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微小核糖核酸-375与肝细胞肝癌关系的研究进展 被引量:2
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作者 师玉卓 付婷 +3 位作者 思广慧 邵中军 张维璐 王新华 《中华老年多器官疾病杂志》 2019年第12期938-941,共4页
肝细胞肝癌(HCC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,其早期症状隐匿,预后差,临床上对其早期诊断有一定的局限性。大量研究表明微小核糖核酸-375(miR-375)与HCC的发生发展有十分密切的关系,miR-375可通过靶向调节致癌基因信号通路影响HCC的发... 肝细胞肝癌(HCC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,其早期症状隐匿,预后差,临床上对其早期诊断有一定的局限性。大量研究表明微小核糖核酸-375(miR-375)与HCC的发生发展有十分密切的关系,miR-375可通过靶向调节致癌基因信号通路影响HCC的发生或发展过程,是HCC早期诊断或预后的标志物。本文就近年miR-375与HCC研究的最新进展作一概述,为HCC的早期诊断、治疗及预后提供理论依据。 展开更多
关键词 肿瘤 肝细胞 微小核糖核酸-375 诊断 治疗
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慢性牙周炎患者龈沟液miR-143、miR-375表达及与疾病严重程度的关系
2
作者 王贺 赵哲 包晶晶 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第15期1909-1912,共4页
目的探讨慢性牙周炎患者龈沟液微小核糖核酸(miR)-143、miR-375表达及与疾病严重程度的关系。方法选取2022年1月至2023年7月在呼和浩特市第一医院确诊的135例慢性牙周炎患者作为研究组,根据疾病严重程度分为轻度组(n=58)、中度组(n=37)... 目的探讨慢性牙周炎患者龈沟液微小核糖核酸(miR)-143、miR-375表达及与疾病严重程度的关系。方法选取2022年1月至2023年7月在呼和浩特市第一医院确诊的135例慢性牙周炎患者作为研究组,根据疾病严重程度分为轻度组(n=58)、中度组(n=37)和重度组(n=40)。另选同期在该院体检的健康志愿者127例作为对照组。实时荧光定量PCR检测miR-143、miR-375相对表达水平,酶联免疫吸附试验试剂盒测定龈沟液炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)]水平。Pearson相关性分析龈沟液miR-143、miR-375表达与临床指标及炎症因子水平的相关性。结果对照组与研究组年龄、性别、刷牙次数、吸烟占比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,研究组龈沟液miR-143相对表达水平显著升高,miR-375相对表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与中度组比较,重度组出血指数(BI)、牙龈指数(GI)、牙周袋探针深度(PD)、附着丧失(AL)显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与中度组比较,重度组IL-6、TNF-α、CRP水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。慢性牙周炎患者龈沟液miR-143相对表达水平与BI、GI、PD、AL及龈沟液CRP、TNF-α、IL-6水平均呈正相关(P<0.05);龈沟液miR-375相对表达水平与BI、GI、PD、AL及龈沟液CRP、TNF-α、IL-6水平均呈负相关(P<0.05)。结论慢性牙周炎患者龈沟液miR-143、miR-375表达可评估患者疾病严重程度,对慢性牙周炎病情判断具有参考价值。 展开更多
关键词 慢性牙周炎 微小核糖核酸-143 微小核糖核酸-375 疾病严重程度
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食管癌组织中miR-375、SHOX2表达变化及临床意义
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作者 刘战飞 郭晓宁 宫惠琳 《山东医药》 CAS 2024年第19期57-60,共4页
目的探讨食管癌组织中微小核糖核酸-375(miR-375)、矮小同源盒基因2(SHOX2)的表达及临床意义。方法选取食管癌患者90例,均接受根治术治疗。术中收集部分癌组织及对应癌旁组织,用实时荧光定量PCR法检测miR-375、SHOX2 mRNA,通过Targetsca... 目的探讨食管癌组织中微小核糖核酸-375(miR-375)、矮小同源盒基因2(SHOX2)的表达及临床意义。方法选取食管癌患者90例,均接受根治术治疗。术中收集部分癌组织及对应癌旁组织,用实时荧光定量PCR法检测miR-375、SHOX2 mRNA,通过Targetscan网站、miRTargetLink网站、miRanda网站、PicTar网站预测miR-375与SHOX2结合位点,用Pearson相关分析法分析食管癌组织中miR-375、SHOX2 mRNA表达的相关性,分析二者表达与临床病理参数的关系。对患者进行随访,统计3年生存率,分析miR-375、SHOX2 mRNA表达与3年生存率的关系。用多因素Cox回归模型分析miR-375、SHOX2 mRNA表达对食管癌患者根治术后预后的影响。结果食管癌组织miR-375表达低于癌旁组织,SHOX2 mRNA表达高于癌旁组织(P均<0.05)。经在线网站预测,miR-375与SHOX2的3'非翻译端1489~1496处存在结合位点;Pearson相关分析显示,食管癌组织中miR-375、SHOX2 mRNA表达呈负相关(r=-0.825,P<0.05)。不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移的食管癌组织中miR-375、SHOX2 mRNA比较差异有统计性意义(P均<0.05)。随访3年,90例食管癌患者死亡29例,总生存率为67.78%(61/90)。高miR-375表达者总生存率高于低miR-375表达者,高SHOX2 mRNA表达者总生存率低于低SHOX2 mRNA表达者(P均<0.05)。多因素Cox回归模型分析结果显示,肿瘤低分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移、SHOX2 mRNA≥1.38为食管癌患者根治术后预后的独立危险因素(P均<0.05),miR-375≥0.66为独立保护因素(P<0.05)。结论食管癌组织中miR-375低表达、SHOX2 mRNA高表达,二者表达变化与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移及预后有关。 展开更多
关键词 食管癌 微小核糖核酸-375 矮小同源盒基因2 根治术 临床病理参数 预后
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甲状腺乳头状癌组织中galecti-3与miR-375水平表达意义及相关性研究 被引量:4
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作者 刘星 霍占江 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第1期49-52,185,共5页
目的探索甲状腺乳头状癌组织中半乳糖凝集素(galectin)-3与微小RNA(micro RNA,miRNA)-375水平表达意义及相关性。方法选取2014年5月~2018年9月于张家口市第一医院普通外科接受手术治疗的87例甲状腺乳头状癌患者作为研究对象,收集其甲状... 目的探索甲状腺乳头状癌组织中半乳糖凝集素(galectin)-3与微小RNA(micro RNA,miRNA)-375水平表达意义及相关性。方法选取2014年5月~2018年9月于张家口市第一医院普通外科接受手术治疗的87例甲状腺乳头状癌患者作为研究对象,收集其甲状腺癌组织及对应的癌旁组织标本。通过实时荧光定量反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测galectin-3和miR-375在各个组织中的表达情况,分析二者的表达关系及其与临床病理特征的相关性。此外,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测入院时患者血清galectin-3水平,采用RT-PCR法检测血清miR-375水平,通过Kaplan-Meier生存曲线评估血清galectin-3与miR-375表达对甲状腺乳头状癌病人预后的影响。结果与癌旁组织相比,galectin-3在甲状腺乳头状癌中表达上调(1.77±0.48 vs 0.57±0.16),差异有统计学意义(t=22.122,P<0.001);而miR-375在癌组织中的表达水平下调(1.34±0.39 vs 2.12±0.62),差异有统计学意义(t=9.933,P<0.05)。galectin-3表达与肿瘤大小、包膜侵犯、血管浸润、淋巴结转移有关(χ^(2)=9.936~20.028,均P<0.05);miR-375表达与肿瘤大小、血管浸润有关(χ^(2)=12.590,6.403,均P<0.05)。血清galectin-3与miR-375表达水平呈负相关(r=-0.487,P<0.001)。血清galectin-3高表达者三年总体生存期(overall survival,OS)低于低表达者(71.7%vs 93.3%),差异有统计学意义(Log-rank=7.493,P=0.001);miR-375高表达患者的三年OS高于低表达者(93.3%vs 73.9%),差异有统计学意义(Log-rank=7.021,P=0.001)。结论galectin-3在甲状腺乳头状癌组织中表达升高,miR-375在甲状腺乳头状癌组织中表达降低,二者共同参与甲状腺乳头状癌的发生发展,对预后具有一定影响。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 半乳糖凝集素3 微小核糖核酸-375
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长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1靶向微小核糖核酸-375/Yes相关蛋白1通路调控胃癌细胞株多药耐药的机制 被引量:1
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作者 何春华 张斌忠 +1 位作者 王胤达 孙亭立 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期2378-2382,共5页
目的:探讨长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1(lncRNA ZNRD1-AS1)在胃癌多药耐药(MDR)中的作用及机制。方法:采用24孔板体外培养胃癌MGC-803细胞株,设空白对照组、MDR组、空载质粒组、lncRNA ZNRD1-AS1过表达组、微小核糖核酸-375模拟物(miR-3... 目的:探讨长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1(lncRNA ZNRD1-AS1)在胃癌多药耐药(MDR)中的作用及机制。方法:采用24孔板体外培养胃癌MGC-803细胞株,设空白对照组、MDR组、空载质粒组、lncRNA ZNRD1-AS1过表达组、微小核糖核酸-375模拟物(miR-375 mimic)组及联合干预组。除空白对照组以外,均采用阿霉素梯度浓度法建立MDR株。建立成功以后,lncRNA ZNRD1-AS1过表达组和miR-375 mimic组分别采用慢病毒转染法转染lncRNA ZNRD1-AS1过表达质粒和miR-375 mimic,空载质粒组转染空载质粒与模拟物对照(mimic NC)。共培养48 h,采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测lncRNA ZNRD1-AS1和miR-375表达,采用蛋白质印迹法(Western blot)实验检测Yes相关蛋白1(YAP1)、哺乳动物不育系20样激酶1(Mst1)、大肿瘤抑制基因-1(Lats1)的蛋白表达,采用噻唑蓝(MTT)实验和流式细胞实验检测细胞的增殖活力与凋亡率,Transwell实验检测MGC-803细胞侵袭能力。结果:各组之间的lncRNA ZNRD1-AS1、miR-375、YAP1表达水平差异均有统计学意义(F=60.465、75.695、63.441,均P<0.05);细胞增殖活力、凋亡率与侵袭数目差异也有统计学意义(F=26.818、63.854、16.323,均P<0.05)。MDR组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为1.736±0.084和0.825±0.135,高于对照组(1.025±0.036和0.155±0.02),miR-375表达为0.054±0.018,低于对照组(0.128±0.028);细胞增殖活力和迁移数目分别为0.855±0.026和152.5±20.5,高于对照组(0.652±0.015和85.0±15.5),凋亡率为(3.85±1.02)%,低于对照组[(6.55±1.05)%,P<0.05]。lncRNA ZNRD1-AS1过表达组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为6.582±1.035和1.256±0.185,均高于MDR组,miR-375表达水平为0.015±0.011,低于MDR组;细胞增殖活力和迁移数目分别为0.987±0.030和(202.5±32.5)个,高于MDR组,凋亡率为(2.03±0.62)%,低于MDRMDR组(P<0.05)。miR-375 mimic组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为0.225±0.086和0.056±0.035,均低于MDR组,miR-375表达水平为32.524±5.254,高于MDR组;细胞增殖活力和迁移能力为0.562±0.085和(80.5±14.6)个,低于MDR组,凋亡率为(18.25±2.10)%,高于MDR组(P<0.05)。共干预组各个指标的变化水平介于lncRNA ZNRD1-AS1过表达组与miR-375 mimic组之间,与两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:lncRNA ZNRD1-AS1能够通过miR-375调节胃癌细胞的行为学特征,从而促进MDR,其机制可能与YAP1介导的Hippo信号通路有关。 展开更多
关键词 胃癌 多药耐药 微小核糖核酸-375 长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1 Hippo信号通路
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帕博利珠单抗辅助治疗非小细胞肺癌伴脑转移患者的疗效及对血清CA9与miR-375水平的影响 被引量:2
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作者 杜林 张逊 +3 位作者 陈峰 徐医军 曹宇琪 褚向晖 《中国处方药》 2022年第8期92-94,共3页
目的探讨帕博利珠单抗辅助治疗对非小细胞肺癌伴脑转移患者的疗效及对血清碳酸酐酶9(CA9)与微小核糖核酸375(miR-375)表达水平的影响。方法选取2018年2月~2021年1月收治的97例非小细胞肺癌伴脑转移患者,随机将患者分为观察组49例与对照... 目的探讨帕博利珠单抗辅助治疗对非小细胞肺癌伴脑转移患者的疗效及对血清碳酸酐酶9(CA9)与微小核糖核酸375(miR-375)表达水平的影响。方法选取2018年2月~2021年1月收治的97例非小细胞肺癌伴脑转移患者,随机将患者分为观察组49例与对照组48例,观察组患者给予吉西他滨联合顺铂(GP)方案+帕博利珠单抗辅助治疗,48例对照组患者给予GP方案治疗,比较两组患者治疗疗效、治疗前后血清CA9与miR-375水平、不良反应发生情况及生活质量情况。结果观察组治疗后完全缓解(CR)23例、部分缓解(PR)19例,对照组治疗后CR15例、PR18例,观察组临床治疗总有效率为85.71%显著高于对照组68.75%(P<0.05);与治疗前相比,治疗后两组患者血清CA9均降低(P<0.05),且观察组血清CA9水平低于对照组(P<0.05),治疗后两组患者血清miR-375水平均升高(P<0.05),且观察组血清miR-375水平高于对照组(P<0.05);观察组共发生1例腹泻、1例白细胞降低、1例乏力,对照组共发生1例呕吐、1例腹泻、1例白细胞降低、2例乏力,观察组患者不良反应总发生率为6.12%与对照组10.42%比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者生活质量改善人数比例为95.92%,显著高于对照组81.25%(P<0.05)。结论帕博利珠单抗辅助治疗能增强非小细胞肺癌伴脑转移患者抗肿瘤作用,提高临床治疗疗效及生存期,改善血清CA9、miR-375水平。 展开更多
关键词 帕博利珠单抗 非小细胞肺癌 脑转移 血清碳酸酐酶9 微小核糖核酸375
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急性冠状动脉综合征患者血浆miR-375水平与预后的关系 被引量:4
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作者 陆宏 陶杰 李家宇 《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第11期1075-1079,共5页
目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆微小核糖核酸(mi R)-375水平与预后的关系。方法选取2016年3月至2017年4月在昆明医科大学第一附属医院接受经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的206例ACS患者作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反... 目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆微小核糖核酸(mi R)-375水平与预后的关系。方法选取2016年3月至2017年4月在昆明医科大学第一附属医院接受经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的206例ACS患者作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测ACS患者血浆mi R-375水平,分析其与患者预后的关系。结果 PCI术后预后不良组血浆miR-375水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。低miR-375组平均生存时间高于高miR-375组,差异有显著统计学意义(P<0.001)。Cox多因素分析结果显示,ACS家族史和miR-375是ACS预后的独立危险因素(P<0.05)。限制性立方样条分析结果显示,血浆miR-375水平与ACS预后明显相关(P<0.001),且呈线性关系(非线性检验,P=0.127)。与miR-375=2.62比较,患者miR-375>2.62时,预后不良风险增加。结论 ACS患者PCI术后血浆miR-375水平降低。PCI术后血浆miR-375水平升高与ACS预后不良有关,是ACS预后不良的独立危险因素。 展开更多
关键词 急性冠状动脉综合征 经皮冠状动脉介入治疗 微小核糖核酸-375 主要心血管不良事件
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miR-146a、miR-375联合AFP检测在诊断原发性肝癌中的应用 被引量:3
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作者 陈泽衍 陈晓静 +4 位作者 郑文斌 黄汉莲 兰希 吴云风 马雯 《中国医学创新》 CAS 2019年第36期132-135,共4页
目的:探究微小核糖核酸146a(miR-146a)、微小核糖核酸375(miR-375)联合甲胎蛋白(AFP)检测在诊断原发性肝癌中的应用价值。方法:选取2017年2月-2019年4月在本院治疗的53例原发性肝癌患者作为肝癌组,将本院同期收治的53例肝脏良性疾病患... 目的:探究微小核糖核酸146a(miR-146a)、微小核糖核酸375(miR-375)联合甲胎蛋白(AFP)检测在诊断原发性肝癌中的应用价值。方法:选取2017年2月-2019年4月在本院治疗的53例原发性肝癌患者作为肝癌组,将本院同期收治的53例肝脏良性疾病患者作为良性组。检测所有患者的血清AFP含量及miR-146a、miR-375相对表达量。比较两组血清AFP含量及miR-146a、miR-375相对表达量。对肝癌组miR-375、miR-146a及AFP检测结果进行ROC曲线分析,根据ROC曲线得miR-375、miR-146a的最佳临界值。对肝癌组进行miR-375、mi R-146a、AFP检测及联合检测,比较各个检测方法的敏感度、特异度和ROC曲线下面积(area under curve,AUC)。结果:肝癌组miR-146a、miR-375相对表达量及AFP含量均高于良性组(P<0.05);联合检测敏感度均高于miR-146a与AFP检测,且特异度高于miR-375检测(P<0.05);联合检测AUC大于AFP、miR-146a及miR-375检测(P<0.05)。结论:miR-146a、miR-375联合AFP检测在诊断原发性肝癌中具有较高的敏感度、特异度。 展开更多
关键词 微小核糖核酸146a 微小核糖核酸375 甲胎蛋白 原发性肝癌
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慢性乙型肝炎患者血清miR-375和miR-155与miR-629的表达及临床意义
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作者 王伟 陈文青 +2 位作者 陈建丽 马黎丽 田永建 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期481-484,共4页
目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者微小核糖核酸-375(miR-375)、miR-155、miR-629的表达及意义。方法选择2019年7月-2021年5月阜阳市人民医院收治的84例慢性乙型肝炎患者纳入病例组;另选取同期于医院体检的健康者84名设为对照组。病例组根... 目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者微小核糖核酸-375(miR-375)、miR-155、miR-629的表达及意义。方法选择2019年7月-2021年5月阜阳市人民医院收治的84例慢性乙型肝炎患者纳入病例组;另选取同期于医院体检的健康者84名设为对照组。病例组根据病情程度进一步分为CHB轻度组(24例)、CHB中度组(34例)、CHB重度组(26例)。比较病例组、对照组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、γ干扰素(IFN-γ)含量。比较病例组、对照组,以及CHB轻度组、CHB中度组、CHB重度组的血清中miR-375、miR-155、miR-629的相对表达量。结果病例组ALT、AST、ALB、IL-6、TGF-β1高于对照组,IFN-γ低于对照组(P<0.05);病例组血清中miR-375、miR-155、miR-629水平均高于对照组(P<0.05);不同病情程度患者血清miR-375、miR-155、miR-629水平差异有统计学意义(P<0.05),病情越严重,以上指标水平越高。结论CHB患者血清中miR-375、miR-155、miR-629呈高水平表达状态,相关检测有助于评价肝功能状态、炎症水平及病情严重程度。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 微小核糖核酸-375 微小核糖核酸-155 微小核糖核酸-629 肝功能 病情程度
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益气养阴活血方改善2型糖尿病大鼠胰岛分泌功能的作用机制 被引量:2
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作者 王顺意 张军 +4 位作者 刘颖 陈伟 魏锦花 王保苍 刘文超 《世界中医药》 CAS 2022年第4期477-482,共6页
目的:探讨益气养阴活血方改善2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛分泌功能的作用机制。方法:选取无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠66只,随机分为对照组11只及造模组55只。造模组用高糖高脂饲料喂养联合链脲佐菌素建立T2DM模型,对照组给予标准颗粒饲... 目的:探讨益气养阴活血方改善2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛分泌功能的作用机制。方法:选取无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠66只,随机分为对照组11只及造模组55只。造模组用高糖高脂饲料喂养联合链脲佐菌素建立T2DM模型,对照组给予标准颗粒饲料喂养及等体积0.1 mmol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。造模成功的大鼠分为模型组、益气养阴活血方低、中、高剂量组及西药组,每组11只。模型组及对照组给予蒸馏水,益气养阴活血方低、中、高剂量组给予0.43 g/mL、0.86 g/mL、1.72 g/mL益气养阴活血方;西药组予以20 mg/mL二甲双胍悬液;各组灌胃剂量10 mL/kg,1次/d,连续12周。检测比较空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素分泌指数(HOMA-β)、胰岛细胞凋亡指数、胰岛微小核糖核酸-375(miR-375)及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平。结果:与模型组比较,各组FBG水平、胰岛细胞凋亡指数、胰岛组织miR-375及Caspase-3表达水平较低,FINS、HOMA-β水平及胰岛组织Bcl-2表达水平较高,差异均有统计学意义(P<0.05),且益气养阴活血方组呈一定量效关系。结论:益气养阴活血方能剂量依赖性的降低T2DM大鼠血糖,改善胰岛分泌功能,抑制胰岛细胞凋亡,其作用机制可能与抑制胰岛组织miR-375表达,调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase-3表达有关。 展开更多
关键词 益气养阴活血方 2型糖尿病 链脲佐菌素 微小核糖核酸-375 空腹血糖 胰岛分泌功能 胰岛细胞凋亡 胱天蛋白酶-3
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MiR-375抑制的人诱导多能干细胞分化为起搏样细胞的研究
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作者 章澜 杨媚 +5 位作者 王晞 唐艳红 宋思维 陈玉婷 王腾 黄从新 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2022年第2期148-154,共7页
目的 探讨抑制miR-375表达能否使其修饰的人诱导多潜能干细胞(hiPSC)在向hiPSC源性心肌细胞(hiPSC-CMs)分化的过程中更高效地向起搏样细胞转化。方法 采用hiPSC时序性激活或抑制Wnt信号通路定向诱导分化到hiPSC-CMs,流式分析检测其分化... 目的 探讨抑制miR-375表达能否使其修饰的人诱导多潜能干细胞(hiPSC)在向hiPSC源性心肌细胞(hiPSC-CMs)分化的过程中更高效地向起搏样细胞转化。方法 采用hiPSC时序性激活或抑制Wnt信号通路定向诱导分化到hiPSC-CMs,流式分析检测其分化效率。分别转染携带miR-375抑制剂和绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒rLV-ZsGreen-Puro-hsa-mir-375 inhibitor(miR-375组)和等量带GFP的空载慢病毒(GFP组),空白组不做转病毒处理(Null组)。分化14 d后在倒置显微镜下计算各组细胞每分钟搏动次数,采用实时荧光聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹检测三组起搏细胞发育相关转录因子(Shox2、Nkx2.5、Isl1)、起搏相关离子通道超极化激活环核苷酸门控通道4型(HCN4)mRNA和蛋白水平变化,采取免疫荧光法检测GFP组和miR-375组Shox2蛋白和心肌细胞特异性标志物心肌肌钙蛋白T(cTNT)的表达。结果 分化第7 d起可见细胞自发性搏动,流式分析结果cTNT阳性率超80%,hiPSCs成功诱导分化到hiPSC-CMs;与GFP组和Null组比较,miR-375组搏动速度及Shox2、HCN4、Isl1的mRNA和蛋白表达水平明显升高,Nkx2.5表达明显降低(P<0.05);荧光显微镜观察miR-375组Shox2蛋白表达强于GFP组,cTNT蛋白表达两组无显著差异。结论 通过抑制miR-375表达能增加hiPSCs向起搏样细胞的分化效率。 展开更多
关键词 心血管病学 微小核糖核酸-375 人诱导多潜能干细胞 慢病毒载体 矮小身材同源异型框基因2 心肌细胞 生物起搏
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lncRNA LINC00324靶向miR-375对胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响 被引量:2
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作者 李清泉 张雅旋 +1 位作者 仇诚 黄保胜 《中国临床研究》 CAS 2020年第10期1302-1307,共6页
目的研究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00324和微小核糖核酸(microRNA,miR)-375对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及机制。方法Real-timePCR检测2017年6月至2018年12月20例行手术切除患者的胶质瘤组织和脑外伤20例行颅内减压手术... 目的研究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00324和微小核糖核酸(microRNA,miR)-375对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及机制。方法Real-timePCR检测2017年6月至2018年12月20例行手术切除患者的胶质瘤组织和脑外伤20例行颅内减压手术患者的正常脑组织中lncRNALINC00324和miR-375的水平,双荧光素酶报告系统验证lncRNALINC00324与miR-375的关系。在外购的胶质瘤U251细胞中转染si-LINC00324、miR-375以抑制LINC00324和过表达miR-375;CCK8法、流式细胞术和Transwell实验分别检测胶质瘤U251细胞增殖、凋亡率、细胞迁移和侵袭能力。结果与正常脑组织相比,胶质瘤组织中lncRNALINC00324表达水平显著升高,miR-375表达水平显著降低(P均<0.01)。过表达lncRNALINC00324可下调胶质瘤U251细胞中miR-375含量(P<0.05),抑制lncRNALINC00324可上调miR-375含量(P<0.05),即lncRNALINC00324靶向负调控miR-375的表达。抑制lncRNALINC0032后,U251细胞中LINC00324含量、反映细胞增殖情况的OD值、侵袭和迁移细胞数降低,凋亡率升高(P<0.05,P<0.01);过表达miR-375后,U251细胞中miR-375含量升高,OD值、侵袭和迁移细胞数降低,凋亡率升高(P均<0.01);即抑制lncRNALINC00324和过表达miR-375均可抑制U251细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡。在抑制LINC00324的同时干扰miR-375,U251细胞中miR-375含量降低,OD值、侵袭和迁移细胞数升高,凋亡率降低(P均<0.01),即干扰miR-375可逆转抑制lncRNALINC00324对U251细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。结论LncRNALINC00324通过靶向miR-375调控U251细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡,其可能作为胶质瘤的潜在分子靶点。 展开更多
关键词 胶质瘤 U251细胞株 长链非编码RNA LINC00324 微小核糖核酸-375 增殖 迁移 侵袭 凋亡
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