miR-150-5p、miR-135b在糖尿病肾病患者中的表达及意义

目的探讨外周血miR-150-5p、miR-135b水平与糖尿病肾病(DN)患者尿白蛋白排泄率(UAER)、预后的关系。方法采用前瞻性研究方法,选取2019年1月至2021年10月延安大学附属医院收治的85例DN患者作为DN组[男46例,女39例,年龄(46.28±4.41)岁,2型糖尿病(T2DM)病程(7.24±2.31)年],另纳入76例单纯T2DM患者作为T2DM组[男40例,女36例,年龄(44.95±6.13)岁,T2DM病程(6.98±3.28)年],80例健康体检者作为对照组[男43例,女37例,年龄(45.74±5.68)岁]。收集3组患者临床资料及外周血miR-150-5p、miR-135b水平,Spearman分析各指标与UAER相关性,绘制受试者操作特征曲线(ROC)及曲线下面积(AUC),分析各指标预后的预测效能,采用相对危险度(RR)及95%置信区间(CI)分析各指标对预后的影响。结果DN组外周血miR-150-5p、miR-135b水平>T2DM组>对照组[(3.36±0.68)比(1.03±0.62)比(0.78±0.21)、(3.96±0.51)比(1.24±0.48)比(0.66±0.12)],差异均有统计学意义(F=560.11、1519.26,均P<0.05);DN组UAER>300 mg/24 h患者外周血miR-150-5p、miR-135b水平>UAER 30~300 mg/24 h患者>UAER<30 mg/24 h患者[(4.10±0.92)比(3.42±0.64)比(2.73±0.51)、(5.40±0.87)比(3.87±0.61)比(3.02±0.49)],差异均有统计学意义(F=23.53、78.25,均P<0.05);DN患者外周血miR-150-5p、miR-135b水平与UREA呈正相关(r=0.783、0.835,均P<0.05);随访12个月,15例发生终末期肾病(ESRD),发生ESRD患者外周血miR-150-5p、miR-135b水平均高于未发生ESRD患者[(4.41±0.55)比(3.14±0.38)、(4.67±0.61)比(3.81±0.42)],差异均有统计学意义(t=10.67、6.53,均P<0.05);外周血miR-150-5p、miR-135b、联合预测DN并发ESRD的AUC分别为0.733、0.829、0.944。外周血miR-150-5p、miR-135b高水平患者并发ESRD的RR分别为低水平的3.619倍、10.889倍,其95%CI分别为1.105~11.856、1.503~78.872。结论外周血miR-150-5p、miR-135b水平与DN患者UAER呈正相关,联合检测可作为预测DN并发ESRD的重要辅助手段,为临床诊治提供可靠数据支持。

乳腺癌患者血清微小RNA-135b、微小RNA-148a-3p、微小RNA-186-5p表达水平及其与新辅助化疗效果相关性研究

目的:探讨乳腺癌患者血清微小RNA-135b(miR-135b)、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平及其与新辅助化疗效果的相关性。方法:选取116例乳腺癌患者为病例组,均接受新辅助化疗,以21 d为1个周期,共化疗8个周期,根据化疗反应将患者分为耐药组(32例)和敏感组(84例),另选128例体检健康女性为对照组。比较病例组和对照组,耐药组和敏感组血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平。采用Pearson相关性分析血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p水平间的相关性。乳腺癌患者化疗效果的影响因素采用Logistic回归分析。血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p对乳腺癌患者化疗耐药的预测价值通过受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果:与对照组比较,病例组miR-135b、miR-148a-3p水平升高,血清miR-186-5p水平降低(均P<0.05)。耐药组血清miR-135b、miR-148a-3p水平高于敏感组,血清miR-186-5p水平低于敏感组(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血清miR-135b与miR-148a-3p呈正相关,与miR-186-5p呈负相关,血清miR-148a-3p与miR-186-5p呈负相关(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p是乳腺癌患者化疗效果的影响因素(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p联合预测化疗耐药的曲线下面积(AUC)高于三者单独预测AUC(均P<0.05)。结论:乳腺癌患者血清miR-135b、miR-148a-3p水平呈高表达,血清miR-186-5p水平呈低表达,三者水平变化与新辅助化疗效果有关,且三者联合检测对患者新辅助化疗耐药的预测价值更高。

血清miR-200b、miR-135b表达对急性缺血性脑卒中患者脑侧支循环状态及认知功能障碍评估的价值

目的探讨血清微小核糖核酸-200b(miR-200b)、miR-135b表达对急性缺血性脑卒中(AIS)患者脑侧支循环状态及认知功能障碍评估的价值。方法选取海军军医大学第一附属医院2022年3月至2023年3月收治的153例AIS患者作为研究对象,依据数字减影血管造影(DSA)侧支循环状态评分将其分为侧支循环良好组(n=81)和侧支循环不良组(n=72),观察血清miR-200b、miR-135b表达水平。并参照蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估所有患者认知功能状态,依据是否存在认知功能障碍将患者分为非障碍组(n=74)及障碍组(n=79),观察不同认知功能状态患者血清miR-200b、miR-135b水平变化,通过Pearson相关性分析血清miR-200b、miR-135b表达水平与AIS患者脑侧支循环状态及认知功能障碍的相关性。结果侧支循环良好组患者血清miR-200b、miR-135b表达水平及MoCA评分均高于侧支循环不良组患者(P<0.05)。非障碍组患者血清miR-200b、miR-135b表达水平均高于障碍组患者(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:血清miR-200b、miR-135b表达水平与AIS患者脑侧支循环状态呈正相关(r=0.746、0.724,P<0.05);与AIS患者认知功能状态呈正相关(r=0.721、0.703,P<0.05)。ROC曲线分析显示:miR-200b预测不良脑侧支循环发生的约登指数(0.685)最大时对应截断值为0.64,曲线下面积为0.853,预测敏感度为83.33%,特异度为85.19%;miR-135b预测不良脑侧支循环发生的约登指数(0.650)最大时对应截断值为1.16,曲线下面积为0.833,预测敏感度为84.72%,特异度为80.25%。miR-200b预测认知功能障碍发生的约登指数(0.595)最大时对应截断值为0.71,曲线下面积为0.827,预测敏感度为79.75%,特异度为79.73%;miR-135b预测认知功能障碍发生的约登指数(0.488)最大时对应截断值为1.18,曲线下面积为0.800,预测敏感度为77.22%,特异度为71.62%结论血清miR-200b、miR-135b在不良脑侧支循环状态及认知功能障碍的AIS患者中表达水平较低,两者与AIS患者脑侧支循环状态及认知功能状态呈正相关,对不良脑侧支循环及认知功能障碍发生的预测价值较高。

心房颤动患者血清miR-29b和miR-135b水平表达与心房纤维化程度及射频消融术后复发的相关性研究

目的 观察心房颤动(atrial fibrillation,AF)患者血清微小核糖核酸(micro RNA,miRNA,miR)-29b和miR-135b的表达变化,探讨二者表达与心房纤维化程度及射频消融术后复发的关系。方法 选取2019年7月~2022年7月于沧州市人民医院心血管内科住院诊治并接受射频消融术治疗的AF患者(病例组,n=158)以及同期体检的健康者(对照组,n=126)。收集AF患者的一般临床资料及生化指标,采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-29b和miR-135b相对表达水平。采用多因素Logistic回归分析AF患者术后复发的影响因素;绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-29b和miR-135b水平对AF患者术后复发的预测价值,曲线下面积(area under the curve,AUC)比较采用Z检验。结果 与对照组比较,病例组血清miR-29b(0.64±0.13 vs 1.04±0.24)和mi R-135b水平(0.45±0.08 vs 1.00±0.14)均降低,差异均有统计学意义(t=17.916,41.604,均P<0.05);与低纤维化组比较,高纤维化组血清miR-29b(0.51±0.11 vs 0.76±0.15)和miR-135b水平(0.34±0.07 vs 0.55±0.09)均降低,差异有统计学意义(t=11.896,16.314,均P<0.05)。与未复发组比较,复发组左心房内径(45.34±3.56 mm vs35.23±2.89 mm)和血清尿酸(uric acid,UA)水平(478.15±68.45μmol/L vs 421.75±61.76μmol/L)均升高,血清miR-29b(0.54±0.12 vs 0.72±0.14)和miR-135b水平(0.36±0.06 vs 0.53±0.10)均降低,差异有统计学意义(t=19.702,5.441,8.584,12.642,均P<0.05)。Logistic回归分析显示,左心房直径(OR=1.603,95%CI:1.054~2.439),UA(OR=1.527,95%CI:1.202~1.939),miR-29b(OR=0.657,95%CI:0.515~0.835)和miR-135b(OR=0.318,95%CI:0.141~0.719)水平是影响AF患者术后复发的影响因素(均P<0.05);血清miR-29b和miR-135b预测AF患者射频消融术后复发的AUC分别为0.843(95%CI:0.783~0.902),0.901(95%CI:0.852~0.949),最佳阈值分别为0.43和0.64,灵敏度分别为65.1%和80.2%,特异度分别为88.9%和91.7%,两者联合预测术后复发的AUC为0.947(95%CI:0.914~0.981),灵敏度和特异度分别为90.75%,83.1%。结论 血清miR-29b和miR-135b水平异常表达与AF患者心房纤维化程度及射频消融术后复发有关,二者联合预测AF患者术后复发具有一定的价值。

未破裂颅内动脉瘤患者血清miR-135b和miR-145表达水平及临床价值研究

目的探究血清miR-135b和miR-145在未破裂颅内动脉瘤(unruptured intracranial aneurysm,UIA)患者中的表达水平及临床价值。方法选取2018年5月~2020年3月邯郸市第一医院神外三科收治的102例UIA患者作为研究组,另选同期健康体检者95例作为对照组,同时收集受试者一般资料进行比较。实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测血清中miR-135b和miR-145表达水平;ROC曲线分析血清miR-135b和miR-145对UIA的诊断价值;Logistic回归分析UIA形成的影响因素。结果研究组中高血压(62.75%)、高血脂(60.00%)、吸烟史(64.76%)、饮酒史(70.59%)患者所占比例高于对照组(46.72%,44.21%,47.37%,53.68%),差异均有统计学意义(χ^(2)=5.361,4.986,6.139,5.993,均P<0.05);研究组患者血清miR-135b(0.79±0.20)表达水平低于对照组(1.03±0.27),血清miR-145水平(1.28±0.24)高于对照组(0.99±0.22),差异均有统计学意义(t=7.122,8.821,均P<0.05);与动脉瘤个数为1及动脉瘤直径<7mm的患者相比,动脉瘤个数≥2及动脉瘤直径≥7mm的患者血清中miR-135b表达水平(0.68±0.18 vs 0.84±0.21,0.71±0.17mm vs 0.85±0.22mm)降低,miR-145水平(1.37±0.31mm vs 1.24±0.21mm,1.37±0.30mm vs 1.21±0.19mm)升高,差异均有统计学意义(t=2.472~3.689,均P<0.05);血清miR-135b,miR-145以及二者联合诊断UIA的曲线下面积(AUC)分别为0.788,0.836和0.907,二者联合的诊断效能优于其各自单独检测(Z=4.236,3.226,均P<0.05);Logistic回归分析结果显示,高血压(OR=1.326,95%CI=1.044~1.684)、吸烟史(OR=1.457,95%CI=1.077~1.970)、饮酒史(OR=1.879,95%CI=1.113~3.171)、血清miR-135b水平<0.94(OR=0.758,95%CI=0.612~0.939)、血清miR-145水平≥1.22(OR=1.433,95%CI=1.113~1.845)均是UIA的影响因素(均P<0.05)。结论UIA患者血清miR-135b水平下调,miR-145水平上调,二者与UIA的形成和发展存在相关性,且二者联合检测对UIA形成的诊断效能较高。

白山毛桃根提取物联合miR-135a-5p抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭及迁移的机制

目的 探讨白山毛桃根提取物对宫颈癌细胞HeLa增殖、侵袭及迁移的影响及分子机制。方法 不同浓度的白山毛桃根提取物处理HeLa细胞,将miR-NC、miR-135a-5p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-135a-5p分别转染至HeLa细胞,将anti-miR-NC、anti-miR-135a-5p分别转染至HeLa细胞后用40 mg/ml白山毛桃根提取物处理细胞;噻唑蓝(MTT)法、克隆形成实验、Transwell实验分别检测细胞增殖、侵袭及迁移;qRT-聚合酶链反应(PCR)法检测miR-135a-5p的表达量;Western印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、p-磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)和p-蛋白激酶B(Akt)蛋白表达量。结果 白山毛桃根提取物可显著降低细胞活力、克隆数、侵袭和迁移细胞数、miR-135a-5p表达和MMP2、MMP9、p-PI3K、p-Akt蛋白水平(P<0.05);转染anti-miR-135a-5p可降低细胞活力、克隆数、侵袭和迁移细胞数、MMP2、MMP9、p-PI3K、p-Akt蛋白水平(P<0.05),而转染miR-135a-5p mimics的作用与之相反;转染anti-miR-135a-5p可增强白山毛桃根提取物对HeLa细胞增殖、迁移、侵袭及PI3K/Akt信号通路的抑制作用。结论 白山毛桃根提取物可通过降低miR-135a-5p表达使PI3K/Akt通路失活,进而抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移。

脓毒症患者外周血miR-125b、miR-150表达及其临床意义

目的 探讨脓毒症患者外周血微小核糖核酸-125b(miR-125b)、微小核糖核酸-150(miR-150)表达及其临床意义。方法 选取邢台市中心医院收治的103例脓毒症患者为研究组,另选取体检健康者82例为健康组,均测定外周血miR-125b、miR-150表达及血清白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平。对比研究组、健康组各指标水平,采用Pearson相关性分析法分析脓毒症患者miR-125b、miR-150表达与IL-6、CRP、PCT水平的关系;比较不同严重程度脓毒症患者及不同预后患者的miR-125b、miR-150表达;采用多因素Logistic回归分析法分析miR-125b、miR-150表达与预后的关系;通过受试者工作特征曲线分析miR-125b、miR-150表达对脓毒症预后的预测价值。结果 研究组外周血miR-125b表达与IL-6、CRP、PCT水平分别为(2.43±0.35)、(159.42±26.81)pg/mL、(115.47±20.38)mg/L、(10.57±2.03)ng/mL,均高于健康组(t=31.012、52.149、48.978、46.945,均P=0.000),miR-150表达(0.21±0.04)低于健康组(t=52.008,P=0.000);经Pearson相关性分析,脓毒症患者外周血miR-125b表达与IL-6(r=0.706,P=0.016)、CRP(r=0.711,P=0.013)、PCT(r=0.759,P=0.001)水平均呈正相关,miR-150与IL-6(r=-0.702,P=0.018)、CRP(r=-0.709,P=0.015)、PCT(r=-0.728,P=0.006)水平均呈负相关;脓毒症者外周血miR-125b表达(2.16±0.43)低于严重脓毒症者(2.82±0.27)(t=8.815,P=0.000),脓毒症者外周血miR-150表达(0.24±0.02)高于严重脓毒症者(0.16±0.03)(t=16.248,P=0.000);入院28 d生存者外周血miR-125b表达(2.25±0.41)低于死亡者(3.13±0.36)(t=8.982,P=0.000),生存者外周血miR-150表达(0.23±0.04)高于死亡者(0.13±0.02)(t=11.078,P=0.000);年龄、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、疾病严重程度及外周血miR-125b表达均是脓毒症患者预后的危险因素(OR=2.438、2.689、2.866、2.824,P=0.036、0.012、0.000、0.005),miR-150表达是其保护因素(OR=0.390,P=0.003);外周血miR-125b、miR-150表达预测脓毒症预后的最佳截断点分别为2.854、0.179,灵敏度分别为76.19%、80.95%,特异度分别为79.27%、75.61%,曲线下面积分别为0.861、0.843。结论 与健康人群比较,脓毒症患者外周血miR-125b表达升高,而miR-150表达降低,且miR-125b、miR-150表达均与炎症因子水平、疾病严重程度及预后相关,并对预后具有一定的预测价值,可作为临床判断病情严重程度及预后的指标。

微小RNA-135b调控Smad5在糖尿病肾病发病中的作用研究

目的探讨微小RNA-135b(miR-135b)在糖尿病肾病(DN)发病中的作用及可能机制。方法应用荧光定量PCR及原位杂交检测miR-135b在DN肾组织中的表达。采用生物信息学预测miR-135b的靶基因,并通过蛋白免疫印迹法及检测双荧光素酶报告基因活性进行验证。同时行蛋白免疫印迹法检测DN系膜细胞增殖及系膜基质相关标志蛋白的表达。结果实时定量PCR显示,miR-135b在DN肾组织中表达较正常肾组织升高(P<0.05)。原位杂交显示,miR-135b在DN肾组织中表达较正常肾组织增强,且其表达主要位于肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞的胞浆和胞核中。人肾小管上皮细胞HMC及人系膜细胞HK-2在高糖培养24 h时均能上调miR-135b的表达,48 h升高更显著,与同时点正常对照培养的HMC及HK-2比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。人源和鼠源的Smad5 3'-非翻译区与miR-135b种子序列的8个碱基UUUCGGUA完全互补。miR-135b模拟物可下调Smad5的蛋白表达水平,而miR-135b抑制物对Smad5的蛋白表达无影响。将Smad5 3'-非翻译区野生型和突变型质粒分别转染入HMC及HK-2,并同时转染miR-135b模拟物,发现miR-135b模拟物能抑制Smad5 3'-非翻译区野生型荧光素酶活性,但对Smad5 3'-非翻译区突变体的荧光素酶活性无影响。miR-135b促进系膜细胞增殖及系膜基质增加HMC细胞转染miR-135b模拟物,可有效下调其靶蛋白Smad5的表达,同时上调增殖核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白(Cyclin D1)表达,且使细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制蛋白p21表达降低(P均<0.05),但转染miR-135b抑制物对PCNA、Cyclin D1、p21的表达无影响(P均>0.05)。结论 MiR-135b通过调控Smad5基因促进系膜细胞增殖及肾脏纤维化。

血清miR-671-3p、miR-135b水平与老年乳腺癌患者化疗耐药性的相关性

目的分析血清微小核糖核酸(miR)-671-3p、miR-135b水平与老年乳腺癌患者化疗耐药性的关系。方法回顾性分析2019年1月至2020年2月在该院接受化疗且化疗结束后产生耐药性的52例老年乳腺癌患者作为耐药组,同期选取在该院接受化疗且化疗结束后未产生耐药性的52例老年乳腺癌患者作为敏感组,全部患者均接受6个周期新辅助化疗方案化疗,其患者资料完整,包括一般资料、实验室指标检测结果资料,重点分析化疗前血清miR-671-3p、miR-135b水平与老年乳腺癌患者化疗耐药性的关系。结果耐药组血清miR-671-3p mRNA相对表达量低于敏感组,miR-135b mRNA相对表达量高于敏感组,差异有统计学意义(P<0.05);组间其他实验室指标比较差异无统计学意义(P>0.05);Spearman相关分析结果显示,老年乳腺癌患者血清miR-671-3p mRNA相对表达量与miR-135b mRNA相对表达量呈负相关(r<0,P<0.05);回归分析结果显示,血清miR-671-3p mRNA相对表达量高表达是老年乳腺癌患者化疗耐药性的保护因素(OR<1,P<0.05);miR-135b mRNA相对表达量高表达是老年乳腺癌患者化疗耐药性的危险因素(OR>1,P<0.05);绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),化疗前血清miR-671-3p mRNA相对表达量、miR-135b mRNA相对表达量预测老年乳腺癌患者化疗耐药性风险的曲线下面积均>0.70,预测价值较理想,且联合预测的价值最好。结论血清miR-671-3p mRNA相对表达量、miR-135b mRNA相对表达量与老年乳腺癌患者化疗耐药性有关。

艾塞那肽结合厄贝沙坦治疗糖尿病肾病患者对其血清galectin-3及miR-135b表达的影响

目的:探索艾塞那肽结合厄贝沙坦治疗糖尿病肾病(DN)患者对其血清半乳糖凝集素-3(galectin-3)及微小核糖核酸(miR)-135b表达的影响。方法:选取2017年5月—2019年5月我院内科收治的132例DN患者,随机分成试验组和对照组,每组各66例。对照组患者在口服厄贝沙坦片,而试验组患者皮下注射艾塞那肽。对比两组患者临床疗效、血清galectin-3和miR-135b和不良反应等指标。结果:治疗后,两组患者空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及低密度脂蛋白(LDL-C)等指标明显降低,而两组患者高密度脂蛋白(HDL-C)明显增加,且试验组患者上述指标变化幅度更高(P<0.05);两组患者丙二醛(MDA)、血清肌酐(Scr)、尿微量白蛋白(Umalb)和尿白蛋白/肌酐比值(ACR)等指标明显降低,两组患者超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和肾小球滤过率(eGFR)等指标明显提高,且试验组患者上述指标变化幅度更高(P<0.05);试验组患者临床总有效率为90.91%,明显高于对照组的77.27%(χ^(2)=4.587,P=0.032);两组患者血清galectin-3和miR-135b水平明显降低,且试验组患者血清galectin-3和miR-135b水平明显低于对照组(P<0.05)。治疗期间,两组患者不良反应事件差异无统计学意义(P>0.05)。结论:艾塞那肽结合厄贝沙坦治疗DN可有效改善患者血糖、血脂和血压水平,提高肾功能,降低氧化应激反应,优化临床疗效,下调血清galectin-3和miR-135b水平,延缓肾脏纤维化进程,安全有效。

糖尿病肾病患者血清miR-135b水平检测与疾病预后的相关性研究

目的探讨血清miR-135b水平与糖尿病肾病(DN)患者预后的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测158例DN患者(DN组)和60例健康体检者(对照组)血清miR-135b水平,分析miR-135b与DN患者不同临床指标的关系。采用肾小球分级、间质性纤维化和小管萎缩评分(IFTA)及间质炎症来评价肾脏损伤情况,并应用ROC曲线分析血清miR-135b水平预测DN患者发生终末期肾病(ESRD)的价值。结果 DN组血清miR-135b水平为3.94±0.75,明显高于对照组0.64±0.13,差异有统计学意义(t=9.317,P<0.01)。血清miR-135b水平与蛋白尿定量、Cr,BUN及eGFR水平相关(P<0.05)。DN患者血清miR-135b水平与肾小球分级、IFTA及间质炎症均有关,且随着肾脏病理损伤程度的增加,血清miR-135b水平明显升高(P<0.05)。终末期肾病(ESRD)患者血清miR-135b水平(5.39±1.26)明显高于非ESRD患者(3.46±0.68),差异有统计学意义(t=4.157,P=0.025)。ROC曲线显示,血清miR-135b水平预测DN患者发生ESRD的最佳截值取4.96时,其AUC[0.912(95%CI:0.850~0.973)]最大,敏感度(91.3%)和特异度(87.5%)较好。Spearman相关分析显示,DN患者血清miR-135b水平与蛋白尿定量、Cr,BUN,肾小球分级,IFTA及间质炎症呈正相关(r=0.504,0.396,0.438,0.475,0.351和0.559,均P<0.01),与eGFR呈负相关(r=-0.637,P<0.01)。结论血清miR-135b水平在DN患者中明显上调,且与DN患者肾脏损伤及预后不良有关。

血清miR-483-5p miR-487b表达与脓毒症所致急性肺损伤患者炎性因子病情和预后的关系研究

目的:探讨miR-483-5p、miR-487b与脓毒症所致急性肺损伤(ALI)患者炎性因子、病情和预后的关系。方法:选择2018年9月至2021年12月我院收治的133例脓毒症患者,51例合并ALI(ALI组),82例未合并ALI(NALI组),根据氧合指数[(氧分压/吸入气氧浓度]将ALI组分为轻度组(201~300mmHg)16例、中度组(101~200mmHg)20例和重度组(≤100mmHg)15例,根据ALI组28d生存状况分为生存组(28例)、死亡组(23例),另选择43例志愿者为对照组。比较不同分组血清miR-483-5p、miR-487b表达与炎性因子水平差异,Pearson分析脓毒症合并ALI患者miR-483-5p、miR-487b表达与炎性因子水平相关性,受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-483-5p、miR-487b预测脓毒症所致ALI患者预后的价值。结果:ALI组基线血清miR-483-5p表达,白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-33(IL-33)水平高于NALI组和对照组(P<0.05),miR-487b表达低于NALI组和对照组(P<0.05)。重度组基线、住院3d、住院7d血清miR-483-5p表达,IL-6、TNF-α、IL-33水平高于中度组和轻度组(P<0.05),miR-487b表达低于中度组和轻度组(P<0.05)。死亡组基线、住院3d、住院7d血清miR-483-5p表达,IL-6、TNF-α、IL-33水平高于生存组(P<0.05),miR-487b表达低于生存组(P<0.05)。脓毒症所致ALI患者基线、住院3d、住院7d血清miR-483-5p表达与基线、住院3d、住院7d IL-6、TNF-α、IL-33水平呈正相关(P<0.05),基线、住院3d、住院7d miR-487b表达与基线、住院3d、住院7d IL-6、TNF-α、IL-33水平呈负相关(P<0.05)。联合住院7d miR-483-5p和miR-487b预测脓毒症所致ALI的曲线下面积为0.964,高于单独miR-483-5p、miR-487b预测(z=2.612、3.141,P<0.05)。结论:脓毒症所致ALI患者血清miR-483-5p表达上调,miR-487b表达下调,且与过度炎症反应,病情加重和不良预后有关。

miR-10b对脑胶质瘤恶性生物学行为的调控及其机制

脑胶质瘤(胶质瘤)具有高发病率、高病死率、高复发率及低治愈率的特点,胶质瘤细胞的无限增殖能力和高侵袭迁移能力是胶质瘤治疗的难点,近年来微小核糖核酸(micro RNA,miRNA)的出现为研究胶质瘤的发生及侵袭迁移机制提供了新的思路。miRNA是一类内生的、长约20~24个核苷酸的非编码小RNA,可通过与其靶基因mRNA的3’UTR区域互补结合,从而在转录后水平调控基因的表达。多项研究证实,miR-10b在胶质瘤组织和胶质瘤患者血清中高表达,并影响患者预后情况。miR-10b可能通过影响其靶基因如PTEN、CDKN、P53、HOXD10等的表达,参与胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移等过程。深入研究miR-10b对胶质瘤的调控作用及其机制,对该病的诊断、治疗和预后评估等均具有重要意义。

miR-27a miR-27b及肺栓塞严重程度指数对急性肺栓塞患者预后的评估价值

目的探讨血清微小核糖核酸-27a(miR-27a)、微小核糖核酸-27b(miR-27b)水平及肺栓塞严重程度指数(PESI)对急性肺栓塞(APE)患者预后的评估价值。方法选取2016年1月至2018年6月海口市第三人民医院收治的APE患者160例,根据APE患者28d生存情况分为存活组(n=115)和死亡组(n=45)。采用PESI评分标准将APE患者分为低危组(n=34)、中危组(n=68)和高危组(n=58)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组血清miR-27a及miR-27b水平变化。应用ROC曲线分析血清miR-27a、miR-27b水平及PESI对APE患者的预后评估价值,采用Pearson相关分析APE患者血清miR-27a、miR-27b水平与PESI的相关性。结果死亡组血清miR-27a(4.26±0.93 vs.1.95±0.42)、miR-27b(3.72土0.75 vs.1.63±0.51)水平及PESI评分(164.70±28.60vs.93.50±14.30)均明显高于存活组(P<0.01)。高危组血清miR-27a(3.94±0.85 vs.2.87±0.62,1.52±0.34)、miR-27b(3.60±0.71vs.2.26±0.54,1.18±0.20)水平及PESI评分(158.50±26.40vs.102.40土18.50,75.20±10.70)均明显高于中危组和低危组(P<0.01)。ROC曲线分析显示,血清miR-27a、miR-27b水平及PESI评分预测APE死亡的最佳截值分别为3.45、2.96、135.70分,三者联合预测APE患者死亡的AUC[0.862(0.803~0.926)]最大,其敏感度和特异度为87.2%和82.5%。相关分析显示,死亡组血清miR-27a、miR-27b水平与PESI均呈正相关(r=0.795、r=0.718,P<0.01),miR-27a水平与miR-27b水平呈正相关(r=0.746,P<0.01)。结论miR-27a及miR-27b表达上调与APE患者预后相关,miR-27a及miR-27b联合PESI.可有效评估APE患者的预后。

微小RNA-182-5p通过靶向MAPK1调控MAPK/NF-κB通路治疗急性肺损伤的研究

目的通过分子生物学手段探讨微小RNA-182-5p(miR-182-5p)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)的影响及其分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测LPS诱导的ALI模型miR-182-5p和丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)表达。双荧光素酶报告基因检测用于检测miR-182-5p与MAPK1的关系。ALI模型分别给予Ad-MAPK1、Ad-miR-182-5p和Ad-MAPK1+Ad-miR-182-5p,而后采用苏木精-伊红染色法(HE染色)和Masson染色检测肺损伤指数和肺纤维化改变情况。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各处理组肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和髓过氧化物酶(MPO)水平。采用蛋白质印迹法(WB)检测核因子κB(NF-κB)和NF-κB抑制蛋白α(IκBα)蛋白表达。结果本研究显示miR-182-5p表达水平在ALI后0~12 h逐渐升高,>12~24 h下降;MAPK1表达则在0~12 h逐渐下降,>12~24 h出现升高。进一步行基因干扰的ALI结果显示,miR-182-5p过表达能够显著下调肺损伤指数、肺纤维化评分和促炎细胞因子水平,而MAPK1的过表达上调了肺损伤指数、肺纤维化评分和促炎细胞因子水平。体外细胞实验结果显示,LPS刺激显著增加NF-κB的蛋白质表达,同时抑制IκBα的表达。miR-182-5p能够抑制NF-κB的表达而促进IκBα的表达;相反,MAPK1过表达则逆转了这一现象。结论miR-182-5p通过抑制MAPK/NF-κB信号通路在ALI中发挥治疗作用,本研究数据或可有助于深入了解ALI的潜在分子机制和ALI治疗新方法的开发。

miR-135b和miR-335在不同年龄人牙髓细胞成牙本质向分化中的差异表达

目的探讨不同年龄阶段人牙髓细胞(HDPCs)在矿化诱导前后miR-135b和miR-335的表达变化,及其在HDPCs分化中的作用。方法提取青年(18～22岁)及中年(46～48岁)临床就诊患者第三磨牙的HDPCs,经体外培养至第3代后,用矿化诱导液诱导细胞向成牙本质细胞方向分化,对细胞结节形成情况进行观察并用VonKossa染色、碱性磷酸酶检测确定HDPCs分化情况,分别取培养0、7、14、21和28d的细胞用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-135b和miR-335的表达变化。结果青年组HDPCs中miR-135b和miR-335显著高于中年组(P<0.05);经矿化诱导后,青年组miR-135b和miR-335表达逐渐降低(P<0.05),而中年组miR-135b表达上升,miR-335表达则维持在低水平。结论 miR-135b和miR-335在不同年龄阶段HDPCs中差异表达,可能在HDPCs成牙本质向分化中具有重要作用。

TTF-1和PTEN基因在子宫内膜癌早期病变中的表达意义

目的分析甲状腺转录因子-1(TTF-1)和磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)基因在子宫内膜癌早期病变中的表达意义.方法选择子宫内膜癌41例、增生性子宫内膜38例和正常子宫内膜13例,采用荧光定量PCR法(RT-PCR)检测3种子宫内膜中TTF-1和PTEN mRNA表达量,分析其与临床病理特征的关系;RT-PCR法检测3种子宫内膜中mi R-135b、mi R-125b和Snail mRNA表达量,分析其与TTF-1和PTEN mRNA表达量的相关性.结果子宫内膜癌组织中TTF-1和PTEN mRNA表达量显著低于其他2组,正常子宫内膜组织中表达量最高,差异有统计学意义(P<0.05).绝经与否、腺癌和鳞癌间TTF-1和PTEN mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);FIGO分期增加、肌层浸润增加、盆腔淋巴结转移的TTF-1和PTEN mRNA表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).子宫内膜癌中mi R-135b mRNA的表达水平显著高于其他2组,正常子宫内膜中最低;mi R-125b和Snail mRNA的表达水平显著低于其他2组,正常子宫内膜中最高;差异有统计学意义(P<0.05).TTF-1和PTEN mRNA表达量与mi R-135b mRNA表达量呈负相关,与mi R-125b和Snail mRNA表达量呈正相关(P<0.05).ROC模型得出,TTF-1 mRNA诊断子宫内膜癌的敏感性86.5%,特异性84.2%,准确性0.823,95%CI=0.762~0.921,P=0.012;PTEN mRNA诊断子宫内膜癌的敏感性85.3%,特异性83.6%,准确性0.842,95%CI=0.785~0.936,P=0.010.结论 TTF-1和PTEN基因可作为子宫内膜癌早期诊断的分子标志物,与临床特征密切相关,可能通过调控肿瘤细胞增殖活性影响肿瘤进程.