慢性心力衰竭患者血清微小核糖核酸-29b表达水平及其临床意义

目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者血清中微小核糖核酸-29b(miR-29b)的表达水平及其临床意义。方法选取2017年6月至2020年8月长沙市第四医院收治的167例CHF患者作为观察组,并根据纽约心脏协会心功能分级标准进行分级;另选同时间段内145名健康体检者为对照组。采用qRT-PCR检测受试者血清miR-29b表达水平,超声心动图检测左心房内径(LAD)、左心室重构指数(LVRI)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室后壁厚度(LVPWD)、左心室质量指数(LVMI)、左心室射血分数(LVEF)、心排血量(CO),并检测血清N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平及评估堪萨斯城心肌病调查问卷(KCCQ)评分、6 min步行试验(6MWT)。比较对照组和观察组各级心功能患者上述各项指标,采用Pearson相关性分析法分析观察组患者血清miR-29b表达水平与心功能、心室重构指标及生存质量的关系;随访1年,采用多因素Logistic回归分析法分析CHF患者血清miR-29b表达水平与预后的关系。结果观察组心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级患者中血清miR-29b相对表达量、LVRI、CO、LVEF及KCCQ评分、6MWT均依次降低(P<0.05),且均低于对照组(F=831.833、386.491、110.251、71.503、101.552、867.632,P<0.05);观察组心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级中LAD、LVEDD、LVMI、LVPWD及血清NT-proBNP、cTnI、cTnT水平均依次升高(P<0.05),且均高于对照组(F=238.758、528.524、241.700、58.167、3712.854、1836.663、2230.468,P<0.05);Pearson相关性分析显示CHF患者miR-29b表达与LVEDD、LVPWD、LVMI、LAD及血清NT-proBNP、cTnI、cTnT水平均呈负相关(r=-0.822、-0.884、-0.891、-0.713、-0.854、-0.813、-0.832,P<0.05),而与LVEF、CO、LVRI及KCCQ评分、6MWT均呈正相关(r=0.734、0.864、0.791、0.721、0.783,P<0.05);多因素Logistic回归分析显示血清miR-29b表达是CHF患者预后不良的保护因素(OR=0.517,P<0.05),心功能分级Ⅲ/Ⅳ级和对医嘱依从性差是其预后不良的危险因素(OR=5.496、6.074,P<0.05)。结论miR-29b表达是CHF患者预后不良的影响因素,对CHF的临床诊治具有重要指导作用。

激素性股骨头坏死患者微小核糖核酸、骨形态发生蛋白-2、1型纤溶酶原激活物抑制剂表达水平及其临床意义

目的探讨激素性股骨头坏死患者血清微小核糖核酸-672-5p(miR-672-5p)、微小核糖核酸-29b(miR-29b)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)表达水平及其对激素性股骨头坏死的预测价值。方法选取2020年3月至2023年3月河南科技大学第一附属医院收治的116例激素性股骨头坏死患者作为病例组,根据国际骨循环研究会(ARCO)分期标准将其分为Ⅰ期组(41例)、Ⅱ期组(30例)和Ⅲ期组(45例),另选本院同期125例健康体检者作为对照组。比较病例组和对照组及不同ARCO分期激素性股骨头坏死患者血清miR-672-5p、miR-29b、BMP-2、PAI-1水平,利用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标的预测价值。结果病例组患者的血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1水平高于对照组,血清BMP-2水平低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ期组患者血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1水平高于Ⅱ期组和Ⅰ期组,Ⅱ期组高于Ⅰ期组(P<0.05);Ⅲ期组患者血清BMP-2水平低于Ⅱ期组和Ⅰ期组,Ⅱ期组低于Ⅰ期组(P<0.05)。激素性股骨头坏死患者血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1水平与ARCO分期呈正相关,BMP-2与ARCO分期呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-672-5p、miR-29b、BMP-2、PAI-1预测激素性股骨头坏死的AUC值均大于0.8(P<0.05),表明均具有较高的预测激素性股骨头坏死的效能。结论激素性股骨头坏死患者血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1呈高表达,而血清BMP-2呈低表达,四者均具有较高的预测激素性股骨头坏死的效能。

原发性先天性青光眼(PCG)患儿与正常婴幼儿血浆中微小核糖核酸(miRNA或miR)-29b、miR-24、miR-200c的表达差异及临床意义

目的探讨原发性先天性青光眼(primary congenital glaucoma,PCG)患儿与正常婴幼儿血浆中微小核糖核酸(miRNA或miR)-29b、miR-24、miR-200c的表达差异及临床意义。方法收集2015年至2017年散发的PCG患儿16例血浆标本作为PCG组,另选年龄相近的正常婴幼儿共49例血浆标本作为正常人组。应用实时荧光定量PCR检测两组受试者血浆中miR-29b、miR-24、miR-200c的表达量,分析各自表达差异与病变严重程度的关系,并运用ROC曲线评价其诊断价值。结果PCG组受试者血浆中miR-29b、miR-24、miR-200c相对表达量(0.31±0.19、0.17±0.16、0.55±0.18)明显低于正常人组(1.18±0.52、2.86±2.65、1.62±0.76),差异均有统计学意义(均为P<0.05);血浆中miR-24、miR-29b的表达与PCG病变严重程度有关,病变越严重,其表达量越低;ROC曲线表明miR-24和miR-29b对PCG疾病的诊断价值高于miR-200c。结论血浆中游离的miRNA可作为辅助诊断PCG一种新的血浆标志物。

慢性肺源性心脏病患儿血清miR-29a-3p、THBS2水平与心肺功能的相关性研究

目的探讨慢性肺源性心脏病患儿血清微小核糖核酸-29a-3p(miR-29a-3p)、血小板反应蛋白2(THBS2)水平与心肺功能的关系。方法纳入2019年7月至2023年9月期间石家庄市中医院收治的136例慢性肺源性心脏病患儿作为研究对象,依据患儿临床体征、心肺功能、症状等分为代偿期组(74例)和失代偿期组(62例)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血清miR-29a-3p水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清THBS2水平,采用超声诊断仪检测心功能指标左心室射血分数(LVEF)、心排血量(CO),采用电化学发光分析法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTnI),采用肺功能仪检测肺功能指标肺动脉收缩压(PASP)、平均肺动脉压(MPAP)、肺动脉舒张压(PADP)。采用Pearson相关性分析慢性肺源性心脏病患儿血清miR-29a-3p、THBS2水平与心肺功能指标的相关性,多因素Logistic回归分析筛选慢性肺源性心脏病患儿病情的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-29a-3p、THBS2水平对慢性肺源性心脏病患儿病情的评估价值。结果失代偿期组患儿THBS2、CK-MB、cTnI、PASP、MPAP、PADP高于代偿期组(P<0.05),miR-29a-3p、LVEF、CO低于代偿期组(P<0.05)。慢性肺源性心脏病患儿血清miR-29a-3p与LVEF、CO呈正相关(P<0.05),与CK-MB、cTnI、PASP、MPAP、PADP呈负相关(P<0.05);THBS2与LVEF、CO呈负相关(P<0.05),与CK-MB、cTnI、PASP、MPAP、PADP呈正相关(P<0.05)。miR-29a-3p是慢性肺源性心脏病患儿病情加重的保护因素(P<0.05),THBS2是慢性肺源性心脏病患儿病情加重的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-29a-3p、THBS2水平单独及联合评估慢性肺源性心脏病患儿病情程度的曲线下面积(AUC)分别为0.827、0.817、0.915。结论血清miR-29a-3p、THBS2水平均是慢性肺源性心脏病患儿病情的影响因素,与慢性肺源性心脏病患儿病情和心肺功能密切相关。

微小RNA-29a及细胞基质金属蛋白酶2在脓毒症中的作用

目的探讨微小RNA(miR)-29a及细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)在脓毒症中的作用。方法 (1)纳入脓毒症患者(脓毒症组)及健康者(对照组)各40例,检测其血清miR-29a和MMP-2表达水平,分析脓毒症患者血清miR-29a和MMP-2水平的相关性。应用TargetScan7. 1及miRanda软件预测MMP-2靶基因。(2)取对数生长期的RAW 264. 7细胞分为miR-29a对照物组和miR-29a模拟物组,转染后24 h、48 h、72 h、96 h检测细胞增殖情况。(3)取浓度为0μg/ml、1μg/ml、5μg/ml、10μg/ml脂多糖分别刺激RAW 264. 7细胞24 h,检测MMP-2蛋白的表达水平。(4)取RAW 264. 7细胞分为脂多糖组、脂多糖+miR-29a对照物组、脂多糖+miR-29a抑制物组和脂多糖+miR-29a模拟物组,转染6 h后加入10μg/ml脂多糖刺激24 h,检测MMP-2蛋白的表达。结果 (1)与对照组比较,脓毒症组血清miR-29a表达水平降低而MMP-2蛋白表达水平升高(P <0. 05)。脓毒症组miR-29a和MMP-2水平呈负相关(P <0. 05)。(2)转染后72 h miR-29a模拟物组的细胞增殖水平低于miR-29a对照物组(P <0. 05)。(3) 0μg/ml脂多糖、1μg/ml脂多糖、5μg/ml脂多糖、10μg/ml脂多糖刺激下RAW 264. 7细胞MMP-2蛋白相对表达水平依次升高(均P <0. 05)。(4)与脂多糖组和脂多糖+miR-29a对照物组相比,脂多糖+miR-29a模拟物组MMP-2表达降低,脂多糖+miR-29a抑制物组MMP-2表达升高(均P <0. 05)。结论 MMP-2及miR-29a均与脓毒症的发生密切相关,miR-29a可能通过调控MMP-2水平参与脓毒症的进程。

孕妇早期血清miR-29a-3p和VEGFA表达水平及其对子痫前期预测价值研究

目的研究微小核糖核酸(micro RNA,miR)-29a-3p和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)在子痫前期患者血清中的表达及意义。方法前瞻性选取2018年1月~2021年1月在石家庄市妇幼保健院行产检的600例孕妇为研究对象,对孕妇随访至分娩结束,根据孕妇是否患子痫前期,分为子痫前期组(n=60)和非子痫前期组(n=540)。实时荧光定量PCR法检测在孕10~14周入院产检时血清中miR-29a-3p的水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清VEGFA水平;采用Pearson法分析miR-29a-3p水平与VEGFA的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miR-29a-3p和VEGFA以及二者联合检测预测子痫前期的价值。结果子痫前期组miR-29a-3p(2.05±0.54)水平高于非子痫前期组(1.04±0.29),VEGFA水平(34.38±9.25 ng/L)低于非子痫前期组(69.49±19.57 ng/L),差异具有统计学意义(t=22.951,13.824,均P<0.05)。重度组血清中VEGFA水平(24.05±6.41 ng/L)显著低于轻度组(38.81±10.47 ng/L),miR-29a-3p(2.45±0.61)水平显著高于轻度组(1.88±0.51),差异均有统计学意义(t=5.537,3.738,均P<0.05)。Pearson分析显示,子痫前期患者血清中miR-29a-3p与VEGFA呈负相关(r=-0.601,P<0.05)。ROC曲线显示,血清中miR-29a-3p和VEGFA水平预测子痫前期的曲线下面积(AUC)分别为0.904,0.882;两者联合预测子痫前期的AUC为0.937,其灵敏度和特异度分别为80.00%,95.20%。结论子痫前期患者血清中miR-29a-3p表达上升,而VEGFA表达下降,血清miR-29a-3p和VEGFA对子痫前期具有一定的预测价值。

血清IGF-1、TNF-α及miR-29b联合检测对老年创伤性骨折患者延迟愈合的预测价值

目的探讨血清胰岛素样生长因子(IGF)⁃1、肿瘤坏死因子(TNF)⁃α及微小核糖核酸(miR)⁃29b联合检测对老年创伤性骨折患者延迟愈合的预测价值。方法选取2019年6月至2022年6月南部战区海军第二医院关节创伤骨科收治的老年创伤性骨折延迟愈合患者66例为延迟组,并以同期收治的老年创伤性骨折正常愈合患者60例为正常组。统计比较两组骨折1周、6周和12周的血清IGF⁃1、TNF⁃α及miR⁃29b水平,分析血清IGF⁃1、TNF⁃α及miR⁃29b水平对老年创伤性骨折患者延迟愈合的影响以及三者的老年创伤性骨折患者延迟愈合预测效能。结果两组组内血清IGF⁃1水平比较,骨折1周>6周>12周,两组组内血清TNF⁃α及miR⁃29b水平比较,骨折1周<6周<12周(延迟组:F=873.772,117.644,180.857;正常组:F=961.553,99.598,315.154;均P<0.001);延迟组骨折1周、6周和12周血清IGF⁃1水平均低于正常组(t=13.666,20.820,13.973,均P<0.001);而其同期血清TNF⁃α及miR⁃29b水平则均高于正常组(TNF⁃α:t=8.634,8.757,7.057;miR⁃29b:t=7.681,10.583,7.949;均P<0.001)。Logistics回归模型分析结果显示,骨折1周血清IGF⁃1水平为老年创伤性骨折延迟愈合的保护因素,而同期血清TNF⁃α及miR⁃29b水平为其老年创伤性延迟愈合的危险因素(均P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,骨折1周血清IGF⁃1、TNF⁃α及miR⁃29b预测老年创伤性骨折患者延迟愈合效能良好,其中以三者联合预测效能最佳。结论血清IGF⁃1、TNF⁃α及miR⁃29b水平与老年创伤性骨折患者延迟愈合均密切相关,骨折1周三者联合检测可用于老年创伤性骨折患者延迟愈合风险早期评估。

心房颤动患者血清miR-29b和miR-135b水平表达与心房纤维化程度及射频消融术后复发的相关性研究

目的 观察心房颤动(atrial fibrillation,AF)患者血清微小核糖核酸(micro RNA,miRNA,miR)-29b和miR-135b的表达变化,探讨二者表达与心房纤维化程度及射频消融术后复发的关系。方法 选取2019年7月~2022年7月于沧州市人民医院心血管内科住院诊治并接受射频消融术治疗的AF患者(病例组,n=158)以及同期体检的健康者(对照组,n=126)。收集AF患者的一般临床资料及生化指标,采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-29b和miR-135b相对表达水平。采用多因素Logistic回归分析AF患者术后复发的影响因素;绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-29b和miR-135b水平对AF患者术后复发的预测价值,曲线下面积(area under the curve,AUC)比较采用Z检验。结果 与对照组比较,病例组血清miR-29b(0.64±0.13 vs 1.04±0.24)和mi R-135b水平(0.45±0.08 vs 1.00±0.14)均降低,差异均有统计学意义(t=17.916,41.604,均P<0.05);与低纤维化组比较,高纤维化组血清miR-29b(0.51±0.11 vs 0.76±0.15)和miR-135b水平(0.34±0.07 vs 0.55±0.09)均降低,差异有统计学意义(t=11.896,16.314,均P<0.05)。与未复发组比较,复发组左心房内径(45.34±3.56 mm vs35.23±2.89 mm)和血清尿酸(uric acid,UA)水平(478.15±68.45μmol/L vs 421.75±61.76μmol/L)均升高,血清miR-29b(0.54±0.12 vs 0.72±0.14)和miR-135b水平(0.36±0.06 vs 0.53±0.10)均降低,差异有统计学意义(t=19.702,5.441,8.584,12.642,均P<0.05)。Logistic回归分析显示,左心房直径(OR=1.603,95%CI:1.054~2.439),UA(OR=1.527,95%CI:1.202~1.939),miR-29b(OR=0.657,95%CI:0.515~0.835)和miR-135b(OR=0.318,95%CI:0.141~0.719)水平是影响AF患者术后复发的影响因素(均P<0.05);血清miR-29b和miR-135b预测AF患者射频消融术后复发的AUC分别为0.843(95%CI:0.783~0.902),0.901(95%CI:0.852~0.949),最佳阈值分别为0.43和0.64,灵敏度分别为65.1%和80.2%,特异度分别为88.9%和91.7%,两者联合预测术后复发的AUC为0.947(95%CI:0.914~0.981),灵敏度和特异度分别为90.75%,83.1%。结论 血清miR-29b和miR-135b水平异常表达与AF患者心房纤维化程度及射频消融术后复发有关,二者联合预测AF患者术后复发具有一定的价值。

血清miR-29a、miR-20a水平预测老年STEMI患者PCI治疗后缺血再灌注损伤

目的探讨血清微小核糖核酸-29a(miR-29a)、miR-20a水平预测老年ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入(PCI)治疗后缺血再灌注损伤(IRI)的临床价值。方法收集100例行PCI治疗的老年STEMI患者临床资料。患者于术前均接受血清miR-29a、miR-20a检测,统计治疗后老年STEMI患者IRI发生情况,分析血清miR-29a、miR-20a水平对老年STEMI患者PCI治疗后IRI的预测价值。结果100例老年STEMI患者PCI治疗后发生IRI 46例(46.00%);发生组miR-29a水平显著高于未发生组,miR-20a水平显著低于未发生组(均P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,血清miR-29a水平过表达(OR>1,P<0.05),miR-20a水平低表达可能与老年STEMI患者PCI治疗后IRI发生相关(OR<1,P<0.05);血清miR-29a、miR-20a及联合检查预测老年STEMI患者PCI治疗后IRI的曲线下面积(AUC)均>0.70,均有一定预测价值,其中联合预测价值最高。结论血清miR-29a、miR-20a水平异常表达与老年STEMI患者PCI治疗后IRI发生密切相关,可有效预测PCI治疗后IRI发生风险。

哮喘患儿血清miR-29b与外周血Th1、Th2细胞失衡的相关性研究

目的探究哮喘患儿血清微小核糖核酸-29b(miR-29b)与外周血辅助性T细胞亚型1/辅助性T细胞亚型2(Th1/Th2)细胞失衡相关性。方法选取2016年5月至2019年5月收治的支气管哮喘患儿104例为研究对象,根据患儿临床病情进展分为急性发作组51例,临床缓解组53例,另选取同期体检显示健康儿童48例为健康对照组。采用实时荧光定量(qRT-PCR)法检测血清miR-29b表达水平,流式细胞术检测外周血Th1、Th2细胞水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清白介素-2(IL-2)、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、干扰素-γ(IFN-γ)水平,分析miR-29b与Th1/Th2失衡相关性。结果健康对照组、临床缓解组、急性发作组外周血Th1、Th1/Th2及血清miR-29b、IL-2、IFN-γ水平依次显著降低(P<0.05),外周血Th2、嗜酸性粒细胞及血清总免疫球蛋白E(IgE)、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10水平依次显著升高(P<0.05)。急性发作期及临床缓解期哮喘患儿血清miR-29b与外周血Th1/Th2水平均呈正相关(P<0.05)。哮喘患儿血清miR-29b与外周血嗜酸性粒细胞计数、血清总IgE、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10水平呈负相关(P<0.05),与哮喘患儿肺功能指标1 s量(FEV1)、用力肺活量(FVC)、最高呼吸气流(PEF)水平及血清IL-2、IFN-γ水平呈正相关(P<0.05)。结论健康对照组、临床缓解组、急性发作组血清miR-29b水平依次显著降低,miR-29b低表达可能通过调控Th1/Th2比例失衡,影响相关炎性细胞因子变化,促进哮喘发生发展。

黄芪甲苷对博来霉素肺纤维化模型小鼠miR-29b及其相关因子表达的影响

目的基于微小核糖核酸29b(MicroRNA-29b,miR-29b)探讨黄芪甲苷对博来霉素肺纤维化模型小鼠的干预作用。方法将40只小鼠随机分为空白组、模型组、miR-29b组、miR-29b阴性对照药组(简称NC组)和黄芪甲苷组,每组8只。博来霉素气道滴入建立肺纤维化模型。干预用药28天后取血清及肺组织,用HE和Masson染色法观察肺组织病理变化;碱水法检测肺组织羟脯氨酸含量;Elisa检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平;PCR检测转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、smad3蛋白(mothers against decapentaplegic homolog 3,smad3)、miR-29b基因表达;Western-blot检测TGF-β1、smad3蛋白、磷酸化smad3蛋白(phosphorylated mothers against decapentaplegic homolog 3,P-smad3)表达。结果病理显示模型组出现肺纤维化改变,miR-29b组和黄芪甲苷组肺纤维化程度较轻。与空白组相比,模型组和NC组的羟脯氨酸升高、SOD含量减少,MDA和ROS含量增加,TGF-β1、P-smad3基因表达量明显升高,miR-29b基因表达量减少,TGF-β1、P-smad3蛋白含量升高(P<0.05)。与模型组相比,黄芪甲苷组羟脯氨酸含量较低,SOD含量增加,MDA含量减少,miR-29b基因表达量增加,Smad3基因表达量减少,TGF-β1、P-smad3蛋白含量减少(P<0.05)。结论黄芪甲苷可以减少肺组织羟脯氨酸含量,减轻胶原纤维沉积,具有抗纤维化作用,其作用机制可能与升高miR-29b水平,调节氧化应激反应和TGF-β1/Smad3信号通路有关。

柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌组织miRNA-29表达的影响

目的:探讨柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌组织微小核糖核酸-29(Microribonucleic Acid-29,miRNA-29)表达的影响。方法:将40只Wistar大鼠随机分为空白组、对照组、柴胡三参胶囊组、维拉帕米组,每组10只。干预10天后,除空白组外,其余各组采取大鼠左冠状动脉前降支高位结扎法制作缺血性心律失常模型,记录各组大鼠室性早搏(Ventricular Premature Beats,VPB)次数以及首次出现时间,室性心动过速(Ventricular Tachycardia,VT)和心室纤维性颤动(Ventricular Fibrillation,VF)次数和持续时间,计算各组大鼠心律失常评分;qRT-PCR检测各组大鼠心肌组织miRNA-29的表达。结果:与空白组相比,其他三组出现明显的缺血性心律失常,VPB、VT和VF频率明显增加(P<0.01),VPB首次出现时间缩短(P<0.05),VT和VF持续时间增长(P<0.05),miRNA-29表达升高(P<0.05);与对照组相比,柴胡三参胶囊组、维拉帕米组VPB、VT和VF频率明显降低(P<0.05);VPB首次出现时间推迟(P<0.05),VT和VF持续时间也降低(P<0.05),心律失常评分降低(P<0.05);心肌组织miRNA-29表达更低(P<0.05)。结论:柴胡三参胶囊可以降低心肌组织中miRNA-29的表达水平,减少缺血性心律失常的发生。

慢性盆腔炎模型大鼠中miR-29及炎症信号通路分子的表达水平及其作用机制研究

目的探究微小核糖核酸(micro RNA,miR)-29对大鼠慢性盆腔炎模型的作用并探究其作用机制。方法将80只SPF级SD大鼠随机分为四组,分别为对照组(n=20)、模型组(n=20)、阴性对照组(n=20)和试验组(n=20)。模型组、阴性对照组和试验组通过机械损伤及接种混合菌构建大鼠慢性盆腔炎模型,阴性对照组和试验组造模后通过尾静脉注射5nmol阴性对照(negative control,NC)antagomiR和miR-29 antagomiR。HE染色检测大鼠子宫组织病理特性;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组大鼠外周血炎症相关指标:白细胞介素(interleukin,IL)-1β,白细胞介素(IL)-6,白细胞介素(IL)-8和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α水平;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测子宫组织miR-29,Toll样受体4(Toll-like receptors,TLR)4,核因子κB(nuclear factor,NF-κB)及NK-κB抑制蛋白α(IκBα)表达水平;WesternBlot检测子宫组织TLR4,NF-κB和IκBα蛋白表达水平。结果HE染色结果表明,与对照组相比,模型组、阴性对照组和试验组大鼠出现明显慢性盆腔炎症状,试验组子宫组织损伤显著缓解;ELISA结果表明:模型组大鼠外周血IL-1β,IL-6,IL-8和TNF-α水平显著高于对照组,与模型组和阴性对照组相比,试验组炎症因子IL-1β,IL-6,IL-8和TNF-α释放显著降低,差异有统计学意义(t=3.021~6.878,均P<0.05);qPCR结果表明,与对照组相比,模型组miR-29,TLR4,NF-κB和IκBα的mRNA表达显著上升,与模型组和阴性对照组相比,试验组miR-29,TLR4,NF-κB和IκBα的mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(t=3.917~8.095,均P<0.05)。Western Blot结果表明:与对照组相比,模型组TLR4,NF-κB和IκBα蛋白表达显著上升,与模型组和阴性对照组相比,试验组TLR4,NF-κB和IκBα蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(t=2.987~8.045,均P<0.05)。结论慢性盆腔炎模型大鼠子宫组织中miR-29显著高表达,下调miR-29具有对大鼠子宫的保护作用,其机制可能与抑制炎症因子释放及TLR4/NF-κB信号通路的调控相关。

CXCR4、miR-29a、GDF-15在急性心肌梗死中的表达及相关性研究

目的 研究CXC趋化因子受体4(CXCR4)、微小核糖核酸-29a(miR-29a)、生长分化因子-15(GDF-15)在急性心肌梗死(AMI)中的表达及相关性。方法 选取2020年3月至2021年3月于合肥京东方医院就诊的58例AMI患者作为研究组,纳入同期因心前区不适前来就诊的50例非冠状动脉病变患者作为对照组,同期进行健康体检的45例健康志愿者作为健康组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清CXCR4、GDF-15表达水平,采用实时荧光定量PCR测定miR-29a表达水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分CXCR4、miR-29a、GDF-15对AMI的诊断价值,分析三者间的相关性。结果 与健康组相比,对照组、研究组CXCR4、miR-29a、GDF-15表达水平升高(P<0.05),与对照组相比,研究组CXCR4、miR-29a、GDF-15表达水平升高(P<0.05)。与单支病变相比,2支、3支病变患者CXCR4、miR-29a、GDF-15表达水平较高(P<0.05),与2支病变相比,3支病变患者CXCR4、miR-29a、GDF-15表达水平较高(P<0.05)。相关性分析发现,CXCR4、miR-29a之间呈正相关(r=0.670,P=0.001),miR-29a、GDF-15之间呈正相关(r=0.815,P=0.001),CXCR4、GDF-15之间呈正相关(r=0.700,P=0.001)。ROC曲线分析显示,与CXCR4、miR-29a、GDF-15单项诊断相比,3项联合诊断AMI的灵敏度更高、曲线下面积更大,诊断价值较高(P<0.05)。结论 CXCR4、miR-29a、GDF-15在AMI患者中呈高表达,且冠状动脉病变支数越多,CXCR4、miR-29a、GDF-15表达水平越高,三者间具有相关性,可能共同参与此病的发生、进展。

COL4A1在miR-29b对N2B细胞氧糖剥夺/再灌注损伤保护作用中的调控机制研究

目的通过构建N2B神经细胞氧糖剥夺(OGD)/再灌注(R)模型验证miR-29b对神经细胞的保护作用,探讨Ⅳ型胶原蛋白基因α1(COL4A1)在miR-29b对神经细胞OGD/R损伤保护作用中的调控机制。方法正常和缺氧条件培养N2B细胞,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-29b表达。细胞计数试剂盒(CCK)-8、克隆形成、Hoechst实验,流式细胞术分别检测不同处理组细胞增殖、凋亡情况。免疫印迹双荧光素酶验证miR-29b靶基因是否为COL4A1;N2B细胞转染miR-29b mimics,RT-qPCR和免疫印迹检测COL4A1表达。构建COL4A13’非翻译区(UTR)野生型和突变型载体、靶基因,设计合成COL4A1,转染N2B细胞,缺氧培养,CCK-8、克隆形成、Hoechst实验,流式细胞术检测不同处理组细胞增殖、凋亡情况。结果OGD/R细胞中miR-29b表达较正常细胞组降低。在相同缺氧/复氧条件下培养细胞中miR-29表达上调,细胞增殖能力明显增强,凋亡明显抑制。miR-29b表达上调抑制COL4A1表达,但转染COL4A1及其对照组后,COL4A1对照组细胞增殖明显高于过表达组,凋亡明显低于过表达组。结论miR-29b对N2B神经细胞OGD/R模型具有保护作用,通过抑制COL4A1表达减轻缺氧对N2B神经细胞的损伤。miR-29b可通过调节COL4A1表达减少缺血/缺氧再灌注对神经细胞的损伤。

基于JAK2/STAT3信号通路调节miR-29对感染性盆腔炎大鼠的干预效果

目的探究基于内源性酪氨酸激酶2(JAK2)/转录激活子3(STAT3)信号通路调节微小RNA-29(miR-29)对感染性盆腔炎大鼠的干预效果。方法选取SPF级65只SD大鼠,15只为空白组,其余50只建立感染性盆腔炎模型,之后将建模成功45只大鼠随机分为模型组、下调组、上调组各15只。做miR-29转染,将10μl miR-29过表达慢病毒悬液、miR-29沉默慢病毒悬液分别注射于上调组、下调组大鼠胃组织中,空白组、模型组注入同剂量的蒸馏水灌胃,注射1 d后观察大鼠变化。结果与空白组相比,模型组、上调组、下调组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)、JAK2、STAT3水平升高,miR-29、超氧化物歧化酶(SOD)水平下降(P<0.05);与模型组相比,上调组miR-29、TNF-α、IL-6、MDA、JAK2、STAT3水平升高,SOD表达水平下降,下调组SOD水平升高,miR-29、TNF-α、IL-6、MDA、JAK2、STAT3表达水平下降(P<0.05);与上调组相比,下调组miR-29、TNF-α、IL-6、MDA、JAK2、STAT3水平下降,SOD水平升高(P<0.05)。结论下调miR-29可抑制感染性盆腔炎大鼠炎性反应,保护组织内膜的完整性,其作用机制可能与JAK2/STAT3信号通路相关。

铝对大鼠脑内miR29及BACE1的影响

目的 研究铝对大鼠脑内微小核糖核酸29（miR29）各亚型（miR29a、miR29a^＊、miR29b1、miR29b2、miR29c1、miR29c2）及β淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACE1）的影响情况.方法 40只普通级SD大鼠按体重随机分为对照组和15、30、45μmol/kg组,每组10只.采用腹腔注射的方式染毒（注射量为0.1 ml/100 g体重）8周,对照组给予0.9%生理盐水,染毒组给予不同浓度的麦芽酚铝（染毒前将麦芽酚和铝溶液等体积混合）.染毒结束后,分离大鼠脑皮质和海马,采用蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测BACE1蛋白的变化;实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测大鼠脑皮质和海马miR29各亚型基因的表达水平.结果 与对照组比较,45μmol/kg组大鼠脑皮质BACE1蛋白表达明显升高,30、45μmol/kg组大鼠海马BACE1蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;与对照组比较,15、30、45μmol/kg组大鼠脑皮质和海马中miR29a^＊、miR29b2、miR29c1、miR29c2基因表达明显降低,差异均有统计学意义（均P〈0.01）;与对照组比较,45μmol/kg组大鼠脑皮质和海马miR29a和miR29b1基因表达明显降低,差异均有统计学意义（均P〈0.05）.相关分析结果显示,皮质和海马miR29a^＊、miR29b2、miR29c1、miR29c2基因与BACE1蛋白表达均无相关性（均P〉0.05）,而miR29a、miR29b1基因与BACE1蛋白表达均呈负相关（皮质：r=-0.987、-0.981;海马：r=-0.992、-0.991;均P〈0.05）.结论 铝可以引起脑内miR29各亚型表达降低,BACE1表达升高,且miR29a、miR29b1与BACE1表达呈负相关.

直肠癌术后结肠造口感染血清miRNAs、CD36 mRNA、mTORC1 mRNA表达及与PCT的相关性

目的探讨直肠癌根治术后结肠造口旁软组织感染患者微小核糖核酸(miR)-15a、miR-29b、分化抗原36(CD36)mRNA、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)mRNA表达及与降钙素原(PCT)的相关性.方法选取2020年8月-2023年7月济宁医学院附属医院收治的91例直肠癌根治术结肠造口患者,根据结肠造口术后7 d内是否发生结肠造口旁软组织感染分为感染组27例和未感染组64例.分析两组肠道菌群失调分度;比较两组血清miR-15a、miR-29b、CD36 mRNA、mTORC1 mRNA、PCT水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析联合检测的预测价值.Pearson法分析miR-15a、miR-29b、CD36 mRNA、mTORC1 mRNA与PCT水平相关性.结果直肠癌根治术后结肠造口旁软组织感染发生率为29.67%.感染组Ⅲ度菌群失调比例、血清miR-29b、CD36 mRNA、mTORC1 mRNA、PCT水平比未感染组高(P<0.05),miR-15a水平比未感染组低(P<0.05),联合检测直肠癌根治术后结肠造口旁软组织感染的曲线下面积(AUC)比单独检测高(P<0.05);miR-29b、CD36 mRNA、mTORC1水平与PCT呈正相关(P<0.05);miR-15a水平与PCT呈负相关(P<0.05).结论直肠癌根治术后结肠造口旁软组织感染发生率高,存在肠道菌群失衡,血清miR-29b、CD36 mRNA、mTORC1 mRNA呈高表达,miR-15a呈低表达,联合检测可预测直肠癌根治术后结肠造口旁软组织感染,直肠癌根治术后结肠造口旁软组织感染患者miR-15a、miR-29b、CD36 mRNA、mTORC1 mRNA表达水平与PCT水平有关.

miRNA-29b对与A549细胞共培养的人肺成纤维细胞的抗纤维化作用

目的探讨miRNA-29b对与A549细胞共培养的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)合成Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)的影响。方法 MRC-5与A549细胞跨室共培养,分为空白对照(A)组、TGF-β1刺激(B)组、miRNA-29b阴性对照转染+TGF-β1刺激(C)组、miRNA-29b转染+TGF-β1刺激(D)组和miRNA-29b转染(E)组。采用实时定量PCR法检测各组细胞中ColⅠ与miRNA-29bmRNA表达水平;Western blot检测细胞中ColⅠ蛋白表达水平。结果与B组和C组相比,D组中ColⅠ表达降低(P<0.05)。结论 miRNA-29b可减少TGF-β1刺激的与A549细胞共培养的MRC-5的ColⅠ表达,对肺纤维化可能有潜在的治疗作用。

短期胰岛素泵强化治疗对2型糖尿病患者血清miR-503和miR-29a表达的影响

目的探讨短期胰岛素泵强化治疗对2型糖尿病(T2DM)患者血清微小核糖核酸(microRNA,miR)-503和miR-29a表达的影响。方法选取2016年3月至2017年3月收治的118例T2DM患者为研究对象,按照随机分组原则,将其分为治疗组与对照组,每组59例。治疗组给予短期胰岛素泵强化治疗,对照组给予口服降糖药进行治疗。用全自动生化分析仪检测两组治疗前后血糖血脂指标,计算胰岛素分泌指数(HOMA-β)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清miR-503和miR-29a mRNA表达水平。结果治疗前,两组血清空腹血糖、糖化血红蛋白(Hb A1c)、餐后2h血糖(2h PG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和HOMA-β、HOMA-IR值及血清miR-503 mRNA、miR-29a mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。治疗后,两组各指标较治疗前均明显改善,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且治疗组HOMA-IR值、血清空腹血糖、Hb A1c、2h PG、TG、TC、LDL-C水平和miR-503、miR-29a mRNA相对表达量均低于对照组(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平、HOMA-β值均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。Spearman秩相关分析示,T2DM患者血清miR-503、miR-29a mRNA表达水平与空腹血糖(r=0.398,r=0.419)、Hb A1c(r=0.596,r=0.531)、2h PG(r=0.370,r=0.421)水平分别呈正相关(P均<0.01),与TG、TC、LDL-C、HDL-C、HOMA-IR、HOMA-β无相关性(P均>0.05);血清miR-503与miR-29a mRNA表达水平呈正相关(r=0.534,P<0.05)。结论短期胰岛素泵强化治疗可显著降低T2DM患者血清miR-503、miR-29a mRNA表达水平,miR-503、miR-29a的表达与T2DM发生发展有关。