基于固相萃取/高效液相色谱-质谱联用法的微囊藻毒素代谢产物制备及应用

采用HPLC-MS/MS监控反应,合成了微囊藻毒素RR的谷胱甘肽和半胱氨酸代谢物(MC-RRGSH及MC-RR-Cys)。该产物经Accu BOND C18固相萃取小柱纯化后,纯度大于95%(HPLC检测)。结果表明,合成反应的最佳时间为60 min。在SPE洗脱过程中,采用纯水淋洗,1%甲酸-90%甲醇洗脱时,MCRR-GSH和MC-RR-Cys的平均回收率可达86.4%±1.5%和90.2%±2.8%。运用ESI-HPLC-MS/MS对以上产物进行一级及二级质谱扫描。两种产物的一级质谱电离均以[M+2H]2+为基峰,对应的质荷比(m/z)分别为673.6和580.5。以MC-RR-GSH和MC-RR-Cys一级质谱图中丰度最高的双电荷离子为母离子进行二级质谱扫描,对应的子离子对为m/z 609.0/536.9和519.4/520.8,由上述裂解碎片推断合成的产物为MC-RR-GSH和MC-RR-Cys。以合成产物为标准品,测定出太湖鲤鱼肾脏中MC-RR-GSH,MC-RR-Cys和MC-RR的含量(干重)分别为未检出,1.587 5,0.001 5μg·kg-1。本文合成的高纯度代谢产物,可作为相关研究中非商品化的标准对照品,代谢产物的质谱裂解碎片亦可为环境中微囊藻毒素MC-RR的GSH/Cys代谢途径分析提供参考。

食源性活性肽及其微囊化技术与应用的研究进展

食源性活性肽是一类对机体有益、易于吸收的小分子聚合物,功能与性质由氨基酸的组成与排列顺序决定。食源性活性肽除了含有丰富的营养价值之外,还具有抑菌、抗氧化、降血压等功能,可用于治疗、控制和预防慢性疾病,对健康食品领域的发展意义重大,是近年来的研究热点。暴露的裸肽在存放与递送等方面存在困难,微囊化技术为食源活性肽的应用提供了新的途径,通过包裹在微囊中可以提高活性肽的稳定性和生物利用率。文章综述了不同来源的食源性活性肽与提取方法,并对微囊化活性肽的天然壁材、微囊化方法进行介绍,对微囊化的食源性活性肽在抗菌、抗氧化与抑制ACE活性等应用方面进行总结。此外,文章综述展望了微囊化的食源性活性肽的未来发展趋势以及在实际应用中遇到的问题,为食源性活性肽进一步的研究开发、应用提供参考。

西流湖水体藻类污染现状和产毒蓝藻的全细胞PCR检测

目的了解西流湖水体浮游藻类尤其是产毒蓝藻的污染现状,并建立全细胞PCR检测产毒蓝藻的方法.方法从2004年3月开始,采集西流湖水体表层水样,用血细胞计数板法计数藻细胞;设计特异引物,采用全细胞PCR方法检测水样中藻青蛋白基因中间序列（PC-IGS）和微囊藻毒素多肽合成酶基因mcyB,并对mcyB扩增产物克隆测序.结果西流湖水体藻类主要是蓝藻、绿藻、硅藻和裸藻,夏秋季蓝藻为优势藻门;2004年7月7日～9月27日水样PC-IGS序列PCR检测阳性,7月29日～9月27日水样mcyB基因PCR检测阳性,扩增片断mcyB测序结果与Genbank报道的铜绿微囊藻mcyB同源性大于97%,氨基酸序列同源性大于94%.结论西流湖夏秋季有产毒蓝藻出现,全细胞PCR法可以检测水体中产毒蓝藻.