mCTA侧支循环评分及血清microRNA-134、VEGF、bFGF水平预测AIS大脑中动脉闭塞患者预后的价值

目的 探究多时相计算机断层扫描血管成像(mCTA)侧支循环评分及血清microRNA-134(miR-134)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平预测急性缺血性脑卒中(AIS)大脑中动脉闭塞患者预后的价值。方法 选取2020年2月—2023年2月在江苏大学附属武进医院住院治疗的AIS大脑中动脉闭塞患者108例。检测患者治疗期间的mCTA侧支循环评分及血清miR-134、VEGF、bFGF水平,并进行随访。根据患者出院后3个月的改良Rankin量表评分,分为预后良好组(改良Rankin量表评分≤2分,47例)、预后不良组(改良Rankin量表评分> 2分,61例),对可能影响患者预后的因素进行分析,并绘制ROC曲线分析其诊断价值。结果 预后不良组最终梗死体积大于预后良好组(P <0.05),mCTA侧支循环评分低于预后良好组(P <0.05);预后不良组miR-134相对表达量高于预后良好组(P <0.05),VEGF、bFGF水平均低于预后良好组(P <0.05)。预后不良组年龄、低密度脂蛋白水平高于预后良好组(P <0.05)。多因素一般Logistic回归分析结果显示:mCTA侧支循环评分[OR=0.804(95%CI:0.729,0.974)]、VEGF[OR=0.618(95%CI:0.397,0.963)]、bFGF[OR=0.608(95%CI:0.402,0.919)]为AIS大脑中动脉闭塞患者预后良好的保护性因素(P <0.05);miR-134[OR=1.941(95%CI:1.802,3.480)]、低密度脂蛋白[OR=1.349(95%CI:1.051,1.730)]是AIS大脑中动脉闭塞患者预后不良的危险因素(P <0.05)。ROC曲线分析结果表明,mCTA侧支循环评分、miR-134、VEGF、bFGF预测AIS大脑中动脉闭塞患者预后不良的曲线下面积分别为0.843、0.946、0.937和0.892,敏感性分别为7.66%(95%CI:0.695,0.837)、9.36%(95%CI:0.900,0.972)、8.72%(95%CI:0.823,0.921)、7.23%(95%CI:0.661,0.785),特异性分别为83.6%(95%CI:0.770,0.902)、82.0%(95%CI:0.770,0.870)、86.9%(95%CI:0.818,0.920)、93.4%(95%CI:0.896,0.972)。结论 预后不良患者最终梗死体积较大,mCTA侧支循环评分较低,血清miR-134、VEGF和bFGF水平较低。mCTA侧支循环评分、血清miR-134、VEGF、bFGF水平对AIS大脑中动脉闭塞患者预后不良有较好的预测价值,可作为预后评估的指标。

母血microRNA-520a水平与胎儿心脏缺陷关系的研究

目的本研究旨在评估母体血循环microRNA-520a作为先天性心脏缺陷胎儿非侵入性诊断标志物的临床应用价值。方法 44例先天性心脏缺陷胎儿孕妇为研究组,34例正常胎儿孕妇做为对照组。定量RT-PCR检测两组孕妇血浆中的microRNA-520a表达水平。结果 microRNA-520a在先天性心脏缺陷胎儿孕妇血浆中的表达水平与正常对照组相比显著上升(P<0.001),ROC特征曲线下面积(AUC)为0.92(95%可信区间为0.86-0.97;P<0.001)。研究显示,microRNA-520a的血浆表达水平可以相当准确地诊断妊娠期胎儿的先天性心脏缺陷。结论本研究的结果表明,microRNA-520a在先天性心脏缺陷胎儿孕妇的血浆中表达水平显著上升。母体血循环microRNA-520a表达水平可能作为先天性心脏缺陷胎儿的非侵入性诊断标志物。

循环microRNA-499与肌钙蛋白T早期诊断急性心肌梗死

【目的】比较分析心肌特异性microRNA-499(miR-499)与心肌肌钙蛋白T(cTnT)在早期诊断急性心肌梗死(AMI)中的价值。【方法】收集67名AMI病人和32名健康人的血浆标本,通过定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血浆中miR-499的含量,同时通过电化学发光法检测血浆cTnT的变化。【结果】AMI病人血浆中miR-499的含量较健康人显著升高(P<0.01),而当这些AMI病人康复后出院时miR-499的含量已下降到基线水平。MiR-499含量的变化与研究病例的自身特征无相关性(P>0.05)。另外,受试者工作特征曲线(ROC)分析表明,miR-499在诊断AMI方面具有明确的心肌特异性和敏感性,但并不优于cTnT。【结论】循环miR-499可作为AMI诊断的生物标志物,但在AMI早期诊断价值上不优于cTnT。

冠心病患者血浆中microRNA-145表达与冠状动脉侧支循环形成的相关性研究

目的探讨冠心病患者血浆中microRNA-145(miRNA-145)表达与冠状动脉侧支循环(CCC)形成的相关性。方法根据冠状动脉造影结果入选80例主要冠状动脉中至少一支直径狭窄≥90%的冠心病患者,按照Rentrop分级方法对CCC进行分级,其中0级24例,1级19例,2级20例,3级17例。Real-time PCR测定血浆中miRNA-145的相对表达,酶联免疫吸附法检测血浆中血管内皮生长因子(VEGF)水平,Gensini积分方法评价冠状动脉病变程度。结果随着CCC分级的增加,血浆中VEGF水平亦随之升高,miRNA-145相对表达随之下降。控制miRNA-145相对表达水平后,血浆中VEGF水平与CCC的建立呈正相关(r=0.524,P<0.01),控制血浆中VEGF水平后,miRNA-145相对表达与CCC的建立呈负相关(r=-0.669,P<0.01),同时miRNA-145相对表达水平与血浆中VEGF水平呈负相关(r=-0.529,P<0.01)。结论在冠心病患者中,CCC形成良好的患者血浆中miRNA-145相对表达低于CCC形成不良患者,表明miRNA-145在CCC的建立中可能起重要作用。

MicroRNA-520a用于异位妊娠血清学诊断的研究

目的评估microRNA-520a作为异位妊娠(ectopic pregnancy,EP)患者非侵入性血清学诊断标志物的临床应用价值。方法收集2017年1月至2018年12月首都医科大学附属北京妇产医院185例孕妇的病例资料及其首次就诊送检的血液标本,包括64例宫腔妊娠(viable intrauterine pregnancy,VIP)、48例自然流产(spontaneous abortion,SA)以及73例EP,采用定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测患者血浆中microRNA-520a的表达水平。同时检测血清绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)和孕酮水平,并比较各组间差异。采用ROC曲线分析microRNA-520a浓度作为EP血清学诊断标志物的有效性。结果microRNA-520a在EP组血浆中的表达水平(1.88±0.50)与VIP组(2.67±0.61,P=0.000)及SA组(2.77±0.50,P<0.001)比较,均显著下降。用于VIP与EP的鉴别诊断,ROC曲线的AUC为0.82(95%CI:0.68~0.97,P=0.001)。结论异位妊娠者血浆标本中microRNA-520a表达水平显著下降,microRNA-520a可作为血清学标志物应用于早期EP诊断。

循环型microRNA-26a及其靶基因PTEN与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨循环型micro RNA-26a(mi R-26a)及靶基因PTEN在系统性红斑狼疮(SLE)的表达,以及在SLE发生、发展中可能发挥的作用。方法选取36例SLE和10例健康体检者血液标本,实时荧光定量聚合酶链反应检测血清mi R-26a、外周血单个核细胞(PBMC)中PTEN的表达,统计分析mi R-26a、PTEN与SLE临床资料的相关性,利用双荧光素酶报告系统验证PTEN是否为mi R-26a的靶基因。结果 SLE患者血清mi R-26a m RNA的表达高于健康人群(P<0.05),PBMC中PTEN m RNA的表达低于健康人群(P<0.05)。SLE患者mi R-26a、PTEN的表达水平与C3、抗ds-DNA、红细胞沉降率、狼疮活动指数相关。mi R-26a转染Ba F3细胞后,PTEN表达下调,PI3K表达上调,转染组荧光素酶活性下降(P<0.05)。结论 SLE患者血清中过表达的mi R-26a可能通过下调靶基因PTEN,上调PI3K/AKT信号通路,参与SLE的发生、发展。

参芪化瘀方对肝癌患者血清microRNA-139和循环肿瘤细胞水平的影响研究

目的:探讨参芪化瘀方对肝癌患者的疗效及血清microRNA-139和循环肿瘤细胞(CTCs)水平的影响。方法:选择医院收治的80例原发性肝癌患者,随机分为对照组与研究组各40例。对照组给予奥沙利铂、5-氟尿嘧啶及醛氢叶酸方案进行化疗,在此基础上,研究组给予参芪化瘀方治疗。比较两组治疗前及治疗4周、8周后中医证候积分、肝功、血清microRNA-139和CTCs水平变化,近期疗效及临床不良反应情况。结果:治疗4周、8周后,两组中医证候积分下降,且研究组更明显(P<0.05)。研究组总有效率(92.50%)明显高于对照组(77.50%)(P<0.05);治疗后,两组TBIL、ALT、AST及ALP升高,研究组TBIL、ALT、AST及ALP低于对照组(P<0.05)。治疗前,两组血清microRNA-139、CTCs比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周、8周后,研究组血清microRNA-139高于对照组及治疗前,CTCs低于对照组及治疗前(P<0.05);两组治疗期间呕吐、腹泻、脱发及血小板减少等临床不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:参芪化瘀方可明显改善血清中肝癌患者microRNA-139、CTCs的表达,临床疗效满意,可作为肝癌患者重要辅助治疗手段进行推广应用。

循环microRNA-21在实体肿瘤早期诊断中应用价值的研究进展

microRNA-21(miRNA-21或miR-21)位于染色体17q23.2的FRA17B脆性区域,具有自主调控基因转录的功能。临床研究表明,miR-21的异常表达与实体肿瘤的发生、发展、侵袭及预后相关,也是目前唯一经鉴定在肝癌、结直肠癌、胃癌、乳腺癌等实体肿瘤一致高表达的mi RNA。鉴于肿瘤组织取材困难、对机体创伤较大,miR-21检测不易在临床应用中推广,循环mi R-21以其取材方便、稳定性好、灵敏性和特异性高等优势已成为一种新型生物标记物,在肿瘤的早期诊断、预后及治疗过程的实时监控中具有潜在价值。本文对循环mi R-21在前列腺癌、肝癌、结肠癌、乳腺癌、胃癌等多种实体肿瘤的早期筛查、诊断中的价值予以综述。

NEUMAG(BALTIC520)卷曲机温水循环系统缺陷原因分析及改进

文章分析了NEUMAG(BALTIC520)卷曲机原设计缺陷和结构特点,对卷曲机温水循环系统所存在的问题及其产生的原因进行了深入的分析,提出了卷曲机温水循环系统技术改进的可行性,制定了详细的改进方案并予以实施。

血浆循环microRNA-126在非小细胞肺癌诊断中的应用

目的探讨血浆循环microRNA-126浓度与非小细胞肺癌(NSCLC)的相关性及其诊断价值。方法采用实时荧光定量PCR方法检测130例NSCLC患者和作为对照的170例健康人的血浆循环microRNA-126浓度。结果对照组血浆循环microRNA-126浓度显著高于NSCLC组(P<0.01)。血浆循环microRNA-126浓度ROC曲线下面积(area under theROC curve,AUC)为0.758,95%CI为0.704～0.811(P<0.01)。当血浆microRNA-126浓度为1051 fmol/L时,血浆microRNA-126对NSCLC诊断的特异度为90.0%,灵敏度为46.4%。其浓度与患者的年龄、性别、吸烟,病理分型和分期均无显著的相关性(P>0.05)。结论血浆循环microRNA-126浓度对NSCLC有一定的临床诊断意义,联合其他血浆microRNA或肿瘤标志物,如神经元特异性烯醇化酶、癌胚抗原和细胞角蛋白片段21-1,可以弥补单一检测的局限性,以提高肺癌的阳性检出率,为临床提供可靠的依据。

MicroRNA-520家族与血瘀证相关性探讨

从分子生物学的角度探讨microRNA-520家族与血瘀证的相关性,认为microRNA-520家族是通过介导炎症反应、免疫紊乱、NF-κB信号通路调节血瘀证的形成过程,可以作为血瘀证的生物标记物,为中医药防治血瘀证提供新的治疗依据,,具有重要的临床应用价值。

MicroRNA-520b靶向白介素-2调节肝癌细胞生长、转移和药物敏感性研究

目的:研究microRNA-520靶向调节IL-2对肝癌细胞生长、转移和药物敏感性的影响。方法:选择并收集原发性肝细胞癌患者术后肝癌及其癌旁组织,采用RT-PCR检测miR-520b表达,采用免疫组化的方法检测IL-2的表达。培养肝癌细胞系HepG2,将细胞分为对照组、空白对照组和miR-520b过表达组(简称过表达组),空白对照组和过表达组细胞分别转染miR-NC及miR-520b mimics,3组细胞均加入重组IL-2培养12 h。检测miR-520b、IL-2的表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-520b对IL-2的靶向调控作用。采用MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell实验检测细胞转移和侵袭能力。检测细胞药物敏感性。结果:肝癌组织中miR-520b和IL-2表达均显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);体外模型中,过表达组细胞野生型IL-2的3′UTR的荧光素酶报告基因的表达较空白对照组降低(P<0.05)。转染miR-520b后,过表达组细胞生长率较对照组和空白对照组显著降低,凋亡率则显著增加,细胞转移和侵袭能力降低(P<0.05);miR-520b联合IL-2培养肝癌细胞的细胞增殖率较单独使用IL-2或miR-520b低(P<0.05)。结论:micro-520b可以靶向调节肝癌细胞中IL-2的表达,抑制癌细胞的生长、转移,增强药物敏感性,micro-520b对肝癌的诊断和治疗具有潜在的价值。

丁苯酞软胶囊配合针刺星状神经节治疗后循环缺血的疗效观察及对患者氧化应激机制的干预作用

目的探讨丁苯酞软胶囊配合针刺星状神经节治疗后循环缺血的疗效观察及对患者氧化应激机制的干预作用。方法选取2016年3月—2019年3月河北省沧州中西医结合医院128例后循环缺血患者作为研究对象,采用随机数字表法分为对照A组、对照B组、观察组及空白对照组,每组32例。对照A组予丁苯酞软胶囊治疗,对照B组予针刺星状神经节治疗,观察组予丁苯酞软胶囊联合针刺星状神经节治疗,空白对照组除口服阿司匹林外不再采用其他治疗。比较4组的临床总有效率、不良反应发生率,美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,Barthel指数,脑血循环指标[颈内动脉(ICA)、椎动脉(VA)、基底动脉(BA)血流速度与脑血管阻力]。采用酶联免疫吸附试验检测4组患者血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平并比较。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测4组患者microRNA-21(miR-21)、microRNA-146a(miR-146a)mRNA相对表达量并比较。结果观察组临床总有效率(90.63%)高于对照A组(68.75%)、对照B组(65.63%)及空白对照组(43.75%)(P<0.05);疗程结束后NIHSS评分低于对照A组、对照B组、空白对照组(P<0.05);Barthel指数高于对照A组、对照B组、空白对照组(P<0.05);观察组疗程结束后ICA、VA、BA血流速度,SOD、CAT水平高于对照A组、对照B组、空白对照组(P<0.05),脑血管阻力、血清MDA、miR-21、miR-146a mRNA相对表达量低于对照A组、对照B组、空白对照组(P<0.05)。结论丁苯酞软胶囊配合针刺星状神经节治疗后循环缺血,可改善患者脑血循环与神经功能,抑制氧化应激,提高患者日常生活能力,疗效良好。

地奥心血康软胶囊对急性ST段抬高型心肌梗死患者循环微RNA-92a表达的影响

目的探讨地奥心血康软胶囊对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者循环微RNA-92a(miR-92a)表达的影响。方法 STEMI患者50例按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组25例,两组患者均在急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后给予常规药物治疗,治疗组在此基础上加用地奥心血康软胶囊,对照组未加用地奥心血康软胶囊。对比两组患者常规药物治疗前和治疗4周后循环miR-92a表达量、左室射血分数(LVEF)变化。结果治疗后治疗组miR-92a表达量水平明显低于治疗前(P<0.05),亦低于对照组治疗后(P<0.05)。治疗后两组LVEF均明显高于治疗前(P<0.05),治疗前、治疗后两组LVEF分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后随访3个月,治疗组主要不良心脏事件(MACEs)发生率为13.0%,对照组为34.8%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 STEMI患者PCI后应用地奥心血康软胶囊治疗,可下调外周血循环miR-92a表达水平,未增加MACEs发生率,无明显不良反应。

冠心病患者血浆中miR-126水平与其冠状动脉侧支循环系统形成及预后的关系

目的分析冠心病患者血浆中miR-126水平与其冠状动脉侧支循环系统形成及预后的关系。方法选取确诊为冠心病患者80例作为观察组,根据CC分级判断患者冠状动脉侧支循环是否良好,并将患者分为侧支循环良好(n=36)和侧支循环不良(n=44),选择同时期体检的适龄健康者50例的血液标本作为对照组。使用实时荧光定量PCR法检测所有研究对象血浆中的miR-126水平,并采用酶联免疫吸附法检测血浆中血管内皮生长因子(VEGF)水平。使用Spearman相关分析法分析冠心病患者miR-126水平和VEGF水平与其冠状动脉侧支循环系统形成的关系,并以冠状动脉造影结果为金标准评估miR-126水平预测冠状动脉侧支循环系统形成的灵敏度和特异度。结果对照组患者血浆中miR-126水平高于观察组(P<0.05),而VEGF水平明显低于观察组(P<0.05);冠心病侧支循环良好的患者血浆中miR-126水平高于侧支循环不良患者(P<0.01),而VEGF水平明显低于侧支循环不良患者(P<0.01);患者血浆中miR-126水平与冠心病患者侧支循环程度呈正相关(r=0.524,P<0.01),患者血浆中VEGF水平与冠心病患者侧支循环程度呈负相关(r=-0.365,P<0.01);miR-126水平预测冠状动脉侧支循环系统形成的灵敏度为83.33%,特异度为86.36%。结论冠心病患者miR-126表达量低于正常人群,miR-126水平降低可能导致VEGF水平上升影响冠心病发病和病程进展,故检测血液循环miR-126水平可作为冠心病患者预后情况的评估指标之一。

Nix和miR-520h对神经胶质瘤发生的影响及相互作用

目的通过综合分析肿瘤标本中基因和蛋白表达,及体外生物学作用的检测,来评价胶质瘤中Nix蛋白的作用以及Nix蛋白与miR-520h的关系。方法选取46例胶质瘤标本,RT-PCR检测miR-520h基因的表达,Western blotting检测Nix蛋白的表达;培养U251胶质瘤细胞,Western blotting检测Nix蛋白的表达;构建靶向Nix基因的shRNA敲除U251细胞中Nix基因(Nix-kn),Western blotting检测Nix,IKKα,i-κBα和p-NF-κB/p65等蛋白的表达水平;has-miR-520h抑制剂转染U251细胞,Western blotting检测Nix,IKKα,i-κBα和p-NF-κB/p65等蛋白的表达水平。结果胶质瘤标本的基因和蛋白检测表明,miR-520h的高表达伴随着Nix蛋白的高表达;体外实验结果表明,与正常培养的U251相比,缺氧培养的U251细胞Nix表达较高;与Nix-kn组相比,Nix-wt组胶质瘤细胞Nix和p-NF-κB/p65表达均明显增高,而NF-κB活性抑制剂蛋白i-κBα表达降低;200 nmol/L的has-miR-520h抑制剂处理细胞后,与正常对照组比较,Nix蛋白表达显著减少,而p-NF-kappaB/p65蛋白表达显著增加。结论在神经胶质瘤的发生发展中miR-520h与Nix蛋白的表达相关;miR-520h可能通过促进Nix合成,从而成为一个强大的肿瘤激活剂。

复元醒脑汤对糖尿病脑梗死大鼠microRNA-503及CCNE1、CDC25A蛋白表达的影响及对促进血管新生的实验研究

目的观察复元醒脑汤对microRNA-503及CCNE1、CDC25A蛋白表达的影响,探讨复元醒脑汤促进糖尿病脑梗死血管新生的分子机制。方法 150只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、西药治疗组、中药治疗组,每组30只。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)后予以高能量高脂肪饲料喂养2周的方法复制糖尿病大鼠模型,制模后采用线栓法制备糖尿病脑梗死动物模型。完成造模后,中药治疗组灌胃复元醒脑汤;西药治疗组灌胃二甲双胍、尼莫地平;空白对照组、假手术组、模型组均灌胃等量的0.9%氯化钠注射液。各组连续灌胃14 d后处死取材。免疫荧光法检测脑梗死区域的血管新生、微循环观察仪检测脑梗死区域血管微循环状况、实时荧光定量PCR法检测脑组织microRNA-503、CCNE1、CDC25A基因表达水平,利用Western blotting检测CCNE1、CDC25A蛋白表达水平。结果与模型组相比,中药治疗组和西药治疗组的脑梗死区域都出现血管新生增多,血管管径增粗,血流加快,蛋白渗漏减少,少见白细胞黏附现象且中药治疗组优于西药治疗组;各实验组脑组织的CCNE1、CDC25A基因及蛋白表达水平由高到低依次为:空白对照组、假手术组、中药治疗组、西药治疗组、模型组。各实验组脑组织microRNA-503基因的表达水平由低到高依次是:空白对照组、假手术组、中药治疗组、西药治疗组、模型组,中药治疗组和西药治疗组均显著低于模型组(P <0.01)。结论复元醒脑汤通过上调CCNE1、CDC25A的表达,从而抑制microRNA-503的表达水平,达到促进梗死组织区域的血管新生,改善脑部微循环。

急性冠脉综合征病人microRNA-499水平变化的影响

目的探讨循环microRNA-499在急性冠脉综合征病人表达水平的变化及其与冠脉狭窄程度的关系。方法选择2015年1月—2015年8月山西医科大学第一医院心内科病人60例,均为以典型胸痛症状,首次就诊高度怀疑冠心病并行冠脉造影的病人。根据心电图变化、血心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平、冠脉造影结果分为无冠心病(No-CAD)组(n=20)、不稳定型心绞痛(UA)组(n=20)、急性心肌梗死(AMI)组(n=20)。受试者于入院后次日清晨空腹抽取肘静脉血5 mL,EDTA抗凝,1h内分离血浆并于-80℃冻存。采用SYBR法qrt-PCR检测血浆microRNA-499水平。所有病人在住院期间行冠脉造影术并根据造影结果进行Gensini评分。结果 3组病人基本资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与No-CAD组及UA组比较,AMI组病人血浆miR-499水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.001)。AMI组microRNA-499水平与cTnI、N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平呈正相关,与Gensini积分无相关性。结论心肌损伤时microRNA-499由心肌细胞释放进入血循环,可作为急性心肌梗死的检测指标。

循环microRNA-1268在肺癌血浆中检测分析及临床意义

目的:探讨循环microRNA-1268(miRNA-1268)在肺癌血浆中的表达情况,并分析其与临床病理特征的相关性及其在肺癌诊断及预后判断中的意义。方法:采用实时荧光定量PCR方法检测miRNA-1268在39例肺癌患者和作为对照组的39例正常人血浆中的相对表达量,并评估其临床意义。结果:肺癌血浆中miRNA-1268的表达水平明显高于正常人,差异有统计学意义;血浆循环miRNA-1268相对表达量ROC曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)为0.680,95%CI为0.562-0.799,取临界值0.054时,血浆miRNA-1268表达诊断肺癌的灵敏度为74.4%,特异度为59.0%;miRNA-1268的表达水平与肿瘤TNM分期相关,而与患者性别、年龄、吸烟、肿瘤大小、淋巴结转移、组织分型、CEA水平无相关性;Kaplan-Meier分析结果显示肺癌血浆中miR-1268高表达者生存时间明显低于低表达者,差异有统计学意义。结论:循环miRNA-1268在肺癌血浆中表达上调,对肺癌有一定的临床诊断及预后判断意义,可作为诊断肺癌和判断预后的一个新的标志物。

MicroRNA-520e通过靶向抑制AEG-1发挥抗结直肠癌特性

目的:探究MicroRNA-520e(miR-520e)在结直肠癌中的表达模式及其对细胞功能的影响。方法:采用qRT-PCR方法检测47例结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织中miR-520e和星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)的mRNA表达水平。将SW480细胞分为对照组、miR-520e-mimic组、NC-mimic组、miR-520e-inhibitor组、NC-inhibitor组、miR-520e-mimic+AEG-1-pcDNA3.1组和miR-520e-mimic+NC-pcDNA3.1组。通过MTT法检测SW480细胞的增殖,通过Annexin V-FITC/PI双染色试剂盒检测细胞凋亡,通过Transwell检测细胞迁移和侵袭,通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-520e和AEG-1的靶向关系,通过qRT-PCR或Western blotting检测AEG-1、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9、NF-κB p65(p65)和磷酸化的NF-κB p65(p-p65)的表达。结果:与癌旁组织相比,结直肠癌组织中miR-520e的表达水平降低(t=9.353,P<0.001)。与对照组相比,miR-520e-mimic组的OD值降低,细胞凋亡率升高,细胞迁移和侵袭数量降低,MMP2、MMP9和p-p65蛋白表达水平降低(P<0.001)。与对照组相比,miR-520e-inhibitor组的OD值升高,细胞凋亡率降低,细胞迁移和侵袭数量升高,MMP2、MMP9和p-p65蛋白表达水平升高。与NC-mimic组相比,miR-520e-inhibitor组的相对荧光素酶活性降低(P<0.001)。与对照组相比,miR-520e-mimic组的AEG-1的mRNA和蛋白表达水平均降低,而miR-520e-inhibitor组均升高(P<0.001)。与miR-520e-mimic+NC-pcDNA3.1组相比,miR-520e-mimic+AEG-1-pcDNA3.1组的AEG-1的mRNA和蛋白表达水平升高,OD值升高,细胞凋亡率降低,迁移和侵袭细胞数增加,MMP2和MMP9的蛋白表达水平及p65的磷酸化水平均增加(P<0.001)。结论:miR-520e在结直肠癌中表达降低,可通过靶向抑制AEG-1来发挥抗结直肠癌特性,其抗癌机制可能通过NF-κB信号通路介导。