微乳液相色谱法同时测定山楂叶提取物中4种黄酮成分

建立了一种新的微乳体系,用于微乳液相色谱同时分析山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷、芦丁、牡荆素及金丝桃苷4种黄酮成分。通过对影响分离选择性的主要因素进行考察,得到最佳微乳体系的组成为:1.0%(w/w)聚氧乙烯月桂醇(Brij35)-1.1%(w/w)正丁醇-0.1%(w/w)正辛醇-0.3%三乙胺(V/V)(H3PO4调节至pH2.5)。在此微乳体系中,表面活性剂类型和浓度、油相种类、添加剂三乙胺、流动相的pH值对4种黄酮成分的分离起到了重要的作用。选择Venusil ASB C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流速为0.8 mL/min,检测波长为360 nm,柱温为35℃。结果显示,4种黄酮成分在27 min内达到基线分离,在0.95～140.8 mg/L范围内,4个黄酮成分的线性相关系数r≥0.9995,平均回收率98.6%～101.6%。本方法可应用于山楂叶提取物中4种主要黄酮成分的质量分析。

固相萃取-微乳液相色谱法对化妆品中8种激素的同时测定

建立了固相萃取-微乳液相色谱同时测定化妆品中糖皮质激素、雌激素、雄激素、孕激素等8种激素药物的新方法。化妆品样品用甲醇超声提取，经Cleanert ODS—SPE固相萃取柱纯化后，以Venusil ASB C8（T）（4．6mm×200mm，5μm，30nm）为色谱柱，3．0％十二烷基硫酸钠（SDS）-6．6％正丁醇-0．8％正辛烷-89．6％水为流动相，检测波长为240nm。结果表明，8种激素在15min内达到基线分离，线性范围为0．5—30mg／L，相关系数r均大于0．9995。在低、中、高3种加标水平下，8种激素的平均回收率为82％～109％；相对标准偏差为1．5％～5．4％：检出限为0．04～0．07ng。

水包油型微乳液相色谱分离激素类药物的影响因素

采用水包油型微乳液相色谱(MELC)分离了6种激素类药物(醋酸可的松、泼尼松龙、己烯雌酚、炔雌醇、醋酸氟轻松及黄体酮)。考察了微乳流动相的组成成分(包括表面活性剂的浓度、油相种类、有机添加剂种类)及固定相孔径等对分离的影响。实验得到的最佳分离条件:色谱柱为Venusil ASB C18(T)(粒径5μm,孔径30nm,250mm×4.6mm),微乳流动相为30g/L十二烷基硫酸钠(SDS)-0.8%正辛烷-6.6%正丁醇,流速为0.8mL/min,检测波长为254nm,柱温为35℃。该方法可用于甾体药物及其制剂的分离鉴别以及快速测定。

微乳液相色谱法对蓝莓叶黄酮类化合物的分离和测定

目的:利用微乳液相色谱分离并测定蓝莓叶中儿茶素、芦丁、山柰酚、槲皮素和杨梅酮5种黄酮成分。方法:从表面活性剂、助表面活性剂、p H值、有机相4个方面对微乳液相色谱分离蓝莓叶黄酮的条件进行优化。结果:分离蓝莓叶黄酮的最优条件为:使用2.5%聚氧乙烯(23)月桂醚作为表面活性剂,8%正丁醇为助表面活性剂,0.8%乙酸乙酯为有机相,0.5%乙酸调节体系p H值为3.2,在以上条件下蓝莓叶黄酮在20 min内能够得到有效分离。结论:蓝莓叶中提取的黄酮类化合物含有儿茶素9.76 mg/g、芦丁13.12 mg/g、山柰酚31.04 mg/g、槲皮素26.42 mg/g、杨梅酮20.30 mg/g。

微乳液相色谱法及其应用进展

微乳液相色谱法是使用普通的正相或反相色谱柱,分别以油包水或水包油型微乳为流动相,用常规检测器进行样品分析的液相色谱法。该法具有独特的选择性,能够同时分离极性范围很广的化合物,流动相中的有机溶剂用量少,调节参数多,以及血浆样品可直接进样,梯度洗脱节省再平衡时间等优点,在复杂组分分离方面具有显著的优势。本文对微乳液相色谱法中常用微乳的组成和结构,各组成成分对分离的影响,以及该法的应用进展进行了综述。

微乳液相色谱直接进样测定大鼠血清中大黄素的含量

目的考察血清直接进样的可行性,建立大鼠血清中大黄素的微乳液相色谱直接进样测定法。方法采用Hypersil BDS C185μm(4.6mm×150mm)色谱柱,以微乳(3.3%十二烷基硫酸钠(SDS)w/V-6.6%正丁醇V/V-1.0正辛烷V/V-水)为流动相,检测波长254nm,血清经微孔滤膜过滤后直接进样。结果大黄素在0.333～5.32μg·ml-1范围与峰面积呈良好线性关系,平均回收率为99.65%,RSD为3.60%,最低定量限为0.1386μg·ml-1。结论采用微乳流动相,可直接进样测定血清样品中大黄素的含量,方法简单、准确、快速。

固相萃取-微乳液相色谱法测定环境水体中的3种酚类化合物

建立了固相萃取-微乳液相色谱法同时测定环境水体中的苯酚、双酚A(BPA)、2,4-二氯苯酚3种酚类化合物的检测方法。水样加酸酸化后,经C18固相萃取小柱富集净化,用微乳液相色谱法测定3种目标物的含量。在In-ertsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)上以微乳(3.0%十二烷基硫酸钠(SDS)-6.0%正丁醇-0.8%正庚烷-90.2%(水+0.5%HAc))和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长280 nm。结果表明,苯酚、双酚A、2,4-二氯苯酚的检出限(S/N=3)依次为0.74、8.0、8.0μg/L,线性范围在0.1～10 mg/L范围内,相关系数(r)均大于0.999。将3种酚类化合物定量加到空白水样中,苯酚、双酚A、2,4-二氯苯酚的加标回收率分别为82.7%、87.8%、82.6%,其RSD均小于5%(n=6)。对环境水样的酚类化合物分析也取得了良好的加标回收率,其值均在85.7%～113.2%之间。结果表明,该方法准确可靠、灵敏度高,适用于环境水体中酚类化合物的检测。

鼻可灵喷雾剂中地塞米松磷酸钠、氧氟沙星及盐酸麻黄碱含量的微乳液相色谱法测定

建立了复方鼻可灵喷雾剂中3组分的微乳液相色谱（MELC）测定方法，并考察了其影响因素。以微乳（33g／L SDS-1．2％（体积分数）正辛烷-9％（体积分数）正丁醇-0．5％（体积分数）三乙胺，磷酸调pH至3）为流动相，采用Hypersil BDS C18 5μm（4．6mm×150mm）色谱柱，检测波长256nm。实验发现，被测组分地塞米松磷酸钠、氧氟沙星及盐酸麻黄碱的线性范围和相关系数分别为0．01～0．04g／L，r=0．9999；0．1～0．3g／L，r=0．9999；0．2～0．6g／L，r=0．9999。对应的平均回收率和RSD（n=5）分别为97％，2．55％；101％．0．45％；101％，0．54％（n=5）。

微乳液相色谱法测定南、北五味子中5种木脂素类成分

目的：建立一种稳定、灵敏的o/w型微乳液相色谱法,同时测定南、北五味子中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素5种木脂素类成分。方法采用Kromasil C18色谱柱（250 mmx4.6 mm,5μm）,通过考察微乳系统的组成对分离效果及保留时间的影响,以最优微乳体系[3.3%十二烷基磺酸钠（SDS,W/V）,1.2%正辛醇（V/V）及6.6%正丁醇（V/V）]-20 mmol/L磷酸盐（用磷酸及氢氧化钠调节pH 7.0）为流动相,流速0.7 mL/min,检测波长254 nm,柱温25℃。结果在优化条件下,5种木脂素类成分在20 min内达到基线分离,分离良好。五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素分别在2.0-155.0、8.3-166.7、8.8-175.8、8.3-166.7、8.9-177.1μg/mL范围内线性关系良好（r＞0.999）。检测限为0.06-0.18μg/mL,定量限为0.17-0.55μg/mL,平均加样回收率为97.22%-100.8%。结论所建立的方法准确、简单易行,可用于不同产地的南、北五味子中5种木脂素类成分的含量测定。

微乳液相色谱法对吴茱萸中辛弗林、吴茱萸碱与吴茱萸次碱含量的测定

构建了一种新的微乳体系,用于微乳液相色谱同时分析吴茱萸药材中的辛弗林、吴茱萸碱和吴茱萸次碱。用甲醇超声提取方法制备样品,通过对表面活性剂种类及浓度、酸度、添加剂等影响因素进行考察,得到最佳微乳体系的组成为:3.0%SDS-6.0%正丁醇-0.6%正辛烷-1.0%甲酸-1.2%乙腈-88.2%水。选择Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流速0.7 mL.min-1;检测波长260 nm。结果显示,在优化条件下,辛弗林、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的线性范围分别为5.21～26.05、7.04～35.2、1.31～6.55 mg/L,相关系数r≥0.999 7,平均回收率为96%～101%,相对标准偏差(n=6)为1.0%～1.5%,检出限为0.048～0.095 mg/L。方法准确,简单易行,可用于吴茱萸药材中3种有效成分的含量分析。

酸性药物在微乳液相色谱体系中的保留行为

以酸性药物萘普生、布洛芬、双氯芬酸、苯丙氨酸和2,4-二氯苯氧基乙酸为研究对象,探讨了酸性药物在微乳液相色谱体系中保留机理,建立了酸性药物的容量因子(k′)与表面活性剂浓度、助表面活性剂浓度、亲脂性有机溶剂浓度以及流动相pH值之间的相关模型。结果表明,表面活性剂、助表面活性剂和亲脂性有机溶剂的浓度以及流动相pH值的变化对酸性药物的容量因子的影响完全与理论模型相吻合。所建立的保留模型能较好地反映在微乳液相色谱体系中微乳液组成和pH值对酸性药物保留行为的影响。

微乳液相色谱法同时测定大鼠灌服大花罗布麻叶提取物后血浆中4种黄酮类成分的含量

目的:建立同时测定大鼠血浆中槲皮素-3-O-槐糖苷、罗布麻甲素、金丝桃苷、芸香苷4种黄酮类成分含量的方法。方法:取8只SD大鼠,ig大花罗布麻叶提取物混悬液,0.1 g/kg(以提取物计)。给药后1 h于眼眶采血1 m L,离心后采用微乳液相色谱法(MELC)测定4种黄酮类成分含量。色谱柱为Zorbax SB-C18,流动相为微乳体系[月桂醇聚氧乙烯醚-正丁醇-乙酸乙酯-三乙胺-水(体积比为2.5∶3.0∶1.7∶0.3∶92.5,p H=5.0)],流速为0.8 m L/min,柱温为30℃,检测波长为360 nm,进样量为10μL,内标为岩白菜素。同时与使用常规有机溶剂为流动相的高效液相色谱法(HPLC,流动相为0.2%磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,其余条件同MELC法)进行相关比较。结果:大鼠血浆中槲皮素-3-O-槐糖苷、罗布麻甲素、金丝桃苷、芸香苷检测质量浓度线性范围为10~1 000 ng/m L(r≥0.998 0),定量下限(信噪比为10)均为10 ng/m L,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均不超过7.5%(n=5),平均加样回收率在97.4%~98.5%之间(RSD均不大于5.3%,n=5),提取回收率均在88.7%~100.3%之间(RSD均不大于6.14%,n=5)。MELC与HPLC的方法学考察结果均符合药典规定,血药浓度测定结果相近,但与HPLC法比较,MELC法可缩短检测时间(10min vs.40 min),减少有机溶剂使用量(0.38 m L vs.28 m L)。结论:本研究建立的MELC法快速简便、绿色环保,可用于大鼠血浆中大花罗布麻叶4种黄酮类成分的同时测定。

微乳液相色谱法测定黄芩中黄芩苷的含量

目的建立黄芩中黄芩苷含量的微乳液相色谱测定法。方法以微乳(2.2%十二烷基硫酸钠-0.8%正辛烷-7.0%正丁醇-0.05%三氟乙酸)-0.05%三氟乙酸溶液(35:65)为流动相,色谱柱采用Hypersil BDS C185μm(4.6mm×150mm),检测波长为280nm,流速1ml/min。结果黄芩苷在0.088～0.88μg范围内,与峰面积呈良好线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为98.71%,RSD为3.90%(n=6)。结论本方法简便、准确,可用于黄芩中黄芩苷的含量测定。

清开灵注射液中黄芩苷含量的微乳液相色谱法测定

建立了微乳液相色谱（MELC）测定中药复方制剂清开灵注射液中黄芩苷含量的分析方法,并考察了微乳流动相的组成及pH值等影响因素。最佳条件为：采用Hypersil BDS C185μm（4.6 mm×150 mm）色谱柱,柱温30℃,以3%十六烷基三甲基溴化铵-0.8%乙酸乙酯-7%乙腈-0.01 mol/L四丁基溴化铵（磷酸调pH至3.0）为流动相,检测波长276 nm。对照品和样品均用70%甲醇处理。结果表明,黄芩苷的线性范围为25-100 mg/L,相关系数r=0.999 9。精密度实验和稳定性实验的RSD分别为1.0%（n=6）和0.50%（n=5）,平均加标回收率和RSD值（n=6）分别为99%、1.9%。市售9批样品中黄芩苷的质量浓度为4.05-5.05 g/L,符合药典规定。

微乳液相色谱法测定人血浆中的丙泊酚

建立了基于微乳液相色谱(MELC)的人血浆中丙泊酚浓度的测定方法。采用HypersilBDSC18色谱柱分离,并考察了微乳流动相中各组分对溶质洗脱的影响。优化的色谱条件:以0.5%醋酸(含有3.0%十二烷基硫酸钠(SDS),0.8%正庚烷,6.0%正丁醇)微乳为流动相,流速为1.0mL/min,荧光检测器激发波长(λex)为274nm、发射波长(λem)为312nm,柱温为室温。人血浆样品用流动相稀释并离心后,直接进样分析。丙泊酚在0.25～10μg/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系,方法的回收率为(98.2±1.9)%～(104.6±2.2)%;日内测定峰面积的相对标准偏差(RSD)为1.42%～2.43%,日间测定峰面积的RSD为2.75%～4.79%。该方法简便可行、重复性好,可用于人血浆中丙泊酚浓度的测定。

微乳液相色谱法测定补骨脂酊中补骨脂素和异补骨脂素的含量

目的:建立微乳液相色谱法测定补骨脂酊中补骨脂素和异补骨脂素的含量。方法:采用Kromasil C18柱,以3.3%十六烷基三甲基溴化铵-0.8%乙酸乙酯-6.6%正丁醇-水为流动相,检测波长246 nm。结果:在该色谱条件下,补骨脂素在1.06μg/mL～42.4μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.0%,RSD为1.25%;异补骨脂素在1.12μg/mL～44.8μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.7%,RSD为1.45%。结论:本方法简便可行、重复性好,可用于该制剂中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定。

微乳液相色谱法同时分离7种水溶性维生素

采用微乳液相色谱法同时分离7种水溶性维生素(V_(B1)、V_(B2)、V_(B6)、VB_(12)、叶酸、烟酰胺和VC)。考察了微乳流动相体系中表面活性剂、油相、助表面活性剂的种类以及流动相的pH值、柱温等对水溶性维生素分离的影响。优化后微乳体系的组成为:十二烷基硫酸钠(SDS)/聚氧乙烯月桂醇醚(Brij35)/正丁醇/乙酸乙酯/水(质量比为2∶60∶66∶8∶864)。色谱柱为Agilent TC C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,检测波长为254 nm,流速为0.5mL/min。7种水溶性维生素在20 min内达到基线分离。在4~36 mg/L范围内,7种水溶性维生素的质量浓度与峰面积的相关系数均大于0.999 1。不同添加水平下,V_(B1)、V_(B2)、V_(B6)、VC和烟酰胺的平均回收率为93.9%~102.9%。该方法可用于食品和药品中的多种水溶性维生素的分离、鉴别及快速测定。

微乳液相色谱法测定虎杖中2种成分的含量

目的 建立虎杖中大黄素、大黄素甲醚含量的微乳液相色谱测定法。方法以微乳为流动相，色谱柱采用Hypersil BDS C185μm（4．6mm×150mm），检测波长为287nm，流速1ml／min，柱温30℃。外标峰面积法同时测定虎杖中大黄素和大黄素甲醚的含量。结果大黄素和大黄素甲醚的线性范围分别为5．3-53．0μg／ml（r=0．9999）和2．4～24．0μg／ml（r=1．0000），平均回收率和相对标准偏差（RSD）值（n=6）分别为97．7％，1．25％；97．6％，1．82％。结论本法简便快速精确，可用于虎杖中大黄素、大黄素甲醚的含量测定。

微乳液相色谱法测定金益排石颗粒中大黄酚的含量

目的:建立金益排石颗粒中大黄酚含量的微乳液相色谱测定法。方法:以微乳2.5%(w/v)十二烷基硫酸钠(SDS)-0.1%(v/v)正辛烷-10.0%(v/v)正丁醇-0.5%三乙胺(v/v)(磷酸调pH至3.0)为流动相,色谱柱采用Hypersil ODS_2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温28℃,流速1 ml·min^(-1),检测波长254 nm。结果:大黄酚在3.9～39.0μg·ml^(-1)范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为99.66%,RSD为0.64%(n=6)。结论:本法简便、准确,可用于金益排石颗粒中大黄酚的含量测定。

微乳液相色谱同时分离和测定大花罗布麻叶中6种黄酮类成分

目的建立一种同时分离和测定大花罗布麻叶中6种黄酮类成分的微乳液相色谱方法。方法用HPLC法测定,色谱柱为Zorbax SB-C_(18)(4.6mm×150mm,5μm);流速:0.8ml·min^(-1);检测波长:360nm;柱温:30℃;采用经过优化后的微乳体系为流动相,其组成为:2.0%Genapol X-080-3.0%正丁醇-0.6%乙酸乙酯-0.2%三乙胺-94.2%水溶液(20mmol·L^(-1) H_3PO_4调节至pH 5.0)。结果大花罗布麻叶中6种黄酮类成分在15min内达到基线分离,在1~500mg·L^(-1)范围内,6个黄酮成分的线性相关系数≥0.9998,回收率98.9%~100.8%。结论本微乳液相色谱法可应用于大花罗布麻叶中6种黄酮成分的同时分离和测定。