血清微小核糖核酸-4286与幽门螺旋杆菌感染的子痫前期患者妊娠结局的关系

目的分析血清微小核糖核酸-4286(miR-4286)与幽门螺旋杆菌(Hp)感染的子痫前期(PE)患者妊娠结局的关系。方法选择Hp感染的孕妇89例[Hp组;年龄24~40岁,平均年龄31.67岁;孕前体质量指数(BMI)21.30~31.55 kg/m^(2),平均孕前BMI 25.47 kg/m^(2)]和204例Hp感染的PE患者(Hp+PE组;年龄24~40岁,平均年龄31.87岁;孕前BMI 21.01~31.55 kg/m^(2),平均孕前BMI 25.69 kg/m^(2))作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测miR-4286表达水平。随访获取Hp感染的PE患者妊娠结局,并分析miR-4286与其妊娠结局的关系。结果Hp组妊娠28周第1天(T2)和妊娠30周第1天(T3)的miR-4286水平均高于Hp+PE组(1.95±0.39 vs 1.82±0.26、2.28±0.31 vs 1.92±0.33。P=0.003、0.000),Hp组和Hp+PE组T3时点的miR-4286水平均高于T2时点(2.28±0.31 vs1.95±0.39、1.92±0.33 vs 1.82±0.26。P=0.000、0.001),Hp组miR-4286水平升高程度[0.38(0.56)]高于Hp+PE组[0.06(0.57)](P=0.000)。Hp+PE组中有121例妊娠结局不良(结局不良组),83例妊娠结局良好(结局良好组)。结局不良组PE确诊时收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、24 h尿蛋白和剖宫产占比均高于结局良好组,分娩孕周低于结局良好组[(155.64±11.89)mmHg vs(151.75±11.34)mmHg、(101.25±6.16)mmHg vs(97.93±8.79)mmHg、(2.69±0.52)g vs(2.06±0.29)g、85.95%vs 65.06%、(34.79±2.06)周vs(37.94±0.97)周。P=0.020、0.002、0.000、0.000、0.000]。结局不良组PE确诊时(T1)、T2和T3时点的miR-4286水平均低于结局良好组(1.37±0.15 vs 1.66±0.23、1.75±0.26 vs 1.92±0.24、1.84±0.34 vs 2.02±0.28。P=0.000、0.000、0.000),两组miR-4286水平随时间进展呈升高趋势,结局不良组miR-4286水平升高程度[0.45(0.52)]高于结局良好组[0.32(0.45)](P=0.028)。T1时点miR-4286判断妊娠结局不良的受试者工作特性(ROC)曲线下面积高于T2和T3时点的miR-4286(0.864 vs 0.688、0.864 vs 0.674。P=0.000、0.000)。SBP>154 mmHg[优势比(OR)=2.784,P=0.035]、24 h尿蛋白>2.37 g(OR=7.628,P=0.000)和剖宫产(OR=6.087,P=0.001)是Hp+PE患者妊娠结局不良的独立危险因素,分娩孕周>37周(OR=0.047,P=0.000)和T1时点的miR-4286>1.47(OR=0.091,P=0.000)是Hp+PE患者妊娠结局不良的独立保护因素。结论PE确诊时miR-4286水平>1.47与Hp+PE患者妊娠结局良好有关。

微小RNA-4286调控肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型对胃癌细胞系HGC-27生长、迁移及侵袭的影响

目的探讨微小RNA-4286(miRNA-4286)调控肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)对胃癌细胞系NGC-27生长、迁移及侵袭的影响。方法将胃癌HGC-27细胞分为空白对照组和阴性对照组、干预组,空白对照组不作任何处理,阴性对照组转染p EGFP-N1质粒,干预组转染pEGFP-N1-miRNA-4286质粒,采用Real-time PCR检测3组胃癌HGC-27细胞miRNA-4286表达量,采用Western blotting检测3组胃癌HGC-27细胞中INPP4A蛋白表达量,采用八肽胆囊收缩素(CCK8)法检测3组胃癌HGC-27细胞增殖率,采用Transwell小室侵袭实验检测3组胃癌HGC-27细胞侵袭能力,采用划痕实验检测3组胃癌HGC-27细胞迁移能力。结果干预组miRNA-4286表达量、增殖率、穿过小室膜的HGC-27细胞数明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);干预组INPP4A蛋白表达量、划痕伤口愈合间距明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);阴性对照组miRNA-4286表达量、INPP4A蛋白表达量、增殖率、穿过小室膜的HGC-27细胞数、划痕伤口愈合间距较空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论MiRNA-4286可能通过下调INPP4A表达而促进胃癌细胞系HGC-27生长、迁移及侵袭。

miR-4286与AEG-1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨miR-4286、星形胶质细胞上调基因-1 (AEG-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与NSCLC临床病理特征的关系。方法分别采用原位杂交方法和免疫组织化学染色检测组织芯片中140例NSCLC癌组织及癌旁正常组织中miR-4286、AEG-1的表达,并分析两者表达水平与NSCLC临床病理特征的关系。结果 NSCLC癌组织中miR-4286高表达率为62.14%,高于癌旁正常组织的4.29%,差异有统计学意义(P<0.01);NSCLC癌组织中AEG-1高表达率为55.71%,高于癌旁正常组织的7.86%,差异有统计学意义(P<0.01)。miR-4286高表达与患者肿瘤直径大小、肿瘤TNM分期和淋巴结转移均有关(均P<0.05),AEG-1高表达与患者肿瘤TNM分期和淋巴结转移均有关(均P<0.05)。Spearman等级相关分析显示NSCLC癌组织中miR-4286的表达与AEG-1的表达呈正相关(r=0.223,P=0.008)。结论 NSCLC癌组织中miR-4286与AEG-1均高表达,miR-4286与AEG-1表达水平与TMN分期和淋巴结转移均有关,提示miR-4286和AEG-1可能参与NSCLC的发生、发展与转移。

血清miR-130a表达水平与COPD急性加重期患者近期预后不良的临床关系

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者血清微小核糖核酸-130a(miR-130a)表达水平及其与近期预后不良的关系。方法 选取2019年6月—2021年6月武汉市第三医院收治的85例AECOPD患者和门诊随诊的66例慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者,分别设为AECOPD组和COPD组,另同期选取70例健康者设为对照组,三组均检测血清miR-130a表达水平。根据AECOPD患者入院28 d预后情况将其分为预后良好组及预后不良组,分析血清miR-130a表达水平与AECOPD患者预后的关系及其预测价值。结果 AECOPD组和COPD组血清miR-130a表达水平均高于对照组(P<0.05),且AECOPD组血清miR-130a表达水平高于COPD组(P<0.05);85例AECOPD患者入院28 d预后不良发生率为41.18%;年龄大、吸烟史、合并冠心病、动脉氧分压低、血清miR-130a表达水平高及机械通气均是AECOPD患者近期预后不良的危险因素(P<0.05);血清miR-130a表达水平预测AECOPD近期预后不良的灵敏度、特异度、曲线下面积分别为85.71%、74.00%、0.813。结论 AECOPD患者血清miR-130a水平呈高表达,与近期预后密切相关,是近期预后不良的危险因素,并对近期预后不良具有一定的预测价值。

血清miR-145、P53抗体在龙贝逍遥散治疗乳腺癌效果及预后评估中的检测价值研究

【目的】探析血清微小核糖核酸-145(miR-145)、P53抗体在龙贝逍遥散治疗乳腺癌效果及预后评估中的检测价值。【方法】选取2020年1月~2021年1月北京航天总医院收治的90例乳腺癌患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者随机分为观察组和对照组,每组各45例,2组患者均接受个性化综合治疗,观察组在此基础上联合龙贝逍遥散治疗,疗程为3个月。采用实时荧光定量(PCR)法检测血清miR-145表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清P53抗体表达水平。比较2组患者治疗前后的血清miR-145、P53抗体表达水平差异,采用Logistic回归分析法探析血清miR-145、P53抗体与观察组患者预后不良的关系,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清miR-145、P53抗体在观察组预后不良预测中的应用价值。【结果】(1)治疗后,2组患者的血清miR-145检测值均呈上升趋势(P<0.05),P53抗体检测值均呈下降趋势(P<0.05),且观察组的血清miR-145检测值明显高于对照组,P53抗体检测值明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)观察组预后良好组的血清miR-145检测值明显高于预后不良组,血清P53抗体检测值明显低于预后不良组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)Logistic回归分析结果显示,miR-145高表达是观察组患者预后不良的保护因素,P53抗体高表达是观察组患者预后不良的危险因素(P<0.05)。(4)血清miR-145、P53抗体联合预测观察组患者预后情况的曲线下面积(AUC)最大(0.877,95%CI:0.769~0.985),其灵敏度、特异度分别为93.75%、93.10%,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】血清miR-145在乳腺癌预后不良中呈低表达,血清P53抗体在乳腺癌预后不良中呈高表达;龙贝逍遥散在乳腺癌患者中可达到较理想的治疗效果,有利于提升血清miR-145表达水平、降低血清P53抗体表达水平。

变应性鼻炎患者血清miR-149-5p、Notch1 mRNA表达与Treg/Th17平衡的关系

目的探讨变应性鼻炎(AR)患者血清miR-149-5p、Notch1 mRNA表达与调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞(Th)17平衡的关系。方法选择98例AR患者(AR组)和30例健康体检志愿者(对照组),根据疾病严重程度将AR患者分为轻度组(51例)、中重度组(47例)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-149-5p、Notch1 mRNA表达,采用流式法检测外周血中Treg、Th17及其细胞因子。Pearson相关性分析血清miR-149-5p、Notch1 mRNA表达与外周血中Treg、Th17及其细胞因子以及miR-149-5p与Notch1 mRNA表达的相关性。结果AR组血清miR-149-5p表达,白细胞介素(IL)-10、转化生长因子-β(1 TGF-β1)水平以及外周血Treg细胞、Treg/Th17值低于对照组(P均<0.05),血清Notch1 mRNA表达,IL-6、IL-17、IL-22、IL-23水平以及外周血Th17细胞高于对照组(P均<0.05)。中重度组血清miR-149-5p表达,IL-10、TGF-β1水平以及外周血Treg细胞、Treg/Th17值低于轻度组(P均<0.05),血清Notch1 mRNA表达,IL-6、IL-17、IL-22、IL-23水平以及外周血Th17细胞高于轻度组(P均<0.05)。AR组血清miR-149-5p表达与外周血Treg细胞、Treg/Th17值、血清IL-10、TGF-β1水平呈正相关(r分别为0.367、0.539、0.265、0.301,P均<0.05),与血清IL-6、IL-17、IL-22、IL-23水平以及外周血Th17细胞呈负相关(r分别为-0.289、-0.213、-0.336、-0.243、-0.221,P均<0.05)。Notch1 mRNA表达与外周血Treg细胞、Treg/Th17值、血清IL-10、TGF-β1水平呈负相关(r分别为-0.346、-0.508、-0.281、-0.293,P均<0.05),与血清IL-6、IL-17、IL-22、IL-23水平以及外周血Th17细胞呈正相关(r分别为0.326、0.241、0.302、0.285、0.237,P均<0.05)。血清miR-149-5p与Notch1 mRNA表达呈负相关(r=-0.550,P<0.05)。结论AR患者血清miR-149-5p表达下调,Notch1 mRNA表达上调,且与AR患者Treg/Th17失衡有关。

miR-2467、miR-96-5p在妊娠期糖尿病中的临床意义

目的:探讨微小核糖核酸-2467(miR-2467)、miR-96-5p在妊娠期糖尿病(GDM)中的临床意义。方法:纳入108例GDM住院患者作为GDM组,另选取同期产检的糖耐量正常孕妇82例为对照组。比较2组血清miR-2467、miR-96-5p相对表达量以及空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hFBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分析miR-2467、miR-96-5p与上述血糖指标的相关性。采用Logistic多元回归模型分析GDM发生的危险因素,绘制受试者工作特征曲线,分析miR-2467、miR-96-5p评估GDM的曲线下面积(AUC)。结果:GDM组血清miR-2467表达、FBG、2hPG、HbA1c水平及HOMA-IR高于对照组,miR-96-5p表达低于对照组(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示血清miR-2467表达与FBG、2hPG、HbA1c、HOMA-IR呈正相关,血清miR-96-5p表达与上述4项指标呈负相关(P均<0.05)。Logistic多元回归分析示孕早期BMI增长≥1.73kg/m^(2)、孕中期BMI增长≥4.88kg/m^(2)、糖尿病家族史、miR-2467≥3.44是GDM发生的危险因素,miR-96-5p≥1.95是GDM发生的保护因素(P<0.05)。血清miR-2467联合miR-96-5p评估GDM的AUC为0.865,敏感度、特异度分别为91.50%、81.50%。结论:miR-2467、miR-96-5p与GDM患者血糖指标及HOMA-IR存在相关性,对评估GDM具有一定意义。

脓毒症患者外周血miR-125b、miR-150表达及其临床意义

目的 探讨脓毒症患者外周血微小核糖核酸-125b(miR-125b)、微小核糖核酸-150(miR-150)表达及其临床意义。方法 选取邢台市中心医院收治的103例脓毒症患者为研究组,另选取体检健康者82例为健康组,均测定外周血miR-125b、miR-150表达及血清白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平。对比研究组、健康组各指标水平,采用Pearson相关性分析法分析脓毒症患者miR-125b、miR-150表达与IL-6、CRP、PCT水平的关系;比较不同严重程度脓毒症患者及不同预后患者的miR-125b、miR-150表达;采用多因素Logistic回归分析法分析miR-125b、miR-150表达与预后的关系;通过受试者工作特征曲线分析miR-125b、miR-150表达对脓毒症预后的预测价值。结果 研究组外周血miR-125b表达与IL-6、CRP、PCT水平分别为(2.43±0.35)、(159.42±26.81)pg/mL、(115.47±20.38)mg/L、(10.57±2.03)ng/mL,均高于健康组(t=31.012、52.149、48.978、46.945,均P=0.000),miR-150表达(0.21±0.04)低于健康组(t=52.008,P=0.000);经Pearson相关性分析,脓毒症患者外周血miR-125b表达与IL-6(r=0.706,P=0.016)、CRP(r=0.711,P=0.013)、PCT(r=0.759,P=0.001)水平均呈正相关,miR-150与IL-6(r=-0.702,P=0.018)、CRP(r=-0.709,P=0.015)、PCT(r=-0.728,P=0.006)水平均呈负相关;脓毒症者外周血miR-125b表达(2.16±0.43)低于严重脓毒症者(2.82±0.27)(t=8.815,P=0.000),脓毒症者外周血miR-150表达(0.24±0.02)高于严重脓毒症者(0.16±0.03)(t=16.248,P=0.000);入院28 d生存者外周血miR-125b表达(2.25±0.41)低于死亡者(3.13±0.36)(t=8.982,P=0.000),生存者外周血miR-150表达(0.23±0.04)高于死亡者(0.13±0.02)(t=11.078,P=0.000);年龄、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、疾病严重程度及外周血miR-125b表达均是脓毒症患者预后的危险因素(OR=2.438、2.689、2.866、2.824,P=0.036、0.012、0.000、0.005),miR-150表达是其保护因素(OR=0.390,P=0.003);外周血miR-125b、miR-150表达预测脓毒症预后的最佳截断点分别为2.854、0.179,灵敏度分别为76.19%、80.95%,特异度分别为79.27%、75.61%,曲线下面积分别为0.861、0.843。结论 与健康人群比较,脓毒症患者外周血miR-125b表达升高,而miR-150表达降低,且miR-125b、miR-150表达均与炎症因子水平、疾病严重程度及预后相关,并对预后具有一定的预测价值,可作为临床判断病情严重程度及预后的指标。

彩色多普勒超声与miR-19a和miR-210在颈动脉狭窄中的应用价值

目的:分析彩色多普勒超声与微小核糖核酸(miRNA)-19a(miR-19a和miR-210)在颈动脉狭窄中的应用价值。方法:选取2020年10月至2022年10月在沧州市人民医院诊治的102例颈动脉狭窄患者纳入病例组,另选取同期在医院体检需行彩色多普勒超声检查的102名健康体检者纳入健康对照组。病例组均在入院1周内行彩色多普勒超声检查和数字减影血管造影(DSA)检查,两组均行血清指标检测。比较两组miR-19a、miR-210,以及病例组不同狭窄程度miR-19a、miR-210,分析彩色多普勒超声与miR-19a、miR-210及其联合对颈动脉狭窄的诊断价值。结果:病例组102例患者经彩色多普查超声颈总动脉检测,正常15例,轻度狭窄15例,中度狭窄21例,重度狭窄33例,完全闭塞18例。病例组miR-19a明显高于健康对照组,miR-210明显较低于对照组,差异有统计学意义(t=10.755、-5.903,P<0.05)。病例组不同狭窄程度miR-19a比较:轻度狭窄<中度狭窄<重度狭窄<完全闭塞,miR-210比较:轻度狭窄>中度狭窄>重度狭窄>完全闭塞,差异均有统计学意义(F=160.399、147.462,P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,彩色多普勒超声、miR-19a及miR-210联合诊断颈动脉狭窄的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.892、0.842、0.729和0.978,联合诊断的灵敏度为97.1%,特异度为95.1%。结论:彩色多普勒超声与miR-19a、miR-210联合对颈动脉狭窄具有较高的诊断价值。

miR-122-5p通过靶向Circ_MTM1在HBV相关肝纤维化中的分子机制研究

目的:研究微小核糖核酸microRNA-122-5p (miR-122-5p)对HBV感染相关肝纤维化的作用及分子机制。方法:分别用采用HBsAg、HBeAg酶联免疫吸附剂测定(ELISA)试剂盒和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HBV表面抗原(HBsAg)、抗原(HBeAg)水平以及HBV DNA、HBV共价闭合环状DNA (cccDNA)水平,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测相应蛋白水平。RT-qPCR检测人肝星状细胞(LX-2细胞)和HBV相关肝纤维化组织细胞中Circ_MTM1、miR-122-5p的表达情况。应用生物信息学软件StarBaseV3.0预测miR-122-5p的可能靶基因,并应用双荧光素酶检测方法判定miR-122-5p对其靶基因Circ_MTM1表达的调节作用。结果:miR-122-5p在HBV相关性肝纤维化组织和细胞中低表达,而Circ_MTM1在HBV相关性肝纤维化组织和细胞中高表达。miR-122-5p靶向下调Circ_MTM1的表达,通过下调Circ_MTM1可抑制HBV相关肝纤维化的进程。结论:miR-122-5p与Circ_MTM1在HBV相关肝纤维化中存在靶向关系,Circ_MTM1通过调控肝纤维化相关蛋白的水平在HBV相关肝纤维化进程中起到启动子作用。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血浆miR-145miR-183表达及临床意义

目的 探讨血浆miR-145及miR-183在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者中的表达及临床意义.方法 选取2017年1月至2019年2月海南省第三人民医院呼吸科收治的AECOPD患者136例,另选取同期来我院健康体检者60例作为对照组.采用实时荧光定量PCR检测各组血浆miR-145及miR-183表达水平.应用受试者工作特征(ROC)曲线,分析血浆miR-145及miR-183表达水平对AECOPD的诊断价值.Pearson相关分析AECOPD患者血浆miR-145及miR-183表达水平与第1秒用力呼气量(FEV1)、FEV1占预计值百分比(F;EV1%)、用力肺活量(FVC)、FVC占预计值百分比(FVC%)及第1秒用力呼气量占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC)的相关性.结果 AECOPD组血浆miR-145(4.80±1.32 vs.0.96±0.38)及miR-183(3.38±1.14 vs.0.72±0.30)表达水平均明显高于对照组(P<0.05).AECOPD组FEV1(1.20±0.26 vs.3.26±0.54,L)、FEV1% (37.80±4.20 vs.102.50±7.90)、FVC(2.56±0.24 vs.4.10±0.58, L)、FVC% (75.40±7.25 vs.105.30±9.80)及FEV1/FVC(44.60±5.18 vs.84.50±6.72)均明显低于对照组(P<0.05).ROC曲线分析显示,血浆miR-145及miR-183表达水平诊断AECOPD的最佳截断值分别为3.16、2.24,两项联合诊断AECOPD的AUC(0.892,95% CI0.840 ~0.962)最大,其敏感度和特异度为87.4%和81.5%.相关分析显示,AECOPD患者血浆miR-145及miR-183表达水平与FEV1、FEV1%、FVC、FVC%及FEV1/FVC均呈负相关(P<0.01).结论 AECOPD患者血浆miR-145及miR-183表达水平明显升高,且与AECOPD患者肺功能指标相关,两项联合检测对AECOPD诊断具有一定的临床价值.

解毒复正汤通过干扰miR-223-3p并靶向调控TGFBR3影响肺癌侵袭转移的实验研究

目的探讨解毒复正汤(JieduFuzhengdecoction,JDFZ)通过影响微小核糖核酸-223-3p(Mircro ribonucleic acid-223-3p,miR-223-3p)靶向调控转化生长因子β受体3(Transforming growth factorβReceptor3,TGFBR3)的表达及其对肺癌细胞迁移的影响。方法利用RT-qPCR技术检测肺腺癌患者癌组织及癌旁组织、肺腺癌患者及健康人外周血清中miR-223-3p表达水平的差异;并检测不同种类的NSCLC细胞系肺癌细胞(95D、LTEP-α-2、A549及NCI-H460)以及人肺上皮细胞BEAS-2B中miR-223-3p的本底表达量,从组织、血浆及细胞3个维度验证miR-223-3p的差异性。利用生物信息学网站重叠分析,初步预测到miR-223-3p与TGFBR33’UTR具有潜在的结合位点序列。接着运用双荧光素酶报告基因实验验证miR-223-3p与TGFBR3的靶向关系。体外培养肺癌A549细胞,采用脂质体法分别将miR-223-3p-过表达序列(miR-223-3p-mimics)及携带TGFBR3全基因的重组载体(Over-expression-TGFBR3,OE-TGFBR3)分别转染至肺癌细胞,以转入无关序列的模拟剂(Negative control-mimics,NC)作为对照组,收集各组稳转细胞,Transwell小室检测转染处理后及JDFZ作用后的细胞迁移能力;收集各组细胞蛋白,蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测细胞中EMT相关蛋白的表达。结果肺癌组织中miR-223-3p的表达量显著低于癌旁组织;肺癌患者血浆miR-223-3p表达水平明显低于健康正常人。不同种类的NSCLC细胞系肺癌细胞(95D、LTEP-α-2、A549及NCI-H460)中的miR-223-3p表达量亦低于正常人肺上皮细胞BEAS-2B。利用生物信息学网站及荧光素酶报告基因实验证实了miR-223-3p与TGFBR3的靶向调控关系。与miR-223-3p NC组对比,miR-223-3p mimics组和miR-223-3p mimics+OE-TGFBR3组的细胞迁移能力均下降(P<0.05),上调TGFBR3和加入解毒复正汤均能有效增强miR-223-3p对A549细胞迁移的负向调节作用;Westenblot结果发现,与miR-223-3p NC组对比,miR-223-3p mimics组和miR-223-3p mimics+OE-TGFBR3组E-Cadherin的表达水平上调,NCadherin及Vimentin的表达水平下升(P<0.05),两组均在不同程度上抑制EMT的发生;上调TGFBR3和加入解毒复正汤作用能有效增加miR-223-3p对细胞迁移相关蛋白的负向调节作用(P<0.05)。结论解毒复正汤对肺癌A549细胞的侵袭迁移有抑制作用,其机制可能是通过调节miR-223-3p并靶向调控TGFBR3及其下游EMT相关指标的表达来实现的。

胃癌组织中miR-155-5p、miR-4286表达与胃癌合并Hp感染患者临床特征及其预后的关系

目的探究胃癌组织中微小RNA(miR)-155-5p、miR-4286表达与胃癌合并幽门螺旋杆菌(Hp)感染患者临床特征及其预后的关系。方法选取2020年1月-2022年6月于本院接受手术切除治疗的144例胃癌患者,根据是否感染Hp分为Hp阳性组(n=93)和Hp阴性组(n=51)。随访期间若胃癌合并Hp感染患者癌症复发或全因死亡归为预后不良(n=34),否则归为预后良好(n=59)。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)测定癌组织、癌旁组织miR-155-5p、miR-4286的表达水平。logistic回归分析胃癌合并Hp感染患者预后不良的影响因素。绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析癌组织miR-155-5p、miR-4286对胃癌合并Hp感染患者预后不良的预测价值。结果与癌旁组织相比,胃癌患者癌组织miR-155-5p、miR-4286表达均上升(P<0.05)。与Hp阴性组相比,Hp阳性组miR-155-5p、miR-4286表达均上升(P<0.05)。癌组织miR-155-5p、miR-4286表达与胃癌合并Hp感染患者的肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。与预后良好组相比,预后不良组miR-155-5p、miR-4286表达均上升(P<0.05)。miR-155-5p、miR-4286为胃癌合并Hp感染患者预后的危险因素(P<0.05)。癌组织miR-155-5p、miR-4268联合预测胃癌合并Hp感染患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.978,显著大于miR-155-5p(Z=2.236,P=0.025)、miR-4268(Z=2.648,P=0.008)单独预测的AUC。结论胃癌合并Hp感染患者癌组织miR-155-5p、miR-4286均呈高表达,与患者的临床特征及预后不良有关,二者联合具有较高的胃癌合并Hp感染患者预后不良评估价值。

miR-200c通过激活Wnt/β-连环蛋白信号通路诱导膀胱癌细胞阿霉素耐药

目的:探讨miR-200c表达与膀胱癌细胞阿霉素(DOX)耐药的关系。方法:过表达或抑制miR-200c表达后,检测DOX对膀胱癌细胞(RT4、RT112、T24和TCCSUP)生长抑制作用的变化。Western blot检测miR-200c对Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响,检测Wnt/β-连环蛋白信号激活剂Wnt3a干预对miR-200c诱导膀胱癌DOX耐药作用的影响。结果:抗miR-200c转染后,T24和RT4细胞DOX的耐药性显著下降。DOX干预后,与对照组细胞相比,抗miR-200c转染组膀胱癌细胞凋亡和S期积累明显增加。此外,抗miR-200c转染组膀胱癌细胞中Dkk1,Kremen2和s FRP2等Wnt/β-连环蛋白信号的负调控蛋白表达明显升高,Wnt/β-连环蛋白信号通路活性明显下降。Wnt3a干预能够拮抗抗miR-200c转染的膀胱癌细胞生长抑制作用。结论:miR-200c表达与膀胱癌细胞DOX耐药密切相关,且Wnt/β-连环蛋白信号通路激活介导了miR-200c诱导的膀胱癌细胞DOX耐药性。

血清miR-483-5p miR-487b表达与脓毒症所致急性肺损伤患者炎性因子病情和预后的关系研究

目的:探讨miR-483-5p、miR-487b与脓毒症所致急性肺损伤(ALI)患者炎性因子、病情和预后的关系。方法:选择2018年9月至2021年12月我院收治的133例脓毒症患者,51例合并ALI(ALI组),82例未合并ALI(NALI组),根据氧合指数[(氧分压/吸入气氧浓度]将ALI组分为轻度组(201~300mmHg)16例、中度组(101~200mmHg)20例和重度组(≤100mmHg)15例,根据ALI组28d生存状况分为生存组(28例)、死亡组(23例),另选择43例志愿者为对照组。比较不同分组血清miR-483-5p、miR-487b表达与炎性因子水平差异,Pearson分析脓毒症合并ALI患者miR-483-5p、miR-487b表达与炎性因子水平相关性,受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-483-5p、miR-487b预测脓毒症所致ALI患者预后的价值。结果:ALI组基线血清miR-483-5p表达,白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-33(IL-33)水平高于NALI组和对照组(P<0.05),miR-487b表达低于NALI组和对照组(P<0.05)。重度组基线、住院3d、住院7d血清miR-483-5p表达,IL-6、TNF-α、IL-33水平高于中度组和轻度组(P<0.05),miR-487b表达低于中度组和轻度组(P<0.05)。死亡组基线、住院3d、住院7d血清miR-483-5p表达,IL-6、TNF-α、IL-33水平高于生存组(P<0.05),miR-487b表达低于生存组(P<0.05)。脓毒症所致ALI患者基线、住院3d、住院7d血清miR-483-5p表达与基线、住院3d、住院7d IL-6、TNF-α、IL-33水平呈正相关(P<0.05),基线、住院3d、住院7d miR-487b表达与基线、住院3d、住院7d IL-6、TNF-α、IL-33水平呈负相关(P<0.05)。联合住院7d miR-483-5p和miR-487b预测脓毒症所致ALI的曲线下面积为0.964,高于单独miR-483-5p、miR-487b预测(z=2.612、3.141,P<0.05)。结论:脓毒症所致ALI患者血清miR-483-5p表达上调,miR-487b表达下调,且与过度炎症反应,病情加重和不良预后有关。

miR-103a-3p过表达靶向负调控PDK4抑制胶质瘤生长及侵袭

目的探讨miR-103a-3p过表达对胶质瘤C6细胞恶性生物学行为的影响及对裸鼠移植瘤生长的影响。方法体外培养鼠源性C6胶质瘤细胞,转染miR-103a-3p mimics质粒过表达miR-103a-3p,转染miR-103a-3p mimics+pcDNA-PDK4质粒分析PDK4过表达对miR-103a-3p过表达的影响;EDU法检测细胞增殖活性;qRT-PCR检测miR-103a-3p、PDK4 mRNA表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Transwell实验检测细胞侵袭能力;免疫印迹法检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin蛋白表达水平。取40只裸鼠,其中20只皮下注射未转染质粒的C6细胞、20只皮下注射转染miR-103a-3p mimics质粒的C6细胞构建移植瘤模型,分析miR-103a-3p mimics过表达对移植瘤生长的影响。结果生物信息学及双荧光素酶试验证实PDK4是miR103a-3p的靶点。过表达miR-103a-3p明显降低C6细胞PDK4、Ki67、PCNA、N-cadherin、vimentin表达水平(P<0.05),明显抑制C6细胞增殖活性、侵袭能力(P<0.05),明显增加C6细胞E-cadherin表达水平、细胞凋亡率(P<0.05)。过表达PDK4明显抑制过表达miR-103a-3p对C6胶质瘤细胞的作用(P<0.05)。过表达miR-103a-3p明显抑制裸鼠移植瘤生长(P<0.05),抑制肿瘤组织PDK4、Ki67、vimentin表达(P<0.05)。结论过表达miR-103a-3p通过靶向抑制PDK4表达,一方面抑制胶质瘤细胞增殖、促进胶质瘤细胞凋亡,从而抑制胶质瘤生长;另一方抑制胶质瘤上皮-间质转化过程,从而抑制胶质瘤细胞侵袭。

MiR-494通过激活PI3K/AKT通路减轻大鼠肝缺血-再灌注损伤

目的探讨微小核糖核酸(miRNA)-494对肝缺血-再灌注损伤(HIRI)的影响及相关作用机制。方法 24只雄性SD大鼠随机均分为4组(每组6只):假手术组行腹部手术而未行肝脏缺血-再灌注;HIRI组大鼠行部分肝缺血60 min后,再灌注6 h;HIRI+agomir-miR-494组在术前7 d内每日腹腔注射agomir-miR-494(20μL);HIRI+agomir-NC组在术前7 d内每日腹腔注射等量的agomir-NC。采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法检测各组肝组织中miR-494的信使核糖核酸(mRNA)表达水平。采用相关试剂盒检测各组的肝损伤指标和氧化应激指标表达水平。观察各组肝组织病理学改变。采用试剂盒检测各组大鼠肝组织中凋亡细胞数和胞质组蛋白相关DNA片段。采用免疫印迹法检测各组凋亡相关蛋白以及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶(AKT)通路相关蛋白的表达量。结果 HIRI+agomir-miR-494组大鼠肝组织miR-494的mRNA水平显著高于HIRI+agomir-NC组(P<0.01)。HIRI+agomir-miR-494组的血清肝损伤指标以及血清氧化应激指标均显著低于HIRI+agomir-NC组(均为P<0.01)。与HIRI+agomir-NC组相比,HIRI+agomir-miR-494组肝细胞坏死明显减少和细胞完整性提高(P<0.05),TUNEL阳性细胞数量明显减少(P<0.05)。HIRI+agomir-miR-494组的cleaved-多聚二磷腺苷核糖聚合酶(PARP)、cleaved-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、Bax水平明显低于HIRI+agomir-NC组(均为P<0.05)。HIRI+agomir-miR-494组大鼠DNA片段显著少于HIRI+agomir-NC组(P<0.01)。HIRI+agomir-miR-494组大鼠肝脏p-AKT、p-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和p-p70S6K表达量明显高于HIRI+agomir-NC组(均为P<0.05)。结论 miR-494可以减轻大鼠HIRI,其作用机制与激活PI3K/AKT信号通路有关。

糖尿病肾病患者血清miR-135b水平检测与疾病预后的相关性研究

目的探讨血清miR-135b水平与糖尿病肾病(DN)患者预后的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测158例DN患者(DN组)和60例健康体检者(对照组)血清miR-135b水平,分析miR-135b与DN患者不同临床指标的关系。采用肾小球分级、间质性纤维化和小管萎缩评分(IFTA)及间质炎症来评价肾脏损伤情况,并应用ROC曲线分析血清miR-135b水平预测DN患者发生终末期肾病(ESRD)的价值。结果 DN组血清miR-135b水平为3.94±0.75,明显高于对照组0.64±0.13,差异有统计学意义(t=9.317,P<0.01)。血清miR-135b水平与蛋白尿定量、Cr,BUN及eGFR水平相关(P<0.05)。DN患者血清miR-135b水平与肾小球分级、IFTA及间质炎症均有关,且随着肾脏病理损伤程度的增加,血清miR-135b水平明显升高(P<0.05)。终末期肾病(ESRD)患者血清miR-135b水平(5.39±1.26)明显高于非ESRD患者(3.46±0.68),差异有统计学意义(t=4.157,P=0.025)。ROC曲线显示,血清miR-135b水平预测DN患者发生ESRD的最佳截值取4.96时,其AUC[0.912(95%CI:0.850~0.973)]最大,敏感度(91.3%)和特异度(87.5%)较好。Spearman相关分析显示,DN患者血清miR-135b水平与蛋白尿定量、Cr,BUN,肾小球分级,IFTA及间质炎症呈正相关(r=0.504,0.396,0.438,0.475,0.351和0.559,均P<0.01),与eGFR呈负相关(r=-0.637,P<0.01)。结论血清miR-135b水平在DN患者中明显上调,且与DN患者肾脏损伤及预后不良有关。

miR-10b对脑胶质瘤恶性生物学行为的调控及其机制

脑胶质瘤(胶质瘤)具有高发病率、高病死率、高复发率及低治愈率的特点,胶质瘤细胞的无限增殖能力和高侵袭迁移能力是胶质瘤治疗的难点,近年来微小核糖核酸(micro RNA,miRNA)的出现为研究胶质瘤的发生及侵袭迁移机制提供了新的思路。miRNA是一类内生的、长约20~24个核苷酸的非编码小RNA,可通过与其靶基因mRNA的3’UTR区域互补结合,从而在转录后水平调控基因的表达。多项研究证实,miR-10b在胶质瘤组织和胶质瘤患者血清中高表达,并影响患者预后情况。miR-10b可能通过影响其靶基因如PTEN、CDKN、P53、HOXD10等的表达,参与胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移等过程。深入研究miR-10b对胶质瘤的调控作用及其机制,对该病的诊断、治疗和预后评估等均具有重要意义。

miR-486-5p在肿瘤发生与发展及其他疾病中的最新研究进展

微小核糖核酸(miRNA)是一组高度保守的非编码核苷酸序列,具有调控转录后基因表达的功能。miRNA通过靶向不同基因影响细胞生理和疾病发展。miRNA具有调控细胞增殖、凋亡等生物学特性,参与组织炎症损伤等病理过程,其中miR-486-5p作为近年新发现的miRNA,与肿瘤等疾病发生、发展密切相关,有望辅助疾病早期诊断、靶向治疗及预后评估。