循环微RNA在卵巢癌中的研究进展

卵巢癌症状出现较晚,目前尚缺乏早期筛查及有效治疗方法,病死率居女性生殖道肿瘤首位。因此,全面了解卵巢癌进展的分子机制、识别新型生物标志物、发现新药的潜在靶点尤为重要。微RNA(miRNA)异常表达参与卵巢癌的发生发展。肿瘤细胞分泌的miRNA可在体液中检测出来,循环miRNA水平与临床疾病的发生发展密切相关,可用于预测卵巢癌的预后和疗效。未来明确循环miRNA在卵巢癌中的作用机制、发现新型肿瘤标志物,可以为疾病的治疗提供新思路。

循环微RNAs与病理妊娠

微RNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小分子RNA,其在血液循环中结构稳定,降解缓慢。它们通过与靶mRNA结合,导致靶mRNA降解或翻译抑制,从而对多数真核细胞在转录后水平调控蛋白表达。miRNAs对胚胎细胞增殖、形态发生、分化和凋亡有重要的调节作用,参与生命过程中一系列的重要进程,其中胎儿发育和妊娠病理结局都受miRNAs的调控。miRNAs的表达水平变化与胚胎植入、异位妊娠、胎儿发育异常、反复自然流产、子痫前期等病理妊娠结局密切相关。胎盘循环miRNAs与妊娠状态有关,筛选差异miRNAs可用于孕期监测和诊断。筛选和鉴别外周血中差异表达的miRNAs,有望成为病理妊娠和妊娠状态潜在的新型分子标志物,作为一种无创筛查和诊断分子标志物其具有潜在的应用价值。

慢性心力衰竭患者微小RNA-182-5p表达水平及其与左心室重构和预后的相关性

目的探讨慢性心力衰竭患者微小RNA(miR)-182-5p表达水平,并分析其与左心室重构及预后的相关性。方法选取2019年1月至2021年12月聊城市人民医院心内科收治的慢性心力衰竭患者138例为慢性心力衰竭组(心衰组),另选取同期接受体检的120例健康志愿者为健康组,检测2组血清miR-182-5p表达水平,并采用Pearson分析miR-182-5p表达水平与左心室重构的相关性,ROC曲线分析miR-182-5p表达水平的诊断价值,连续随访1年,收集并分析心衰组生存状况,采用Kaplan-Meier生存曲线评估miR-182-5p表达水平及预后价值。结果心衰组左心室射血分数(LVEF)水平低于健康组,左心室重构指数(LVRI)和miR-182-5p表达水平显著高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);miR-182-5p表达水平与LVEF呈负相关(r=-0.496,P=0.000),与LVRI呈正相关(r=0.460,P=0.000);miR-182-5p表达水平诊断慢性心力衰竭的ROC曲线下面积为0.964,截断值为0.905,敏感性为91.3%,特异性为86.7%;Kaplan-Meier生存曲线分析显示,miR-182-5p低表达患者生存率高于高表达患者(P=0.039)。结论慢性心力衰竭患者miR-182-5p表达水平高于健康人群,且水平越高的患者左心室重构越严重,检测miR-182-5p表达水平有助于慢性心力衰竭患者的诊断和不良预后预测。

老年慢性心力衰竭患者血清微小RNA-665和微小RNA-144表达水平与心功能的关系

目的探讨老年慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者血清微小RNA(miR)-665、miR-144水平与心功能的关系。方法连续选取2021年3月至2023年3月内蒙古医科大学附属医院诊治的老年CHF患者120例为CHF组,根据纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级:Ⅱ级39例、Ⅲ级51例、Ⅳ级30例;选择同时间段老年健康志愿者120例纳入对照组。收集临床资料及心功能指标,检测血清miR-665、miR-144表达水平,Pearson相关性分析miR-665、miR-144与心功能指标的关系。结果与对照组比较,CHF组LVEF显著降低,左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD)及血清miR-665、miR-144表达水平显著升高(P<0.01)。CHF组心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级患者LVEF依次降低,LVEDD、LVESD及血清miR-665、miR-144表达水平依次升高,差异有统计学意义(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,血清miR-665与miR-144呈正相关(r=0.693,P=0.000);miR-665、miR-144与LVEF呈负相关(r=-0.577,P=0.000,r=-0.591,P=0.000),与LVEDD(r=0.485,P=0.000,r=0.507,P=0.000)、LVESD(r=0.539,P=0.000,r=0.494,P=0.000)呈正相关。结论老年CHF患者血清miR-665、miR-144水平升高,均与心功能密切相关。

老年腔隙性脑梗死患者血清微小RNA-377和微小RNA-137水平及临床意义

目的分析老年腔隙性脑梗死(LI)患者血清微小RNA(miR)-377、miR-137水平及临床意义。方法选择2021年2月至2022年12月哈励逊国际和平医院收治的老年LI患者248例作为LI组,另选择同期来我院体检的健康者110例作为健康组;根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将老年LI患者248例分为神经缺损组60例(≥2分)和无神经缺损组188例(<2分)。检测血清miR-377、miR-137水平;用Pearson相关性分析和Spearman相关性分析;logistic回归分析老年LI患者神经缺损影响因素;ROC曲线评估血清miR-377、miR-137水平对老年LI及神经缺损诊断的预测价值。结果LI组血清miR-377、miR-137水平低于健康组(P<0.01)。miR-377和miR-137联合评估老年LI的曲线下面积(AUC)为0.782(95%CI:0.735~0.824),高于二者单一检测(P<0.01)。神经缺损组脑动脉硬化、血红蛋白降低、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)1、IL-6、IL-17、C反应蛋白(CRP)、改良的Rankin量表(mRS)评分高于无神经缺损组(P<0.05,P<0.01),血清miR-377、miR-137水平低于无神经缺损组(0.61±0.25 vs 0.89±0.28,0.61±0.24 vs 0.85±0.27,P<0.01)。血清miR-377与miR-137水平呈正相关(P<0.01);血清miR-377、miR-137水平与TNF-α、IL-6、CRP、mRS评分均呈负相关(P<0.01)。miR-377、miR-137、TNF-α、IL-6、CRP是老年LI患者神经缺损的影响因素(P<0.01)。miR-377、miR-137联合评估老年LI患者神经缺损的AUC为0.812(95%CI:0.758~0.859),高于二者单一检测(P<0.05,P<0.01)。结论血清miR-377、miR-137水平在老年LI及其神经缺损患者血清中表达较低,检测其水平具有一定临床预测价值。

微小RNA-483-3p在原发性高血压患者血清中的水平及诊断价值

目的探讨微小RNA(miR)-483-3p在原发性高血压患者血清中的水平及诊断价值。方法选取2021年1月至2023年3月于三亚中心医院心内科就诊并确诊为原发性高血压的患者180例作为研究组,选取同期来我院体检且与研究组一般资料匹配的健康志愿者160例作为对照组。实时荧光定量聚合酶链反应检测2组血清miR-483-3p水平。结果与对照组比较,研究组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、收缩压、舒张压水平升高(P<0.01)。研究组血清miR-483-3p水平高于对照组(2.15±0.57 vs 1.00±0.05,P<0.01)。研究组中高血压1级、2级、3级患者血清miR-483-3p水平呈明显升高趋势(1.44±0.45 vs 1.79±0.58 vs 3.35±0.64,P<0.05)。相关性分析显示,研究组血清miR-483-3p水平与高血压分级呈正相关(r=0.745,P=0.000);研究组血清miR-483-3p水平与TC、TG、LDL-C、收缩压、舒张压水平均呈正相关(P<0.01)。miR-483-3p、TC、LDL-C、收缩压、舒张压是原发性高血压的独立影响因素(P<0.05,P<0.01)。血清miR-483-3p水平预测原发性高血压的曲线下面积为0.923(95%CI:0.890~0.949)。结论miR-483-3p在原发性高血压患者血清中的水平随病情严重程度的加重呈上升趋势,对原发性高血压有较高的诊断价值。

再灌注治疗对急性心肌梗死患者血浆外泌体微小RNA差异表达的影响

目的观察冠状动脉再灌注治疗对急性心肌梗死(AMI)患者血浆外泌体微小RNA(miRNA,miR)差异表达的影响。方法选取2022年10月至11月于深圳市龙岗区第三人民医院确诊的3例老年男性AMI患者,进行冠状动脉再灌注治疗,留取患者入院时、术后2 h和术后24 h静脉血,应用miRNA测序技术筛选3例患者血浆外泌体中共同差异表达miRNA后,对其靶基因进行生信分析,利用定量聚合酶链反应验证其中差异表达的miR-499a-5p。结果与入院时比较,术后2 h血浆外泌体miRNA有418个上调和406个下调,术后24 h血浆外泌体miRNA有320个上调和225个下调(P<0.05);与术后2 h比较,术后24 h血浆外泌体miRNA有344个上调和350个下调(P<0.05)。Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes富集分析显示,差异表达的miRNA富集在磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B、缺氧诱导因子1和血管平滑肌收缩等通路。Gene Ontology富集分析显示,差异表达的miRNA靶基因分子功能方面主要富集于蛋白结合和DNA结合;细胞组分方面主要富集于细胞膜和细胞质;生物学过程方面主要富集于信号转导和DNA模板转录。术后2 h miR-499a-5p水平显著低于入院时[(0.577±0.020)vs(1.000±0.023),P<0.05],术后24 h miR-499a-5p水平显著低于术后2 h[(0.068±0.006)vs(0.577±0.020),P<0.05]。结论血浆外泌体miRNA可作为早期诊断老年AMI患者和预测冠状动脉再灌注治疗效果的生物标志物。

肝癌外周血循环微RNA的临床应用价值与展望

肝癌的早期诊断、有效的治疗和复发转移监测一直是困扰临床医师的难题。微RNA(miRNA)在肝癌细胞增殖、凋亡、代谢等过程中有重要作用,并且其可以释放到血液、尿液和唾液等体液中。外周血中miRNA可作为肝癌诊断、疗效评估、复发转移监测和预后判断的生物标志物,甚至可能成为肝癌的治疗靶标。文章就将外周血循环中的miRNA作为肝癌诊疗监测标志物的研究进展进行总结。

微小RNA let-7c通过抑制血小板源性生长因子受体表达促进小鼠血管平滑肌细胞衰老

目的探讨微小RNA(miRNA)let-7c参与小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)衰老的机制。方法选择C57BL/6J小鼠40只,将小鼠分为对照组、老年组各20只,通过qPCR技术检测小鼠血清及主动脉血管中let-7c miRNA表达水平。从C57BL/6J小鼠主动脉中提取并原代培养VSMC。通过博来霉素体外诱导细胞衰老模型。使用Lipo2000脂质体转染法过表达或抑制细胞let-7c miRNA表达。将VSMC分为阴性对照(NC)组、博来霉素组、博来霉素+let-7c过表达组、博来霉素+let-7c抑制组,通过衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色评估组织或细胞衰老水平。将VSMC分为控制组、血小板衍生生长因子(PDGF)组、PDGF+let-7c过表达组,采用Western blot检测各组细胞蛋白表达。将VSMC分为空白组、let-7c过表达组、突变组、突变+let-7c过表达组,使用双荧光素酶报告基因验证let-7c靶点。结果老年组小鼠主动脉和血清中let-7c miRNA相对表达水平显著高于对照组(6.37±0.81 vs 1.00±0.00,P<0.05;5.23±0.44 vs 1.00±0.00,P<0.05)。博来霉素+let-7c过表达组中SA-β-gal染色阳性比例较博来霉素组增多,而博来霉素+let-7c抑制组中SA-β-gal染色阳性比例较博来霉素组明显减少(P<0.05)。与PDGF+let-7c过表达组比较,PDGF组血清反应因子表达显著升高,α平滑肌肌动蛋白及平滑肌肌球蛋白重链表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶实验显示,let-7c过表达组中荧光素酶活性水平较空白组显著下降(0.43±0.05 vs 1.00±0.00,P<0.05)。结论miRNA let-7c通过抑制PDGF受体表达促进小鼠VSMC衰老。

微小RNA-124促进氧糖剥夺/复糖复氧后脑微血管内皮细胞血管新生的研究

目的探讨微小RNA(miR)-124对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)后脑微血管内皮细胞(BMEC)血管新生的作用及相关机制。方法将小鼠BMEC随机分为6组,正常对照组(con组),OGD/R组,OGD/R+过表达对照组(OGD/R+ov-con组),OGD/R+miR-124过表达组(OGD/R+ov-miR-124组),OGD/R+沉默对照组(OGD/R+si-con组),OGD/R+miR-124沉默组(OGD/R+si-miR-124组)。比较各组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量、CD31阳性细胞数、miR-124水平、15脂氧化酶(15-LOX)mRNA及蛋白表达水平。结果与con组比较,OGD/R组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量及miR-124水平降低(P<0.05,P<0.01);OGD/R组15-LOXmRNA及蛋白表达水平较con组显著升高(3.29±0.24vs1.00±0.00,4.31±0.39vs1.00±0.00,P<0.01)。与OGD/R+ov-con组比较,OGD/R+ov-miR-124组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量、CD31阳性细胞数、miR-124水平明显升高,15-LOXmRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);与OGD/R+si-con组比较,OGD/R+si-miR-124组BMEC迁移距离、BMEC迁移数量、小管形成数量、CD31阳性细胞数、miR-124水平降低,15-LOXmRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论miR-124可能通过调控15-LOX水平促进OGD/R后BMEC血管新生,为缺血性脑卒中提供潜在治疗靶点。

循环miRNA作为心血管疾病新型生物标志物的研究进展

心血管疾病(CVD)是当前严重威胁人类健康的主要疾病,患病率和病死率较高,给社会和家庭带来巨大负担。早期诊断和预测CVD的进展对CVD的管理和减少心血管不良事件的发生有重要作用。微RNA(miRNA)与多种CVD(急性心肌梗死、心力衰竭、心肌炎、心律失常等)的发生发展密切相关;血液中的循环miRNA具有性质稳定、样本易于采集的优点,有望成为CVD的生物标志物。循环miRNA在多种CVD的精确诊断、风险分层、预后评估等方面发挥作用,但其在作为CVD生物标志物应用于临床前仍需要进行大量研究。

循环外泌体微RNA在支气管哮喘中的作用综述

支气管哮喘是一种病理特点复杂的异质性疾病,目前缺乏灵敏、有效的诊断方法,病情往往被低估,导致延误治疗。近年来,循环外泌体包裹的微RNA(microRNA,miRNA)作为细胞间重要的信息传递介质,由于其高度的稳定性和样本收集的便利性,以及在诊断和预测各种疾病方面展现出的敏感性和特异性,使其具有作为疾病生物标志物的潜力。由于循环外泌体miRNA的研究起步较晚,目前其在哮喘的诊断、鉴别、疗效预测和预后评估中的结果尚不一致,实际的临床应用存在一定阻碍。综合现有的研究提示:多种循环外泌体miRNA可协调作用于哮喘的发生与发展,且个体的生理特征是影响循环外泌体miRNA与哮喘两者间关联的重要因素,不同的病情进展程度、表型以及用药前后哮喘患者miRNA的种类与数量的差异和变化规律仍有待进一步细化和明确。该文总结、归纳了现有循环外泌体miRNA在哮喘疾病诊断、严重程度和表型鉴别以及药物疗效和预后评估中作用的最新进展,以期为哮喘的早期诊断和精准治疗提供新的思路与方向。

长链非编码RNA在阿尔茨海默病发生发展中的作用研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种神经退行性疾病,临床上主要表现为记忆力及认知功能下降,并逐渐丧失自理能力[1]。随着全球人口结构老龄化加剧,预计2050年AD全球患病人数将达到1亿人。AD的病理学特征主要包括β淀粉样蛋白(Aβ)在大脑中沉积、神经元内tau蛋白过度磷酸化,以及神经元缺失等[2]。

血清微小RNA-192微小RNA-221中性粒细胞与淋巴细胞比值血小板与淋巴细胞比值对重症肺炎患儿合并脓毒血症的诊断价值

目的探讨血清微小RNA-192(miR-192)、微小RNA-221(miR-221)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)对重症肺炎患儿合并脓毒血症的诊断价值。方法选取2020年10月至2022年3月于北京市延庆区医院就诊的重症肺炎患儿256例为研究对象,其中合并脓毒血症患儿104例(试验组),剩余152例(对照组)。分别应用SysmexXN-9100血球仪检测血常规计算出亚临床指标、应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清miR-192、miR-221;比较2组miR-192、miR-221、NLR、PLR差异;利用Pearson相关分析miR-192和miR-221与NLR、PLR相关性;利用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-192、miR-221、NLR、PLR对重症肺炎合并脓毒血症患儿诊断价值。结果重症肺炎合并脓毒血症患儿miR-192、miR-221相对于对照组表达水平降低,而NLR、PLR水平升高(t=16.272,P<0.01;t=10.972,P<0.01;t=15.352,P<0.01;t=22.278,P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,重症肺炎合并脓毒血症患儿miR-192与NLR、PLR表达均呈负相关(r=-0.402,P<0.01;r=-0.432,P=0.001),miR-221与NLR、PLR表达均呈负相关(r=-0.341,P=0.002;r=-0.458,P=0.001)。miR-192、miR-221、NLR、PLR对重症肺炎合并脓毒血症患儿诊断曲线下面积(AUC)分别为0.863、0.769、0.792、0.787。联合指标诊断的AUC为0.955。结论对重症肺炎合并脓毒血症患儿血清miR-192、miR-221表达水平降低,NLR、PLR、表达水平增高,且与患儿临床症状体征相符,联合检测可以提高重症肺炎合并脓毒血症患儿诊断特异度和敏感度,便于及时救治,迅速缓解患儿症状,值得临床推广。

微小RNA-29b评估冠状动脉斑块破裂的价值及机制研究

目的探讨冠状动脉综合征患者微小RNA(microRNA,miR)-29b评估稳定性冠状动脉疾病(SCAD)斑块破裂早期预警价值及其导致冠状动脉斑块破裂的可能机制。方法选择2020年4月至2022年4月三二〇一医院诊治的210例SCAD患者,根据干预手段分为PCI组95例和冠状动脉造影(CAG)组115例。比较2组治疗前后外周血miR-29b表达水平。将人外周血单核细胞分为空白对照组(未做任何处理)、miR-29b组(转染miR-29b)以及miR-29b空白对照组(转染miR-29b空白质粒),比较3组细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)、NF-κB、白细胞介素6(IL-6)mRNA和蛋白表达情况。结果PCI组术后miR-29b表达高于术前;PCI组术后miR-29b表达明显高于CAG组(P<0.01)。ROC曲线分析显示,miR-29b诊断冠状动脉斑块破裂的截断值为0.86,曲线下面积为0.838(95%CI:0.707~0.970)。多因素logistic回归分析显示,miR-29b是SCAD患者发生冠状动脉斑块破裂的独立预测因素(OR=0.598,95%CI:0.394~0.908,P=0.016)。Pearson相关分析显示,SCAD患者术前miR-29b与人外周血单核细胞EMMPRIN mRNA呈负相关(r=-0.575,P<0.01)。miR-29b组的EMMPRIN、NF-κB、IL-6mRNA以及蛋白表达量明显低于空白对照组和miR-29b空白对照组(P<0.05)。结论SCAD患者PCI术后miR-29b表达升高是冠状动脉斑块破裂的保护因素,其作为机制可能为miR-29b通过下调单核细胞EMMPRIN的表达而抑制斑块破裂。

老年急性脑出血并癫痫患者血清中血管生成素样蛋白4和微小RNA-124蛋白表达水平及其临床意义

目的 分析血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、微小RNA-124(miR-124)在老年急性脑出血并发癫痫患者中的表达及其临床意义。方法 选取2020年1月至2022年1月首都医科大学附属北京地坛医院顺义院区收治的72例急性脑出血并发癫痫患者为急性脑出血并发癫痫组,另选取同期收治的单纯急性脑出血患者50例为急性脑出血组,健康体检的健康志愿者50例为对照组。检测各组血清ANGPTL4水平、miR-124 mRNA表达量。结果 与对照组比较,急性脑出血组、急性脑出血并发癫痫组ANGPTL4水平较高,miR-124 mRNA表达量较低(P<0.05);与急性脑出血组比较,急性脑出血并发癫痫组ANGPTL4水平较高,miR-124 mRNA表达量较低(P<0.05)。ANGPTL4与癫痫严重程度、认知障碍、脑卒中史呈正相关,miR-124与癫痫严重程度、认知障碍、脑卒中史呈负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析,结果显示认知障碍、脑卒中史、ANGPTL4、miR-124为影响老年急性脑出血并发癫痫的危险因素。ROC曲线显示,ANGPTL4、miR-124联合检测对老年急性脑出血并发癫痫的预测价值高于单项检测预测(P<0.05)。结论 老年急性脑出血并发癫痫患者ANGPTL4表达较高,miR-124表达较低;ANGPTL4、miR-124与患者癫痫严重程度、认知障碍、脑卒中史相关,且两项联合检测对老年急性脑出血并发癫痫的预测价值较高。

微小RNA-29a及水通道蛋白4与创伤性脑损伤和预后的关系

目的探究微小RNA-29a(miR-29a)/水通道蛋白(AQP)4在早期急性创伤性脑水肿(TBE)中的表达和术后神经功能损伤及预后的相关性。方法收集2018年1月至2019年6月重庆医科大学附属第三医院神经疾病中心收治的老年重型脑挫伤患者50例,根据术前头颅CT检查结果分为阴性组5例、轻度组11例、中度组20例、重度组14例。检测患者血清及组织miR-29a水平、组织AQP4水平,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估患者术后神经功能损伤情况,格拉斯哥昏迷评分(GCS)评价患者预后情况,GCS4~5分纳入预后良好组11例,GCS<4分纳入预后不良组39例。结果阴性组、轻度组、中度组和重度组组织AQP4蛋白表达量逐渐增加,同时组织和血清miR-29a相对表达量逐渐降低(P<0.01);血清和组织miR-29a相对表达量与组织AQP4蛋白表达量均呈负相关性(r=-0.748、r=-0.538,P<0.01);组织AQP4蛋白表达量与NIHSS评分呈正相关性(r=0.634,P<0.01),而血清和组织miR-29a相对表达量与NIHSS评分呈负相关性(r=-0.700、r=-0.801,P<0.01)。与预后良好组比较,预后不良组组织AQP4蛋白表达量升高,组织、血清miR-29a相对表达量降低(P<0.01)。ROC曲线分析显示,术前血清miR-29a相对表达量预测患者预后不良曲线下面积为0.879(95%CI:0.746~1.000)。结论老年患者早期急性TBE后脑水肿程度越严重,组织中AQP4表达越高,同时组织与血清中miR-29a表达越低,与术后神经功能下降有关。检测血清miR-29a相对表达量可提供一定的预后信息。

微小RNA-92a调控音猥因子途径对心肌缺血再灌注损伤后促血管再生的影响及机制

目的探究微小RNA-92a(miR-92a)调控音猥因子(SHH)途径对心肌缺血再灌注(I/R)损伤后促血管再生的影响及机制。方法从1~3d龄SD大鼠中培养原代心肌细胞后建立心肌细胞缺氧/复氧模型,将其分成心肌细胞常氧培养组和心肌细胞I/R组。miR-92a模拟物(mimic)和拮抗剂(inhibitor)转染入大鼠原代心肌细胞,使miR-92a过表达或低表达,分成对照组、I/R组、miR-92amimic组和miR-92ainhibitor组。细胞计数法8测定各组细胞活力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,ELISA和QT-PCR测定血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和血管生成素1等血管新生因子表达,Westernblot法测定SHH信号通路蛋白表达。结果心肌细胞I/R组miR-92a表达显著高于心肌细胞常氧培养组(3.89±0.29vs1.53±0.19,P<0.01)。对照组、miR-92ainhibitor组、I/R组和miR-92amimic组SHH蛋白(0.57±0.13vs0.51±0.11vs0.24±0.03vs0.14±0.02,P<0.01)、Smoothened蛋白(0.53±0.12vs0.49±0.10vs0.14±0.04vs0.09±0.01,P<0.01)、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(0.56±0.14vs0.50±0.13vs0.15±0.03vs0.08±0.01,P<0.01)和神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(0.58±0.11 vs0.49±0.12vs0.18±0.02vs0.11±0.03,P<0.01)比较差异有统计学意义。结论miR-92a在心肌I/R损伤中异常高表达,抑制miR-92a表达可激活SHH信号通路有效促进血管再生因子表达。

微RNA与心房颤动发病机制的研究进展

心房颤动(房颤)是临床心血管疾病最常见的心律失常之一,其发病率随年龄的增长而显著增加,具有高住院率、高致残率和高病死率的特征,其发病机制尚不完全清楚。近年来研究发现,微RNA参与基因转录后水平的调控,在心血管系统主要参与调控心血管系统的发育和多种心血管疾病的病理生理过程,与房颤的发生、发展密切相关,其具体机制主要是通过参与调节和心脏重构相关的靶基因而导致房颤。

环状RNA ITCH对高糖诱导的心脏成纤维细胞活化的影响与机制研究

目的 探讨环状RNA ITCH(Circ-ITCH)对高糖诱导的心脏成纤维细胞(CF)活化的影响及其机制。方法 体外培养人CF(HCF),按照处理方法的不同分为对照组、高糖组、过表达载体阴性对照(OV-NC)组、Circ-ITCH过表达载体(OV-Circ-ITCH)组;模拟物阴性对照[微小RNA(miR)-NC]组、miR-212-3p模拟物(miR-212-3p mimics)组、抑制物阴性对照(inhibitor-NC)组、miR-212-3p抑制物(miR-212-3p inhibitor)组;Circ-ITCH过表达载体+模拟物阴性对照(OV-Circ-ITCH+miR-NC)组、Circ-ITCH过表达载体+miR-212-3p模拟物(OV-Circ-ITCH+miR-212-3p mimics)组、Circ-ITCH过表达载体+小分子干扰RNA阴性对照(OV-Circ-ITCH+si-NC)组和Circ-ITCH过表达载体+Samd同源物7小分子干扰RNA(OV-Circ-ITCH+si-Smad7)组,除对照组外,其余各组转染12 h后采用30 mmol/L D-葡萄糖处理进行高糖诱导,检测Circ-ITCH、miR-212-3p、Smad7表达、细胞活力及胶原纤维沉积,并验证miR-212-3p与Circ-ITCH、Smad7靶向关系。结果 与对照组比较,高糖组Circ-ITCH、Smad7 mRNA和蛋白表达降低(0.45±0.05 vs 0.99±0.07,0.51±0.06 vs 0.99±0.08,0.68±0.05 vs 1.16±0.07,P<0.05),miR-212-3p表达升高(2.17±0.12 vs 1.01±0.08,P<0.05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达及细胞活力升高(P<0.05),胶原纤维沉积增多。Circ-ITCH过表达升高高糖诱导的HCF细胞中Smad7表达,降低miR-212-3p、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA表达及细胞活力,减少胶原纤维沉积。miR-212-3p过表达抑制高糖诱导的HCF细胞中Smad7表达,而抑制miR-212-3p表达则相反。miR-212-3p过表达或抑制Smad7表达均减弱Circ-ITCH过表达对高糖诱导的HCF细胞增殖、胶原纤维沉积的影响。HCF细胞中miR-212-3p与Circ-ITCH、Smad7存在靶向关系。结论 Circ-ITCH靶向抑制miR-212-3p并上调Smad7表达,抑制高糖诱导的HCF细胞活化。