miR-495在骨肉瘤组织中的表达变化及意义

目的探讨微小核糖核酸495(miR-495)在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法收集手术切除的骨肉瘤组织及其对应的癌旁组织(距离肿瘤边缘>5 cm,病理检查证实为正常组织)标本各56例份,采用real-time PCR法检测miR-495表达。以骨肉瘤组织miR-495相对表达量的均值为界值,分析miR-495表达>界值、≤界值与患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤部位、Enneking分期、淋巴结远处转移及预后的关系。结果骨肉瘤及其癌旁组织miR-495相对表达量分别为0.42±0.16、1.01±0.05,两者比较P<0.01。56例患者中,骨肉瘤组织miR-495相对表达量的均值为0.42,miR-495相对表达量≤0.42者31例、>0.42者25例。骨肉瘤组织miR-495表达≤0.42与Enneking分期、淋巴结远处转移有关(P均<0.01),与患者性别、年龄、肿瘤直径及肿瘤部位均无关(P均>0.05)。骨肉瘤组织miR-495表达≤0.42与>0.42者5年生存率分别为26%、48%;二者比较P<0.01;COX比例风险回归模型结果显示,miR-495表达≤0.42是影响骨肉瘤患者预后的独立危险因素(HR=3.699,95%CI:1.985~6.941,P<0.05)。结论骨肉瘤组织中miR-495表达降低,miR-495异常低表达可能参与了骨肉瘤的发生、发展及转移,并且与患者预后不良有关。

Lnc SNHG20和miR-495在宫颈癌中的表达及意义

目的检测长链非编码RNA(LncRNA)核内小RNA宿主基因20(SNHG20)和微小核糖核酸-495(miR-495)在宫颈癌患者癌组织及癌旁正常组织中的表达水平,分析二者表达相关性及与宫颈癌疾病的关系。方法选取2011年6月至2013年8月在本院诊治并接受手术的宫颈癌患者的癌组织及配对癌旁组织分别设为研究组与对照组,每组74例,采用实时荧光定量PCR技术检测Lnc SNHG20和miR-495表达水平,分析Lnc SNHG20与miR-495表达相关性及与宫颈癌疾病的关系。结果研究组中Lnc SNHG20相对表达量显著高于对照组(P<0.05),miR-495相对表达量显著低于对照组(P<0.05)。Lnc SNHG20和miR-495表达水平与患者FIGO分期、组织分化、肿瘤直径和淋巴结是否转移有关(P<0.05)。Lnc SNHG20高表达组生存率显著低于低表达组(P<0.05),miR-495低表达组生存率显著低于高表达组(P<0.05)。Lnc SNHG20表达与miR-495号负相关(r=-0.839,P<0.01),是影响宫颈癌不良预后发生的独立危险因素(P<0.05)。结论Lnc SNHG20在宫颈癌患者癌组织中高表达,miR-495低表达,二者表达水平负相关,与FIGO分期、组织分化、肿瘤直径和淋巴结是否转移有关,是影响宫颈癌不良预后发生的独立危险因素。

miR-495对食管癌细胞株Eca109在不同放射剂量和顺铂浓度作用的影响及机制研究

目的探讨微小核糖核酸(microRNA,miR)-495对食管癌细胞株Eca109在不同放射剂量和顺铂浓度作用下的影响及机制。方法采用分次放疗递增法诱导建立放射抵抗型细胞株Eca109(Eca109-RAD)及分次顺铂递增法诱导建立顺铂耐药型细胞株Eca109(Eca109-DDP),实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-495在Eca109-RAD及Eca109-DDP细胞中的表达。Eca109-RAD及Eca109-DDP分为NC组和miR-495 mimic组,转染后qRT-PCR检测各组细胞中miR-495的表达,CCK8检测不同放射剂量对Eca109-RAD细胞和Eca109细胞存活能力的影响,及不同浓度的顺铂对Eca109-DDP细胞和Eca109细胞存活能力的影响,NC组和miR-495 mimic组经放射及顺铂处理后,采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,Western blot检测各组细胞中凋亡相关蛋白caspase 3,Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果与Eca109细胞(0.99±0.01)相比,Eca109-RAD细胞中miR-495的表达(0.48±0.03)及Eca109-DDP细胞中miR-495的表达(0.52±0.05)均降低,差异有统计学意义(t=27.930,15.970,均P=0.000)。与NC组细胞相比,miR-495 mimic组Eca109-RAD细胞中miR-495的表达(4.82±0.48 vs 1.00±0.03)及Eca109-DDP细胞中miR-495的表达(5.68±0.54 vs 1.00±0.01)均显著增加,差异有统计学意义(t=13.760,15.100,均P=0.000)。与NC组相比,miR-495 mimic组Eca109-RAD细胞对放疗敏感度增加,差异均有统计学意义(t=6.780~18.860,P=0.000~0.001);与NC组相比,miR-495 mimic组Eca109-DDP细胞对顺铂敏感度增加,差异均有统计学意义(t=7.510~21.630,均P=0.000)。经放射处理后,与NC组相比,miR-495 mimic组Eca109-RAD细胞平板克隆形成能力(46.33±5.69个vs 93.33±4.51个)及Eca109-DDP(34.67±2.52个vs 89.00±4.03个)细胞平板克隆形成能力显著降低(t=11.210,19.800,均P=0.000)。经放射处理后,与NC组相比,miR-495 mimic组Eca109-RAD细胞凋亡率(25.66%±2.41%vs 8.39%±0.82%)及Eca109-DDP细胞凋亡率(21.05%±5.37%vs 8.67%±1.15%)均显著增加(t=11.750,10.030,P=0.000,0.001)。经放射处理后,与NC组相比,miR-495 mimic组Eca109-RAD细胞及Eca109-DDP细胞中Bcl-2蛋白表达均降低(t=4.650,7.450,P=0.006,0.001),Bax和caspase 3蛋白的表达均增加(t=7.100~14.290,P=0.000~0.001)。结论MiR-495可能通过调控凋亡相关蛋白促进食管癌细胞放化疗敏感度。

宫颈癌组织中miR-495-3p的表达及其对癌细胞凋亡、侵袭的影响

目的探讨miR-495-3p在宫颈癌患者癌组织中的表达及其对人宫颈癌细胞HeLa细胞凋亡和侵袭的影响。方法组织学实验:选取2020年12月至2021年12月河北中石油中心医院和石家庄市第四医院归档的资料齐全完整的47例宫颈癌患者宫颈组织及其癌旁组织手术标本,通过实时荧光定量PCR对癌组织和癌旁组织miR-495-3p表达水平进行检测。细胞学实验:将人宫颈癌细胞HeLa分为3组,对照组(不转染)、NC组(转染NC质粒)和miR-495-3p组(转染miR-495-3p质粒),划痕实验和细胞迁移实验(Transwell)检测各组细胞迁移和侵袭能力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平及细胞周期;Western Blot检测G1/S-特异性周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达水平。结果组织学实验表明,与癌旁组织相比,癌组织中miR-495-3p低表达(0.396±0.012 vs 1.893±0.215,t=47.663,P<0.01)。细胞学实验表明,与对照组相比,miR-495-3p组细胞迁移能力和侵袭能力显著下降(P<0.01);细胞存活比例显著降低,早期凋亡和晚期凋亡比例显著增加(P<0.05);G0/G1时期细胞比例显著增加,S期和G2期细胞比例显著降低(P<0.05);Western Blot实验表明miR-495-3p组CyclinD1蛋白表达水平较其他两组显著降低(P<0.01),NC组细胞和对照组细胞差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-495-3p在宫颈癌组织中显著低表达,miR-495-3p可以通过抑制宫颈癌细胞的迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡,同时通过抑制CyclinD1的表达干预宫颈癌细胞周期调控。