虹明樱蛤Moerellairidescens在不同温度、不同贮藏方式、不同湿度条件下进行低温保活试验,结果表明:彩虹明樱蛤在1～3℃条件下保活效果最好,保活3d后的存活率为92%;放在塑料筐内的彩虹明樱蛤,堆放比平铺效果好;彩虹明樱蛤低温保活受湿度的影响很大,在100%相对湿度条件下保活效果最好。

4种常用消毒剂对泥螺和彩虹明樱蛤的急性毒性

基于潮间带滩涂潮汐特征，确定12h为总实验时间，采取全程不换药和6h换药两种染毒方式，于2006年7～8月在浙江省岱山县岱西镇开展了溴氯海因、强杀118、碘溴海因和二溴海因对泥螺和彩虹明樱蛤的急性毒性实验．结果表明：各实验药物对泥螺、彩虹明樱蛤的致毒效应均随实验时间延长而缓慢增强；全程不换药组的半致死质量浓度LC50值均高于换药组，经u检验发现，两者致毒效果无差异；泥螺对消毒剂的耐毒能力略强于彩虹明樱蛤，4种消毒剂中以溴氯海因毒性最小，二溴海因最大，溴氯海因、强杀118、二溴海因及碘溴海因对泥螺和彩虹明樱蛤安全质量浓度分别为0．330，0．088，0．040，0．051g／L和0．250，0．140，0．079，0．150g／L．最后，就泥螺和彩虹明樱蛤对溴氯海因、强杀118、二溴海因、碘溴海因的急性致毒效应特征、药物间的致毒效果及其安全质量浓度进行了探讨．

响应曲面法优化微波辅提彩虹明樱蛤多糖的提取工艺

目的:采用响应曲面法以微波辅助提取优化彩虹明樱蛤中多糖的提取工艺。方法:在单因素试验的基础上,以提取温度、提取时间、水料比为随机因子,多糖得率为响应值,进行3因素3水平的Box-Behnken中心组合设计,采用响应曲面法分析3个因素对响应值的影响并以此确定最佳提取工艺条件。结果:彩虹明樱蛤多糖的最佳提取工艺条件为:提取温度45℃,提取时间2.7 h,水料比50∶1,在此条件下多糖得率的验证值为1.17%,与预测值1.19%之间的相对误差为1.70%。结论:响应曲面法能较好地预测彩虹明樱蛤多糖的提取工艺,提高多糖提取率。

彩虹明樱蛤贝体尺寸性状对体重的影响效应

随机选取彩虹明樱蛤120枚,在逐个测量体重和壳宽的基础上,以右壳为测量对象依次测量AB、AC、BC、OA、OB、OC和SW等长度性状指标。采用相关分析、通径分析和偏回归分析等多元统计学方法,探寻形态性状对体重的影响效应。结果表明:(1)除AC-BC组合未达极显著水平(P>0.05)外,彩虹明樱蛤各生物学测定指标间两两相关系数均达极显著水平(P<0.01);(2)AB、OB、SW等3项尺寸性状是影响彩虹明樱蛤体重的关键指标,其中AB尤为重要,其它尺寸性状主要通过AB的间接作用影响体重;(3)AB-SW、AB-OB、SW-OB性状组合对体重的决定程度较大,其中SW-OB组合在AB的影响下大于AB对体重的直接影响。

彩虹明樱蛤基因组DNA提取及RAPD扩增的初步研究

对采自浙江温岭的彩虹明樱蛤（Moerella iridescens）养殖群体的DNA提取和RAPD扩增条件进行了研究。从38种随机引物中筛选到重复性好的6种引物分别对11个个体的DNA进行扩增，共产生247个DNA条带（300-1600bp），总共检测到43个位点，其中多态位点32个，多态位点比例为74．42％。11个个体间的遗传相似系数在0．553～0．884之间，平均为0．691，个体间的平均遗传距离为0．309。表明该群体的遗传多样性比较丰富，种质资源处于良好状态。

彩虹明樱蛤[Moerella iridescens(Benson)]生活史的初步研究

1988年4月至1989年10月间,通过室内培育和海区采集相结合的方法初步研究了彩虹明樱蛤的生活史。按该蛤各个时期的形态特征和生态习性,描述了生活史的三个阶段:胚胎阶段、浮游幼虫阶段和埋栖生活阶段。同时,用组织学方法初步研究了该蛤的繁殖周期。此外,对受精、产卵类型、稚贝和蛤苗的区分诸问题进行了讨论。