重复经颅磁刺激对阿尔茨海默病患者临床症状及血浆微小核糖核酸-125b、血浆磷酸化Tau-181蛋白的影响

目的:观察重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)患者认知功能、神经精神行为症状及血浆微小核糖核酸-125b(microRNA-125b,miR-125b)、血浆磷酸化Tau-181蛋白(phosphorylated Tau181 protein,P-tau181)表达的影响。方法:筛选轻中度AD患者34例,随机分为对照组(n=16)和试验组(n=18)。对照组采取认知训练及重复经颅磁伪刺激,试验组采取认知训练结合重复经颅磁真刺激。磁刺激强度为100%的静息运动阈值,频率为10Hz,每日治疗1次,每周治疗5天,持续4周,刺激脑区为左侧前额叶背外侧区和左侧颞叶区。在治疗前、后进行Addenbrooke-Ⅲ认知检查(the AddenbrookeⅢcognitive examination,ACE-Ⅲ)、简易精神状态量表(mini-mental state scale,MMSE)及神经精神症状问卷(neuropsychiatric inventory,NPI)评估,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测微小miR-125b表达量,酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技术检测P-tau181的浓度。结果:治疗结束后,试验组ACE-Ⅲ、MMSE和NPI评分以及miR-125b、P-tau181均较组内治疗前显著改善,差异具有显著性意义(P<0.05),且上述指标与对照组治疗后相比,差异具有显著性意义(P<0.05);而对照组各项指标改善不具有显著性意义(P>0.05)。结论:rTMS能改善轻中度AD患者的认知功能及神经精神行为症状,这可能与rTMS促进血浆miR-125b的表达和抑制P-tau181蛋白产生相关。

脓毒症患者外周血miR-125b、miR-150表达及其临床意义

目的 探讨脓毒症患者外周血微小核糖核酸-125b(miR-125b)、微小核糖核酸-150(miR-150)表达及其临床意义。方法 选取邢台市中心医院收治的103例脓毒症患者为研究组,另选取体检健康者82例为健康组,均测定外周血miR-125b、miR-150表达及血清白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平。对比研究组、健康组各指标水平,采用Pearson相关性分析法分析脓毒症患者miR-125b、miR-150表达与IL-6、CRP、PCT水平的关系;比较不同严重程度脓毒症患者及不同预后患者的miR-125b、miR-150表达;采用多因素Logistic回归分析法分析miR-125b、miR-150表达与预后的关系;通过受试者工作特征曲线分析miR-125b、miR-150表达对脓毒症预后的预测价值。结果 研究组外周血miR-125b表达与IL-6、CRP、PCT水平分别为(2.43±0.35)、(159.42±26.81)pg/mL、(115.47±20.38)mg/L、(10.57±2.03)ng/mL,均高于健康组(t=31.012、52.149、48.978、46.945,均P=0.000),miR-150表达(0.21±0.04)低于健康组(t=52.008,P=0.000);经Pearson相关性分析,脓毒症患者外周血miR-125b表达与IL-6(r=0.706,P=0.016)、CRP(r=0.711,P=0.013)、PCT(r=0.759,P=0.001)水平均呈正相关,miR-150与IL-6(r=-0.702,P=0.018)、CRP(r=-0.709,P=0.015)、PCT(r=-0.728,P=0.006)水平均呈负相关;脓毒症者外周血miR-125b表达(2.16±0.43)低于严重脓毒症者(2.82±0.27)(t=8.815,P=0.000),脓毒症者外周血miR-150表达(0.24±0.02)高于严重脓毒症者(0.16±0.03)(t=16.248,P=0.000);入院28 d生存者外周血miR-125b表达(2.25±0.41)低于死亡者(3.13±0.36)(t=8.982,P=0.000),生存者外周血miR-150表达(0.23±0.04)高于死亡者(0.13±0.02)(t=11.078,P=0.000);年龄、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、疾病严重程度及外周血miR-125b表达均是脓毒症患者预后的危险因素(OR=2.438、2.689、2.866、2.824,P=0.036、0.012、0.000、0.005),miR-150表达是其保护因素(OR=0.390,P=0.003);外周血miR-125b、miR-150表达预测脓毒症预后的最佳截断点分别为2.854、0.179,灵敏度分别为76.19%、80.95%,特异度分别为79.27%、75.61%,曲线下面积分别为0.861、0.843。结论 与健康人群比较,脓毒症患者外周血miR-125b表达升高,而miR-150表达降低,且miR-125b、miR-150表达均与炎症因子水平、疾病严重程度及预后相关,并对预后具有一定的预测价值,可作为临床判断病情严重程度及预后的指标。

甲状腺癌患者NF-κB mRNA、miR-125a-5p与临床病理特征及预后的关系

目的探究甲状腺癌患者核转录因子-κB(NF-κB)mRNA、miR-125a-5p与临床病理特征及预后的关系。方法选取2017年5月—2020年4月240例甲状腺癌手术患者作为观察组,另选取同期体检健康者60例作为对照组。比较2组NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平,分析甲状腺癌患者NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平与临床病理特征的关系,比较复发与未复发患者临床资料,分析NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平与甲状腺癌术后复发的关系及NF-κB mRNA、miR-125a-5p间的相关性,采用受试者工作特征曲线评价NF-κB mRNA、miR-125a-5p检测对甲状腺癌术后复发的预测价值。结果观察组NF-κB mRNA水平高于对照组,miR-125a-5p水平低于对照组(P<0.05)。甲状腺癌患者NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平在肿瘤大小、临床分期、血管间隙浸润及淋巴结转移方面比较差异有统计学意义(P<0.01)。甲状腺癌术后复发患者肿瘤大小>5 cm、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、血管间隙浸润及淋巴结转移比例和术后1周NF-κB mRNA水平均高于未复发患者,术后1周miR-125a-5p水平及NF-κB mRNA、miR-125a-5p手术前后差值绝对值均低于未复发患者(P<0.05,P<0.01)。NF-κB mRNA、miR-125a-5p手术前后差值绝对值是甲状腺癌术后复发的影响因素(P<0.01)。NF-κB mRNA、miR-125a-5p手术前后差值绝对值联合预测甲状腺癌术后复发的曲线下面积为0.927,高于各指标单独预测的曲线下面积(0.831、0.775)(P<0.05)。相关性分析可知,甲状腺癌患者NF-κB mRNA与miR-125a-5p呈负相关(r=-0.765,P<0.01)。结论甲状腺癌患者NF-κB mRNA水平上调,miR-125a-5p水平下调,临床检测手术前后差值绝对值,可预测其术后复发情况,便于术后早期制订辅助治疗方案。

miR-125a对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响及机制

目的探讨微小RNA-125a(miR-125a)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭等生物学行为的影响及机制。方法常规培养人EC细胞(JEC、HEC-1B、Ishikawa细胞)和子宫内膜上皮细胞(ECS细胞)。用RT-PCR法检测细胞中miR-125a表达,筛选miR-125a表达最低的细胞为实验细胞。取对数生长期miR-125a表达最低的EC细胞,并将其随机分为miR-NC组、miR-125a mimics组,分别转染miRNA阴性对照miR-NC、miR-125a模拟物miR-125a mimics。用RT-PCR法检测miR-125a表达,用CCK-8实验检测细胞增殖活性(OD值),用平板克隆实验检测细胞集落形成能力,用流式细胞术检测细胞凋亡能力(凋亡率),用Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blotting法检测细胞内LIN28同系物B(LIN28B)蛋白表达。结果与ECS细胞比较,JEC、HEC-1B、Ishikawa细胞中miR-125a相对表达量均低(P均<0.05),且Ishikawa细胞miR-125a的相对表达量最低,将其作为实验细胞。与miR-NC组比较,miR-125a mimics组miR-125a表达高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-125a mimics组培养24、48、72 h后OD值低,集落形成数少,凋亡率高,迁移细胞数、侵袭细胞数少,LIN28B蛋白相对表达量低,比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论上调miR-125a表达可抑制EC细胞增殖、迁移及侵袭,并诱导其凋亡,该作用可能与其靶向调控LIN28B表达有关。

微小RNA miR-125b真核表达载体的构建及其对细胞增殖的影响

目的:构建微小RNA125b(miR-125b)真核表达载体,研究其过表达后对细胞增殖的影响。方法:以pcDNA3.1(-)-myc-his载体为模板,PCR扩增CMV启动子,克隆入pHRS-1cla-EGFP慢病毒载体,构建pHRS-1cla-CMV-EGFP载体;以从人全血中提取的基因组DNA为模板,PCR扩增pri-miR-125b序列,将其克隆到pHRS-1cla-CMV-EGFP载体中,构建pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP慢病毒表达载体;将pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP表达载体瞬时转染入293FT细胞,用实时定量PCR技术对miR-125b在转录水平的表达进行检测,用MTT及Brdu法检测miR-125b过表达后对293FT细胞增殖的影响。结果:构建的pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP真核表达载体经质粒酶切和测序鉴定正确,转染细胞后72h经实时定量PCR检测,成熟miR-125b表达上调约750倍(P<0.01),说明其能有效高表达,MTT及Brdu法检测显示细胞增殖受到明显抑制(P<0.01)。结论:构建了pHRS-1cla-miR-125b-CMV-EGFP慢病毒真核表达载体,转染293FT细胞后能高效表达成熟miR-125b,同时证明过表达miR-125b能使细胞的增殖受到非常明显的抑制。

GDM患者miRNA-125b、SFRP5、SerpinB1变化及益生菌联合胰岛素治疗效果

目的:探究微小RNA-125b(miRNA-125b)、分泌型卷曲相关蛋白-5(SFRP5)和丝氨酸蛋白酶抑制剂B1(SerpinB1)对妊娠期糖尿病(GDM)诊断价值及益生菌联合胰岛素治疗效果。方法:选取2020年1月-2022年12月入院接受治疗的GDM孕妇90例纳入病例组,同期待产的90例健康孕妇纳入健康组;病例组给予益生菌冻干粉联合门冬胰岛素治疗,PCR分析miRNA-125b相对表达水平,酶联免疫吸附试验法测定SFRP5和SerpinB1水平;检测病例组空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平、餐后2 h血糖(2 h PG)水平。对比病例组和健康组miRNA-125b、SFRP5和SerpinB1水平,分析miRNA-125b、SFRP5和SerpinB1对GDM诊断价值;对比干预前后病例组miRNA-125b、SFRP5、SerpinB1和血糖水平。结果:病例组miRNA-125b(0.62±0.11)和SFRP5(9.16±1.37 ng/ml)均低于健康组(1.55±0.29、14.96±3.18 ng/ml),SerpinB1(2.89±0.95 ng/ml)高于健康组(2.34±0.58 ng/ml)(均P<0.05);miRNA-125b、SFRP5、SerpinB1联合诊断GDM的ROC曲线下面积为0.941,特异性(93.2%)敏感度(96.5%)高于单独指标检测(P<0.05);病例组治疗3个月后,miRNA-125b和SFRP5水平均高于治疗前,SerpinB1、FBG、2hPG和HbAlc水平均低于治疗前(均P<0.05),发生低血糖2例、皮疹1例、恶心呕吐2例,但症状均较轻,减少用药剂量或停药后症状均消失。结论:相较于健康孕妇,GDM患者miRNA-125b和SFRP5水平降低,SerpinB1水平升高,3项联合检测对GDM有较高诊断价值;应用益生菌联合门冬胰岛素治疗,可明显改善GDM患者miRNA-125b、SFRP5、SerpinB1和血糖水平。

过表达微小RNA miR-125b对人胚胎干细胞增殖的影响

目的:通过在人胚胎干细胞(hESC)中有效转染微小RNA miR-125b的真核表达载体,研究过表达miR-125b对hESC增殖的影响。方法:将在无饲养层上培养至第3 d,克隆融合达70%的hESC用Accutase酶消化为单细胞,然后用LipofectAMINE2000对hESC单细胞转染pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP载体及其对照pHRS-1cla-CMV-EGFP载体,通过实时定量PCR对转染后细胞中成熟miR-125b的表达进行检测;进一步进行细胞计数和克隆计数,对miR-125b表达上调的hESC的增殖情况进行分析。结果:实时定量PCR检测结果表明,细胞转染后72 h,miR-125b的表达上调1.45倍,说明hESC转染成功;克隆计数及细胞计数结果显示过表达miR-125b的hESC增殖受到明显抑制(P<001)。结论:转染miR-125b真核表达载体的hESC能够上调成熟miR-125b的表达,hESC中miR-125b的表达上调能明显抑制hESC的增殖。

MiR-125b表达与子宫内膜癌细胞侵袭及迁移的研究

目的:探讨微小RNA分子miR-125b的表达与子宫内膜癌临床特性的关系及其对子宫内膜癌株HEC-1B细胞的侵袭及迁移能力的影响。方法:收集2012年11月至2013年11月期间四川省妇幼保健院30例子宫内膜癌患者组织标本,利用Taqman Quantitative Realtime-PCR技术检测miR-125b在不同临床分期及不同转移状态的子宫内膜癌患者肿瘤组织中的相对表达情况,分析其表达与子宫内膜癌临床分期及远处转移间的关系;恢复HEC-1B细胞内miR-125b的表达,分别运用Transwell体外侵袭及迁移实验检测其对HEC-1B细胞侵袭及迁移能力的影响。结果:Ⅳ期子宫内膜癌组织中miR-125b的表达较Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期肿瘤组织均明显下降,无远处转移患者组织中miR-125b表达较伴有转移患者表达明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。Transwell迁移实验结果表明,miR-125b组穿膜细胞数(184±35个)较未处理组(410±45个)和对照组(398±40个)明显减少,差异有统计学意义(P<0.01);侵袭实验结果表明,过表达miR-125b组穿膜细胞细胞数(123±32个)同样明显少于未处理组(220±30个)和对照组(215±35个),差异有统计学意义(P<0.01)。进一步的蛋白印迹结果显示,过表达miR-125b后细胞中基质金属蛋白酶13(MMP-13)表达下降。结论:miR-125b的低表达与子宫内膜癌有无远处转移及临床病理分期有关,恢复其在HEC-1B细胞中的表达能够明显抑制细胞体外侵袭及迁移,这可能与抑制细胞中MMP-13表达有关。

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞miR-125b及miR-145的表达及临床意义

目的探讨miR-125b及miR-145在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平及其临床意义。方法选取海南省人民医院收治的136例SLE患者,采用SLE病情活动指数(SLEDAI)评分将其分为低活动组(n=75)和高活动组(n=61),另选取60例健康体检者作为对照组。采用实时定量PCR(RT-PCR)法检测各组PBMC中miR-125b及miR-145水平,分析其对SLE患者的诊断价值。Pearson相关分析SLE患者miR-125b及miR-145水平与抗双链DNA(dsDNA)抗体、C3、C4、IgG、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)及SLEDAI评分的相关性。结果 SLE组、高活动组和低活动组抗dsDNA抗体、ESR、IgG及CRP水平均明显高于对照组(P<0.05),而C3及C4水平均明显低于对照组(P<0.05)。SLE组、高活动组和低活动组PBMC中miR-125b(0.84±0.23、0.42±0.09和1.53±0.28 vs 6.12±1.83)及miR-145(0.68±0.17、0.35±0.06和1.12±0.20 vs 2.15±0.64)表达水平均明显低于对照组(P<0.01),且高活动组PBMC中miR-125b(0.42±0.09 vs 1.53±0.28)及miR-145(0.35±0.06 vs1.12±0.20)表达水平明显低于低活动组(P<0.01)。SLE患者治疗后miR-125b(2.60±0.71 vs 0.84±0.23)及miR-145(1.96±0.58 vs 0.68±0.17)表达水平明显高于治疗前(P<0.01),SLE患者治疗后抗dsDNA抗体(96.24±17.20 vs 272.36±64.35)水平明显低于治疗前(P<0.01)。ROC曲线分析显示,miR-125b、miR-145及抗dsDNA抗体三项联合诊断SLE的AUC(95%CI)为0.928(0.871～0.986),其敏感度(90.4%)和特异度(85.0%)较好。相关分析显示,SLE患者miR-125b、miR-145与抗dsDNA抗体、IgG、SLEDAI评分均呈负相关(P<0.05),miR-125b与miR-145呈明显正相关(r=0.805,P<0.05)。结论 miR-125b及miR-145水平在SLE患者PBMC中明显降低,且与SLE病情活动相关,联合抗dsDNA抗体检测对SLE诊断具有一定价值。

miR-125b、miR-29a和miR-155-5p作为诊断结核性脑膜炎生物标志的研究

目的探讨结核性脑膜炎患者脑脊液及血浆中micro RNA(mi R)-125b、mi R-29a和mi R-155-5p的表达水平及其临床意义。方法收集20例结核性脑膜炎患者(结脑组)和20例原发性头痛患者(对照组)的脑脊液和血浆,分别提取总RNA,使用实时定量PCR方法分别检测脑脊液和血浆中mi R-125b、mi R-29a及mi R-155-5p的表达水平。结果与对照组相比,结脑组脑脊液、血浆中mi R-29a、mi R-125b表达水平明显上调,结脑组血浆中mi R-155-5p表达水平明显上调,差异均有统计学意义(均P<0.01),而2组脑脊液中mi R-155-5p表达水平比较差异无统计学意义。结论 mi R-125b、mi R-29a和mi R-155-5p可能参与了调节结核性脑膜炎的发生、发展过程,mi R-125b和mi R-29a有可能作为潜在的诊断结核性脑膜炎的生物学标志。

早产儿血清mi R-125b,LncRNA MALAT1表达水平与支气管肺发育不良的相关性研究

目的 探讨早产儿血清微小核糖核酸(micro RNA,mi R)-125b,长链非编码RNA(long non-coding RNA,Lnc RNA)转移相关肺腺癌转录本-1(metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)水平与支气管肺发育不良(broncho-pulmonary dysplasia,BPD)的关系。方法 选取2020年4月~2021年4月入住潍坊市妇幼保健院新生儿重症监护室(neonatal intensive care unit,NICU)的227例早产儿作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RQ-PCR)检测血清mi R-125b和Lnc RNA MALAT1的表达水平;绘制血清mi R-125b和Lnc RNA MALAT1预测早产儿BPD发生的ROC曲线;多因素Logistic回归分析影响早产儿BPD的有关因素。结果 BPD组早产儿给氧时间34.54±9.21天,机械通气时间23.97±1.30h长于非BPD组(17.28±5.22天,4.71±2.26h),差异具有统计学意义(t=17.387,60.047,均P<0.05)。进入NICU后第10和14天,BPD组早产儿血清mi R-125b水平(0.70±0.18,0.48±0.16)均低于无BPD组(0.99±0.12,1.02±0.16),差异具有统计学意义(t=13.683,21.787,均P<0.05);血清Lnc RNAMALAT1水平(1.52±0.41,2.02±0.61)均高于无BPD组(1.03±0.15,1.02±0.11),差异具有统计学意义(t=13.198,20.569,均P<0.05);血清mi R-125b水平在轻度BPD组、中度BPD组和重度BPD组中依次降低(0.60±0.16,0.47±0.12,0.36±0.10),血清Lnc RNA MALAT1水平在轻度BPD组、中度BPD组和重度BPD组中依次升高(1.54±0.42,1.99±0.51,2.45±0.62),差异具有统计学意义(F=15.872,14.084,均P<0.05)。ROC分析结果显示,血清mi R-125b预测早产儿BPD的曲线下面积(AUC)为0.820(0.765~0.875),最佳诊断截点为0.59,Lnc RNA MALAT1预测早产儿BPD的AUC为0.773(0.685~0.861),最佳诊断截点为1.71,两个指标联合预测的价值最高,AUC为0.902(0.855~0.948)。多因素Logistic回归分析结果显示,给氧时间(OR:2.135,95%CI:1.241~3.674,P=0.006)、机械通气时间(OR:2.187,95%CI:1.132~4.225,P=0.020)和Lnc RNA MALAT1(OR:2.016,95%CI:1.190~3.416,P=0.009)是早产儿BPD的独立危险因素,mi R-125b(OR:0.699,95%CI:0.552~0.884,P=0.003)是早产儿BPD的独立保护因素。结论 血清mi R-125b水平降低及Lnc RNA MALAT1水平升高与早产儿BPD及严重程度有相关,检测早产儿血清mi R-125b,Lnc RNA MALAT1可为临床早期诊断治疗BPD提供理论依据。

MiR-125b对心肌梗死后成纤维细胞的调控机制研究

目的探讨微小核糖核酸125b(miR-125b)对成人心脏成纤维细胞(HCF-a)合成胶原、增殖、活化、迁移、凋亡的调控作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)通路的影响。方法体外培养HCF-a细胞,分为空白对照组和miR-125b模拟物转染组。采用RT-PCR和Western blot法检测胶原-Ⅰ、胶原Ⅲ、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3基因和蛋白表达情况;采用MTT法检测HCF-a细胞增殖情况;采用Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果与空白对照组相比,miR-125b过表达可明显上调Col-Ⅰ和Col-Ⅲ、α-SMA m RNA和蛋白的表达,促进细胞增殖、迁移和凋亡(P<0.05)。另外,经RT-PCR检测,与空白对照组比较,miR-125b过表达可明显促进TGF-β1 m RNA的表达水平(P<0.05);经Western blot检测,与空白对照组比较,miR-125b过表达对HCF-a细胞Smad2/Smad3蛋白磷酸化水平均有明显上调作用(P<0.05)。结论Mi R-125b可以通过调控TGF-β1/Smad通路参与心肌纤维化进程。

中枢性性早熟女童血清微小核糖核酸-125b和微小核糖核酸-664-2表达及与促性腺激素释放激素激动剂疗效的关系

目的 探讨中枢性性早熟女童血清微小核糖核酸-125b(miR-125b)、微小核糖核酸-664-2(miR-664-2)表达及与促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)疗效的关系。方法 选取2020年1月-2022年12月宁波大学附属人民医院收治的120例中枢性性早熟女童作为研究组,另招募健康体检女童127例作为对照组。采用实时-逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组血清miR-125b、miR-664-2表达量并比较。研究组采用GnRHa治疗,对比研究组治疗前后血清性激素水平,评价研究组临床疗效,比较研究组治疗有效与治疗无效女童的血清miR-125b、miR-664-2表达量,采用logistic回归分析法分析研究组治疗无效的影响因素。结果 研究组血清miR-125b、miR-664-2表达均高于对照组(P<0.05)。研究组治疗后血清miR-125b、miR-664-2表达,黄体生成素(LH)、雌激素(E_2)、卵泡刺激素(FSH)水平均低于治疗前(均P<0.05)。研究组治疗总有效率为74.17%。研究组治疗无效女童治疗前后血清miR-125b、miR-664-2表达均高于治疗有效女童(均P<0.05),治疗有效女童治疗后血清miR-125b、miR-664-2表达均低于治疗前(均P<0.05),而治疗无效女童治疗前后比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。发病年龄(OR=0.456,95%CI:0.246~0.844),骨龄(OR=2.368,95%CI:1.290~4.347),未遵医嘱调整饮食(OR=2.843,95%CI:1.801~4.489),经常使用成人洗护用品(OR=2.818,95%CI:1.508~5.266),治疗前血清miR-125b表达(OR=3.196,95%CI:1.694~6.032)、miR-664-2表达(OR=3.873,95%CI:2.126~7.055)均是治疗无效的影响因素(均P<0.05)。结论 中枢性性早熟女童血清miR-125b、miR-664-2表达升高,与性激素有关,且是GnRHa治疗无效的危险因素。

血清miR-125b、miR-142-3p表达与脓毒症预后的关系及其预测价值

目的分析血清微小RNA(miR)-125b、miR-142-3p表达与脓毒症患者预后的关系及其预测价值。方法选择2017年1月—2019年10月海南省人民医院重症医学科重症监护室(ICU)住院的脓毒症患者100例作为脓毒症组,同时选取ICU非脓毒症患者90例作为对照组,脓毒症患者根据28 d预后情况分为存活亚组(63例)和死亡亚组(37例)。2组患者入ICU后24 h内,进行APACHEⅡ、SOFA评分,检测血清miR-125b、miR-142-3p表达水平和炎性因子水平。Pearson法分析miR-125b和miR-142-3p与炎性因子相关性;受试者工作特征曲线(ROC)评估血清miR-125b和miR-142-3p对脓毒症患者预后的预测价值。结果脓毒症组患者血清WBC、CRP、PCT、TNF-α、IL-6、IL-1β水平及miR-125b、miR-142-3p的表达水平显著高于对照组(t=8.828、5.764、21.790、18.763、35.251、20.490、10.942、14.427,P均=0.000);存活亚组患者入院时APACHEⅡ评分、SOFA评分、PCT、TNF-α、IL-1β、miR-125b和miR-142-3p水平均低于死亡亚组(t=8.264、5.564、6.412、25.032、10.943、7.905、7.154,P均=0.000);miR-125b与APACHEⅡ评分、SOFA评分、CRP、PCT、TNF-α和IL-6呈正相关(r/P=0.364/0.006、0.313/0.017、0.398/0.001、0.234/0.028、0.437/0.001、0.204/0.041),miR-142-3p与PCT、TNF-α、IL-6和IL-1β呈正相关(r/P=0.293/0.021、0.512/0.000、0.344/0.009、0.418/0.000);血清miR-125b表达水平预测脓毒症患者预后的曲线下面积(AUC)为0.746,最佳临界值为1.74,敏感度和特异度分别为79.57%和72.26%,约登指数为0.518;血清miR-142-3p预测患者预后的AUC为0.685,最佳临界值为2.68,敏感度和特异度分别为68.03%和71.15%,约登指数为0.392。结论脓毒症患者血清miR-125b和miR-142-3p表达升高,且与不良预后有关,二者均与炎性因子具有一定相关性,其中miR-125b对脓毒症患者预后的预测效能较好。

miR-125b靶向STAT3调控舌鳞状细胞癌增殖、迁移、侵袭机制的研究

目的 对miR-125b靶向STAT3调控舌鳞状细胞癌增殖、迁移、侵袭的机制进行研究。方法 采用实时荧光PCR法检测miR-125b在舌鳞状细胞癌癌组织及癌旁组织中的表达,采用MTT法检测细胞的增殖能力;采用Transwell法检测miR-125b对舌鳞状细胞癌细胞的侵袭作用;采用划痕实验检测舌鳞状细胞癌细胞的迁移能力;采用双荧光素酶活性检测法检验STAT3与miR-125b之间的关系。结果 qPCR法证实,miR-125b在癌组织(1.72±0.31)中的表达明显高于癌旁组织(0.51±0.11);与NC mimics+STAT3-3′UTR(wt)组的相对荧光素酶活性相比较,miR-125b+STATS3-3′UTR(Wt)组明显降低(P<0.05);miR-125b+STATS3-3′UTR(MUT)组与NC mimics+STATS3-3′UTR(MUT)组的相对荧光素酶活性相比无统计学差异(P>0.05);miR-125b对舌鳞细胞癌的增殖抑制作用随浓度增加而增加,呈浓度依赖性;不含miR-125b的溶液对癌细胞的侵袭能力(77.49±9.11)大于含miR-125b的溶液对癌细胞的侵袭能力(19.23±3.82),miR-125b对癌细胞的侵袭能力具有显著的下调作用;含有miR-125b组的细胞愈合率明显下降。结论 miR-125b可调控STAT3的蛋白表达从而抑制舌鳞状细胞癌的增殖、迁移、侵袭。

弥漫大B细胞淋巴瘤患者miR-125表达水平与临床病理及预后的关系分析

目的分析弥漫大B细胞淋巴瘤(Diffuse Large B-cell Lymphoma,DLBCL)患者微小RNA-125(microRNA-125,miR-125)表达水平与临床病理参数及预后的关系。方法回顾性分析2015年3月-2017年3月四川大学华西医院血液内科收治的148例DLBCL患者的临床资料,列为DLBCL组。取同期收治的淋巴结反应性增生(Reactive Hyperplasia of Lymph Node,RH)患者35例列为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链方法(Real-Time Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测组织标本miR-125表达,分析其与DLBCL病理特点及预后的关系。结果DLBCL组组织miR-125表达水平(3.514±1.101)明显高于对照组(0.362±0.097,P<0.05),差异有统计学意义;免疫表型、乳酸脱氢酶水平、IPI评分与Ki-67指数均为miR-125表达相关影响因素(P<0.05);免疫表型为非生发中心来源、Ann Arbor临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、乳酸脱氢酶>245 U/L、国际预后指数(International Prognostic Index,IPI)评分3~5分、结外累及≥2处、Ki-67指数≥75%的DLBCL患者miR-125表达水平更高(P<0.05);低miR-125表达组总生存率为97.4%,中位生存时间为36.30个月;高miR-125表达组总生存率为77.1%,中位生存时间为33.67个月,两组生存情况比较(Log Rankχ^2=4.488,P=0.034<0.05)。结论DLBCL组组织miR-125呈异常高表达,且与免疫表型、乳酸脱氢酶水平、IPI评分及Ki-67指数有关,参与DLBCL发病及进展过程,且对预后存在一定的影响。

miR-125b、miR-126在儿童哮喘中的诊断价值及其与哮喘严重程度的关系

目的探讨微小核糖核酸-125b(miR-125b)、miR-126对儿童哮喘的诊断价值,分析二者与哮喘严重程度的关系。方法选取该院2017年9月至2020年12月收治的120例哮喘患儿、79例单纯上呼吸道感染患儿作为哮喘组、感染组,另选取同期84例体检健康志愿儿童作为对照组。检测并比较3组血清miR-125b、miR-126水平及肺功能指标[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、FEV_(1)/FVC],采用Pearson线性相关分析血清miR-125b、miR-126水平与肺功能指标的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-125b、miR-126单独和联合检测诊断哮喘的曲线下面积(AUC)。根据哮喘严重程度,将哮喘患儿分成轻度组、中度组及重度组,比较3组血清miR-125b、miR-126水平,采用Spearman相关分析血清miR-125b、miR-126水平与患儿哮喘严重程度的相关性。结果哮喘组血清miR-125b、miR-126水平高于感染组与对照组(P<0.05),感染组血清miR-125b、miR-126水平高于对照组(P<0.05);哮喘组FEV_(1)、FEV_(1)/FVC低于感染组与对照组(P<0.05)。血清miR-125b、miR-126水平与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC均呈负相关(r<0,P<0.05)。血清miR-125b、miR-126单独和联合检测诊断哮喘的AUC分别为0.763、0.749、0.846。重度组、中度组血清miR-125b、miR-126水平高于轻度组(P<0.05),重度组高于中度组(P<0.05)。血清miR-125b、miR-126水平与哮喘严重程度均呈正相关(r>0,P<0.05)。结论哮喘患儿血清miR-125b、miR-126水平明显升高,二者对哮喘诊断及哮喘严重程度评估均有一定价值。

CXCL12/CXCR4轴通过诱导miR-125b促进肝癌细胞肿瘤干性和5-氟尿嘧啶抵抗的机制

目的探究趋化因子CXCL12/趋化因子受体CXCR4轴通过诱导miR-125b促进肝癌细胞肿瘤干性和5-氟尿嘧啶(5-FU)抵抗的机制。方法选择人肝细胞癌细胞系Huh7,分为7组:对照组(正常培养的肝细胞癌系),CXCR4转染组(CXCR4模拟转染超表达),CXCR4沉默组(CXCR4低表达或者不表达),miR-125b转染组(miR-125b超表达),CXCL12+125b抑制剂组(CXCL12超表达的+抑制miR-125b的表达),5-FU处理组(10μg/L的5-FU处理细胞),5-FU+miR-125b转染组(10μg/L的5-FU处理+miR-125b超表达的细胞)。聚合酶链式反应分析miR-125b mRNA表达;蛋白质印迹法检测E-钙粘蛋白、波形蛋白、CXCR4蛋白、Caspase-3、Bcl-2和Bax的蛋白表达;Transwell分析各组细胞中的细胞迁移、侵袭测定;MTT检测细胞存活力;细胞计数试剂盒8(CCK-8)评估细胞增殖。结果与对照组相比,CXCR4转染组miR-125b mRNA、波形蛋白、CXCR4的蛋白表达显著升高,E黏着蛋白表达显著降低(P<0.05);与CXCR4转染组相比,CXCR4沉默组miR-125b mRNA、波形蛋白、CXCR4的蛋白表达显著降低,E黏着蛋白表达显著升高(P<0.05)。与对照组相比,miR-125b转染组细胞迁移、侵袭数量、细胞活力均显著增加,细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与miR-125b转染组相比,CXCL12+125b抑制剂组,细胞迁移、侵袭数量、细胞活均显著减少,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与对照组相比,5-FU处理组细胞增殖率、Bcl-2表达显著降低,caspase-3、Bax的蛋白表达显著升高(P<0.05),与5-FU处理组相比,5-FU+miR-125b转染组细胞增殖率、Bcl-2表达显著升高,caspase-3、Bax的蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论MiR-125b通过激活CXCL12/CXCR4轴而被上调,miR-125b增强CXCR4的表达,这在触发肿瘤侵袭和进展中形成了正反馈回路。这些结果为miR-125b在肝癌进程和化学抗性的发展中的作用提供了新的线索,为肝癌的治疗提供了潜在的治疗靶点。

颅内动脉瘤患者手术前后血清miR-126、miR-125b表达变化及其临床意义

目的分析颅内动脉瘤患者手术前后血清miR-126、miR-125b表达变化及其临床意义。方法收集2018年8月—2020年8月行手术治疗的104例颅内动脉瘤的临床资料,设为观察组,另选取同期体检的健康者100例为对照组。比较对照组及观察组手术前后血清miR-126、miR-125b表达及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)水平。对观察组进行6个月的随访,根据不同预后分为生存组86例和死亡组18例,并比较术后血清miR-126、miR-125b表达水平。观察术前血清miR-126、miR-125b表达与患者临床特征的关系,同时分析二者与MMP-9、VEGF的相关性。结果观察组术前和术后血清miR-126表达、VEGF、MMP-9水平高于对照组,miR-125b表达低于对照组(P<0.05);观察组术后miR-126表达、VEGF、MMP-9水平低于术前,miR-125b表达高于术前(P<0.05)。术前血清miR-126、miR-125b表达与动脉瘤数目、动脉瘤直径相关(P<0.05,P<0.01)。生存组术后血清miR-126表达低于死亡组,miR-125b表达高于死亡组(P<0.01)。术前血清miR-126表达与VEGF、MMP-9呈正相关(P<0.01),miR-125b表达与VEGF、MMP-9呈负相关(P<0.01)。结论血清miR-126、miR-125b在颅内动脉瘤患者中存在异常表达,与动脉瘤数目、直径及预后有关,且与VEGF、MMP-9具有显著相关性。

miR-125b、miR-29a、miR-425-5p在子宫内膜癌患者血清中表达水平变化及临床意义

目的分析微小核糖核苷酸(miRNA)-125b、miR-29a、miR-425-5p在子宫内膜癌患者血清中相对表达水平变化及临床意义。方法收集2019年5月至2021年3月绵阳市中心医院收治的124例子宫内膜癌患者作为子宫内膜癌组,另选择同期体检的124例健康女性作为健康对照组。应用实时荧光定量PCR检测两组血清miR-125b、miR-29a、miR-425-5p相对表达水平。比较两组血清miR-125b、miR-29a、miR-425-5p相对表达水平,分析其与肿瘤临床分期、淋巴结转移的关系,通过Pearson相关分析miR-125b、miR-29a、miR-425-5p之间的相关性。结果子宫内膜癌组血清miR-425-5p相对表达水平明显高于健康对照组,血清miR-125b、miR-29a相对表达水平明显低于健康对照组(P<0.05);Ⅰ~Ⅱ期子宫内膜癌患者血清miR-125b、miR-29a相对表达水平高于Ⅲ~Ⅳ期患者,血清miR-425-5p相对表达水平低于Ⅲ~Ⅳ期患者(P<0.05);中高分化子宫内膜癌患者血清miR-125b、miR-29a水平高于低分化患者,血清miR-425-5p表达水平低于低分化患者(P<0.05);淋巴结转移的子宫内膜癌患者miR-125b、miR-29a相对表达水平高于无淋巴结转移患者,血清miR-425-5p相对表达水平低于无淋巴结转移患者(P<0.05);浅肌层浸润的子宫内膜癌患者血清miR-125b、miR-29a相对表达水平高于深肌层浸润患者,血清miR-425-5p相对表达水平低于深肌层浸润患者(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,子宫内膜癌患者miR-425-5p与miR-125b、miR-29a均呈负相关(r=-0.419、-0.436,P<0.05)。结论miR-425-5p在子宫内膜癌患者血清中相对表达水平升高,miR-125b、miR-29a在子宫内膜癌患者血清中相对表达水平降低,且其与临床分期、淋巴结转移密切相关,可能作为子宫内膜癌诊断、治疗的新型靶点。