依托咪酯调控miR-204-5p/HOXC8轴对胃癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的探讨依托咪酯(Eto)调节微小RNA(miR)-204-5p/同源盒基因C8(HOXC8)轴对人胃癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法2023年4月—2024年4月于武汉科技大学实验室进行实验,将胃癌细胞MKN45分为对照(Ctrl)组、低剂量Eto组(Eto-L,5μmol/L)、中剂量Eto组(Eto-M,10μmol/L)、高剂量Eto组(Eto-H,20μmol/L)、Eto-H+miR-inhibitor-NC、Eto-H+miR-204-5p inhibitor组。CCK-8法、集落形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测MKN45细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力;qRT-PCR检测细胞中miR-204-5p和HOXC8 mRNA表达水平;双荧光素酶实验检测miR-204-5p和HOXC8之间的靶向关系。结果与Ctrl组比较,Eto-L组、Eto-M组、Eto-H组、Eto-H+miR-inhibitor-NC组、Eto-H+miR-204-5p inhibitor组MKN45细胞存活率、集落形成率、细胞侵入率、HOXC8 mRNA水平均显著降低(F/P=33.391/<0.001、29.646/<0.001、44.814/<0.001、45.485/<0.001),细胞凋亡率和miR-204-5p水平显著升高(F/P=78.091/<0.001、22.665/<0.001);与Eto-H+miR-inhibitor-NC组比较,Eto-H+miR-204-5p inhibitor组MKN45细胞存活率、集落形成率、细胞侵入率、HOXC8 mRNA水平均显著升高(q/P=8.099/<0.001、7.587/<0.001、7.768/<0.001、11.162/<0.001),细胞凋亡率和miR-204-5p水平显著降低(q/P=10.254/<0.001、8.596/<0.001);与HOXC8-WT和miR-NC共转染细胞比较,HOXC8-WT和miR-204-5p mimic共转染的MKN45细胞中相对荧光酶活性显著降低(t/P=5.770/<0.001)。结论Eto可能通过上调miR-204-5p、下调HOXC8,减弱胃癌细胞MKN45增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡。

LncRNA DGUOK-AS1调控miR-204-5p对肝癌细胞MHCC97-H增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)脱氧鸟苷激酶反义RNA(DGUOK-AS)1调控miR-204-5p对肝癌细胞MHCC97-H增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析肝癌组织中DGUOK-AS1和miR-204-5p表达量。双荧光素酶报告实验确定DGUOK-AS1与miR-204-5p靶向关系,RT-qPCR检测干扰DGUOK-AS1表达后MHCC97-H细胞miR-204-5p表达量。集落形成实验分析DGUOK-AS1和miR-204-5p表达对MHCC97-H细胞增殖的影响。流式细胞仪分析细胞周期分布和凋亡。Transwell实验分析细胞迁移和侵袭。结果 与癌旁组织比较,肝癌组织中DGUOK-AS1表达量明显上调,而miR-204-5p表达量明显下调(P<0.05)。miR-204-5p是DGUOK-AS1的靶基因。干扰DGUOK-AS1表达后miR-204-5p表达量显著升高(P<0.05)。干扰DGUOK-AS1表达后MHCC97-H细胞克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、S期细胞比例显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与干扰DGUOK-AS1表达比较,同时干扰DGUOK-AS1和miR-204-5p表达后MHCC97-H细胞克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、S期细胞比例显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论 干扰DGUOK-AS1通过靶向miR-204-5p可抑制肝癌细胞MHCC97-H增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。

内皮微粒包裹的miR-204-3p介导川崎病血管炎性损伤的机制探讨

目的 探讨内皮微粒(EMP)包裹的miR-204-3p介导川崎病(KD)血管炎性损伤的作用机制。方法 2016年4月至2021年3月,58例KD患者和50例对照组入选本研究。其中,18例KD患者伴有冠状动脉瘤(CAA),其余为无冠状动脉瘤(NCAA)。分离各组血清样品中EMP,并进行全基因组miRNA测序。在体外试验中,将VSMC或预转染miR-204-3p模拟物(AgomiR-204-3p)、miR-204-3p抑制剂(AntagomiR-204-3p)的VSMC与各组EMP共培养。结果 通过全基因组miRNA测序以及RT-qPCR分析证实miR-204-3p在KD EMP中显著增加,并且EMP中miR-204-3p水平根据冠状动脉病理严重程度显著降低,顺序为NCAA>SCAA>MCAA>GCAA。与对照组EMP共培养相比,VSMC与NCAA EMP共培养48 h后增殖率显著降低(P<0.05),VSMC分化标志物(ACTA2和CNN1)表达显著增加(P<0.05),去分化标志物(OPN和PDGFRβ)表达显著降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测证实,EMP中miR-204-3p在功能上靶向VSMC中的PDGFRβ。在与NCAA EMP孵育的VSMC中,使用AntagomiR-204-3p可显著降低分化标记物(ACTA2和CNN1)的表达,并增加去分化标记物(OPN和PDGFRβ)的表达。在与CAA EMP孵育的VSMC中,给予AgomiR-204-3p显著增加分化标记物的表达,并降低去分化标记物的表达。结论 EMP将miR-204-3p转移到VSMC并通过靶向PDGFRβ部分介导KD血管炎性损伤。因此,靶向miR-204-3p-PDGFRβ轴可能为KD诱导的血管病变提供新的治疗选择。

纳武利尤单抗联合安罗替尼对Ⅲb~Ⅳ期NSCLC的疗效观察及对miR-1269、miR-204-5p表达的影响

目的探究纳武利尤单抗联合安罗替尼治疗Ⅲb~Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的效果及对微小RNA-1269(miR-1269)、miR-204-5p表达的影响。方法选取Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者82例,患者分配为对照组、观察组,各41例,使用随机数字表法,对照组采用安罗替尼治疗,观察组在对照组的基础上采用纳武利尤单抗治疗;比较两组患者的疗效、治疗前后肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、miR-1269、miR-204-5p表达水平和不良反应的发生率。结果观察组患者治疗后疾病控制率(87.80%,36/41)显著高于对照组(68.29%,28/41)(χ^(2)=4.556,P=0.033);与治疗前相比,治疗后观察组和对照组的CEA、CYFRA21-1、miR-1269水平显著降低,miR-204-5p水平显著升高(P<0.05);治疗后与对照组相比,观察组的CEA、CYFRA21-1、miR-1269水平显著降低,miR-204-5p水平显著升高(P<0.05);不良反应两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论纳武利尤单抗联合安罗替尼治疗Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者可降低患者肿瘤标志物的水平,调节miR-1269、miR-204-5p的表达,效果更好。

蒙药壮西-4调控miR-204对骨质疏松大鼠成骨细胞增殖的影响及机制

目的 探讨蒙药壮西-4调控miR-204对骨质疏松大鼠成骨细胞增殖的影响及机制。方法 将60只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、低、中和高剂量组各10只。建模各组给予维A酸溶液灌胃建立骨质疏松模型,连续14 d。阳性对照组给予戊酸雌二醇灌胃,低、中、高剂量组分别给予不同剂量(50、100、200 mg/kg)蒙药壮西-4灌胃,空白对照组和模型对照组给予同体积的生理盐水灌胃,连续42 d。采用骨密度(BMD)仪测定大鼠第4腰椎及右股骨的BMD值,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)血清miR-204表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清骨桥蛋白(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)含量。取MC3T3-E1细胞,分为对照组、促进组、抑制组和药物组,分别加入生理盐水、miR-204模拟物、miR-204抑制剂和蒙药壮西-4。采用RT-PCR法检测miR-204表达量,Western印迹检测RANKL、OPG蛋白表达量,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况,计算细胞存活率。结果 各组第4腰椎和右股骨BMD值、血清miR-204表达量、血清OPG含量差异有统计学意义(均P<0.05);空白对照组明显高于建模各组,模型对照组明显低于低、中、高剂量组、阳性对照组,阳性对照组和中剂量组明显高于低、高剂量组(均P<0.05)。各组血清RANKL含量差异有统计学意义(均P<0.05),空白对照组明显低于建模各组(均P<0.05),模型对照组明显高于低、中、高剂量组和阳性对照组(均P<0.05),阳性对照组和中剂量组明显低于低、高剂量组(均P<0.05)。各组miR-204表达量、OPG蛋白表达量、细胞存活率差异有统计学意义(均P<0.05),促进组和药物组明显高于对照组和抑制组,抑制组明显低于对照组(均P<0.05)。各组RANKL蛋白表达量差异具有统计学意义(均P<0.05),促进组和药物组明显低于对照组和抑制组,抑制组明显高于对照组(均P<0.05)。结论 蒙药壮西-4能增加骨质疏松大鼠BMD,其可能机制为通过上调miR-204表达促进大鼠成骨细胞增殖。

下咽鳞状细胞癌组织miR-204、miR-504表达与临床病理特征和预后的关系

目的 探讨下咽鳞状细胞癌(hypopharyngeal squamous cell carcinoma, HSCC)组织微小核糖核酸204(microRNA-204,miR-204)、miR-504表达与临床病理特征和预后的关系。方法 选取2018-04/2020-04月作者医院收治的122例HSCC患者为研究对象。收集所有患者术中癌组织及癌旁组织标本(距肿瘤切缘≥2 cm),采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)检测癌组织及癌旁组织中miR-204、miR-504相对表达量。分析miR-204、miR-504表达与HSCC患者临床病理特征的关系。对HSCC患者进行3年随访。采用单因素和多因素Cox比例风险回归模型分析HSCC患者预后的影响因素。绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析miR-204、miR-504低表达和高表达HSCC患者3年总生存情况。结果 与癌旁组织比较,HSCC癌组织miR-204、miR-504表达显著降低(P均<0.05)。不同性别、年龄、吸烟史、饮酒史、T分期、发病部位、淋巴结个数、结外侵犯、术后同步放化疗的HSCC患者miR-204、miR-504表达差异无统计学意义(P>0.05),N1~N3期、低分化程度HSCC患者的miR-204、miR-504表达显著低于N0期、中高分化程度HSCC患者(P均<0.05)。Cox回归分析结果显示,T分期和N分期升高、阳性淋巴结个数>2个、伴结外侵犯、低分化程度、miR-204表达降低、miR-504表达降低是HSCC患者预后不良的危险因素(P<0.05)。122例HSCC患者随访3年期间失访5例,最终获得随访117例。Kplan-Meier生存曲线分析显示,miR-204、miR-504低表达组3年总生存率低于高表达组[54.29%(38/70)vs. 70.21%(33/47),P<0.05;50.68%(37/73)vs. 77.27%(34/44,P<0.05]。结论 HSCC组织中miR-204、miR-504均呈低表达,二者低表达与HSCC患者的T分期和N分期升高、低分化程度及预后不良有关。

miR-204-5p通过靶向负性调控RAB22A促进膀胱癌细胞的恶性生物学行为

目的探讨MiR-204-5p靶向RAB22A对膀胱癌细胞生物学行为的影响及其分子机制。方法TCGA数据库进行了miR-204-5p的生存分析和临床病理性状的相关性分析;检测膀胱癌组织和癌旁组织以及正常尿路上皮细胞和膀胱癌细胞中miR-204-5p的表达水平;过表达/敲低miR-204-5p后检测细胞增殖、迁移和侵袭、和凋亡等变化;转录组测序,数据库分析和多种实验证实miR-204-5p靶向抑制RAB22A基因调控膀胱癌细胞的生物学行为。结果TCGA数据库中MiR-204-5p高表达患者的中位生存期较低,表现出较差的预后(P<0.05);miR-204-5p在膀胱癌组织和细胞表达明显上调(P<0.05);过表达miR-204-5p可促进细胞增殖(P<0.05)、迁移和侵袭(P<0.05),减少细胞凋亡(P<0.05),敲低后则相反;转录组测序,数据库分析和双荧光素酶实验提示RAB22A是miR-204-5p下游关键因子,qRT-PCR,Western blotting证实过表达miR-204-5p可抑制RAB22A的表达(P<0.05);过表达RAB22A可部分逆转miR-204-5p对膀胱癌细胞生长的促进作用(P<0.05)。结论miR-204-5p通过靶向负性调控RAB22A促进膀胱癌细胞的恶性生物学行为。

声门上型喉癌患者血清LncRNA MALAT1、miR-204-5p表达与预后的关系

目的探讨声门上型喉癌患者血清LncRNA MALAT1、miR-204-5p表达与预后的关系。方法分析2016年11月~2020年11月于保定市第一中心医院耳鼻咽喉科接受治疗的118例声门上型喉癌患者作为观察组,另选取同期体检的118名健康成年人作为对照组。观察组根据生存情况分为预后不良组(n=20例)与预后良好组(n=98例)。应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法,对LncRNA MALAT1、miR-204-5p的表达量进行检测;Pearson法分析血清LncRNA MALAT1与miR-204-5p水平之间的关联性;构建受试者工作特征(ROC)曲线,评估血清LncRNA MALAT1及miR-204-5p水平对声门上型喉癌患者预后方面的预测价值。结果观察组的血清LncRNA MALAT1水平显著高于对照组(P<0.05),miR-204-5p水平显著低于对照组(P<0.05);血清LncRNA MALAT1与miR-204-5p表达水平呈负相关(r=-0.487,P<0.001);血清中LncRNA MALAT1与miR-204-5p表达水平与肿瘤T分级、淋巴结转移及分化程度间存在显著相关性(P<0.05);相较于预后良好组,预后不良组患者患者血清中LncRNA MALAT1的浓度明显升高(P<0.05),T1级、无淋巴结转移、高分化、临床Ⅰ~Ⅱ期及血清miR-204-5p水平显著降低(P<0.05)。通过ROC曲线分析,LncRNA MALAT1与miR-204-5p联合应用于预测声门上型喉癌患者预后,其曲线下面积(AUC)显著大于LncRNA MALAT1单独预测的AUC(Z=3.079,P=0.002)及miR-204-5p单独预测的AUC(Z=3.338,P=0.001)。结论声门上型喉癌患者血清LncRNA MALAT1水平升高,血清miR-204-5p水平降低,对预测声门上型喉癌患者的预后情况展现出一定价值。

血清miR-532-5p、miR-204-5p与急性小动脉闭塞型脑卒中患者神经功能及预后的关系

目的探讨血清微小核糖核酸-532-5p(miR-532-5p)、miR-204-5p水平与急性小动脉闭塞型脑卒中(AOSO)患者神经功能缺损程度及预后的关系。方法选取佳木斯市中心医院2022年1月至2023年9月收治的92例AOSO患者为试验组,另选取同期体检的53例健康志愿者为对照组。纳入患者根据神经缺损程度,将其分为轻度组(n=50)和重度组(n=42);同时根据改良的Rankin评分量表(mRS),将其分为预后良好组(mRS评分≤2分,n=55)和预后不良组(mRS评分≥3分,n=37)。采用qRT-PCR检测AOSO患者及健康志愿者血清miR-532-5p、miR-204-5p相对表达量;采用Logistic回归分析AOSO患者神经功能缺损程度及预后的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-532-5p、miR-204-5p对AOSO患者预后的预测价值。结果与轻度组相比,重度组血清miR-532-5p、miR-204-5p相对表达量明显降低(P<0.05);重度组高血压、高血脂患者占比及NHISS评分升高(P<0.05)。预后不良组miR-532-5p、miR-204-5p相对表达量较预后良好组明显降低,高血压患者占比较预后良好组明显明显升高(P<0.05),且高血压为AOSO患者神经功能重度缺损及预后不良的危险因素(P<0.05),miR-532-5p、miR-204-5p为AOSO患者神经功能重度缺损及预后不良的保护因素(P<0.05)。血清miR-532-5p、miR-204-5p二者联合预测AOSO患者预后明显优于二者单独预测(P<0.05)。结论AOSO患者血清miR-532-5p、miR-204-5p相对表达量明显降低,均为影响AOSO患者神经功能缺损程度以及预后的保护因素,与AOSO患者预后具有一定关系。

妊娠期高血压miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平及临床意义

目的 探讨妊娠期高血压miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平及临床意义。方法 回顾性选取83例2022年1月至2023年1月承德市妇幼保健院收治的妊娠期高血压患者的临床资料作为病例组,其中28例妊娠期高血压作为妊娠期高血压组、28例轻度子痫前期作为轻度子痫前期组、27例重度子痫前期作为重度子痫前期组;另随机选择同期于本院产科门诊规律围产期保健并入院待产的94名正常足月单胎妊娠孕妇为对照组。结果 收缩压、舒张压:重度子痫前期组>轻度子痫前期组>妊娠期高血压组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平:重度子痫前期组>轻度子痫前期组>妊娠期高血压组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a水平联合检测诊断妊娠期高血压的AUC值为0.940,高于各指标单独检测(0.768、0.809、0.744、0.795,P<0.05)。病例组不良妊娠结局总发生率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 妊娠期高血压患者不良妊娠结局的几率更大,血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a在妊娠期高血压患者中呈高表达,其表达水平与患者病情严重程度具有一定关系,且四者联合检测对妊娠期高血压的诊断价值更高。

血清miR-182-5p、miR-204表达对原发性肝癌患者RFA术后疗效及复发的预测价值

目的 探讨血清miR-182-5p、miR-204表达对原发性肝癌(PHC)患者射频消融(RFA)术后疗效及复发的预测价值。方法 选取本院2021年6月—2022年6月上海健康医学院附属崇明医院收治的298例PHC患者作为病例组,均行RFA术治疗,另选取同期进行健康体检的336例作为健康对照组。比较病例组与健康对照组、RFA术后完全消融组和残留组、RFA术后未复发组和复发组的血清miR-182-5p、miR-204表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价血清miR-182-5p、miR-204表达水平对RFA术后疗效及复发的预测价值,并分析血清miR-182-5p、miR-204表达与患者预后生存期的关系。结果 病例组血清miR-182-5p表达水平高于健康对照组,而miR-204表达水平低于健康对照组(P<0.05)。RFA术后完全消融率为85.91%(256/298),肿瘤残留率为14.09%(42/298);RFA术后完全消融组的血清miR-182-5p表达水平低于残留组,而miR-204表达水平高于残留组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-182-5p、miR-204联合预测患者RFA术后肿瘤残留的AUC为0.919(95%CI:0.868~0.970),灵敏度为85.71%,特异度为93.36%。RFA术后随访期间的复发率为18.95%(47/248),未复发率为81.05%(201/248);RFA术后未复发组的血清miR-182-5p表达水平低于复发组,而miR-204表达水平高于复发组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-182-5p、miR-204联合检测预测患者RFA术后复发的AUC为0.875(95%CI:0.817~0.933),灵敏度为80.85%,特异度为90.05%。miR-182-5p高表达组的中位总生存期(OS)为25.48个月,短于低表达组的28.67个月;miR-204高表达组的中位OS为29.34个月,长于低表达组的26.81个月(均P<0.05)。结论 血清miR-182-5p可能通过高表达、miR-204可能通过低表达参与PHC患者RFA术后肿瘤残留及复发进程,且与患者预后生存期缩短有关,二者联合对PHC患者RFA术后肿瘤残留及复发均有一定的预测价值。

微小RNA204(miR-204)低表达与肝细胞癌预后不良相关

目的研究微小RNA204(mi R-204)在肝细胞癌中的表达及与预后的关系和可能机制。方法选择50例肝细胞癌患者,收集手术切除后的肝癌细胞以及肝癌旁组织,采用定时定量PCR检测肝细胞癌组织及癌旁组织mi R-204的表达,以mi R-204表达水平中位数为分界点,观察mi R-204的表达与肝细胞癌患者临床病理特征的关系。采用免疫组织化学染色检测Bcl2及SIRT1(sirtuin 1)蛋白的表达,合成mi R-204转染SMMC-7721肝癌细胞,MTT法检测细胞增殖,采用PCR检测SMMC-7721细胞的SIRT1与Bcl2 m RNA的水平。结果 HCC组织mi R-204水平显著降低;与mi R-204低表达的患者相比,mi R-204高表达的患者瘤体直径较小(在5 cm)、肿瘤数少、TNM分期较低,与患者年龄、性别、乙型肝炎病毒(HBV)感染情况无关;mi R-204低表达组中Bcl2及SIRT1蛋白水平显著高于mi R-204高表达组,mi R-204与Bcl2及SIRT1的水平呈负相关;mi R-204转染SMMC-7721细胞后,过表达mi R-204的SMMC-7721细胞SIRT1与Bcl2 m RNA水平不仅显著低于转染阴性对照mi RNA的细胞,也显著低于癌旁肝组织SIRT1与Bcl2 m RNA水平;与阴性对照组相比,转染mi R-204的SMMC-7721细胞的增殖能力明显降低。结论 mi R-204低表达肝细胞癌预后不良相关,上调其表达可下调SIRT1、Bcl2水平,抑制肝癌细胞增殖、促进细胞凋亡。

血清miR-126、miR-204-5p、miR-218水平与妊娠期高血压患者病情及妊娠结局的相关性分析

目的:分析血清微小-RNA-126(miR-126)、微小-RNA-204-5p(miR-204-5p)、微小-RNA-218(miR-218)水平与妊娠期高血压(HDCP)患者病情及妊娠结局的相关性。方法:选取2022年10月-2024年1月于本院分娩的73例HDCP患者为观察组,另选取同期73例健康体检者为对照组。比较两组、不同病情程度及妊娠结局患者血清miR-126、miR-204-5p、miR-218水平,分析其与病情程度、妊娠结局的相关性及联合预测价值。结果:观察组血清miR-126、miR-204-5p水平高于对照组,miR-218水平低于对照组(P<0.05);子痫前期及子痫患者血清miR-126、miR-204-5p水平高于单纯HDCP患者,miR-218水平低于单纯HDCP患者(P<0.05);不良患者血清miR-126、miR-204-5p水平高于良好患者,miR-218水平低于良好患者(P<0.05);血清miR-126、miR-204-5p水平与病情程度、妊娠结局呈正相关,miR-218水平与病情程度、妊娠结局呈负相关(P<0.05);血清miR-126、miR-204-5p、miR-218水平联合预测的AUC为0.837,最佳敏感度、特异度为84.91%、85.00%(P<0.05)。结论:血清miR-126、miR-204-5p、miR-218水平与HDCP患者病情程度、妊娠结局关系密切,可作为临床评估病情、预测妊娠结局的参考指标。

血清微小核糖核酸-4286与幽门螺旋杆菌感染的子痫前期患者妊娠结局的关系

目的分析血清微小核糖核酸-4286(miR-4286)与幽门螺旋杆菌(Hp)感染的子痫前期(PE)患者妊娠结局的关系。方法选择Hp感染的孕妇89例[Hp组;年龄24~40岁,平均年龄31.67岁;孕前体质量指数(BMI)21.30~31.55 kg/m^(2),平均孕前BMI 25.47 kg/m^(2)]和204例Hp感染的PE患者(Hp+PE组;年龄24~40岁,平均年龄31.87岁;孕前BMI 21.01~31.55 kg/m^(2),平均孕前BMI 25.69 kg/m^(2))作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测miR-4286表达水平。随访获取Hp感染的PE患者妊娠结局,并分析miR-4286与其妊娠结局的关系。结果Hp组妊娠28周第1天(T2)和妊娠30周第1天(T3)的miR-4286水平均高于Hp+PE组(1.95±0.39 vs 1.82±0.26、2.28±0.31 vs 1.92±0.33。P=0.003、0.000),Hp组和Hp+PE组T3时点的miR-4286水平均高于T2时点(2.28±0.31 vs1.95±0.39、1.92±0.33 vs 1.82±0.26。P=0.000、0.001),Hp组miR-4286水平升高程度[0.38(0.56)]高于Hp+PE组[0.06(0.57)](P=0.000)。Hp+PE组中有121例妊娠结局不良(结局不良组),83例妊娠结局良好(结局良好组)。结局不良组PE确诊时收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、24 h尿蛋白和剖宫产占比均高于结局良好组,分娩孕周低于结局良好组[(155.64±11.89)mmHg vs(151.75±11.34)mmHg、(101.25±6.16)mmHg vs(97.93±8.79)mmHg、(2.69±0.52)g vs(2.06±0.29)g、85.95%vs 65.06%、(34.79±2.06)周vs(37.94±0.97)周。P=0.020、0.002、0.000、0.000、0.000]。结局不良组PE确诊时(T1)、T2和T3时点的miR-4286水平均低于结局良好组(1.37±0.15 vs 1.66±0.23、1.75±0.26 vs 1.92±0.24、1.84±0.34 vs 2.02±0.28。P=0.000、0.000、0.000),两组miR-4286水平随时间进展呈升高趋势,结局不良组miR-4286水平升高程度[0.45(0.52)]高于结局良好组[0.32(0.45)](P=0.028)。T1时点miR-4286判断妊娠结局不良的受试者工作特性(ROC)曲线下面积高于T2和T3时点的miR-4286(0.864 vs 0.688、0.864 vs 0.674。P=0.000、0.000)。SBP>154 mmHg[优势比(OR)=2.784,P=0.035]、24 h尿蛋白>2.37 g(OR=7.628,P=0.000)和剖宫产(OR=6.087,P=0.001)是Hp+PE患者妊娠结局不良的独立危险因素,分娩孕周>37周(OR=0.047,P=0.000)和T1时点的miR-4286>1.47(OR=0.091,P=0.000)是Hp+PE患者妊娠结局不良的独立保护因素。结论PE确诊时miR-4286水平>1.47与Hp+PE患者妊娠结局良好有关。

埃克替尼与安罗替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效比较及对miR-185-5p、miR-204-5p表达水平影响观察

目的:比较埃克替尼与安罗替尼治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效,及对微小核糖核酸(miR)-185-5p、miR-204-5p表达水平的影响。方法:60例晚期NSCLC患者分为观察组和对照组,每组30例。对照组患者给予埃克替尼治疗,观察组患者给予安罗替尼治疗,比较两组疗效、治疗前后血清miR-185-5p、miR-204-5p水平变化、生存情况以及药品不良反应差异。结果:观察组患者的肿瘤控制率,以及总生存期和无瘤生存期均显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的血清miR-185-5p、miR-204-5p水平均较前显著升高(P<0.05),且观察组血清miR-204-5p、miR-185-5p水平高于对照组(P<0.05)。两组患者的药品不良反应发生例数差异无统计学意义(P>0.05)。结论:相比埃克替尼,安罗替尼治疗晚期NSCLC患者疗效更佳,可显著上调患者血清miR-185-5p、miR-204-5p水平。

miR-204在子痫前期患者胎盘组织中的表达及对滋养细胞增殖和侵袭功能影响观察

目的观察miR-204在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达变化及其对滋养细胞增殖、侵袭功能的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测60例子痫前期患者和30例正常妊娠孕妇胎盘组织中的miR-204。采用生物学信息法预测miR-204的可能作用靶基因。采用脂质体转染法转染miR-204模拟物至人绒毛膜滋养细胞HTR-8/SVneo,CCK8实验检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,qRT-PCR和Western blotting检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA和蛋白。结果 PE患者和正常孕妇胎盘组织中miR-204的相对表达量分别为2.40±0.16、1.02±0.05,两者相比,P<0.01;重度PE和轻度PE患者胎盘组织中miR-204的相对表达量分别为2.84±0.19、1.96±0.13,两者相比,P<0.01。miR-204作用靶基因可能是MMP-9。与对照细胞相比,转染miR-204模拟物的HTR-8/SVneo细胞的增殖能力和侵袭能力明显降低(P均<0.01)、MMP-9 mRNA和蛋白的表达明显下降(P均<0.01)。结论 miR-204在PE患者胎盘组织中表达明显增高。miR-204能够通过下调MMP-9的表达使滋养细胞增殖和侵袭能力下降,与PE的发病有关。

miR-204-5p靶向溴结构域蛋白4对舌鳞状细胞癌细胞SCC25增殖和迁移侵袭的影响研究

目的探讨miR-204-5p对溴结构域蛋白(BRD)4的靶向作用机制以及对舌鳞状细胞癌SCC25细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测舌鳞状细胞癌组织以及不同细胞株系间的miR-204-5p和BRD4 mRNA的表达水平;miR-204-5p转染SCC25细胞后,细胞计数试剂盒(CCK)8法检测其对细胞增殖的影响,Transwell小室法检测miR-204-5p对SCC25迁移和侵袭的影响;使用TargetScan和荧光素酶实验分析并验证miR-204-5p与BRD4的靶向调控关系;RT-qPCR和Western blot检测miR-204-5p模拟物和抑制剂对BRD4表达水平的影响;Transwell小室法和CCK8法检测miR-204-5p调控BRD4对SCC25增殖和迁移侵袭的影响。结果miR-204-5p在舌鳞状细胞癌组织和SCC25细胞中表达下调,BRD4在舌鳞状细胞癌组织和SCC25细胞中表达上调;提高miR-204-5p表达量抑制SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭;TargetScan和荧光素酶实验证实miR-204-5p与BRD4具有靶向负调控关系;miR-204-5p模拟物抑制BRD4表达,miR-204-5p抑制剂促进BRD4表达上调;当在SCC25细胞中同时过表达miR-204-5p和BRD4时,BRD4能够回补miR-204-5p对SCC25细胞的抑制作用。结论miR-204-5p能够通过靶向负调控BRD4抑制舌鳞状细胞癌SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭。

miR-204-5p、miR-1233-3p在妊娠期高血压疾病孕妇中的表达及临床意义

目的探讨miR-204-5p、miR-1233-3p在妊娠期高血压疾病(HDCP)中的诊断价值。方法选择2018年12月至2020年6月河北省沧州市中心医院(以下简称"我院")收治的197例HDCP患者为研究对象,其中妊娠期高血压102例为妊娠期高血压组,子痫前期95例为子痫前期组;另随机选择同期于我院产科门诊规律围产期保健并入院待产的82名正常足月单胎妊娠孕妇为对照组。检测受试者外周血清miR-204-5p、miR-1233-3p表达及白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。分析miR-204-5p、miR-1233-3p表达与HDCP患者临床参数及IL-6、TNF-α的相关性及miR-204-5p、miR-1233-3p对HDCP的诊断价值。结果子痫前期组、妊娠期高血压组血清miR-204-5p、miR-1233-3p表达及IL-6、TNF-α水平高于对照组(P<0.05);子痫前期组血清miR-204-5p、miR-1233-3p表达及IL-6、TNF-α水平高于妊娠期高血压组(P<0.05)。HDCP患者miR-204-5p、miR-1233-3p表达与分娩孕龄、新生儿体重呈负相关(r_(mi R-204-5p)=-0.403、-0.395,r_(mi R-1233-3p)=-0.321、-0.354,P<0.05);与收缩压、舒张压、24 h尿蛋白定量、IL-6、TNF-α呈正相关(r_(mi R-204-5p)=0.653、0.619、0.597、0.594、0.601,r_(mi R-1233-3p)=0.624、0.609、0.543、0.615、0.631,P<0.05)。miR-204-5p、miR-1233-3p联合诊断HDCP的曲线下面积值大于miR-204-5p、miR-1233-3p单独检测(P<0.05)。结论 miR-204-5p、miR-1233-3p高表达与分娩孕龄、新生儿体重、炎症因子均有关,对HDCP诊断具有较高应用价值。

miR-204-5p通过靶向HMGB1抑制甲状腺乳头状癌K1细胞增殖、侵袭和迁移

目的探讨miR-204-5p对甲状腺乳头状癌K1细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法将体外培养的K1细胞分为miR-NC组(转染miR-204-5p mimics阴性对照)、miR-204-5p组(转染miR-204-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染miR-204-5p inhibitor阴性对照)和anti-miR-204-5p组(转染miR-204-5p inhibitor),RT-PCR检测各组细胞中miR-204-5p的表达,MTT法检测细胞增殖活力,Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移能力。双荧光素酶报告基因实验检测miR-204-5p与HMGB1的靶向关系,RT-PCR和Western blot检测miR-204-5p对HMGB1 mRNA和蛋白表达的调控作用。通过转染HMGB1干扰序列siRNA-HMGB1和HMGB1过表达质粒pcDNA3.1-HMGB1构建HMGB1低表达和过表达的K1细胞株,观察HMGB1对K1细胞增殖、侵袭和迁移的影响。结果与miR-NC组相比,miR-204-5p组细胞中miR-204-5p表达水平明显升高;而anti-miR-204-5p组细胞中miR-204-5p表达的水平较anti-miR-NC组明显降低(P<0.05)。miR-204-5p组细胞的增殖活力、侵袭能力和迁移能力较miR-NC组均明显降低,而anti-miR-204-5p组较anti-miR-NC组均明显升高(P<0.05);HMGB1是miR-204-5p潜在的靶基因,miR-204-5p可负向调控HMGB1表达。HMGB1低表达可抑制K1细胞增殖、侵袭和迁移,而HMGB1过表达则促进K1细胞增殖、侵袭和迁移。结论 miR-204-5p可靶向HMGB1抑制K1细胞增殖、侵袭和迁移。

lncRNA Gm4419靶向miR-204-5p调控LPS诱导的心肌细胞损伤机制

目的 研究lncRNA Gm4419对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞(H9C2)损伤的影响及潜在机制。方法 用10 mg/L LPS诱导心肌细胞H9C2细胞6 h,qRT-PCR检测细胞中lncRNA Gm4419和miR-204-5p的表达。在H9C2细胞中转染GM4419干扰物(si-GM4419)和miR-204-5p模拟物(miR-204-5p)干扰lncRNA Gm4419和过表达miR-204-5p,检测两者对LPS诱导的H9C2细胞损伤的影响,流式细胞术和Western印迹分别检测凋亡率及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和酶切-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3的表达,检测LPS诱导后细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;双荧光素酶报告系统验证lncRNA Gm4419与miR-204-5p的调控关系。结果 与con组相比,LPS可促进心肌细胞H9C2中lncRNA Gm4419表达(P<0.05),抑制miR-204-5p表达(P<0.05),提高H9C2细胞中Bax和酶切caspase-3蛋白及MDA的含量,减少Bcl-2蛋白及SOD、GSH-Px的含量,提高细胞凋亡率(P<0.05);干扰lncRNA Gm4419和过表达miR-204-5p均可减轻LPS诱导的H9C2细胞损伤并抑制细胞凋亡;lncRNA Gm4419靶向负调控miR-204-5p的表达;抑制miR-204-5p可逆转干扰lncRNA Gm4419对LPS诱导的H9C2细胞损伤的作用(P<0.05)。结论 lncRNA Gm4419通过靶向miR-204-5p调控LPS诱导的心肌细胞H9C2的损伤和凋亡。