循环miRNA-26a对经皮冠状动脉介入治疗术后对比剂肾病的预测价值分析

目的探讨循环miRNA-26a对经皮冠状动脉介入治疗术后对比剂肾病(CIN)的预测价值。方法选取2016年1月-2018年1月在延安大学附属医院心内科进行经皮冠状动脉介入治疗的病人160例,其中术后并发CIN病人80例为病人CIN组,未发生CIN或其他并发症病人80例为病人对照组,实时定量PCR检测血浆miRNA-26a表达,Pearson检验评价血浆miRNA-26a表达与病人Mehran评分的相关性。将SD大鼠分为大鼠CIN组及大鼠对照组,各15只。构建大鼠CIN模型,在造影剂/生理盐水给药后0 h、2 h、4 h、8 h、12 h和24 h获取大鼠外周血,并采集主要器官的组织样本,实时定量PCR检测其血浆及主要器官(心、肝、脾、肺、脑)中miRNA-26a表达。结果大鼠CIN组的血浆及肾脏中miRNA-26a表达较大鼠对照组明显升高(P<0.05);miRNA-26a在大鼠肾脏中出现明显的高表达,在其余5种器官(心、肝、脾、肺、脑)中表达水平较低(P<0.05);大鼠CIN组血浆miRNA-26a表达在给药后2 h出现明显升高(P<0.05),4 h时达到峰值,12 h时仍明显高于大鼠对照组(P<0.05);病人CIN组血浆miRNA-26a表达较病人对照组明显升高(P<0.05);miRNA-26a高表达病人Mehran风险评分明显高于低表达组(P<0.05),Mehran评分≥6分病人比例较低表达组明显升高(P<0.05),Pearson相关分析发现血浆miRNA-26a表达与Mehran评分呈正相关(r=0.372,P<0.05)。结论血浆miRNA-26a水平可作为CIN早期诊断的潜在生物标志物。

循环miRNA-126在冠心病发生发展中的作用

冠心病（CHD）即多种高危因素诱导的冠状动脉发生粥样硬化性（AS）改变，继而引起冠脉血管管腔不同程度的狭窄甚至完全闭塞，造成心肌细胞缺血、缺氧或坏死而导致的心脏病。

miRNA-21的循环放大检测及成像

报道了一种miRNA循环放大检测系统,该系统涉及红色发射碳量子点(CDs)以及聚多巴胺纳米球(PDANSs)。通过纳米材料与DNA的自组装,在激发光源410、542 nm的照射下,产生650、585 nm的荧光信号,通过荧光信号的关-开,可以实现对靶标miRNA-21循环放大的双荧光检测与细胞成像,极大提高检测的灵敏度与准确性。

血浆循环miRNA-126、miRNA-28-3p的表达与糖尿病的关系研究

目的探讨血浆中miRNA-126和miRNA-28-3p的表达与糖尿病(DM)的关系,并进行相关机制探讨。方法随机选取恩施土家族苗族自治州中心医院DM患者80例作为DM组,选取同期治疗的非DM患者80例作为对照组,采用qRT-PCR检测其血浆中循环miRNA-126和miRNA-28-3p的表达水平,并对其靶基因、基本生物学功能和相关lncRNA和circRNA进行生物信息学预测。结果 DM患者血浆中miRNA-126的表达水平(0.115 0±0.014 4)较对照组患者(0.001 9±0.000 6)明显升高,差异具有极显著性统计学意义(P<0.01);DM患者血浆中miRNA-28-3p的表达水平(0.138 6±0.017 24)较对照组患者(0.000 6±0.000 05)明显升高,差异具有极显著性统计学意义(P<0.01);miRNA-126与miRNA-28-3p的Pearson相关系数为0.433 5(P<0.01);2组患者miRNA-126、miRNA-28-3p ROC曲线下面积差异均有极显著性统计学意义(P<0.01);生物信息学分析发现miRNA-126、miRNA-28-3p可能参与调控了胰岛素信号通路、胰岛素受体信号通路、胰岛素/胰岛素生长因子信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和血管生成等信号通路,并可能与多种lncRNA和circRNA都有关。结论血浆中循环miRNA-126与miRNA-28-3p可能通过调控胰岛素和胰岛素生长因子相关信号通路导致DM的发生,可以作为DM新型临床诊断生物标志物,并可能与多种lncRNA和circRNA有关。

狼疮性肾炎患者尿液miR-26a、miR-146a表达及对病情活动的预测价值分析

目的 分析狼疮性肾炎(LN)患者尿液miR-26a、miR-146a表达及对病情活动的预测价值。方法 选取2021年1月至2022年12月在本院住院的158例LN患者,按照系统性红斑狼疮活动指数(SLEDAI)将其分为LN稳定期组(88例)和LN活动期组(70例);选取同期本院60例体检健康者作为对照组。比较三组的一般资料及常规实验室指标;用多因素Logistic回归分析影响LN病情活动的因素;分析LN患者尿液miR-26a、miR-146a预测病情活动的效能。结果 LN活动期组和LN稳定期组的补体C3、补体C4、血红蛋白、白蛋白水平及尿液miR-26a、miR-146a表达量均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。LN活动期组的补体C4、血红蛋白、白蛋白水平及尿液miR-26a、miR-146a表达量均低于LN稳定期组,尿酸水平高于LN稳定期组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,尿液miR-26a、miR-146a均是影响LN患者病情活动的因素(P<0.05)。尿液miR-26a、miR-146a及二者联合预测LN患者病情活动的曲线下面积(AUC)分别为0.773、0.686、0.876;二者联合预测价值优于尿液miR-26a及miR-146a单独预测(P=0.037、0.000)。结论 miR-26a及miR-146a在LN患者尿液中表达降低,二者联合用于预测LN病情活动的价值更高。

高危型HPV阳性患者血清miRNA-26a表达水平对宫颈癌的预测价值

目的:探讨高危型人乳头瘤病毒(HPV)阳性患者血清miRNA-26a(miR-26a)表达水平对宫颈癌的预测价值。方法:HPV16和(或)HPV18阳性的宫颈癌和良性病变患者各50例,采用实时荧光定量PCR检测患者血清和宫颈组织中miR-26a的表达水平。结果:宫颈癌患者血清和宫颈组织中miR-26a的表达水平均低于良性病变患者(P<0.05)。宫颈癌患者血清和宫颈组织中miR-26a的表达水平呈正相关(r P=0.535,P<0.001)。利用血清miR-26a表达水平鉴别诊断HPV16和(或)HPV18阳性的宫颈癌和良性病变患者,ROC曲线下面积为0.887(95%CI=0.808~0.941),诊断界点取3.94时,敏感度为78.0%,特异度为88.0%。结论:血清miR-26a表达水平对高危型HPV阳性的宫颈癌具有一定的预测价值。

miRNA-26b-3p通过靶向STAT3调控食管鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移

目的:观察miR-26b-3p在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达水平及其对ESCC细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并探讨其分子调控机制。方法:选取河北医科大学第四医院2018年4月1日至2018年12月25日手术切除的ESCC组织及相应癌旁组织各60例,利用qPCR法检测ESCC组织、癌旁组织和ESCC细胞中miR-26b-3p的表达。选取miR-26b-3p表达水平较低的ESCC细胞TE1和KYSE150,转染miR-26b-3p mimic,并设立阴性对照。利用细胞增殖实验、划痕愈合实验和Transwell实验检测过表达miR-26b-3p对TE1和KYSE150细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。荧光素酶报告基因实验检测miR-26b-3p与STAT3的3’UTR靶点部位的结合情况。随后同时转染miR-26b-3p mimic和pcDNA3.0-STAT3,利用细胞增殖实验、划痕愈合实验和Transwell实验检测STAT3是否可逆转过表达miR-26b-3p对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。qPCR和WB法检测甲基化酶抑制剂5-Aza-DC对ESCC细胞甲基化的影响和miR-26b-3p与STAT3表达的影响。结果:miR-26b-3p在ESCC组织中的表达低于癌旁组织(P<0.01),其在ESCC细胞TE1、KYSE150和LYSE170中表达水平显著低于人正常食管上皮细胞HEEC(均P<0.01)。与miR-26b-3p NC组相比,miR-26b-3p mimic转染可明显上调TE1和KYSE150细胞中miR-26b-3p的表达(均P<0.01),但可明显抑制两种细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05或P<0.01)。荧光素酶报告基因实验结果表明,在TE1和KYSE150细胞中,miR-26b-3p明显抑制了野生型STAT3载体的荧光素酶活性(P<0.05或P<0.01),而突变型的荧光素酶活性不受影响。同时转染miR-26b-3p mimic和pcDNA3.0-STAT3可部分逆转miR-26b-3p mimic对TE1和KYSE150细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用(P<0.05或P<0.01)。5-Aza-DC处理后,TE1和KYSE150细胞中miR-26b-3p表达上调(均P<0.01)、STAT3 mRNA和蛋白水平降低(P<0.05),miR-26b-3p呈现去甲基化状态。结论:miR-26b-3p的启动子高甲基化导致其在ESCC组织和细胞中的表达下调,其作为抑癌因子可通过靶向STAT3而抑制ESCC细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

冠状动脉严重狭窄患者血浆miRNA-195表达及其与侧支循环形成的关系

目的探讨冠状动脉严重狭窄患者血浆mi RNA-195表达及其与侧支循环形成的关系。方法选取2016年3月至2017年5月期间190例接受选择性冠状动脉造影检查的患者作为研究对象,根据Rentrop分级将患者分为侧支循环不良组(90例)与侧支循环良好组(100例),比较两组患者的血浆mi RNA-195和VEGF水平,分析所有入选者血浆mi RNA-195和VEGF水平的相关性以及血浆mi RNA-195和Gensini积分的相关性。结果 (1)侧支循环良好组的血浆mi RNA-195和VEGF水平均明显高于侧支循环不良组,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)冠心病患者血浆mi RNA-195与VEGF水平呈正相关性(r=0.628,P=0.022);(3)冠心病患者血浆mi RNA-195与Gensini积分呈正相关性(r=0.765,P=0.013)。结论冠状动脉严重狭窄患者侧支循环的形成过程中,mi RNA-195可能是通过调控VEGF参与了新生血管的生成,可以尝试将其作为预测侧支循环形成的生物标记物供临床参考。

MiRNA-26a通过调控结缔组织生长因子缓解血管平滑肌细胞的钙化

目的探究miRNA-26a调控结缔组织生长因子对血管平滑肌细胞钙化的作用。方法将细胞分为对照组、模型组、模型+AR234960组、AR234960+miR-26a mimic组和miR-26a mimic组。对照组细胞正常培养基培养,模型组VSMC细胞诱导钙化,模型+AR234960组的VSMC细胞诱导钙化后加入AR234960激动剂干预,AR234960+miR-26a mimic组的VSMC细胞诱导钙化后用AR234960激动剂和miR-26a mimic处理,miR-26a mimic组的VSMC细胞诱导钙化后转染miR-26a mimic。茜素红染色测定各组细胞钙化沉积;试剂盒检测各组细胞碱性磷酸酶(ALP)活性;荧光定量PCR和Westernblot检测各组细胞miR-26a、OPG、OPN、BMP-2、Collagen II基因和蛋白表达情况。双荧光素酶基因验证miR-26a与CTGF的结合。结果平滑肌A7r5细胞钙化后,miR-26a的表达随着钙化时间的增加而降低(P<0.05),而CTGF的表达随钙化时间的增加而增加(P<0.05)。茜素红染色结果显示,AR234960能够增加细胞的钙化程度,而miR-26a mimic能够减轻细胞钙化。与对照组相比,模型组ALP活性、OPN、BMP-2、Collagen IImRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05),OPG mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,模型+AR234960组上述指标均无显著差异(P>0.05),而miR-26a mimic组ALP活性、OPN、BMP-2、Collagen IImRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05),OPG mRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05);与miR-26a mimic组相比,AR234960+miR-26a mimic组ALP活性、OPN、BMP-2、Collagen IImRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05),OPG mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05)。双荧光素酶基因检测结果显示,miR-26a-inhibitor组CTGF 3'-UTR野生型中相对荧光素酶活性较miR-26a-mimic组显著升高(P<0.05)。结论miRNA-26a能够有效降低细胞中ALP活性及OPN、BMP-2、Collagen II的表达,同时增加钙化细胞中OPG水平,为miRNA-26a通过调控CTGF水平进而对缓解血管平滑肌细胞钙化提供了理论依据。

循环miRNA-210的表达与胎儿生长受限的相关性分析

目的分析miRNA-210与胎儿生长受限的相关性,阐明循环中miRNA-210在胎儿生长受限发病机制中的作用,为胎儿生长受限的早期诊断及病理机制提供新的生物学标志物。方法选择2015年1月至2016年1月在扬州市妇幼保健院分娩的产妇,采取随机原则,选取符合胎儿生长受限孕足月分娩(包括顺产及剖宫产)的30例孕妇为胎儿生长受限组,选取同期足月分娩正常体重新生儿的孕妇30例为对照组,采集两组孕妇外周血,提取RNA采用Trizol法,Real Time-PCR分别测定胎儿生长受限组和对照组循环中miRNA-210的表达水平与选择内参基因U6表达的相对值,分析miRNA-210与胎儿生长受限的相关性。结果胎儿生长受限组与对照组产妇年龄、孕前体重、孕周比较无明显差异(t值分别为0.84、0.74、0.48,均P>0.05),但胎儿生长受限组新生儿体重明显低于对照组,差异有统计学意义(t=8.56,P<0.01)。胎儿生长受限组miRNA-210的表达水平为4.58,与对照组相比,表达明显增加(t=7.43,P<0.01)。miRNA-210可作为一个潜在的生物学标志物来区分胎儿生长受限及正常发育儿。结论胎儿生长受限组循环中miRNA-210的表达水平明显升高,miRNA-210可能参与了胎儿生长受限的发病,循环中miRNA-210可作为胎儿生长受限诊断的生物标志物。

miRNA-26a在良、恶性腹水鉴别诊断中的意义

目的探讨miRNA-26a在良、恶性腹水鉴别诊断中的意义。方法收集北京大学深圳医院2011年9月～2014年3月门诊及住院患者60例,包括20例肝硬化腹水患者(肝硬化腹水组),20例结核性腹水患者(结核性腹水组),20例恶性腹水患者(恶性腹水组)。采用实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测并比较各组血清miRNA-26a、甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原125(CA125)的表达。结果恶性腹水组血清CA125表达高于结核性腹水组和肝硬化腹水组,但差异无统计学意义(P>0.05)。AFP、miRNA-26a在结核性腹水组及肝硬化腹水组表达差异无统计学意义(P>0.05);AFP和miRNA-26a在恶性腹水组患者血清表达明显高于结核性腹水组和肝硬化腹水组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miRNA-26a水平将来有可能有助于良、恶性腹水的鉴别诊断。

miRNA-126、miRNA-26a在食管癌中的表达及与患者临床特征的关系分析

目的检测miRNA-126、miRNA-26a在食管癌患者中的表达水平,并分析miRNA-126、miRNA-26a表达情况与食管癌临床特征的关系。方法收集113例食管癌手术切除患者的食管癌组织和癌旁组织,分析miRNA-126和miRNA-26a在食管癌组织和癌旁组织中的相对表达量及相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA-126、miRNA-26a的预测价值。结果食管癌组织中miRNA-126和miRNA-26a相对表达量均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。ROC曲线分析结果显示,当约登指数最大时,对应的miRNA-126和miRNA-26a为0.92和2.03,可作为诊断食管癌的临界值。miRNA-126和miRNA-26a在食管癌组织中的表达水平呈正相关(r=0.757,P﹤0.01)。不同分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况的食管癌患者中miRNA-126和miRNA-26a表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论 miRNA-126、miRNA-26a在食管癌患者中呈低表达,且与食管癌分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关,可反映病情严重程度和预后。

血浆Ki67联合miRNA-26b检测诊断肝细胞癌价值分析

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者血浆Ki67和miRNA-26b水平变化,分析其诊断效能。方法我院收治的HCC患者90例和乙型肝炎肝硬化患者60例,采用RT-qPCR检测血浆Ki67和miRNA-26b水平,采用ROC曲线分析血浆Ki67和miRNA-26b水平诊断HCC的效能。结果HCC患者血浆Ki67水平为【1.6(1.1~2.2)】,显著高于肝硬化组【0.4(0.1~1.2),P<0.05】;HCC患者血浆miRNA-26b水平为【0.7(0.3~1.4)】,显著低于肝硬化组【2.0(1.4~3.0),P<0.05】;不同肿瘤Edmonson分级、早期是否复发和肿瘤转移患者血浆Ki67和miRNA-26b水平分布差异具有统计学意义(P<0.05);血浆Ki67诊断HCC的ROC曲线下面积为0.8(95%置信区间为0.7~0.9),血浆miRNA-26b诊断HCC的ROC曲线下面积为0.8(95%置信区间为0.8~0.9)。ROC曲线结果显示,血浆Ki67和miRNA-26b水平诊断HCC的灵敏度分别为55.6%和70.0%,特异度分别为95.0%和83.3%,血浆Ki67和miRNA-26b串联试验诊断的特异度为96.7%,并联试验的灵敏性为87.8%,两指标联合诊断HCC的准确性为85.3%,显著高于单个指标的71.3%和75.3%。结论联合检测血浆Ki67和miRNA-26b水平可帮助诊断HCC,值得临床进一步探讨。

老年冠状动脉严重狭窄患者血浆miRNA-195表达及其与侧支循环形成的关系

目的探讨老年冠状动脉严重狭窄患者血浆miRNA-195表达及其与侧支循环形成的关系。方法68例老年冠心病患者作为老年冠心病组,入组患者均经冠状动脉造影检查且冠状动脉狭窄程度达95%以上,根据Rentrop分级将其分为侧支良好亚组(Rentrop分级≥2)32例和侧支不良亚组(Rentrop分级≤1)36例;另选取同期72例体检健康者作为对照组。采用RT-PCR检测两组的血浆miR-195表达水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)的浓度,相关性应用Pearson相关分析,影响因素采用多因素Logistic回归进行分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆miR-195水平对冠状动脉侧支循环形成的辨别能力。结果老年冠心病组血浆中miRNA-195及VEGF表达水平均明显低于对照组(P<0.05),且侧支不良亚组明显低于侧支良好亚组和对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果提示,血浆miRNA-195表达水平与老年冠状动脉严重狭窄患者侧支循环呈正相关(r=0.615,P=0.003)。多因素Logistic回归分析提示,血浆miRNA-195水平和Gensini积分是影响老年冠状动脉严重狭窄患者侧支循环的危险因素。血浆miRNA-195判断老年冠状动脉严重狭窄患者侧支循环形成的灵敏度为83.29%,特异度为94.76%。结论miRNA-195在老年冠状动脉严重狭窄患者血浆中表达水平相对较低,且侧支不良亚组明显低于侧支良好亚组,其可能成为辨别老年冠状动脉侧支循环形成的一个评价指标。

循环型microRNA-26a及其靶基因PTEN与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨循环型micro RNA-26a(mi R-26a)及靶基因PTEN在系统性红斑狼疮(SLE)的表达,以及在SLE发生、发展中可能发挥的作用。方法选取36例SLE和10例健康体检者血液标本,实时荧光定量聚合酶链反应检测血清mi R-26a、外周血单个核细胞(PBMC)中PTEN的表达,统计分析mi R-26a、PTEN与SLE临床资料的相关性,利用双荧光素酶报告系统验证PTEN是否为mi R-26a的靶基因。结果 SLE患者血清mi R-26a m RNA的表达高于健康人群(P<0.05),PBMC中PTEN m RNA的表达低于健康人群(P<0.05)。SLE患者mi R-26a、PTEN的表达水平与C3、抗ds-DNA、红细胞沉降率、狼疮活动指数相关。mi R-26a转染Ba F3细胞后,PTEN表达下调,PI3K表达上调,转染组荧光素酶活性下降(P<0.05)。结论 SLE患者血清中过表达的mi R-26a可能通过下调靶基因PTEN,上调PI3K/AKT信号通路,参与SLE的发生、发展。

血清中MiRNA-26a检测在早期前列腺癌诊断中的意义

前列腺癌（prostate cancer,PCa）在欧美国家尤其非洲裔黑人最常见;在亚洲及前苏联国家较少见。近年来,我国的经济增长迅速,前列腺癌的发病率增加。随着我国社会逐渐进入老年化,前列腺癌发病率必然加大。前列腺癌早期通常常没有症状,只有当肿瘤阻塞尿道,膀胱颈时,发生类似下尿道梗阻或刺激症状。因此,前列腺癌的早期诊断尤为重要。小分子RNA（miRNA）的发现,为前列腺癌的研究带来希望。研究证实,人类的众多生理、病理过程都与miRNA有关,包括前列腺癌的发生发展。本实验中,

miRNA-26a在支气管哮喘患儿及哮喘小鼠模型中高表达

目的:探讨miRNA-26a在支气管哮喘患儿及支气管哮喘小鼠模型中的表达。方法:应用real-time PCR法检测支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞中miRNA-26a与正常儿童的表达差异。采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导支气管哮喘小鼠模型,通过检测肺泡灌洗液(BALF)中细胞数及组织病理验证模型建立。应用real-time PCR法检测支气管哮喘小鼠模型肺组织miRNA-26a与对照组的表达差异。采用Western blot法检测小鼠肺组织GSK-3β的表达差异。结果:支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞miRNA-26a显著高于正常对照组。OVA诱导的支气管哮喘小鼠模型组BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞数显著高于正常对照组。组织病理显示支气管哮喘模型组炎症细胞浸润明显高于正常对照组。支气管哮喘小鼠模型组肺组织miRNA-26a显著高于正常对照,GSK-3β蛋白水平明显低于正常对照组。结论:miRNA-26a在支气管哮喘患儿及支气管哮喘小鼠模型中高表达。

miRNA-26b/PTEN/TDP-43信号通路在视网膜母细胞瘤Y79细胞株增殖中的作用研究

目的探究miRNA-26b通过PTEN/TDP-43信号通路调节视网膜母细胞瘤Y79细胞株增殖的潜在机制。方法采用Q-PCR的方法,测定miRNA-26b的水平。采用转染TDP-43-siRNA或PTEN-cDNA的方法,分别下调TDP-43或上调PTEN。采用细胞计数的方法统计Y79细胞在处理miRNA-26b抑制剂或激活剂、转染TDP-43-siRNA、转染PTEN-cDNA后0 h、12 h、24 h时的细胞密度。采用免疫印迹的方法检测Y79细胞在不同处理情况下的TDP-43和PTEN的水平。结果抑制miRNA-26b可抑制Y79细胞细胞生长,反之,激活miRNA-26b促进Y79细胞细胞生长。抑制miRNA-26b可下调TDP-43、上调PTEN,激活miRNA-26b可上调TDP-43、下调PTEN;抑制TDP-43或过表达PTEN可抑制Y79细胞生长。过表达PTEN可下调TDP-43水平;在过表达PTEN的情况下激活miRNA-26b,TDP-43水平无显著变化,Y79细胞生长速度无显著差异。结论miRNA-26b可通过上调PTEN反向调节TDP-43水平,进而抑制Y79细胞的增殖。

miRNA-26b靶向IL-6/STAT3信号通路诱导肝癌细胞自噬的实验研究

目的探讨miRNA-26b(miR-26b)在肝癌细胞自噬调控中的作用及可能分子机制。方法采用荧光定量PCR(QPCR)检测人正常肝细胞系HL-7702和人肝癌细胞系Hep G2、Hep-3B、Bel-7402及SSMC-7721中miRNA-26b的表达情况。双荧光素酶基因报告实验评价miR-26b对IL-6的靶向调控作用。向Hep G2细胞转染miR-26b模拟物mimics(转染组)和阴性对照NC(阴性对照组),Western blotting检测两组IL-6/STAT3信号通路以及自噬相关蛋白的表达。向Hep G2细胞转染IL-6 siRNA1和IL-6 siRNA2,Western blotting检测干扰IL-6后STAT3激活及自噬相关蛋白表达。结果 Hep G2、Hep-3B、Bel-7402细胞系中miR-26b表达水平分别为0.34±0.063、0.69±0.092、0.57±0.086,显著低于正常肝细胞系HL-7702的1.15±0.189,差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-26b可抑制野生型IL-6 3’UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型IL-63’UTR-MUT的荧光素酶活性无影响。转染miR-26b mimics后IL-6、p-STAT3相对表达量显著降低(P<0.05),诱导自噬相关蛋白Beclin1相对表达量和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著升高(P<0.05)。沉默IL-6导致p-STAT3相对表达量显著降低(P<0.05),诱导自噬相关蛋白Beclin1相对表达量和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著升高(P<0.05)。结论 miRNA-26b靶向抑制IL-6/STAT3信号通路的激活,进而诱导肝癌细胞自噬发生。

miRNA-26a-5p、miRNA-135a-5p在子痫前期发生中的作用及机制研究

目的探讨miRNA-26a-5p、miRNA-135a-5p在子痫前期发生中的作用及其机制。方法收集2018年7月—2019年8月海南省妇女儿童医学中心妇产科收治的子痫前期孕妇30例(观察组)和健康孕妇30例(对照组)的血清及胎盘组织,采用荧光定量PCR法检测2组血清中miRNA-26a-5p、miRNA-135a-5p表达情况;采用免疫组织化学方法检测胎盘组织中E-钙黏蛋白(E-cad)的表达情况。结果观察组血清中miRNA-26a-5p、miRNA-135a-5p表达明显高于对照组(t/P=198.035/0.000,216.658/0.000);观察组胎盘E-cad蛋白表达明显高于对照组(t=8.207,P=0.000)。经Pearson相关性分析显示,血清miRNA-26a-5p、miRNA-135a-5p表达与胎盘中E-cad表达均呈现正相关(r/P=0.531/0.001,0.543/0.004)。结论与健康孕妇相比,子痫前期孕妇血清中miRNA-26a-5p、miRNA-135a-5p相对表达量较高,可能通过调控胎盘E-cad的表达参与子痫前期发病。