微小染色体维持蛋白2基因诱导性敲除宫颈癌HeLa细胞系的建立及对DNA复制的影响

目的利用诱导性CRISPR/Cas9技术建立微小染色体维持蛋白2(MCM2)基因敲除的宫颈癌HeLa细胞系,并探究MCM2对DNA复制及复制压力的影响。方法使用诱导性CRISPR/Cas9系统TLCV2,构建MCM2敲除HeLa细胞系;并分为对照组(Control)、敲除1组(KO1)和敲除2组(KO2)。通过Western blot、EdU掺入实验、实时定量PCR、免疫荧光、CCK-8等实验,分析MCM2敲除对DNA复制和羟基脲诱导复制压力的影响。结果经过诱导后CRISPR/Cas9系统有效地敲除MCM2基因,并影响MCM2-7复合物的稳定。与对照细胞相比,MCM2敲除细胞DNA复制能力显著下降,同时Cyclin A1、Cyclin E1和CDK4的mRNA表达水平降低。在DNA复制压力下,MCM2敲除降低了细胞的存活能力、DNA损伤修复能力,并增加基因组的不稳定性。结论MCM2基因敲除降低正常条件下HeLa细胞的DNA复制能力,并降低复制压力后细胞的存活能力。本研究成功地构建了诱导性MCM2基因敲除HeLa细胞系,为进一步研究MCM2基因在宫颈癌中的作用及其生物学功能奠定了基础。

微小染色体维持蛋白2在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:探讨微小染色体维持蛋白2(MCM2p)在乳腺癌的表达及其与临床病理特征的关系,并分析MCM2p与Ki-67的相关性。方法:运用免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中MCM2p、Ki-67的表达。结果:在乳腺癌组织中MCM2p、Ki-67的表达均高于正常乳腺组织,且MCM2p的标记指数明显高于Ki-67,两者表达呈正相关。MCM2p的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、临床病理分期和核分裂指数有非常显著相关性,与患者的年龄、肿瘤大小及组织学类型无显著性关系。结论:MCM2p与乳腺癌临床病理的发展紧密相关,作为病理诊断的参考指标较Ki-67有更强的敏感性。

微小染色体维持蛋白2在鼻咽癌中的免疫组织化学表达及临床意义

目的研究微小染色体维持蛋白2(MCM2)在鼻咽癌中表达以及同鼻咽癌临床分期、颈淋巴结转移、病理类型、远处转移等的关系。方法对62例鼻咽癌标本应用免疫组化法研究、分析MCM2基因的表达情况。结果①有远处转移组的MCM2表达水平明显高于无远处转移组;②MCM2的表达水平与临床分期呈正相关;③MCM2表达在未分化癌组中高于角化性鳞癌组;④MCM2的表达在有无颈淋巴结转移、年龄、性别组间无明显差异。结论 MCM2表达的程度与鼻咽癌的临床分期相关;MCM2的高表达可能是鼻咽癌远处转移的因素之一;MCM2表达的水平可能是鼻咽癌预后评估的重要参考指标。

膀胱癌组织中微小染色体维持蛋白2的表达变化及其意义

目的观察膀胱癌组织中微小染色体维持蛋白2(MCM2)的表达变化,探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测53例膀胱癌、l5例正常膀胱黏膜组织中MCM2的表达,分析膀胱癌不同临床病理特征之间MCM2的表达差异及MCM2对膀胱癌预后的评估价值。结果膀胱癌组织中MCM2 IOD值为5 653.45±1 253.64,明显高于正常膀胱黏膜组织中的89.44±35.12(P<0.01)。膀胱癌分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移、远处转移和是否复发的组织中MCM2 IOD值差异有统计学意义(P均<0.05)。结论膀胱癌组织中MCM2表达明显上调,并能反映膀胱癌的浸润、转移力;MCM2检测对判断膀胱癌的发展及预后具有一定的意义。

肠癌组织中微小染色体维持蛋白2的高表达与肠癌肝转移及临床病理特征的关系

目的探究肠癌组织中微小染色体维持蛋白2(MCM2)的高表达与肠癌肝转移及临床病理特征的关系。方法 2009年1月—2014年1月收治大肠癌患者215例,其中肝转移88例为肝转移组,另127例为无肝转移组,同时选择60例健康者为健康对照组。比较3组血浆MCM2水平,以及肝转移组与无肝转移组肠癌组织MCM2表达情况,分析MCM2表达与临床病理特征的关系。结果与健康对照组比较,肠癌肝转移组和无肝转移组MCM2水平均升高(P<0.05),且肝转移组MCM2水平高于无肝转移组(P<0.05);肠癌肝转移组MCM2高表达率为76.1%(67/88),高于肠癌无肝转移组的46.5%(59/127)(P<0.05);MCM2高表达与肠癌TNM分期、分化程度及淋巴转移密切相关(X^2=5.005、4.263、4.388,P<0.05)。结论 MCM2高表达与大肠癌肝转移、TNM分期、分化程度、淋巴转移密切相关。

微小染色体维持蛋白2在妇科恶性肿瘤研究中的进展

微小染色体维持蛋白2(MCM2)是真核细胞DNA复制启动的许可因子。MCM2只在增殖细胞周期中表达,被视为特异性增殖相关因子,能够检测具有增生潜能的细胞和较好地区分正常组织、不典型增生及肿瘤组织。用MCM2作为肿瘤标志物提高了妇科恶性肿瘤的筛查检出率,有助于判定肿瘤预后,MCM2抗体及抑制剂有望成为治疗妇科恶性肿瘤的新靶点。

微小染色体维持蛋白2在胃癌中的表达及预后意义

目的探讨微小染色体维持蛋白2(MCM2)在胃癌中的表达及预后意义。方法采用免疫组化方法检测MCM2在胃癌、转移淋巴结和正常组织中的表达,分析其表达与临床病理特征及生存率的关系。结果 MCM2在胃癌及转移淋巴结组织中的表达较正常组织中高,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中MCM2表达与患者的年龄、浸润深度和淋巴结转移有显著相关性(P<0.05),与肿瘤大小、肿瘤位置、有无远处转移、UICC分期无显著相关性(P>0.05)。胃癌中MCM2表达阴性患者的预后较MCM2表达阳性患者好(P<0.05)。生存分析显示,MCM2在胃癌中的阳性表达(P<0.05)、肿瘤的浸润深度(P<0.05)及淋巴结转移(P<0.05)是胃癌术后的独立预测因素。结论 MCM2可作为胃癌细胞增殖和预后判断的标志物。

膀胱癌组织及尿脱落细胞组织中微小染色体维持蛋白2的检测

目的探讨膀胱癌组织和尿脱落细胞组织中微小染色体维持蛋白2（rainichromosome maintenanee2 protein，MCM2）的表达及意义。方法采用RT—PCR方法检测25例膀胱癌患者、28例泌尿系良性疾病患者和15例正常对照组尿脱落细胞组织中MCM2的表达；并对膀胱癌组织MCM2的表达进行检测，同时行尿细胞学检查。结果膀胱癌组织标本中MCM2阳性率为96％（24／25），MCM2表达量与分化程度、浸润深度、淋巴结转移、是否复发密切相关（P〈0．05）。膀胱癌患者尿脱落细胞中MCM2阳性率随分化程度和浸润浓度及复发的增加而逐渐增加；且在不同分化程度及不同浸润浓度、是否复发之间的差异也有显著性（P〈0．05）。尿脱落细胞中MCM2检测诊断膀胱癌的灵敏度（96％）、阴性预测值（97．6％）明显高于尿细胞学检查（52％、76．8％），差异有显著性（P〈0．05）0结论MCM2能很好地反映膀胱癌组织中细胞的增殖能力，RT—PCR方法检测膀胱癌组织及尿脱落细胞组织中MCM2表达是一种敏感、特异的膀胱癌诊断方法。

微小染色体维持蛋白2与头颈部肿瘤

微小染色体维持蛋白2(minichromosome maintenance protein 2,MCM2)是微小染色体维持蛋白家族中的成员之一,在人类多种肿瘤组织中表达。MCM2在静止期细胞中不表达,而在突变、增殖的细胞中高度表达,可准确反映细胞的增殖能力,是评价细胞进入增殖期的特异指标,被视为癌前标志物。MCM2的过度表达与各种头颈部肿瘤的发生发展密切相关,有望作为各头颈肿瘤早期筛查和预后评估的临床指标。本文主要阐述MCM2的结构和功能,并对其与头颈部肿瘤的关系进行综述。

微小染色体维持蛋白2在宫颈病变中的研究进展

微小染色体维持蛋白2(minichromosome maintenance protein 2,MCM2)是真核细胞DNA复制启动的许可因子。其mRNA水平在细胞周期中是呈周期性变化的,一些细胞周期相关因子通过调控MCM2可干预DNA的复制。其只在增殖细胞周期中表达,被视为特异性增殖相关因子,能够用于检测具有增生潜能的细胞和较好地区分正常组织、不典型增生及肿瘤组织。其异常表达反映了具有癌变潜能的细胞被锁定在细胞周期中不断地进行异常复制、增殖,其标记指数越高预示肿瘤恶性程度越高,预后越差,故MCM2是研究肿瘤细胞能动性及判定肿瘤预后的有效指标。MCM2与宫颈病变的关系经过了多年的研究,其作为肿瘤标志物加入宫颈病变的筛查提高了宫颈癌前病变的检出率并有助于宫颈癌预后的判定,而MCM2的抗体或抑制剂有望成为宫颈癌治疗的新靶点。

微小染色体维持蛋白2与细胞间隙连接蛋白43在非霍奇金淋巴瘤中的表达和临床研究

目的分析探讨非霍奇金淋巴瘤中微小染色体维持蛋白2(MCM2)和细胞间隙连接蛋白43(Cx43)的表达,并探讨其临床意义。方法选择2015年2月—2017年2月间在周口市中心医院接受治疗的55例非霍奇金淋巴瘤患者作为观察组,另选择35例反应性增生淋巴结患者作为对照组,分别采用SP法对两组患者的MCM2和Cx43表达,并对测定结果进行分析。结果经过对比研究,观察组患者MCM2的阳性表达率显著高于对照组,观察组的Cx43阳性表达率明显低于对照组患者(P<0.05)。同时,MCM2的表达与Cx43的表达没有显著关系,但是与患者的肿瘤恶性程度存在显著相关性,MCM2的表达还与患者肿瘤的临床分期和Ki-67存在显著相关性。结论非霍奇金淋巴瘤的恶性程度会导致MCM2和Cx43蛋白出现异常表达,因此,通过测定MCM2和Cx43蛋白对于诊断非霍奇金淋巴瘤具有重要价值。

基于生物信息学分析微小染色体维持蛋白2在头颈部鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中微小染色体维持蛋白2(MCM2)的表达情况及意义。方法通过基因表达公共(GEO)数据库比较MCM2在HNSCC和正常组织中的表达差异。利用UALCAN数据库分析不同因素下MCM2在HNSCC和正常组织中的表达情况;TIMER数据库分析MCM2与免疫细胞的相关性;运用Linked Omics数据库和STRING数据库研究与MCM2密切相关的基因。最后运用GSCALite数据库分析相关关键基因的药物靶点。结果MCM2在HNSCC中表达高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。MCM2在不同年龄段、性别、肿瘤分级、临床分期和淋巴转移的HNSCC中表达均高于正常组织,且人乳头瘤病毒(HPV)阳性患者MCM2表达高于HPV阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。HNSCC中MCM2的表达与免疫细胞的浸润水平成正相关(P<0.05)。GSCALite数据库分析显示MCM2受NPK76-II-72-1、Navitoclax、GSK1070916和I-BET-762等药物调节。结论MCM2在HNSCC中高表达,可作为HNSCC诊断和药物治疗的新靶点。

p16/微小染色体维持蛋白2免疫细胞化学双染在宫颈癌筛查中的应用价值

目的探讨p16/微小染色体维持蛋白2(MCM2)免疫细胞化学双染在宫颈癌筛查中的应用价值。方法选取2022年7月至12月于徐州市肿瘤医院进行人乳头瘤病毒(HPV)分型及薄层液基细胞学检查(TCT)检测的525例宫颈癌筛查患者作为研究对象。所有患者均行HPV分型检测、TCT检测、p16/MCM2双染及阴道镜和活检。分析p16/MCM2表达与高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染、宫颈病变的关系,比较p16/MCM2、HR-HPV及TCT诊断宫颈病变的敏感度、特异度及准确率。结果HPV16/18阳性患者、其他HR-HPV阳性患者的p16/MCM2阳性占比高于HPV阴性,差异有统计学意义(P<0.017);HPV16/18阳性患者的p16/MCM2阳性占比与其他HR-HPV阳性比较,差异无统计学意义(P>0.017);宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈鳞癌(SCC)患者中的p16/MCM2阳性占比高于良性病变患者,差异有统计学意义(P<0.005);p16/MCM2、HR-HPV诊断敏感度高于TCT,p16/MCM2、TCT诊断特异度高于HR-HPV,p16/MCM2诊断准确率高于TCT,差异有统计学意义(P<0.017);p16/MCM2与HR-HPV诊断敏感度、p16/MCM2与TCT诊断特异度、p16/MCM2与HR-HPV诊断准确率、HR-HPV与TCT诊断准确率比较,差异无统计学意义(P>0.017)。结论p16/MCM2免疫细胞化学双染诊断宫颈病变敏感度、特异度及准确率均较高,能够识别宫颈异常细胞,降低宫颈病变的漏诊率及误诊率。

微型染色体维持蛋白2在大肠肿瘤中的表达及其意义

目的:研究微型染色体维持蛋白(minichromosome maintenance proteins,MCMs)家族中的一成员Mcm2蛋白在大肠肿瘤中的表达情况及其意义.方法:采用免疫组化染色的方法,检测了23例正常大肠黏膜、33例大肠腺瘤及69例大肠癌组织中Mcm2蛋白的表达,并以标记指数(labelling index,LI)量化其表达.结果:在正常大肠黏膜组织中,Mcm2蛋白表达仅局限于腺体基底部的1/3～1/2部分的增生细胞,而在大肠腺瘤组织和癌组织中,Mcm2蛋白在整个上皮包括肠腔表面的细胞也有大量表达,三者LI的中位数(范围)分别为18%(5%～37%)、35%(15%～75%)、66%(41%～90%),三者之间差异有显著性(P＜0.05).Mcm2蛋白表达在大肠癌患者的不同年龄段(≤40岁和>40岁)、性别、肿块大小(≤3 cm 和>3 cm)、病理学类型、Dukes分期之间无显著性差异(P>0.05),但在大肠肿瘤的不同分化程度(大肠癌的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级,大肠腺瘤的轻、中、重度不典型增生)之间有显著性差异(P<0.05),呈逐渐升高趋势.结论:Mcm2蛋白是大肠肿瘤组织的一种可靠标志物, Mcm2的表达可以提示大肠癌的恶性程度高低和腺瘤的恶变可能性,有助于临床判断患者的预后以及选择合适的治疗方法.

p16、微型染色体维持蛋白2、Ki-67在宫颈鳞状上皮内病变的表达与意义

目的检测子宫颈鳞状上皮内病变(SIL)组织中p16、微型染色体维持蛋白2(MCM2)、Ki-67的表达,分析三者阳性表达的关系,为疾病的临床诊断与治疗提供依据。方法回顾性分析吉安市妇幼保健院2017年7月至2019年10月收治的240例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者(CINⅠ级患者130例,CINⅡ~Ⅲ级110例患者)、50例慢性宫颈炎患者及20例宫颈浸润性鳞癌患者的临床资料。采集各患者宫颈活检组织,进行SP法免疫组织化学染色,检测各患者子宫颈病理组织p16、MCM2、Ki-67的表达情况,分析p16、MCM2、Ki-67阳性表达的相关性。结果CINⅠ级、CINⅡ~Ⅲ级、浸润性鳞癌患者病理组织中p16、MCM2、Ki-67阳性表达率均显著高于慢性宫颈炎患者,且CINⅡ~Ⅲ级、浸润性鳞癌患者显著高于CINⅠ级患者;Spearman相关性分析显示,p16与MCM2阳性表达呈正相关关系(r=0.691);p16与Ki-67阳性表达呈正相关(r=0.556);MCM2与Ki-67阳性表达呈正相关(r=0.676)(均P<0.05)。结论在慢性宫颈炎患者、CIN患者及浸润性鳞癌患者宫颈组织中p16、MCM2、Ki-67均异常高表达,且三者阳性表达与疾病严重程度正相关,p16、MCM2、Ki-67三者阳性表达也具有显著正相关性,可将其作为SIL诊断的分子标志物。

癌组织微小染色体支持蛋白2表达与ⅢA期非小细胞肺癌完全性切除术预后的关系

目的探讨微小染色体支持蛋白2(MCM2)在ⅢA期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测77例NSCLC手术切除标本中MCM2的表达,依据染色程度及阳性染色细胞百分比分为表达阳性及阴性,分析MCM2表达与患者无病生存期及生存时间之间的关系。结果77例ⅢA期NSCLC患者手术标本均不同程度表达MCM2,MCM2表达阳性患者的中位无病生存期及中位生存时间(11和24个月)均显著短于表达阴性患者(16和41个月,P=0.0345、0.0138)。结论MCM2表达是ⅢA期NSCLC手术预后的独立指标。

微型染色体维持蛋白2、诱生型环氧化酶和p53在肺鳞癌中的表达及意义

目的测定微型染色体维持蛋白2(MCM2)、诱生型环氧化酶(COX-2)及p53在肺鳞癌病理组织和正常肺组织中的表达,探讨该表达与肺鳞癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化法测定81例肺鳞癌病理组织和12例正常肺黏膜组织中MCM-2、COX-2及p53表达,对81例术后的患者随访8～60个月。结果81例肺鳞癌中MCM2的表达越高,肿瘤分化程度越低,TNM分期越高(P＜0．001),有淋巴结转移者MCM2的表达高于无淋巴结转移者;但是,COX-2表达越高,肿瘤分化程度越高,TNM分期越低,有淋巴结转移者低于无淋巴结转移者(P=0．042);有淋巴结转移者p53的表达高于无淋巴结转移者(P=0．049);MCM2、COX-2和p53三者两两之间无相关性。单因素生存率分析提示MCM2高表达者的累积生存率明显低于低表达者,COX-2和p53的表达与疾病的预后无关。多因素Cox模型筛选出肿瘤的TNM分期、淋巴结转移状况和MCM2是影响疾病预后的独立因素。结论检测MCM2、COX- 2及p53在肺鳞癌中的表达水平对判断肺鳞癌的恶性程度及预后提供了参考依据。

抑制微小染色体支持蛋白2的表达可增强卵巢癌对卡铂的敏感性

目的:研究微小染色体支持蛋白2(MCM2)对卵巢癌细胞化疗敏感性的影响。方法:使用短发卡RNA(shRNA)下调A2780卵巢癌细胞株中MCM2的表达,应用集落形成试验检测A2780卵巢癌细胞株的数量,并研究其对卡铂化疗的敏感性。结果:下调A2780卵巢癌细胞株中MCM2的表达,可抑制癌细胞的增殖,延缓细胞周期G 0进入G 1期。MCM2表达的下调显著减少了卡铂治疗后的A2780卵巢癌细胞株的集落形成数量。结论:卵巢癌细胞对卡铂的敏感性可能与P53介导的细胞凋亡机制有关,下调MCM2的表达可提高卵巢癌细胞对化疗的敏感性,为治疗卵巢癌提供新的方法。

应用组织芯片检测MCM-2和P16在肾细胞癌中的表达研究

目的:应用组织芯片技术探讨蛋白MCM-2和P16在肾细胞癌中的表达情况及两者的相关性。方法:采用免疫组织化学方法(SP法)检测82例肾细胞癌和40例正常对照组中MCM-2和P16的表达情况。结果:MCM-2在肾细胞癌组中表达阳性率为79.3%,高于对照组32.5%,并且随组织学分级增高表达增强(P<0.05),与组织学类型及临床分期无关(P>0.05);P16肾细胞癌组中表达阳性率为36.7%,低于对照组62.5%,并且随组织学分级增高与临床分期增加阳性率降低(P<0.05),而与组织学类型无关(P>0.05);在肾细胞癌组中两者呈负相关。结论:MCM-2和P16可能参与了肾细胞癌的发生发展过程,两者联合表达可用于判断肾细胞癌的恶性程度。

PTK7、HER-2、Mcm5蛋白在食管鳞癌组织中的表达水平及其临床预后价值研究

目的:探究酪氨酸蛋白激酶-7(PTK7)、人表皮生长因子受体2(HER-2)、微小染色体维持蛋白5(Mcm5)蛋白在食管鳞癌(ESCC)组织中的表达水平及其临床预后价值。方法:选择180例ESCC患者作为研究对象,采集其肿瘤组织,并随机收集100例癌旁组织,通过免疫组化染色检测PTK7、HER-2、Mcm5蛋白的表达水平,以及其与临床病理特点以及与预后的关系。结果:ESCC组织中PTK7、HER-2、Mcm5的阳性率均显著高于癌旁组织(P<0.05)。出现淋巴转移组织中PTK7的阳性率显著高于未出现淋巴转移(P<0.05)。瘤体直径大于2 cm、TNM分期为Ⅲ期和Ⅳ期以及合并淋巴转移ESCC组织HER-2阳性率显著升高(P<0.05)。TNM分期为Ⅲ期和Ⅳ期以及合并淋巴转移ESCC组织Mcm5阳性率更高(P<0.05)。ESCC组织中PTK7表达水平与淋巴转移正相关(P<0.05),HER-2与TNM分期和淋巴转移正相关(P<0.05),Mcm5与瘤体大小、TNM分期和淋巴转移正相关(P<0.05)。PTK7、HER-2、Mcm5阳性的ESCC患者的无瘤生存期显著短于阴性组(P<0.05)。结论:在ESCC组织中PTK7、HER-2、Mcm5的表达水平均显著上调,并且高水平的HER-2、Mcm5预示着更严重的病理分期以及淋巴转移,并且PTK7、HER-2、Mcm5与更差的预后有关。