脑得生片联合长春西汀治疗脑出血恢复期的效果观察

研究分析对脑出血恢复期患者联合应用脑得生片和长春西汀的效果。方法:选取我院2023年01月~2023年07月收治的60例脑出血患者,随机均分为研究组和对照组。对照组单独使用长春西汀,研究组则联合使用脑得生片和长春西汀,比较两组的脑损伤血清标志物、脑卒中神经缺损程度、肢体运动功能、日常生活能力评估、血流变指标、炎性因子水平。结果:研究组的胶质纤维酸性蛋白、星形胶质原性蛋白、髓鞘碱性蛋白的降低程度优于对照组,S神经元特异性烯醇化酶和脑源性神经营养因子的上涨幅度高于对照组,脑卒中神经缺损程度评分低于对照组,肢体运动功能、日常生活能力高于对照组,血流变指标水平低于对照组,炎症因子水平低于对照组,组间差异均显著(P<0.05),有统计学意义。结论:对脑出血恢复期患者联合应用脑得生片和长春西汀的效果显著,值得推广利用。

清金得生片抗肿瘤机理研究

目的探讨中药复方清金得生片对荷瘤动物的抑瘤作用及其对免疫功能的影响。方法以C57系小鼠造成Lewis肺癌模型、NIH系小鼠造成肝癌22(H22)和肉瘤180(S180)模型,观察清金得生片对Lewis,H22、S180的抑制作用以及对荷瘤小鼠外周血中T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞(NK)活性的影响。结果清金得生片高、中、低剂量对小鼠Lewis肺癌抑瘤率分别为44.9%、38.7%和34.9%;对小鼠肝癌22(H22)抑瘤率为51.76%、46.23%、39.7%;对小鼠肉瘤180(S180)的抑瘤率为57.54%、49.60%、34.92%;能使荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞(T),辅助性T细胞(Th)的百分数提高,纠正Th/Ts(Ts为抑制性T细胞)的比值异常,拮抗化疗药FT-207对此类细胞的抑制作用;提高自然杀伤细胞的活性。结论提示清金得生片能使受抑制的免疫功能提高,从而达到抑制肿瘤生长,阻止癌细胞扩散的目的。

脑得生片中10种成分的定量研究

目的建立HPLC法,对脑得生片中3′-羟基葛根素、葛根素、葛根素芹菜糖苷、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、染料木苷、三七皂苷Rb_1、人参皂苷Rg_1、大豆苷元和人参皂苷Rb_1 10种有效成分进行定量分析。方法色谱条件:色谱柱为Kromasil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-2.0 g·L^(-1)磷酸水溶液,梯度洗脱;流速为0.8 mL·min^(-1);检测波长为250和203 nm;柱温为35℃。结果 10个成分的峰具有良好的分离度;3′-羟基葛根素、葛根素、葛根素芹菜糖苷、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、染料木苷、三七皂苷Rb_1、人参皂苷Rg_1、大豆苷元和人参皂苷Rb_1的线性范围分别为14.99～299.88,15.00～300.03,8.26～165.13,10.24～204.82,10.01～200.13,6.40～128.00,15.75～314.93,21.00～419.97,7.01～140.14和17.50～349.97μg·mL^(-1),相关系数分别为0.999 5,0.999 8,0.999 9,0.999 5,0.999 6,0.999 5,0.999 6,0.999 8,0.999 6和0.999 6;精密度、稳定性与重复性实验的RSD值均小于1.60%;10个对照品的加样回收率均在97.10%～98.48%之间,RSD值均在0.76%～1.56%之间;10批制剂中3′-羟基葛根素、葛根素、葛根素芹菜糖苷、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、染料木苷、三七皂苷Rb_1、人参皂苷Rg_1、大豆苷元和人参皂苷Rb_1的平均含量分别为7.43,13.33,8.29,10.64,9.35,1.04,2.21,8.44,1.73和2.97 mg·g^(-1),RSD值分别为1.23%,0.82%,1.11%,1.24%,1.07%,1.58%,1.28%,0.86%,1.45%和1.28%。结论脑得生片中10种主要有效成分的含量检测方法操作简便、准确、可靠、稳定且重复性好,为该制剂的质量控制提供了有效的评价方法。

清金得生片抗肿瘤作用的实验研究

[目的]观察中药复方清金得生片(清金片)的抗肿瘤作用。[方法]复制C57小鼠Lewis肺癌模型,以替加氟片(FT-207)为阳性对照药(0.2g/kg),观察清金片高、中、低刑量(3.15、1.05、0.35 g/kg)组的抑瘤率;复制NIH小鼠艾氏腹水癌(EAC)模型,观察清金片各剂量组的生存时间和生命延长率;以 8 g/kg清金片灌胃SD大鼠,制备含药血清,采用体外培养与四甲基偶氯唑盐(MTT)法,观察体积分数为10％、20％、30％的清金片含药血清对人肺腺癌细胞株(LAC)生长的抑制作用;观察清金片各剂量组时肉瘤180(S180)荷瘤小鼠二甲苯致炎的耳肿胀度,以及H22腹水瘤荷瘤小鼠气管内酚红排出量的影响。[结果]清金片高、中、低剂量组在抑制小鼠Lewis肺癌生长方面作用与FT-207相仿,延长EAC荷瘤小鼠的存活时间和生命延长率的作用优于FT-207,高剂量组在减少二甲苯所致小鼠耳肿胀方面作用与FT-207及阿斯匹林相似,而在促进荷瘤小鼠气管内酚红排出量方面的作用优于FT-207而与溴已新片相仿;清金片各浓度含药血清均能抑制LAC的生长,其作用与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01),且均呈现剂量效应关系。[结论]清金得生片对原发性支气管肺癌及转移性肺癌有抑瘤、抗炎、祛痰作用。其作用总体与化疗药FT-207相似。

清金得生片对Lewis肺癌小鼠血清IL-2、TNF的影响

目的研究清金得生片对Lewis肺癌小鼠血清IL-2、TNF的调节作用。方法建立Lewis肺癌模型,运用益气除痰法代表方清金得生片进行实验性治疗,采用放射免疫法(RIA)测定IL-2的活性、TNF的含量。结果清金得生片各用药组荷瘤小鼠血清IL-2水平明显高于生理盐水组(P<0.05);TNF水平清金得生片高、中剂量有明显的升高作用,与生理盐水组比较有显著差异(P<0.05)。结论清金得生片有调节免疫细胞因子IL-2、TNF的作用,从而增强荷瘤小鼠的免疫力。

清金得生片对人肺腺癌细胞端粒酶及凋亡相关基因蛋白表达的影响

目的探讨清金得生片抑制肺癌细胞生长的相关分子机制。方法采用免疫组织化学染色(SABC)方法检测清金得生片含药血清处理后人肺腺癌细胞株端粒酶活性和凋亡相关基因bcl-2、bax的表达水平。结果清金得生片含药血清作用72h,人肺腺癌细胞端粒酶活性明显抑制,同时可下调bcl-2蛋白阳性细胞染色率、上调bax蛋白阳性细胞染色率。结论清金得生片通过抑制人肺腺癌细胞端粒酶活性,调节bcl-2和bax蛋白的表达,发挥抗肿瘤作用。

脑得生片中阿魏酸薄层色谱鉴别展开剂的选择

目的筛选脑得生片中阿魏酸薄层色谱鉴别的展开剂。方法比较6种不同的展开剂系统的展开效果。结果以甲苯-三氯甲烷-醋酸乙酯-冰醋酸(6∶5∶2∶1)作展开剂,分离效果好,斑点清晰。结论此展开剂专属性强,重复性好。

脑得生片中三七皂甙的含量测定

以人参皂甙Rg_1,为对照品,应用吸附树脂分离、比色技术,对脑得生片进行了质量考察研究,并拟定了脑得生片的定量指标。

RP-HPLC法测定脑得生片中羟基红花黄色素A的含量

目的采用反相高效液相色谱法建立了测定脑得生片中羟基红花黄色素A含量的方法。方法采用超声波法提取,经大孔树脂HP20纯化后,以反相高效液相色谱法测定羟基红花黄色素A的含量。色谱柱为Phenomenex Luna C_(18)(5μm,3.9mm×150mm),流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(体积比21:5:74),流速1.0mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长403nm。结果羟基红花黄色素A在1.22～9.15μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.9998。平均加样回收率为100.93%,RSD为1.73%。结论该方法准确、专属性强、重复性好,可用于测定脑得生片中羟基红花黄色素A的含量。

清金得生片抗小鼠Lewis肺癌作用的病理形态观察

目的：探讨清金得生片抗小鼠Lewis肺癌的作用机制。方法：将C57小鼠常规接种Lewis肺癌，随机分5组，设清金得生片高剂量组（3．5g／kg）、中剂量组（2．1g／kg）、低剂量组（1．05g/kg）、FT-207组、生理盐水组，连续灌胃给药10天，停药24h后拉颈处死，取肿瘤称重量，测量体积，肿瘤组织用10％甲醛固定，切片、HE染色。结果：清金得生片各剂量组肿瘤重量明显轻于生理盐水组，肿瘤体积明显比生理盐水组小，肿瘤重量抑制率为26．52％～46．96％，肿瘤体积抑制率为26．45％～45．06％。镜下可见部分瘤细胞体积缩小，核致密，染色质浓缩边集，个别瘤细胞核断裂形成大小不等的胞核小体，肿瘤细胞核分裂数明显减少，在大片坏死残留的肿瘤细胞周围有大量的淋巴细胞和白细胞浸润。结论：清金得生片有抑制Lewis肺癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，以及提高机体免疫功能的作用。

脑得生片中异黄酮类成分的含量测定

目的:建立脑得生片中有效成分异黄酮的含量测定方法。方法:采用超声波法提取结合大孔树脂纯化,以高效液相色谱法测定葛根素和黄豆苷的含量。以甲醇-水(16:84)为流动相,检测波长为250 nm,流速1.0 ml·min^(-1)。结果:平均加样回收率分别为99.33%和98.92%,RSD分别为1.48%。结论:该方法准确、可靠、重现性良好,可作为脑得生片的质量控制方法。

HPLC测定清金得生片华蟾酥毒基和酯蟾毒配基含量

目的:建立清金得生片中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的含量测定方法。方法:采用Hypersil ODS色谱柱(250mm×4mm,5μm);以乙腈-0.5%磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH至3.2)(45:55)为流动相;检测波长为296nm;柱温35℃。结果:华蟾酥毒基和酯蟾毒配基分别在0.04～1.25μg(r=0.999 9)、0.04～1.24μg(r=0.9998)范围内线性关系良好,加样回收率分别为99.37%(RSD=1.71%),100.20%(RSD=1.37%)。结论:方法简便、结果准确。

清金得生片对人肺腺癌细胞(LAC)抑制与凋亡的诱导作用

【目的】观察清金得生片对人肺腺癌细胞(LAC)的抑制与凋亡的影响。【方法】以8 g/kg剂量的清金得生片,0.2 g/kg剂量的替加氟(FT-207)灌胃SD大鼠制备体积分数为10%、20%、30%的中药含药血清和体积分数为20%的FT-207含药血清,并设空白血清对照;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法观察清金得生片对LAC的抑制作用;采用硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双染色法,以流式细胞仪检测清金得生片对LAC细胞早期凋亡的影响;采用透射电镜观察中药对LAC超微结构的影响。【结果】不同剂量中药含药血清对LAC增殖的抑制作用与药物浓度及作用时间呈一定依赖关系,其中体积分数为30%的中药含药血清作用72 h时的抑瘤率达32%;各剂量组中药含药血清均具有一定诱导LAC细胞凋亡的作用;中药含药血清高、中剂量组透射电镜下可见明显凋亡特征,低剂量组凋亡特征不明显。【结论】清金得生片的抗肿瘤机制可能与其能抑制LAC增殖、诱导细胞凋亡作用有关。

清金得生片联合化疗对Lewis荷瘤小鼠Fas、FasL mRNA表达的影响

目的观察清金得生片联合化疗对Lewis荷瘤小鼠Fas、FasL mRNA表达的影响。方法 Lewis肺癌荷瘤小鼠随机分为模型组、清金组、顺铂组、清金加顺铂组,给药10 d后,取肿瘤组织,采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠Fas、FasL mRNA的表达。结果清金加顺铂组瘤体组织Fas mRNA的表达显著高于模型组(P<0.05),各给药组间差异无统计学意义;与模型组比较,清金组、顺铂组、清金加顺铂组瘤体组织FasLmRNA的表达差异均有统计学意义(P<0.05),各给药组间差异无统计学意义。结论清金得生片联合化疗的抗肿瘤作用与调节Fas/FasL系统,从而逆转肿瘤的免疫逃逸有关。

运用UV-Vis考察不同厂家脑得生片物质组释放特征

[目的]建立脑得生片物质组的含量测定方法,并考察不同厂家脑得生片物质组体外释放特征。[方法]以紫外可见光谱(UV-Vis)法测定并计算各供试品溶液的物质组浓度及释放度,并采用Weilbull分布进行处理,考察不同释放度测定装置、不同释放介质和不同转数对脑得生片物质组释放度的影响及不同厂家脑得生片物质组释放度。[结果]100min时2个不同厂家的脑得生片物质组的累积释放百分率分别为98.54%、109.97%;主要释放特征参数:A厂T50=(52.85±4.68)min,Td=(56.75±4.66)min,B厂T50=(61.30±2.67)min,Td=(69.13±3.09)min。[结论]不同厂家脑得生片物质组释放度可用UV-Vis法进行研究。

益气解毒中药清金得生片诱导人肺腺癌细胞株HSP70表达的研究

目的探讨清金得生片治疗肺腺癌的作用机制。方法采用MTT比色及免疫组织化学染色(SABC)法检测清金得生片药物血清对人肺腺癌细胞株的抑制率及HSP70表达水平。结果清金得生片药物血清能促进人肺腺癌细胞株HSP70表达,并呈药物血清浓度依赖性地抑制人肺腺癌细胞株生长。结论清金得生片可能是通过诱导人肺腺癌细胞株HSP70表达的免疫效应而达到治疗肿瘤作用。

清金得生片对化疗荷瘤小鼠的增效减毒作用研究

目的:观察清金得生片对化疗荷瘤小鼠的增效减毒作用。方法:采用Lewis肺癌株造成荷瘤小鼠模型后,再以环磷酰胺腹腔注射化疗荷瘤小鼠模型,实验分为清金得生片组、环磷酰胺加清金得生片高、中、低剂量组、环磷酰胺加贞芪扶正冲剂组、环磷酰胺组、生理盐水对照组,进行外周血白细胞计数,T淋巴细胞亚群、胸腺和脾脏指数、抑瘤率的测定。结果:环磷酰胺化疗导致的荷瘤小鼠白细胞(WBC)总数、T淋巴细胞亚群中的CD3、CD4百分率、胸腺和脾脏指数明显低于生理盐水对照组(P<0.05),而清金得生片组及化疗同时加清金得生片的各用药组荷瘤小鼠白细胞总数和T淋巴细胞亚群中CD3、CD4百分率、CD4／CD8比值、胸腺和脾脏指数、抑瘤率均明显高于环磷酰胺组。结论:清金得生片对化疗荷瘤小鼠的造血系统和免疫功能具有一定的保护作用,并增强了化疗药物的疗效。

脑得生片合血塞通注射液治疗中风30例

目的 :观察脑得生片合血塞通注射液治疗中风的疗效。方法 :治疗组 30例 (脑得生片合血塞通注射液治疗 )与对照组 30例 (脑血栓片治疗 )作疗效比较。从中风病积分 (语言、运动功能、综合功能 )及血液流变学诸方面进行比较。结果 :治疗组总有效率 87% ,对照组总有效率 80 % ;血液流变学各项指标治疗组均明显优于对照组。结论 :脑得生片合血塞通注射液治疗中风病有确切疗效。

固相萃取-高效液相色谱法测定脑得生片中人参皂甙Rg_1的含量

本文建立固相萃取-高效液相色谱法测定脑得生片中人参皂甙Rg1含量的条件。采用超声振荡和固相萃取提取，色谱柱为Shim－PackCLC－ODS．流动相为乙腈-水（3∶7），检测波长210nm。平均回收率为（94．6±2,46）％，RSD为2.46％。该法适应于脑得生片中人参皂甙Rg1的含量测定。