微小核糖核酸-208与心血管疾病关系研究进展

微小核糖核酸是一类长21~25个核苷酸的高保守性的非编码小分子RNA,主要通过与靶基因真核mRNA的3’非翻译区结合而调控基因的表达。近年来研究发现循环血微小核糖核酸在心血管疾病中的含量会发生变化,现就心肌特异性的微小核糖核酸-208在心血管疾病的研究进展做一综述。

老年急性心肌梗死患者血清微小核糖核酸-133a、微小核糖核酸-208a表达水平与冠状动脉病变程度相关性研究

目的探讨老年急性心肌梗死(AMI)患者血清微小核糖核酸(miR)-133a、miR-208a表达水平,分析其对冠状动脉病变程度的影响。方法选取自2017年2月至2019年2月收治的120例AMI患者为AMI组,患者均存在不同程度的冠状动脉病变;选取同期收治的80例稳定型心绞痛(SAP)患者为SAP组;选取同期体检的72例健康者为健康组。采用实时荧光定量法检测3组血清miR-133a、miR-208a表达水平,并进行比较。对AMI患者行冠状动脉造影,根据Gensini评分明确AMI患者冠状动脉病变程度,并分为轻度、中度、重度,比较不同冠状动脉病变程度的AMI患者血清miR-133a、miR-208a表达水平,采用Pearson线性相关分析对AMI患者血清miR-133a、miR-208a表达水平与冠状动脉病变程度的相关性进行分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-133a、miR-208a对冠状动脉病变加重的评估价值。采用Logistic回归分析对AMI患者冠脉病变加重的危险因素进行分析。结果AMI组、SAP组的血清miR-133a、miR-208a相对表达量高于健康组,且AMI组高于SAP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重度、中度病变患者血清miR-133a、miR-208a相对表达量均高于轻度病变患者,且重度病变患者高于中度病变患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson线性相关分析显示,血清miR-133a、miR-208a与AMI冠状动脉病变程度呈正相关(r=0.729、r=0.680,P<0.05)。以中度、重度患者为冠状动脉病变加重,ROC曲线显示,血清miR-133a、miR-208a及二者联合评估冠脉病变加重的ROC曲线下面积分别为0.751、0.774、0.854。Logistic回归分析结果显示,糖尿病、高血压以及血清miR-133a、miR-208a表达水平增高是AMI冠脉病变加重的危险因素(P<0.05)。结论血清miR-133a、miR-208a在AMI患者中表达明显增高,且与冠状动脉病变密切相关,二者联合检测对冠状动脉病变程度具有一定预测价值。

急性ST段抬高型心肌梗死患者血浆微小核糖核酸-208a水平对并发急性心力衰竭的预测价值

目的:探讨血清微小核糖核酸-208a(miR-208a)表达水平对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者并发急性心力衰竭的预测关系。方法:连续性收集2018年1月至2019年6月,就诊于我科的152例急性STEMI患者纳入病例组,并随机选择同期在我院行健康体检的志愿者60例为对照组。根据发病48 h内是否发生急性心力衰竭(AHF)将病例组分为AHF亚组和非AHF亚组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血浆miR-208a的相对表达水平。结果:病例组血浆miR-208a相对表达水平显著高于对照组(Z=10.919,P=0.000)。AHF亚组血浆miR-208a相对表达水平显著高于非AHF亚组(Z=9.573,P=0.000)。Pearson相关性分析结果显示,病例组患者血浆miR-208a相对表达水平与BNP、hsCRP和cTnI均呈正相关关系(r=0.612,P=0.000;r=0.447,P=0.000;r=0.378,P=0.000)。二分类Logistic回归分析结果显示血浆miR-208a相对表达水平是急性STEMI患者并发AHF的危险因素(OR=2.118,95%CI 1.127~3.982,P=0.007)。血浆miR-208a预测AHF的AUC为0.896(0.844,0.948),cut-off值为32.00,对应的敏感性和特异性分别为88.4%和83.3%。结论:急性STEMI患者血浆miR-208a表达水平显著升高,且可能是并发AHF的危险因素。

激素性股骨头坏死患者微小核糖核酸、骨形态发生蛋白-2、1型纤溶酶原激活物抑制剂表达水平及其临床意义

目的探讨激素性股骨头坏死患者血清微小核糖核酸-672-5p(miR-672-5p)、微小核糖核酸-29b(miR-29b)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)表达水平及其对激素性股骨头坏死的预测价值。方法选取2020年3月至2023年3月河南科技大学第一附属医院收治的116例激素性股骨头坏死患者作为病例组,根据国际骨循环研究会(ARCO)分期标准将其分为Ⅰ期组(41例)、Ⅱ期组(30例)和Ⅲ期组(45例),另选本院同期125例健康体检者作为对照组。比较病例组和对照组及不同ARCO分期激素性股骨头坏死患者血清miR-672-5p、miR-29b、BMP-2、PAI-1水平,利用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标的预测价值。结果病例组患者的血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1水平高于对照组,血清BMP-2水平低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ期组患者血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1水平高于Ⅱ期组和Ⅰ期组,Ⅱ期组高于Ⅰ期组(P<0.05);Ⅲ期组患者血清BMP-2水平低于Ⅱ期组和Ⅰ期组,Ⅱ期组低于Ⅰ期组(P<0.05)。激素性股骨头坏死患者血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1水平与ARCO分期呈正相关,BMP-2与ARCO分期呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-672-5p、miR-29b、BMP-2、PAI-1预测激素性股骨头坏死的AUC值均大于0.8(P<0.05),表明均具有较高的预测激素性股骨头坏死的效能。结论激素性股骨头坏死患者血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1呈高表达,而血清BMP-2呈低表达,四者均具有较高的预测激素性股骨头坏死的效能。

环状核糖核酸转化/转录域关联蛋白和微小核糖核酸-761在冠心病中的表达及临床意义

目的:探究环状核糖核酸转化/转录域关联蛋白(circular RNA transformation/transcription domain associated protein,circTRRAP)和微小RNA-761(microRNA-761,miR-761)在冠心病患者血清中的表达及与心肌损伤的相关性。方法:从2019年12月到2022年12月,在湖南中医药大学第一附属医院接受治疗的80例冠状动脉疾病患者被纳入研究组,同时,80名健康人为对照组。实时荧光定量PCR法用来检测血清中circTRRAP、miR-761表达水平;检测两组心肌损伤相关指标cTnI、cTnT、CK-MB和BNP的水平;采用Person相关性系数分析circTRRAP、miR-761表达与心肌损伤指标的相关性;以ROC曲线探究血清circTRRAP和miR-761水平对冠心病的诊断价值。结果:观察组的circTRRAP水平显著高于对照组,而miR-761水平则远低于对照组(P<0.05)。在心肌损伤指标cTnI、cTnT、CK-MB以及BNP方面,观察组的表达较对照组明显升高(P<0.05)。Pearson法结果显示,冠心病患者血清circTRRAP水平与miR-761呈负相关(r=-0.422,P<0.05)。此外,冠心病患者血清circTRRAP表达水平与cTnI、cTnT、CK-MB和BNP呈显著性的正相关(P<0.05);miR-761表达水平与cTnI、cTnT、CK-MB和BNP呈显著性的负相关(P<0.05)。circTRRAP水平诊断冠心病的曲线下面积(AUC)为0.917,敏感度为78.3%,特异性为95.0%;miR-761水平诊断冠心病的AUC为0.907,敏感度为97.8%,特异性为72.5%;circTRRAP和miR-761联合诊断的AUC为0.991,敏感度为93.5%,特异性为97.5%。结论:冠心病患者血清中circTRRAP的表达水平较高,miR-761的表达水平较低,且血清circTRRAP和miR-761表达水平对冠心病患者早期诊断均有重要作用。

微小核糖核酸-451a在人参养荣汤治疗鼻咽癌放射性黏膜损伤中的机制研究

目的:通过检测微小核糖核酸-451a(miR-451a)和富含半胱氨酸的分泌性酸性蛋白(SPARC)mRNA的表达,推断人参养荣汤治疗鼻咽癌(NPC)放射性黏膜损伤的疗效及作用机制。方法:选择2022年3月—2023年5月收治的鼻咽癌放射性口腔黏膜损伤患者30例作为观察组,选择同期健康者30例作为对照组。采用辨证论治拟人参养荣汤加减治疗,比较观察组治疗前后患者中医症候积分量表和口干程度、口咽疼痛程度、黏膜损伤程度。检测治疗前后患者血清miR-451a和SPARC mRNA表达水平。结果:人参养荣汤可以有效降低患者主症和次症严重程度、Ⅲ级和Ⅳ级口腔黏膜损伤程度、口咽疼痛程度以及口干程度,使患者血清中miR-451a表达下降,促进SPARC mRNA蛋白翻译增强(P<0.05)。治疗前后,miR-451a与中医症候积分均呈正相关(P<0.05)。结论:人参养荣汤对鼻咽癌放射性黏膜损伤具有一定的临床疗效,可降低miR-451a表达水平,升高SPARC mRNA表达水平;miR-451a抑制了SPARC mRNA的翻译,可为将来的中西医结合治疗提供理论依据。

重复经颅磁刺激对阿尔茨海默病患者临床症状及血浆微小核糖核酸-125b、血浆磷酸化Tau-181蛋白的影响

目的:观察重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)患者认知功能、神经精神行为症状及血浆微小核糖核酸-125b(microRNA-125b,miR-125b)、血浆磷酸化Tau-181蛋白(phosphorylated Tau181 protein,P-tau181)表达的影响。方法:筛选轻中度AD患者34例,随机分为对照组(n=16)和试验组(n=18)。对照组采取认知训练及重复经颅磁伪刺激,试验组采取认知训练结合重复经颅磁真刺激。磁刺激强度为100%的静息运动阈值,频率为10Hz,每日治疗1次,每周治疗5天,持续4周,刺激脑区为左侧前额叶背外侧区和左侧颞叶区。在治疗前、后进行Addenbrooke-Ⅲ认知检查(the AddenbrookeⅢcognitive examination,ACE-Ⅲ)、简易精神状态量表(mini-mental state scale,MMSE)及神经精神症状问卷(neuropsychiatric inventory,NPI)评估,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测微小miR-125b表达量,酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技术检测P-tau181的浓度。结果:治疗结束后,试验组ACE-Ⅲ、MMSE和NPI评分以及miR-125b、P-tau181均较组内治疗前显著改善,差异具有显著性意义(P<0.05),且上述指标与对照组治疗后相比,差异具有显著性意义(P<0.05);而对照组各项指标改善不具有显著性意义(P>0.05)。结论:rTMS能改善轻中度AD患者的认知功能及神经精神行为症状,这可能与rTMS促进血浆miR-125b的表达和抑制P-tau181蛋白产生相关。

慢性心力衰竭患者血清微小核糖核酸-29b表达水平及其临床意义

目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者血清中微小核糖核酸-29b(miR-29b)的表达水平及其临床意义。方法选取2017年6月至2020年8月长沙市第四医院收治的167例CHF患者作为观察组,并根据纽约心脏协会心功能分级标准进行分级;另选同时间段内145名健康体检者为对照组。采用qRT-PCR检测受试者血清miR-29b表达水平,超声心动图检测左心房内径(LAD)、左心室重构指数(LVRI)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室后壁厚度(LVPWD)、左心室质量指数(LVMI)、左心室射血分数(LVEF)、心排血量(CO),并检测血清N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平及评估堪萨斯城心肌病调查问卷(KCCQ)评分、6 min步行试验(6MWT)。比较对照组和观察组各级心功能患者上述各项指标,采用Pearson相关性分析法分析观察组患者血清miR-29b表达水平与心功能、心室重构指标及生存质量的关系;随访1年,采用多因素Logistic回归分析法分析CHF患者血清miR-29b表达水平与预后的关系。结果观察组心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级患者中血清miR-29b相对表达量、LVRI、CO、LVEF及KCCQ评分、6MWT均依次降低(P<0.05),且均低于对照组(F=831.833、386.491、110.251、71.503、101.552、867.632,P<0.05);观察组心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级中LAD、LVEDD、LVMI、LVPWD及血清NT-proBNP、cTnI、cTnT水平均依次升高(P<0.05),且均高于对照组(F=238.758、528.524、241.700、58.167、3712.854、1836.663、2230.468,P<0.05);Pearson相关性分析显示CHF患者miR-29b表达与LVEDD、LVPWD、LVMI、LAD及血清NT-proBNP、cTnI、cTnT水平均呈负相关(r=-0.822、-0.884、-0.891、-0.713、-0.854、-0.813、-0.832,P<0.05),而与LVEF、CO、LVRI及KCCQ评分、6MWT均呈正相关(r=0.734、0.864、0.791、0.721、0.783,P<0.05);多因素Logistic回归分析显示血清miR-29b表达是CHF患者预后不良的保护因素(OR=0.517,P<0.05),心功能分级Ⅲ/Ⅳ级和对医嘱依从性差是其预后不良的危险因素(OR=5.496、6.074,P<0.05)。结论miR-29b表达是CHF患者预后不良的影响因素,对CHF的临床诊治具有重要指导作用。

血清微小核糖核酸-133a、微小核糖核酸-126、髓系细胞表达触发受体-1、肺表面活性蛋白A表达水平与脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征风险及预后关系

目的:研究血清微小核糖核酸-133a(miR-133a)、微小核糖核酸-126(miR-126)、髓系细胞表达触发受体-1(TREM-1)、肺表面活性蛋白A(SP-A)表达水平与脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)风险及预后的关系。方法:将248例脓毒症患者根据其是否发生ARDS分为无ARDS组(97例)和ARDS组(151例),统计两组血清miR-133a、miR-126、TREM-1、SP-A表达水平;分别根据脓毒症并发ARDS患者病情严重程度及入院后28 d预后情况将其分为轻度组(51例)、中度组(73例)、重度组(27例)及存活组(122例)、死亡组(29例),比较不同病情严重程度及预后脓毒症并发ARDS患者血清miR-133a、miR-126、TREM-1、SP-A表达水平。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-133a、miR-126、TREM-1、SP-A对脓毒症并发ARDS患者预后的预测价值。结果:ARDS组血清miR-133a、miR-126、TREM-1表达水平高于无ARDS组,血清SP-A表达水平低于无ARDS组(均P<0.05)。轻度组、中度组、重度组血清miR-133a、miR-126、TREM-1表达水平呈升高趋势,血清SP-A表达水平呈降低趋势,组间比较差异具有统计学意义(均P<0.05)。死亡组血清miR-133a、miR-126、TREM-1表达水平高于存活组,血清SP-A表达水平低于存活组(均P<0.05)。血清miR-133a、miR-126、TREM-1、SP-A联合预测脓毒症并发ARDS患者预后的曲线下面积(AUC)值高于四者单独检测(均P<0.05);敏感度比较,血清SP-A、TREM-1高于血清miR-133a、miR-126及联合检测,血清SP-A高于血清TREM-1,联合检测高于血清miR-133a、miR-126(均P<0.05);特异度比较,血清miR-133a高于血清TREM-1、SP-A及联合检测,血清miR-126、联合检测高于血清TREM-1、SP-A(均P<0.05)。结论:血清miR-133a、miR-126、TREM-1、SP-A表达水平与脓毒症并发ARDS患者病情的发生和发展均关系密切,四者联合对脓毒症并发ARDS患者预后具有较好的预测效果。

微小核糖核酸-27a、微小核糖核酸-1299预测食管癌病人术后预后的临床价值

目的探讨微小核糖核酸(miR)-27a、miR-1299预测食管癌病人术后远期预后的临床价值。方法2020年6月~2022年6月我院收治的食管癌病人89例,均行微创胸、腹腔镜联合食管癌切除术治疗。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测病人术前miR-27a、miR-1299表达量,采用酶联法检测血清铁蛋白(SF)水平,分析miR-27a、miR-1299相对表达量及血清SF与食管癌病人临床病理的关系。术后跟踪随访并记录病人的生存情况,随访截止时间为2023年2月。分析miR-27a、miR-1299表达量及血清SF与病人预后的关系,采用多因素Cox回归模型分析影响食管癌病人预后的危险因素。Pearson分析miR-27a、miR-1299与血清SF的关系。结果miR-27a、miR-1299相对表达量及血清SF在肿瘤分期、淋巴结转移和分化程度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析结果显示,miR-27a高表达组及SF高表达组总生存率低于miR-27a低表达组及SF低表达组,miR-1299高表达组总生存率高于miR-1299低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示,miR-27a≥2.54、miR-1299<4.18和血清SF≥223.78μg/L均为影响食管癌病人术后远期预后的独立危险因素(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清SF水平与miR-27a相对表达量呈正相关(P<0.05,r=0.612),与miR-1299相对表达量呈负相关(P<0.05,r=-0.517)。结论食管癌病人miR-27a、miR-1299表达及血清SF与病人肿瘤分期、淋巴结转移和分化程度有关,且可以评估病人术后预后。

微小核糖核酸-155对肝癌细胞增殖、侵袭迁移和凋亡的影响

目的探究微小核糖核酸(miR)-155靶向蛋白酪氨酸磷酸酶非受体21型(PTPN21)调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法体外培养Huh7人肝癌细胞并通过miR-155沉默慢病毒(sh-miR-155)转染下调miR-155。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Huh7细胞miR-155沉默效果,获得稳转细胞株后将细胞株随机分为:Blank组(正常Huh7细胞)、shNC组(Huh7细胞+miR-155空载体)、sh-miR-155组(Huh7细胞+miR-155沉默)、sh-miR-155+Recilisib组(Huh7细胞+miR-155沉默+PI3K-AKT激动剂)、shNC+Recilisib组(Huh7细胞+miR-155空载体+PI3K-AKT激动剂)。双荧光素酶实验检测PTPN21是否为miR-155的下游;溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术测定各组细胞凋亡水平;Transwell实验分析各组细胞侵袭与迁移能力;蛋白质印迹检测各组PTPN21、通路相关蛋白PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT及凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、Caspase-3表达变化差异。结果sh-miR-155组中miR-155的表达水平低于Blank组及shNC组(P<0.0001),miR-155在Blank组及shNC组表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。MTT结果显示,sh-miR-155组中Huh7细胞在2、3、4、5 d时A值均低于Blank组及shNC组(P<0.0001),而Blank组与shNC组差异无统计学意义(P>0.05);sh-miR-155组在2、3、4、5 d时A值低于sh-miR-155+Recilisib组及shNC+Recilisib组(P=0.0052,P<0.0001),而sh-miR-155+Recilisib组在2、3、4、5 d时A值低于shNC+Recilisib组(P<0.0001)。Blank组与shNC组迁移及侵袭细胞数差异无统计学意义(P>0.05),激活PI3K-AKT信号通路后,与Blank组相比,shNC+Recilisib组肝癌细胞的迁移、侵袭能力显著增加(P<0.0001)。相反,沉默miR-155后Huh7细胞的迁移及侵袭细胞数明显低于Blank组及shNC组(P<0.0001),而PI3K激动剂逆转了这一现象,与sh-miR-155组相比,sh-miR-155+Recilisib组肝癌细胞的迁移、侵袭能力增强(P=0.0002)。慢病毒转染Huh7人肝癌细胞以沉默miR-155,下调miR-155抑制PTPN21调控PI3K-AKT信号通路从而抑制肝癌细胞的侵袭、迁移、增殖能力,促进肝癌细胞凋亡。结论miR-155通过靶向PTPN21调控PI3K-AKT信号通路抑制肝癌细胞的迁移、侵袭、增殖。miR-155可能是未来肝癌治疗潜在靶点。

姜黄素通过微小核糖核酸-34a介导的自噬途径保护心肌细胞免受高糖诱导的损伤研究

目的:探究姜黄素(curcumin,Cur)通过miR-34a介导的自噬途径保护心肌细胞免受高糖(highglucose,HG)诱导的损伤。方法:将心肌细胞分为Con组(正常培养细胞)、HG组(30mmol/L葡萄糖培养细胞)、HG+Cur-L组(姜黄素25μmol/L和葡萄糖30mmol/L培养细胞)、HG+Cur-M组(姜黄素50μmol/L和葡萄糖30 mmol/L培养细胞)、HG+Cur-H组(姜黄素100μmol/L和葡萄糖30mmol/L培养细胞)、HG+Cur+miR-NC组(转染miR-NC,使用姜黄素100μmol/L和葡萄糖30mmol/L培养细胞)、HG+Cur+miR-34a(转染miR-34a,使用姜黄素100μmol/L和葡萄糖30 mmol/L培养细胞)、HG+Cur+miR-34a+3-MA组(转染miR-34a,使用姜黄素100μmol/L、葡萄糖30 mmol/L及自噬抑制剂3-MA 10μmol/L培养细胞)。采用qRT-PCR检测miR-34a表达水平;CCK8检测细胞活性;ELISA检测LDH含量、SOD、GSH-Px活性;Western blot检测Beclin-1、LC3II/I、p62蛋白表达。结果:与Con组相比,HG组细胞活性、SOD、GSH-Px活性、p62蛋白明显降低,而LDH含量、miR-34a表达、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达明显增加。与HG组比较,HG+Cur-L组、HG+Cur-M组、HG+Cur-H组细胞活性、SOD、GSH-Px活性、p62蛋白明显增加,而LDH含量、miR-34a表达、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达明显降低。与HG+Cur+miR-NC组相比,HG+Cur+miR-34a、HG+Cur+miR-34a+3-MA组细胞活性、SOD、GSH-Px活性、p62蛋白明显降低,而LDH含量、miR-34a表达、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达明显增加。与HG+Cur+miR-34a组相比,HG+Cur+miR-34a+3-MA组细胞活性、SOD、GSH-Px活性、p62蛋白明显增加,而LDH含量、miR-34a表达、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达明显降低。结论:姜黄素通过微小核糖核酸-34a介导自噬途径减缓高糖诱导的心肌细胞损伤。

老年急性心肌梗死伴心力衰竭患者血清中Kruppel样因子15、微小核糖核酸128-3p表达与心功能的关系

目的探讨老年急性心肌梗死(AMI)伴心力衰竭患者血清中Kruppel样因子15(KLF15)、微小核糖核酸128-3p(miR-128-3p)表达与心功能的关系。方法纳入2020年8月至2021年8月期间襄阳市襄州区人民医院收治的老年AMI伴心力衰竭患者112例作为AMI伴心力衰竭组,同期选取一般资料相匹配且单纯AMI患者120例作为AMI组,所有患者采用超声心动图进行心功能检测,记录左心室收缩末期内径(LVESd)、左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室射血分数(LVEF);测定患者血清中脑钠肽(BNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、KLF15、miR-128-3p水平;Pearson法分析老年AMI伴心力衰竭患者血清KLF15、miR-128-3p表达水平与BNP、CK-MB、cTnI、LVESd、LVEDd、LVEF相关性,并分析血清KLF15与miR-128-3p的相关性。结果与AMI组相比,AMI伴心力衰竭组患者miR-128-3p表达水平、BNP、CK-MB、cTnI、LVESd、LVEDd水平升高(t/Z=38.306、5.865、7.997、20.575、16.037、17.368,P<0.05),LVEF、KLF15水平降低(t=24.072、47.301,P<0.05)。AMI伴心力衰竭患者血清miR-128-3p水平随心功能分级升高而升高(F=322.866,P<0.05),KLF15水平随心功能分级升高而降低(F=221.228,P<0.05);老年AMI伴心力衰竭患者血清miR-128-3p表达水平与BNP、CK-MB、cTnI呈正相关(r=0.667、0.525、0.617,P<0.05),与LVEF呈负相关(r=-0.537,P<0.05);血清KLF15表达水平与BNP、CK-MB、cTnI、LVEDd呈负相关(r=-0.531、-0.574、-0.562、-0.416,P<0.05),与LVEF呈正相关(r=0.624,P<0.05)。TargetScan网站预测miR-128-3p与KLF15具有靶向结合位点,Pearson分析显示,老年AMI伴心力衰竭患者血清miR-128-3p与KLF15呈负相关(r=-0.853,P<0.05)。结论老年AMI伴心力衰竭患者血清KLF15降低,miR-128-3p水平升高,均与患者心功能指标具有相关性,可作为判断AMI伴心力衰竭患者心功能的标志物。

血清微小核糖核酸-183、基质金属蛋白酶9水平与B型主动脉夹层患者预后的关系

目的 探讨血清微小核糖核酸(miRNA)-183、基质金属蛋白酶9(MMP9)水平与B型主动脉夹层(TBAD)患者胸段血管内主动脉修复术(TEVAR)后预后的关系。方法 收集2019年1月至2022年1月柳州市工人医院接受TEVAR治疗的150例TBAD患者的临床资料,根据术后随访情况将患者分为预后不良组(n=27)和预后良好组(n=121)。统计随访期间不良事件的发生情况,采用多因素Logistic回归模型分析TBAD患者TEVAR术后预后不良的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)分析miRNA-183、MMP9对TBAD患者TEVAR术后预后不良的预测价值。结果 随访时间为8~44个月,中位随访23个月。预后不良组患者的年龄大于预后良好组患者,高血压比例、2型糖尿病比例、收缩压、白细胞计数、空腹血糖、糖化血红蛋白水平及血清MMP9水平均高于预后良好组患者,血清mi RNA-183的表达水平低于预后良好组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果显示,高血压、MMP9表达水平高均是TBAD患者TEVAR术后预后不良的危险因素(P<0.05),miRNA-183水平高是TBAD患者TEVAR术后预后不良的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miRNA-183和MMP9联合预测TBAD患者TEVAR术后预后不良的曲线下面积(AUC)为0.919,高于miRNA-183、MMP9单独预测的0.824、0.843,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 血清miRNA-183表达下调、MMP9水平升高均与TBAD患者TEVAR术后预后不良有关,可作为其预后分析的标志物。

慢性阻塞性肺疾病合并冠心病患者组胺、可溶性髓样细胞触发受体-1、微小核糖核酸-145、超敏C反应蛋白的表达特征及检测价值

目的 探讨组胺(HA)、可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)、微小核糖核酸-145(miR-145)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并冠心病(CHD)患者中的表达特征及检测价值。方法 将107例COPD合并CHD患者设为研究组,同期健康体检者107例设为对照组。抽取受检者血液样本,检测miR-145、HA及sTREM-1、hs-CRP水平。比较2组HA、sTREM-1、miR-145、hs-CRP水平,并比较研究组不同病情严重程度和纽约心脏病协会(NYHA)分级患者的HA、sTREM-1、miR-145、hs-CRP水平。观察各指标水平与病情严重程度、NYHA分级的关联性。结果 研究组HA、sTREM-1、hs-CRP水平高于对照组,miR-145水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同COPD病情严重程度患者的HA、sTREM-1、miR-145、hs-CRP水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);随着病情严重程度的加剧,HA、sTREM-1、hs-CRP水平持续增高,miR-145持续降低,差异有统计学意义(P<0.05)。不同NYHA分级患者的HA、sTREM-1、miR-145、hs-CRP水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);随着NYHA分级的增高,HA、sTREM-1、hs-CRP水平持续增高,miR-145持续降低,差异有统计学意义(P<0.05)。HA、sTREM-1、hs-CRP与COPD病情严重程度、NYHA分级呈正相关,miR-145与COPD病情严重程度、NYHA分级呈负相关(P<0.05)。结论 COPD合并CHD患者的HA、sTREM-1、miR-145、hs-CRP表达异常,且与COPD病情严重程度、NYHA分级密切相关。

利用CRISPR-Cas9技术构建微小核糖核酸-551b基因敲除小鼠模型

目的:利用成簇规律性间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR)相关蛋白9(CRISP associated protein 9,Cas9)技术构建微小核糖核酸-551b(miR-551b)基因敲除小鼠模型。方法:选择健康C57BL/6J小鼠,针对miR-551b外显子1区域,设计导向RNA(guide RNA,gRNA),构建Cas9载体质粒,将体外转录的Cas9 RNA及gRNA显微注射入小鼠的受精卵并体外培养。将培养合格的胚胎移植到代孕小鼠的输卵管中,待小鼠生育后得到F0代小鼠,使用基因测序确定基因敲除情况,与野生型小鼠繁育后,得到F1代杂合小鼠,F1代小鼠经自交繁育获得F2代小鼠,F3代小鼠由F2代纯合小鼠自交获得,采用电泳鉴定小鼠基因型,RT-PCR检测F3代小鼠组织miR-551b的表达。结果:利用CRISPR/Cas9技术构建模型小鼠得到F0代小鼠,通过测序筛选出缺失目标序列的F0代杂合子小鼠。与WT小鼠繁育后,琼脂糖凝胶电泳及测序筛选出F1代杂合小鼠,同样的方法鉴定并获得F2、F3代基因敲除小鼠,获取F3代纯合小鼠的心脏及下腔静脉样本,RT-PCR结果证实F3代纯合小鼠miR551b表达明显低于WT小鼠(P<0.05),成功敲除miR-551b基因。结论:通过CRISPR-Cas9技术成功构建miR⁃155基因敲除小鼠模型并稳定遗传,为进一步研究提供了有利条件。

血清微小核糖核酸-130a对老年高血压脑出血的影响

目的分析老年高血压脑出血患者血清微小核糖核酸(miR)-130a表达及其对脑血肿扩大的预测价值。方法选取210例老年高血压脑出血患者(疾病组)和180例老年健康志愿者(健康组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组血清miR-130a表达;Logistic回归分析明确疾病组脑血肿扩大的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,将曲线下面积(AUC)用以评价血清miR-130a表达对脑血肿扩大的预测价值。结果疾病组血清miR-130a相对表达量显著高于健康组(P<0.05);疾病组不同性别、年龄、出血位置患者血清miR-130a相对表达量差异无统计学意义(P>0.05),入院时舒张压、收缩压升高患者血清miR-130a相对表达量显著高于未升高患者(P<0.001);疾病组脑血肿扩大发生率为16.83%,且疾病组脑血肿扩大发生患者血清miR-130a表达显著高于未发生脑血肿扩大患者(P<0.05);丘脑出血、入院时格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、血清miR-130a表达均是疾病组发生脑血肿扩大的影响因素(P<0.05);血清miR-130a表达对脑血肿扩大的预测灵敏度、AUC均显著高于GCS评分(P<0.05)。结论老年高血压脑出血患者血清miR-130a表达高,可能与血压升高有关,且发生脑血肿扩大者更高,血清miR-130a表达升高与丘脑出血等均可增加脑血肿扩大的发生风险,且血清miR-130a表达可预测脑血肿扩大。

子宫内膜癌患者血清微小核糖核酸-146a、微小核糖核酸-155表达水平及其临床意义

目的分析子宫内膜癌(EC)患者血清微小核糖核酸-146a(miR-146a)、微小核糖核酸-155(miR-155)表达水平及其临床意义。方法前瞻性纳入达州市中心医院2019年7月至2021年4月收治的81例EC患者作为EC组,另纳入同期收治的81例子宫内膜增生患者作为内膜增生组。检测并比较两组入院时血清miR-146a、miR-155水平;询问并记录EC患者临床病理特征,比较不同病理特征EC患者血清miR-146a、miR-155水平,分析血清miR-146a、miR-155水平与EC患者临床病理特征的关系。结果EC组血清miR-146a水平低于内膜增生组,miR-155水平高于内膜增生组(P<0.05)。有淋巴结转移EC患者血清miR-146a水平低于无淋巴结转移患者,miR-155水平高于无淋巴结转移患者(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,血清miR-146a水平升高可能是EC患者淋巴结转移的保护因子(OR<1,P<0.05),miR-155水平升高可能是EC患者淋巴结转移的风险因子(OR>1,P<0.05)。结论EC患者血清miR-146a降低水平、miR-155水平升高,且血清miR-146a水平降低、miR-155水平升高可能与EC患者淋巴结转移有关。

急诊有机磷中毒患者外周血微小核糖核酸-214、T淋巴细胞和炎症因子表达与早期肾损伤关系

目的:分析急诊有机磷中毒患者外周血微小核糖核酸(miRNA)-214、T淋巴细胞和炎症因子的表达与早期肾损伤的关系。方法:选取80例急诊有机磷中毒患者为研究对象,将其作为研究组,根据是否发生早期肾损伤将其分为肾损伤组(n=24)和非肾损伤组(n=56),另选取同期50例健康体检者作为对照组。比较不同组别之间的miR-214、CD3^(+)、CD8^(+)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-18(IL-18)水平差异,分析miR-214、CD3^(+)、CD8^(+)、CRP、IL-18与早期肾损伤的关系。结果:研究组miR-214、CRP、IL-18水平均高于对照组,CD3^(+)、CD8^(+)水平均低于对照组(均P<0.05)。单因素分析结果显示,肾损伤组miR-214、CRP、IL-18水平均高于非肾损伤组,CD3^(+)、CD8^(+)水平均低于非肾损伤组(均P<0.05),而两组间性别、年龄、体重指数、中毒时间、服毒量比较差异无统计学意义(均P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-214、CD3^(+)、CD8^(+)、CRP、IL-18水平均为影响急诊有机磷中毒患者发生早期肾损伤的危险因素(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-214、CD3^(+)、CD8^(+)、CRP、IL-18在预测急诊有机磷中毒患者发生早期肾损伤中具有较高价值(均P<0.05)。结论:急诊有机磷中毒患者miR-214、CRP、IL-18表达量升高、CD3^(+)、CD8^(+)表达量降低有助于疾病的早期判断,在预测早期肾损伤的发生风险中具有较高的临床价值。

宫颈癌患者血清微小核糖核酸-381、微小核糖核酸-145水平变化及与临床病理参数相关性分析

目的:探讨宫颈癌(CC)患者血清微小核糖核酸-381(miRNA-381)、微小核糖核酸-145(miRNA-145)水平的变化及与临床病理参数的关系。方法:选取CC患者80例作为观察组,并于同期健康女性体检者选取68例作为对照组。采用定量聚合酶链反应法(QRT-PCR)检测两组血清miRNA-381、miRNA-145表达水平,同时收集其临床病理资料,探究血清表达水平与临床病理参数的关系。结果:观察组血清miRNA-381、miRNA-145水平低于对照组(均P<0.05);CC患者血清miRNA-381、miRNA-145表达水平与患者年龄、乳头瘤病毒感染、肿瘤直径、病理分期等因素无关(均P>0.05);与病理类型、组织分化程度、浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移有关(均P<0.05)。结论:CC患者中血清miRNA-381、miRNA-145呈低表达,其表达水平与病理类型、组织分化程度、浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移有关。