梅毒血清固定患者外周血单个核淋巴细胞中miR-31和mi R-192水平表达及其诊断价值研究

目的 探讨梅毒血清固定患者外周血单个核淋巴细胞中微小核糖核酸(micro RNA,miR)-31和微小核糖核酸(micro RNA,miR)-192的表达水平及其诊断价值。方法 选取2020年11月~2022年11月江阴市人民医院收治的梅毒患者81例,根据患者进行驱梅治疗后的血清转变情况分为血清固定组(n=37)和转阴组(n=44),根据临床病理分期分为一期梅毒患者组(n=45)和二期梅毒患者组(n=36),根据梅毒快速血浆反应素试验(rapid plasma response test,RPR)分为反应素初始滴度<1∶8梅毒患者组(n=31),1∶8~1∶32梅毒患者组(n=26)和> 1∶32梅毒患者组(n=24)。另选取同期进行健康体检的50例志愿者为健康对照组。实时荧光定量PCR检测各组外周血miR-31和miR-192水平;Logistic回归分析梅毒患者发生血清固定的影响因素;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析外周血miR-31,miR-192水平对梅毒患者发生血清固定的诊断价值。结果 血清固定组、转阴组和健康对照组外周血miR-31(0.36±0.10,0.68±0.13,1.01±0.22)和miR-192(0.51±0.12,0.73±0.19,1.03±0.05)表达水平逐渐升高,差异具有统计学意义(F=167.815,173.090,均P <0.05);病理分期为Ⅰ期患者外周血miR-31(0.56±0.13),miR-192(0.76±0.14)水平显著高于Ⅱ期(0.38±0.10,0.47±0.08),差异具有统计学意义(t=6.842,11.059,均P <0.05);反应素初始滴度<1∶8、反应素初始滴度为1∶8~1∶32、反应素初始滴度> 1∶32的梅毒患者血清miR-31(0.56±0.18,0.48±0.12,0.39±0.09)和miR-192(0.80±0.20,0.64±0.13,0.49±0.12)表达水平逐渐降低,差异具有统计学意义(F=10.057,26.166,均P <0.05);miR-31[OR(95%CI)=0.537(0.338~0.853)]和miR-192 [OR(95%CI)=0.375(0.192~0.732)]均是梅毒患者发生血清固定的保护因素(均P <0.05);外周血miR-31,miR-192以及两者联合诊断梅毒患者发生血清固定的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.729(95%CI:0.618~0.821),0.821(95%CI:0.720~0.898)和0.927(95%CI:0.847~0.973),联合诊断的敏感度和特异度分别为83.78%,84.09%,二者联合优于外周血miR-31和mi R-192各自单独诊断,差异具有统计学意义(Z=3.836,2.563,均P <0.05)。结论 外周血miR-31和miR-192在梅毒血清固定患者体内下调,二者联合诊断梅毒血清固定具有较高效能。

不明原因复发性自然流产患者蜕膜组织中miR-21和miR-31的表达及其与FOXP3的相关性研究

目的研究微小核糖核酸-21(miR-21)、miR-31和叉头样转录因子P3(FOXP3)在不明原因复发性自然流产(URSA)患者蜕膜中的表达情况,探讨miR-21、miR-31与FOXP3之间的相关性。方法运用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法测定miR-21、miR-31及FOXP3在URSA患者及正常对照组蜕膜组织中的表达情况,并分析miR-21、miR-31的表达与FOXP3表达的相关性。结果FOXP3、miR-21在URSA组中的表达均明显低于正常对照组(P均<0.05),而miR-31在URSA组中的表达高于对照组(P>0.05)。蜕膜组织中miR-21,miR-31的表达与FOXP3的表达相关(P均<0.05),其中miR-21与FOXP3表达呈正相关,而miR-31与FOXP3表达呈负相关。结论蜕膜组织中miR-21和miR-31的表达异常,可能通过下调FOXP3基因的表达而引起母体免疫耐受机制紊乱,从而导致URSA的发生。

子痫前期并发幽门螺旋杆菌感染患者血清miR-31-5p表达与不良妊娠结局的相关性研究

目的探究血清微小核糖核酸-31-5p(miR-31-5p)表达与子痫前期(PE)并发幽门螺旋杆菌(Hp)感染患者不良妊娠结局的相关性。方法选取2019年1月~2020年5月在唐山市妇幼保健院就诊的204例PE并发Hp感染患者作为研究对象,并根据妊娠结局将其分为不良妊娠组(n=121)和正常妊娠组(n=83)。用实时荧光定量PCR法检测PE确诊时(T0)、妊娠28周第1天(T1)和妊娠30周第1天(T2)的血清miR-31-5p表达量。结果不良妊娠组的收缩压、舒张压、24 h尿蛋白和剖宫产率分别为155.64±11.89mmHg,101.25±6.16mmHg,2.69±0.52g/24 h和85.95%,均高于正常妊娠组(151.75±11.34mmHg,97.93±8.79mmHg,2.06±0.29g/24 h和65.06%);分娩孕周为34.79±2.06周,低于正常妊娠组(37.94±0.97周),差异均有统计学意义(t/χ^(2)=2.344~14.631,均P<0.05)。不良妊娠组的血清T0-miR-31-5p,T1-miR-31-5p和T2-miR-31-5p相对表达量分别为2.42±0.39,2.20±0.42和2.10±0.25,均高于正常妊娠组(2.11±0.32,1.76±0.33和1.69±0.20),差异均有统计学意义(t=6.025~12.657,均P=0.000)。T2-miR-31-5p预判PE并发Hp感染患者妊娠结局的受试者工作特征曲线下面积高于T0-miR-31-5p和T1-miR-31-5p,差异均有统计学意义(Z=4.957,P=0.000;Z=3.009,P=0.003)。Logistic回归分析结果显示24 h尿蛋白高(OR=15.250,95CI:2.804~81.781)、剖宫产(OR=7.954,95%CI:1.416~44.675)和T2-miR-31-5p高(OR=24.479,95%CI:6.365~94.148)是PE并发Hp感染患者妊娠结局不良的独立危险因素,分娩孕周长(OR=0.244,95%CI:0.132~0.452)是PE并发Hp感染患者妊娠结局不良的独立保护因素。结论血清T2-miR-31-5p表达量高与PE并发Hp感染患者不良妊娠结局有关。

双荧光素酶报告基因技术验证miR-31对LATS2的靶向调控作用

目的通过双荧光素酶报告基因技术验证miR-31对大肿瘤抑制因子2(LATS2)的靶向调控作用,观察miR-31在心肌细胞肥大过程中的可能影响。方法运用Targetscan软件预测大鼠miR-31对LATS2的靶向调控作用;以双荧光素酶报告质粒为工具载体,分别插入人工合成的大鼠LATS2基因野生型3′UTR(LATS2-3′UTR-WT)及突变型3′UTR(LATS2-3′UTR-MU)片段,构建LATS2-3′UTR-WT及LATS2-3′UTR-MU双荧光素酶报告质粒;重组双荧光素酶报告质粒分别与miR-31过表达质粒共转染293T细胞,检测荧光素酶活性并分析miR-31对LATS2的靶向调控作用;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导体外心肌细胞肥大模型,RT-qPCR检测miR-31、LATS2及心肌细胞肥大基因心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)的表达,F肌动蛋白荧光探针观察心肌细胞形态变化。结果Targetscan软件预测结果显示,大鼠miR-31与LATS2基因3′UTR存在互补结合位点;经酶切及基因测序鉴定,成功构建LATS2-3′UTR-WT及LATS2-3′UTR-MU双荧光素酶报告质粒;与LATS2-3′UTR-MU+miR-31组相比,LATS2-3′UTR-NC+miRNA-31组荧光素酶活性无明显变化(0.98±0.03vs.1.00±0.03,P>0.05),而LATS2-3′UTR-MT+miR-31组与LATS2-3′UTR-NC+miR-31组相比,荧光素酶活性显著降低(0.74±0.02vs.1.00±0.03,P<0.01);AngⅡ诱导48h后可检测到心肌细胞肥大基因ANP(P<0.01)及β-MHC表达上调(P<0.05),心肌细胞肥大过程中miR-31表达显著上调(P<0.01),LATS2基因明显下调(P<0.05),96h后心肌细胞表面积明显增大。结论miR-31可通过与LATS2基因3′UTR互补结合实现其对LATS2靶向调控作用,miR-31靶向作用LATS2可能参与调控心肌细胞的肥大。

血清FABP4和PPARγ与miR-31-5p对子痫前期并发Hp感染患者妊娠结局的预测价值

目的研究血清脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、微小核糖核酸-31-5p(miR-31-5p)在预测子痫前期(PE)并发幽门螺杆菌(Hp)感染患者妊娠结局中的应用价值,为患者不良妊娠结局发生的早期诊断提供参考和依据。方法回顾性选取2020年1月-2022年6月舟山市妇女儿童医院收治的198例PE并发Hp感染患者,分为结局不良组(75例)和结局良好组(123例),分组依据为妊娠结局。统计PE并发Hp感染患者不良妊娠结局发生情况,比较两组基础资料、血清FABP4、PPARγ、miR-31-5p水平,分析上述血清学指标对PE并发Hp感染患者不良妊娠结局的预测价值。结果198例PE并发Hp感染患者总不良妊娠结局发生例数75例,总不良妊娠结局发生率为37.88%;结局不良组分娩孕周更短,剖宫产率更高(P<0.05);结局不良组血清FABP4、miR-31-5p水平更高,血清PPARγ水平更低(P<0.05);血清FABP4、PPARγ、miR-31-5p联合预测PE并发Hp感染患者不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)值、敏感度、特异度均高于三者单独检测(P<0.05)。结论发生不良妊娠结局的PE合并Hp感染患者孕期较短且多为剖宫产分娩,血清FABP4、PPARγ、miR-31-5p水平对其不良妊娠结局发生的预测价值较高。