微囊化异种坐骨神经组织细胞移植对大鼠脊髓损伤后生长相关蛋白-43表达的影响

目的 :探讨微囊化异种坐骨神经组织细胞移植对大鼠脊髓损伤后再生的促进作用。方法 :A组微囊化坐骨神经组织细胞组、B组坐骨神经组织细胞组、C组空囊组、D组明胶海绵组及E组损伤对照组。无菌条件下取家兔坐骨神经 ,过滤后加入生理盐水制成悬液。将悬液与 1.5 %海藻酸钠溶液充分混合 ,经双腔喷头喷入 2 0mmol/L的氯化钡溶液制得微囊化坐骨神经组织细胞。同法制备空囊 ,但不包被细胞。以T10为中心打开椎管 ,虹膜刀自脊髓后正中沟插入并向左半侧横向切开 ,去除约 2mm脊髓组织 ,分别将浸有微囊化坐骨神经组织细胞、坐骨神经组织细胞及空囊的明胶海绵植入A、B、C组损伤处 ,D组植入明胶海绵 ,E组不作移植。分别于术后不同时间 ,每个时相 4只大鼠 ,取出脊髓损伤平面为中心的 8mm脊髓 ,分别行Nissl及GAP -4 3组化染色。结果 :A组尼氏体恢复 ,7天时GAP -4 3阳性表达达高峰 ,以后渐下降。结论

微囊化兔坐骨神经组织细胞移植对大鼠损伤脊髓P物质表达的影响

目的:探讨微囊化异种坐骨神经组织细胞移植对脊髓半横断损伤大鼠的脊髓修复作用。方法:免疫组织化学方法结合图像分析检测微囊化兔坐骨神经组织细胞移植后,脊髓半横断损伤大鼠脊髓后角内P物质(SP)的阳性神经元数和平均光密度。结果:脊髓半横断损伤后第1、2周脊髓后角内SP阳性神经元数和平均光密度均降低,至第4、8周时逐渐回升,微囊组SP的表达明显高于同时间点的细胞悬液组、单损组。细胞悬液组与单损组比较,除移植后第1周SP的含量差异有显著性外,其余各时间点的比较差别无统计学意义。结论:微囊化兔坐骨神经组织细胞移植能使脊髓半横断大鼠脊髓后角内SP的表达上调,对脊髓半横断损伤后的感觉神经元有保护作用。

微囊化兔坐骨神经组织移植对大鼠脊髓损伤神经元的影响

目的：观察大鼠脊髓半横断损伤后植入微囊化兔坐骨神经组织对一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法：尼氏染色和NADPH-d组织化学染色。利用图像分析系统检测染色标记细胞数和阳性细胞平均面积、平均光密度。结果：脊髓损伤后神经元数量减少,尼氏体脱失、溶解。术后3d,微囊组NOS阳性细胞数、阳性细胞平均面积及平均光密度均明显高于单损组；术后7d微囊组NOS阳性细胞数和阳性细胞平均面积较细胞组高；术后14d,细胞组NOS阳性细胞数急剧增高超过微囊组,但微囊组仍平稳上升。结论：微囊化兔坐骨神经组织移植能诱导早期NOS表达增加及抑制后期NO过量产生,减轻脊髓继发性损伤,有利于损伤脊髓的修复和再生。

异种移植微囊化新生猪胰岛细胞受体感染PERV潜在风险分析

目的:研究新生猪胰岛细胞(neonatal pig islets,NPIs)经微囊化后异种移植到狗体内,受体感染猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)的风险。方法:将10只狗随机分成实验组和对照组,分别移植微囊化猪胰岛细胞和未被微囊化猪胰岛细胞。应用放射免疫的方法检测狗体内血清特异性猪C-肽以判断胰岛移植物活性;采用免疫组织化学技术检测28d后肝移植部位是否有微囊化猪胰岛细胞;PCR和RT-PCR技术分别检测不同时间点狗外周血中PERV及猪mt DNA。结果:移植微囊化猪胰岛细胞2周后,给受体注射葡萄糖,15～30min狗的外周血中猪C-肽表达明显升高,而对照组检测不到猪C-肽;免疫组化结果表明,狗肝脏移植部位周围可检测到少量微囊化猪胰岛细胞,肝组织无明显异常;PCR和RT-PCR结果表明,移植微囊化猪胰岛细胞在不同时间点狗外周血内均未检测到猪mt DNA及PERV表达,而对照组于移植后4d内检测到猪mt DNA及PERV呈微弱表达,10d后均未见表达。结论:微囊化猪胰岛细胞能够在受体肝脏内存活并发挥作用,受体内不存在PERV的感染,提示海藻酸钠微囊可以有效地防止猪mt DNA及PERV的穿越,可能在异种移植中具有较好的应用前景。

微囊化异种肝细胞移植治疗大鼠急性肝功能衰竭

目的:探讨微囊化猪肝细胞异种移植治疗大鼠急性肝功能衰竭的可行性.方法:将分离的猪肝细胞微囊化后移植到Wistar大鼠腹腔内,3d后切除大鼠80%肝叶造成肝衰模型,观察大鼠2wk存活情况.结果:对照组、未微囊化肝细胞移植组及微囊化肝细胞移植组的2wk存活率分别为6.2%,31.2%和56.2%,微囊化组肝细胞存活率明显较未微囊化组及对照组高.微囊化肝细胞在移植14d后结构基本完好.结论:微囊化异种肝细胞移植提供了一种治疗急性肝功能衰竭的可行方法.

微囊化异种肝细胞移植对药物性肝衰的治疗作用及免疫隔离机制的初步研究

目的 :探讨微囊化异种肝细胞脾内移植对药物性肝衰大鼠的治疗作用 ;测定受体存活率、肝功能的变化及CD4 ,CD8的变化。方法 :海藻酸钠体外包裹经胶原酶技术制备的异种 (豚鼠 )肝细胞为供体 ,SD大鼠为受体 ,D -氨基半乳糖 (19.5ml/kg)腹腔内一次性注射 ,制作肝衰模型。 4 8h后将微囊化的游离豚鼠肝细胞 (1.5× 10 7)移植于大鼠脾脏内。以豚鼠裸肝细胞 (1.5× 10 7)移植及生理盐水1.2ml脾脏注射为对照。移植后 14d观察存活率、肝功能及肝脏病理情况 ,免疫组化ABC法测定CD4 ,CD8的变化。结果 :微囊化肝细胞移植组存活率 80 % ,明显高于生理盐水组 (2 5 % )和裸肝细胞移植组(70 % )。 (P <0 .0 1 V P <0 .0 5 )。微囊肝细胞移植组 14d总胆红素 (7.99± 0 .5 8mg/L)和ALT(5 5±6 .7u) ,明显低于生理盐水组 (9.6 3± 0 .83mg/LV 91± 8.0u)和裸肝细胞组 (8.9± 0 .6 6mg/LV 74± 7.1u)(P <0 .0 5VP <0 .0 1)。移植后 12h ,72h ,14d分别测定受体脾脏CD4 ,CD8淋巴细胞 ,微囊化肝细胞组72h ,14d呈阳性。裸肝细胞组均呈阳性。结论 :大鼠药物性肝衰微囊化肝细胞脾内移植后维持存活率14d ,细胞免疫参与排斥反应 ,肝细胞微囊化处理可延迟细胞免疫的发生时间。

微囊化胰岛细胞异种移植治疗糖尿病的研究

胰腺器官和胰岛细胞的移植可以改善内分泌功能，对血糖代谢进行生理性调节，降低糖尿病（DM）并发病的发生率，提高糖尿病患者的生活质量，试图达到根治DM的目的。异种胰岛远比人源胰岛来源丰富，但是严重的免疫排斥反应限制了异种移植的开展。应用生物材料制作的海藻酸钠一多聚赖氨酸一海藻酸钠（APA）微胶囊，其半通透性的囊膜将细胞包裹。只允许小分子的营养物质和细胞分泌物自由通过，限制了大分子的免疫成分和细胞进入，从而达到延长移植物存活的免疫隔离作用。

微囊化大鼠胰岛移植物的制备与异种移植

为降低胰岛移植中排斥反应，用海藻酸钠－聚赖氨酸生物膜制备微囊化大鼠胰岛，体外培养，胰岛素释放试验功能良好，胰岛素释放量与单纯胰岛差异无显著意义；异种移植可成功地纠正糖尿病小鼠的高血糖状态平均达４个月之久。表明：大鼠，胰岛微囊化可在不便用免疫抑制剂的情况下，有效地延长胰岛在糖尿病小鼠体内的生存期。

琼脂糖微囊化成猪胰岛异种移植实验研究

目的 观察实验性糖尿病大鼠腹腔内移植琼脂糖微囊化成猪胰岛治疗效果。方法 以琼脂糖作为制备微囊的材料 ,用相分离方法包被成猪胰岛 ,将 18只糖尿病大鼠随机分为 3组 :对照组、未微囊化胰岛移植组、微囊化胰岛移植组 ,分别进行腹腔内胰岛移植。结果 移植前 3组血糖水平无显著差异 ,移植后 7天时 ,3组血糖分别为 (2 2 .6 7± 1.15 ) mmol/ L,(18.5 8± 2 .6 2 ) mm ol/ L 和 (12 .38± 2 .6 8) m mol/ L,微囊化胰岛移植组与前 2组相比均有显著差异 ,且生存期明显长于前 2组。结论 琼脂糖微囊化成猪胰岛可存活于糖尿病大鼠体内 ,并且具有生物活性。

两种微囊化大鼠胰岛异种移植于糖尿病小鼠的疗效比较

目的将大鼠胰岛分别用两种不同的免疫隔离材料微囊化移植到糖尿病小鼠肾包膜下,对它们的疗效进行比较。方法尾静脉注射3%链脲佐菌素建立小鼠糖尿病模型。成模小鼠随机分为4组:海藻酸钡微囊化胰岛移植组、琼脂糖聚苯乙烯磺酸微囊化胰岛移植组、未微囊化胰岛移植组和空白对照组,每只小鼠肾包膜下植入300个相应大鼠胰岛。结果4组糖尿病小鼠移植前血糖水平无显著差异,移植后1周分别为:海藻酸钡微囊化胰岛移植组(7.26±1.56)mmol/L、琼脂糖聚苯乙烯磺酸微囊化胰岛移植组(7.14±1.04)mmol/L、未微囊化胰岛移植组(7.42±1.52)mmol/L、空白对照组(22.54±1.24)mmol/L,前2组与后2组相比有显著性差异,生存期也明显长于后2组;海藻酸钡微囊化移植组维持正常血糖时间及生存期(分别为76d和92d)明显长于琼脂糖微囊化移植组(分别为41d和56d)。结论用海藻酸钡和琼脂糖聚苯乙烯磺酸制备的微囊化大鼠胰岛均可存活于糖尿病小鼠体内并发挥生物功能,海藻酸钡微囊优于琼脂糖聚苯乙烯磺酸。

微囊化大鼠胰岛移植物的制备与异种移植

为了解决胰岛移植中排斥反应,用海藻酸钠—聚赖氨酸生物膜制备微囊化大鼠胰岛,体外培养,胰岛素释放试验功能良好,与单纯胰岛无显著性差异;异种移植可成功地纠正糖尿病小鼠的高血糖状态平均达4个月之久。表明:大鼠胰岛微囊化可在不使用免疫抑制剂的情况下,有效地延长胰岛在糖尿病小鼠体内的生存期。

经肝动脉移植微囊化新生猪胰岛细胞治疗糖尿病的实验研究

目的 :探讨经肝动脉移植微囊化新生猪胰岛细胞后 ,移植物生理功能以及副反应的特点。方法 :化学药物诱导制作犬的糖尿病模型后 ,将分离、纯化及微囊化的新生猪胰岛细胞经肝动脉移植入糖尿病犬的肝内 ,测定移植前后糖尿病犬的胰岛素用量、血糖水平以及葡萄糖刺激血清C肽、肝功能及CD4 /CD8的变化 ,并于移植 6月后对移植受体肝、胰进行病理学检查。结果 :移植后模型犬血糖逐步下降至正常水平 ,胰岛素用量减少 ,移植 6月后 2犬停用胰岛素 ,并维持血糖正常达 180d之久 ;移植后肝检查无明显变化 ,胰腺检查见凋亡胰岛无再生现象。结论 :微囊化的新生猪胰岛细胞经肝动脉移植入糖尿病犬的肝内 ,能纠正异种动物犬糖尿病模型的高血糖状态 。

糖尿病犬经肝动脉肝内移植微囊化猪胰岛细胞的安全性和有效性

目的评估移植于I型糖尿病犬肝脏中的微囊化新生猪胰岛细胞(NPI)的生物相容性、免疫学特性及生理学特性。方法I型糖尿病犬分为A、B两组,每组15只,A组每只犬分别经肝动脉灌注微囊化新生猪胰岛细胞40～60万个,B组每只犬分别经肝动脉灌注未微囊化新生猪胰岛细胞40～60万个,两组动物移植后均不使用免疫抑制治疗。移植前后分别测量移植受体的肝脏功能及淋巴细胞CD4+/CD8+比值。移植6个月后所有移植受体的肝脏均进行病理学检查。结果移植后A组外源性胰岛素用量从移植前的22 u逐渐降至5 u,B组所需外源性胰岛素从移植前的24 u下降至10 u。移植后2～3周B组胰岛素用量恢复到移植前的水平,而A组的部分动物的胰岛素剂量继续减至8 u。B组受体移植后血的CD4+较移植前升高,而A组的CD4+和CD8+细胞移植后无明显变化。移植后所有受体的肝功能及组织结构未见异常。结论微囊化的新生猪胰岛细胞在受体犬的肝脏中有很好的生物相容性。微囊可以延长移植物的存活,且异种移植微囊化的新生猪胰岛细胞能够纠正糖尿病犬的高血糖状态。

微囊化牛嗜铬细胞移植于帕金森病样大鼠脑纹状体内的行为观察

帕金森病（ＰＤ）的基本病理生理改变是黑质致密带、蓝斑及自主神经节的神经元变性，致使黑质／纹状体通路中的多巴胺（ＤＡ）减少，引起一系列临床症状。目前，由于药物治疗只能部分地改善ＰＤ症状，且不能阻止其病情发展、人们试图在脑内移植ＤＡ能细胞，以替代变性的神...

微囊化猪肝细胞移植治疗大鼠急性肝衰的免疫隔离机制

目的:探讨微囊化猪肝细胞腹腔内移植对药物性肝衰大鼠的治疗作用,观察受体存活率、肝组织病理变化及大网膜的免疫隔离作用. 方法:以海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)包裹乳猪肝细胞,体外观察APA微囊对NK细胞介导的细胞毒作用的隔离效果.D-氨基半乳糖腹腔内注射诱导大鼠急性肝衰竭,48 h后将微囊化的猪肝细胞移植于大鼠腹腔内,观察移植大鼠存活率,免疫组化法检测大鼠大网膜内CD4、CD8、IgG和IgM的表达. 结果:微囊可有效保护囊内K562细胞不受NK细胞的杀伤.与裸肝细胞移植组相比,微囊化乳猪肝细胞移植组大鼠存活率显著提高(1wk存活率78.6% vs 66.7%, P=0.0 046;2 wk存活率42.9% vs 25.0%,P=0.0027, P<0.01).大网膜CD4、CD8、IgG表达较弱(P=0.0 342、P=0.0 197及P=0.0 445,P<0.05),而IgM表达无明显差异(P>0.05). 结论:APA微囊可有效隔离抗体及淋巴细胞介导的体液和细胞免疫反应.微囊化异种肝细胞移植可治疗大鼠急性肝衰,给予肝功能代谢支持,提高移植治疗效果.

微囊化雪旺细胞移植研究进展

微囊技术为组织 /细胞移植开辟了新途径 ,它有效地避免了移植后的免疫排斥反应 ,并解决了移植物来源稀少的问题。微囊具有良好的免疫隔离作用 ,体现在对免疫活性细胞及部分细胞因子的阻挡作用 ,使移植物能存活下来并发挥其功能。雪旺细胞的分离纯化技术已日渐成熟 ,目前对微囊化雪旺细胞的研究取得了一定的进展 ,使异种雪旺细胞的移植在治疗神经损伤方面成为可能 ,并具有广阔的应用前景。

改良微囊化新生猪胰岛细胞移植治疗鼠糖尿病

用链脲霉素制备的糖尿病小鼠３６只，随机分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ４组。Ａ组为生理盐水组，Ｂ组为空囊组，Ｃ组为植入未包囊的猪胰岛细胞组，Ｄ组为微囊包膜猪胰岛细胞组。Ｃ、Ｄ组植入量均为１２０ｍｇ／只，术后２周全部停用胰岛素。结果，Ｄ组小鼠在停用胰岛素的情况下，于第二周血糖水平降至９０１±２２６ｍｍｏｌ／Ｌ，并维持４～６个月之久，与Ａ、Ｂ、Ｃ组２００１±３２８ｍｍｏｌ／Ｌ、１９０６±３１６ｍｍｏｌ／Ｌ、１３８２±２９６ｍｍｏｌ／Ｌ相比均有显著差异（Ｐ＜０．０１；Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０５）。证明微囊化猪胰岛细胞免疫原性低，在小鼠体内生物活性良好。

微囊化甲状旁腺细胞移植的研究进展

本文通过利用海藻酸钠 -聚赖氨酸 -海藻酸钠 (APA)制成的微囊包裹甲状旁腺细胞进行异种甲状旁腺细胞移植来证明微囊化包被组织细胞可发挥免疫隔离作用。其高度的生物相容性和良好的免疫隔离作用为解决治疗疾病中的免疫排斥反应和移植物来源短缺 。