微小核糖核酸7641/沉默信息调节因子1途径参与高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞损伤的研究

目的探讨微小核糖核酸7641(miR-7641)/沉默信息调节因子1(SIRT1)途径参与人视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)的损伤。方法HRCEC分为正常对照(NC)组、高糖(HG)组、高糖+抑制剂无关RNA序列(inhibitor NC)组(HG+siNC组)、高糖+miR-7641抑制剂(miR-7641 inhibitor)组(HG+miR-7641 siRNA组)。流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞计数试剂盒8检测细胞增殖活力,RT-PCR法检测miR-7641表达,ELISA法检测SIRT1表达。结果与NC组比较,HG、HG+siNC、HG+miR-7641siRNA组细胞凋亡率、miR-7641表达升高(P<0.05),细胞活力、SIRT1表达降低(P<0.05)。HG+miR-7641siRNA组细胞凋亡、miR-7641表达低于HG、HG+siNC组(P<0.05),细胞活力、SIRT1表达高于HG、HG+siNC组(P<0.05)。结论miR-7641可能通过靶向降解SIRT1参与DM环境下HRCEC损伤,影响HRCEC增殖及凋亡,参与DR的发生发展。

激素性股骨头坏死患者微小核糖核酸、骨形态发生蛋白-2、1型纤溶酶原激活物抑制剂表达水平及其临床意义

目的探讨激素性股骨头坏死患者血清微小核糖核酸-672-5p(miR-672-5p)、微小核糖核酸-29b(miR-29b)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)表达水平及其对激素性股骨头坏死的预测价值。方法选取2020年3月至2023年3月河南科技大学第一附属医院收治的116例激素性股骨头坏死患者作为病例组,根据国际骨循环研究会(ARCO)分期标准将其分为Ⅰ期组(41例)、Ⅱ期组(30例)和Ⅲ期组(45例),另选本院同期125例健康体检者作为对照组。比较病例组和对照组及不同ARCO分期激素性股骨头坏死患者血清miR-672-5p、miR-29b、BMP-2、PAI-1水平,利用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标的预测价值。结果病例组患者的血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1水平高于对照组,血清BMP-2水平低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ期组患者血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1水平高于Ⅱ期组和Ⅰ期组,Ⅱ期组高于Ⅰ期组(P<0.05);Ⅲ期组患者血清BMP-2水平低于Ⅱ期组和Ⅰ期组,Ⅱ期组低于Ⅰ期组(P<0.05)。激素性股骨头坏死患者血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1水平与ARCO分期呈正相关,BMP-2与ARCO分期呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-672-5p、miR-29b、BMP-2、PAI-1预测激素性股骨头坏死的AUC值均大于0.8(P<0.05),表明均具有较高的预测激素性股骨头坏死的效能。结论激素性股骨头坏死患者血清miR-672-5p、miR-29b、PAI-1呈高表达,而血清BMP-2呈低表达,四者均具有较高的预测激素性股骨头坏死的效能。

环状核糖核酸转化/转录域关联蛋白和微小核糖核酸-761在冠心病中的表达及临床意义

目的:探究环状核糖核酸转化/转录域关联蛋白(circular RNA transformation/transcription domain associated protein,circTRRAP)和微小RNA-761(microRNA-761,miR-761)在冠心病患者血清中的表达及与心肌损伤的相关性。方法:从2019年12月到2022年12月,在湖南中医药大学第一附属医院接受治疗的80例冠状动脉疾病患者被纳入研究组,同时,80名健康人为对照组。实时荧光定量PCR法用来检测血清中circTRRAP、miR-761表达水平;检测两组心肌损伤相关指标cTnI、cTnT、CK-MB和BNP的水平;采用Person相关性系数分析circTRRAP、miR-761表达与心肌损伤指标的相关性;以ROC曲线探究血清circTRRAP和miR-761水平对冠心病的诊断价值。结果:观察组的circTRRAP水平显著高于对照组,而miR-761水平则远低于对照组(P<0.05)。在心肌损伤指标cTnI、cTnT、CK-MB以及BNP方面,观察组的表达较对照组明显升高(P<0.05)。Pearson法结果显示,冠心病患者血清circTRRAP水平与miR-761呈负相关(r=-0.422,P<0.05)。此外,冠心病患者血清circTRRAP表达水平与cTnI、cTnT、CK-MB和BNP呈显著性的正相关(P<0.05);miR-761表达水平与cTnI、cTnT、CK-MB和BNP呈显著性的负相关(P<0.05)。circTRRAP水平诊断冠心病的曲线下面积(AUC)为0.917,敏感度为78.3%,特异性为95.0%;miR-761水平诊断冠心病的AUC为0.907,敏感度为97.8%,特异性为72.5%;circTRRAP和miR-761联合诊断的AUC为0.991,敏感度为93.5%,特异性为97.5%。结论:冠心病患者血清中circTRRAP的表达水平较高,miR-761的表达水平较低,且血清circTRRAP和miR-761表达水平对冠心病患者早期诊断均有重要作用。

微小核糖核酸mmu-miR-8114和mmu-miR-3473b在细粒棘球蚴致敏小鼠中的调控作用

目的探索微小核糖核酸(miRNAs)在通过细粒棘球蚴感染引起的小鼠过敏反应中的调节作用。方法建立小鼠体内棘球蚴病动物模型,收集脾脏单核细胞进行转录组测序。比较过敏性小鼠和非过敏小鼠之间mRNAs和miRNAs的差异表达。使用Targetscan和miRanda软件预测mRNAs和miRNAs之间的靶向调控关系,并通过蛋白质—蛋白质相互作用(PPI)网络分析,识别核心基因,通过富集分析探讨核心基因的生物学作用。最后利用qRT-PCR和Western blot验证关键结果。结果过敏与非过敏小鼠之间存在1642个差异表达的mRNAs。对18个差异表达的miRNAs进行分析,鉴定出60个差异表达的靶标基因,其中在PPI网络中连通度最大的前10个基因被认定为核心基因。富集分析显示核心基因主要参与NF-kappa B信号通路。基于miRNAs与mRNAs之间的负调控作用以及双荧光素酶报告系统发现mmu-miR-8114与Atf3以及mmu-miR-3473b与Myd88具有靶向调控关系,并与NF-kappa B信号通路有关。通过qRT-PCR验证了mmu-miR-8114和mmu-miR-3473b在过敏小鼠中下调表达,Atf3、Myd88、Socs3在过敏小鼠中上调表达。qRT-PCR和Western blot结果发现NF-kappa B信号通路在过敏小鼠中的活性增加。结论本研究揭示了mmu-miR-8114和mmu-miR-3473b通过NF-kappa B信号通路调控导致小鼠过敏反应的重要作用,为理解细粒棘球蚴感染引起的过敏反应机制提供了新的见解。

微小核糖核酸-149-5p对人瓣膜间质细胞成骨样分化影响的研究

目的:观察微小RNA(miR)-149-5p对瓣膜钙化细胞模型的影响,探讨其可能的机制。方法:收集正常瓣膜组织和钙化瓣膜组织并提取RNA,检测miR-149-5p及钙化相关基因Runt及转录因子2(Runt related transcription factor 2,RUNX2)的表达水平,并分析相关性;培养原代人瓣膜间质细胞(human valve interstitial cells,hVICs),更换成骨样分化诱导培养基(osteogenic differentiation medium,OM)培养14天,茜红素染色检测细胞成骨样分化程度,realtime-PCR检测miR-149-5p表达水平;进而将hVICs分为三组:对照组,NC+OM组和miR-149-5p+OM组,后两组分别转染NC mimic和miR-149-5p mimic;realtime-PCR检测细胞中成骨样分化标志基因OCN、ALPP和靶基因的mRNA表达水平,TargetScan和miRDB数据库预测miR-149-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miR-149-5p对靶基因的靶向关系。结果:与无钙化的相比,钙化的主动脉瓣膜组织中miR-149-5p的表达量显著下降,而且与RUNX2的表达量成负相关(均为P<0.05);hVICs诱导成骨样分化后茜红素染色阳性区域显著增加,同时miR-149-5p的表达逐渐下调(P<0.05);miR-149-5p mimic转染hVICs后,miR-149-5p+OM组细胞内miR-149-5p的表达较NC+OM组显著上调。miR-149-5p+OM组的hVICs中钙含量、OCN和ALPP的表达均低于NC+OM组(P<0.05)。TargetScan数据库预测结果显示miR-149-5p可与促成骨样分化的基因IL6的3’-UTR区结合;双荧光素酶报告基因实验显示miR-149-5p可抑制IL6报告基因活性(P<0.05),而报告基因突变后抑制作用消失;miR-149-5p+OM组hVICs中IL6的表达显著下调(P<0.05)。结论:miR-149-5p可能通过靶向抑制促钙化因子IL-6的表达,在主动脉瓣膜钙化中发挥保护性作用。

微小核糖核酸-451a在人参养荣汤治疗鼻咽癌放射性黏膜损伤中的机制研究

目的:通过检测微小核糖核酸-451a(miR-451a)和富含半胱氨酸的分泌性酸性蛋白(SPARC)mRNA的表达,推断人参养荣汤治疗鼻咽癌(NPC)放射性黏膜损伤的疗效及作用机制。方法:选择2022年3月—2023年5月收治的鼻咽癌放射性口腔黏膜损伤患者30例作为观察组,选择同期健康者30例作为对照组。采用辨证论治拟人参养荣汤加减治疗,比较观察组治疗前后患者中医症候积分量表和口干程度、口咽疼痛程度、黏膜损伤程度。检测治疗前后患者血清miR-451a和SPARC mRNA表达水平。结果:人参养荣汤可以有效降低患者主症和次症严重程度、Ⅲ级和Ⅳ级口腔黏膜损伤程度、口咽疼痛程度以及口干程度,使患者血清中miR-451a表达下降,促进SPARC mRNA蛋白翻译增强(P<0.05)。治疗前后,miR-451a与中医症候积分均呈正相关(P<0.05)。结论:人参养荣汤对鼻咽癌放射性黏膜损伤具有一定的临床疗效,可降低miR-451a表达水平,升高SPARC mRNA表达水平;miR-451a抑制了SPARC mRNA的翻译,可为将来的中西医结合治疗提供理论依据。

重复经颅磁刺激对阿尔茨海默病患者临床症状及血浆微小核糖核酸-125b、血浆磷酸化Tau-181蛋白的影响

目的:观察重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)患者认知功能、神经精神行为症状及血浆微小核糖核酸-125b(microRNA-125b,miR-125b)、血浆磷酸化Tau-181蛋白(phosphorylated Tau181 protein,P-tau181)表达的影响。方法:筛选轻中度AD患者34例,随机分为对照组(n=16)和试验组(n=18)。对照组采取认知训练及重复经颅磁伪刺激,试验组采取认知训练结合重复经颅磁真刺激。磁刺激强度为100%的静息运动阈值,频率为10Hz,每日治疗1次,每周治疗5天,持续4周,刺激脑区为左侧前额叶背外侧区和左侧颞叶区。在治疗前、后进行Addenbrooke-Ⅲ认知检查(the AddenbrookeⅢcognitive examination,ACE-Ⅲ)、简易精神状态量表(mini-mental state scale,MMSE)及神经精神症状问卷(neuropsychiatric inventory,NPI)评估,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测微小miR-125b表达量,酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技术检测P-tau181的浓度。结果:治疗结束后,试验组ACE-Ⅲ、MMSE和NPI评分以及miR-125b、P-tau181均较组内治疗前显著改善,差异具有显著性意义(P<0.05),且上述指标与对照组治疗后相比,差异具有显著性意义(P<0.05);而对照组各项指标改善不具有显著性意义(P>0.05)。结论:rTMS能改善轻中度AD患者的认知功能及神经精神行为症状,这可能与rTMS促进血浆miR-125b的表达和抑制P-tau181蛋白产生相关。

微小核糖核酸对包虫病患者免疫细胞功能的调控作用研究进展

包虫病是一种对宿主造成严重损害的潜在致命性人畜共患疾病。微小核糖核酸(miRNAs)是一类小型非编码RNA分子,可在转录后以序列特异性方式通过抑制或促进mRNA降解以调节基因表达,从而发挥调控生物学过程的作用。宿主感染棘球蚴绦虫后可以引起多种miRNAs表达改变,并参与宿主的免疫调节过程。在包虫病患者的感染过程中,miR-71、miR-4989-3p、miR-222-3p、miR-155-5p、miR-146a-5p可影响单核巨噬细胞功能,miR-277a-3p能够影响树突状细胞功能,miR-374b-5p、miR-126a-5p可影响T淋巴细胞功能,miR-181a-5p能够影响自然杀伤细胞功能,上述miRNAs通过影响患者的免疫细胞及其功能而参与免疫调节。但目前还有很多miRNAs的功能和机制尚未得到证实,需要我们使用更先进的方法来确定有效的miRNAs及其功能,以便为包虫病的早期诊断和治疗提供新靶点及理论依据。

慢性心力衰竭患者血清微小核糖核酸-29b表达水平及其临床意义

目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者血清中微小核糖核酸-29b(miR-29b)的表达水平及其临床意义。方法选取2017年6月至2020年8月长沙市第四医院收治的167例CHF患者作为观察组,并根据纽约心脏协会心功能分级标准进行分级;另选同时间段内145名健康体检者为对照组。采用qRT-PCR检测受试者血清miR-29b表达水平,超声心动图检测左心房内径(LAD)、左心室重构指数(LVRI)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室后壁厚度(LVPWD)、左心室质量指数(LVMI)、左心室射血分数(LVEF)、心排血量(CO),并检测血清N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平及评估堪萨斯城心肌病调查问卷(KCCQ)评分、6 min步行试验(6MWT)。比较对照组和观察组各级心功能患者上述各项指标,采用Pearson相关性分析法分析观察组患者血清miR-29b表达水平与心功能、心室重构指标及生存质量的关系;随访1年,采用多因素Logistic回归分析法分析CHF患者血清miR-29b表达水平与预后的关系。结果观察组心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级患者中血清miR-29b相对表达量、LVRI、CO、LVEF及KCCQ评分、6MWT均依次降低(P<0.05),且均低于对照组(F=831.833、386.491、110.251、71.503、101.552、867.632,P<0.05);观察组心功能Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级中LAD、LVEDD、LVMI、LVPWD及血清NT-proBNP、cTnI、cTnT水平均依次升高(P<0.05),且均高于对照组(F=238.758、528.524、241.700、58.167、3712.854、1836.663、2230.468,P<0.05);Pearson相关性分析显示CHF患者miR-29b表达与LVEDD、LVPWD、LVMI、LAD及血清NT-proBNP、cTnI、cTnT水平均呈负相关(r=-0.822、-0.884、-0.891、-0.713、-0.854、-0.813、-0.832,P<0.05),而与LVEF、CO、LVRI及KCCQ评分、6MWT均呈正相关(r=0.734、0.864、0.791、0.721、0.783,P<0.05);多因素Logistic回归分析显示血清miR-29b表达是CHF患者预后不良的保护因素(OR=0.517,P<0.05),心功能分级Ⅲ/Ⅳ级和对医嘱依从性差是其预后不良的危险因素(OR=5.496、6.074,P<0.05)。结论miR-29b表达是CHF患者预后不良的影响因素,对CHF的临床诊治具有重要指导作用。

差异表达微小核糖核酸在子宫内膜异位症中的诊断价值及调控机制

目的探讨差异表达微小核糖核酸(miR)在子宫内膜异位症(EMT)中的诊断价值,并分析其调控作用机制。方法选取南京医科大学附属苏州医院妇产科2022年3月至2023年3月收治的EMT患者75例纳入EMT组,选取同期健康志愿者75名纳入正常对照组。通过miR芯片分析技术筛选研究对象血样中表达差异的miR,采用定量聚合酶链反应(qPCR)法检测75例EMT患者的血样及60例拟行手术的EMT患者术前1 d、术后2个月血样的miR-410-3p的表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-410-3p在EMT中的诊断价值,通过TargetScan数据库进行生物信息学分析筛选靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验和免疫印迹(Western blot)法检测转染miR-410-3p后血管内皮生长因子A(VEGFA)的表达水平。结果共筛选出87个表达差异的miRNA。与正常对照组比较,EMT组miR-365的表达显著上调(P<0.05),miR-410-3p的表达显著下调(P<0.05)。miR-410-3p的ROC曲线下面积(AUC)为0.7705。60例拟行手术的EMT患者术前、术后血样验证发现,病灶切除后,miR-410-3p的表达显著上调(P<0.05)。转染miR-410-3p后,VEGFA表达显著下调(P<0.05)。结论血浆miR-410-3p可作为EMT患者的生物标志物,可靶向调控VEGFA的表达,具有良好的诊断潜力,其可能通过靶向抑制VEGFA发挥调控作用。

食管癌患者血清白介素17、微小核糖核酸424水平与临床病理参数和预后的关系

目的探讨食管癌(EC)患者血清白介素17(IL-17)、微小核糖核酸424(miRNA 424)表达情况及与临床病理参数和预后的关系。方法我院收治的223例EC患者,收集一般临床资料及病理资料,入院后采集空腹静脉血,检测血清IL-17、miRNA 424水平,比较不同病理特征下EC患者血清IL-17、miRNA 424水平,分析血清miRNA 424水平与EC临床病理参数的关系;术后随访3年,根据患者生存状况分为生存组(n=152)和死亡组(n=71),比较两组血清IL-17、miRNA 424水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IL-17、miRNA 424水平对EC患者预后的预测价值。结果不同年龄、肿瘤直径、TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移患者血清IL-17、miRNA 424水平比较差异有统计学意义(P<0.05);血清IL-7、miRNA 424表达水平与EC TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移呈正相关(P<0.05);生存组IL-17、miRNA 424水平低于死亡组(P<0.05);IL-17、miRNA 424单独及联合预测EC患者预后的敏感度分别为77.46%、74.65%、88.73%,特异度分别为65.13%、62.50%、61.84%,AUC分比为0.755、0.734、0.835,联合诊断价值更高。结论EC患者IL-17、miRNA 424与疾病临床分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移均具有显著相关性,且二者对患者预后具有较高的诊断价值。

微小核糖核酸参与结核病免疫调节信号通路的研究进展

据《2022年WHO全球结核病报告》显示,2021年全球估计新发1060万结核病患者,其中成年男性600万,成年女性340万,儿童120万,新增45万例利福平耐药结核病患者,结核病严重威胁着发展中国家和发达国家公共卫生安全[1]。由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的结核病是致命的传染病之一,MTB在感染中引起炎症反应和免疫介导的宿主损伤,诱导更有利于其生存的条件[2]。

血清微小核糖核酸-183、基质金属蛋白酶9水平与B型主动脉夹层患者预后的关系

目的 探讨血清微小核糖核酸(miRNA)-183、基质金属蛋白酶9(MMP9)水平与B型主动脉夹层(TBAD)患者胸段血管内主动脉修复术(TEVAR)后预后的关系。方法 收集2019年1月至2022年1月柳州市工人医院接受TEVAR治疗的150例TBAD患者的临床资料,根据术后随访情况将患者分为预后不良组(n=27)和预后良好组(n=121)。统计随访期间不良事件的发生情况,采用多因素Logistic回归模型分析TBAD患者TEVAR术后预后不良的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)分析miRNA-183、MMP9对TBAD患者TEVAR术后预后不良的预测价值。结果 随访时间为8~44个月,中位随访23个月。预后不良组患者的年龄大于预后良好组患者,高血压比例、2型糖尿病比例、收缩压、白细胞计数、空腹血糖、糖化血红蛋白水平及血清MMP9水平均高于预后良好组患者,血清mi RNA-183的表达水平低于预后良好组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果显示,高血压、MMP9表达水平高均是TBAD患者TEVAR术后预后不良的危险因素(P<0.05),miRNA-183水平高是TBAD患者TEVAR术后预后不良的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miRNA-183和MMP9联合预测TBAD患者TEVAR术后预后不良的曲线下面积(AUC)为0.919,高于miRNA-183、MMP9单独预测的0.824、0.843,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 血清miRNA-183表达下调、MMP9水平升高均与TBAD患者TEVAR术后预后不良有关,可作为其预后分析的标志物。

血清微小核糖核酸-133a、微小核糖核酸-126、髓系细胞表达触发受体-1、肺表面活性蛋白A表达水平与脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征风险及预后关系

目的:研究血清微小核糖核酸-133a(miR-133a)、微小核糖核酸-126(miR-126)、髓系细胞表达触发受体-1(TREM-1)、肺表面活性蛋白A(SP-A)表达水平与脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)风险及预后的关系。方法:将248例脓毒症患者根据其是否发生ARDS分为无ARDS组(97例)和ARDS组(151例),统计两组血清miR-133a、miR-126、TREM-1、SP-A表达水平;分别根据脓毒症并发ARDS患者病情严重程度及入院后28 d预后情况将其分为轻度组(51例)、中度组(73例)、重度组(27例)及存活组(122例)、死亡组(29例),比较不同病情严重程度及预后脓毒症并发ARDS患者血清miR-133a、miR-126、TREM-1、SP-A表达水平。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-133a、miR-126、TREM-1、SP-A对脓毒症并发ARDS患者预后的预测价值。结果:ARDS组血清miR-133a、miR-126、TREM-1表达水平高于无ARDS组,血清SP-A表达水平低于无ARDS组(均P<0.05)。轻度组、中度组、重度组血清miR-133a、miR-126、TREM-1表达水平呈升高趋势,血清SP-A表达水平呈降低趋势,组间比较差异具有统计学意义(均P<0.05)。死亡组血清miR-133a、miR-126、TREM-1表达水平高于存活组,血清SP-A表达水平低于存活组(均P<0.05)。血清miR-133a、miR-126、TREM-1、SP-A联合预测脓毒症并发ARDS患者预后的曲线下面积(AUC)值高于四者单独检测(均P<0.05);敏感度比较,血清SP-A、TREM-1高于血清miR-133a、miR-126及联合检测,血清SP-A高于血清TREM-1,联合检测高于血清miR-133a、miR-126(均P<0.05);特异度比较,血清miR-133a高于血清TREM-1、SP-A及联合检测,血清miR-126、联合检测高于血清TREM-1、SP-A(均P<0.05)。结论:血清miR-133a、miR-126、TREM-1、SP-A表达水平与脓毒症并发ARDS患者病情的发生和发展均关系密切,四者联合对脓毒症并发ARDS患者预后具有较好的预测效果。

微小核糖核酸-27a、微小核糖核酸-1299预测食管癌病人术后预后的临床价值

目的探讨微小核糖核酸(miR)-27a、miR-1299预测食管癌病人术后远期预后的临床价值。方法2020年6月~2022年6月我院收治的食管癌病人89例,均行微创胸、腹腔镜联合食管癌切除术治疗。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测病人术前miR-27a、miR-1299表达量,采用酶联法检测血清铁蛋白(SF)水平,分析miR-27a、miR-1299相对表达量及血清SF与食管癌病人临床病理的关系。术后跟踪随访并记录病人的生存情况,随访截止时间为2023年2月。分析miR-27a、miR-1299表达量及血清SF与病人预后的关系,采用多因素Cox回归模型分析影响食管癌病人预后的危险因素。Pearson分析miR-27a、miR-1299与血清SF的关系。结果miR-27a、miR-1299相对表达量及血清SF在肿瘤分期、淋巴结转移和分化程度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析结果显示,miR-27a高表达组及SF高表达组总生存率低于miR-27a低表达组及SF低表达组,miR-1299高表达组总生存率高于miR-1299低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示,miR-27a≥2.54、miR-1299<4.18和血清SF≥223.78μg/L均为影响食管癌病人术后远期预后的独立危险因素(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清SF水平与miR-27a相对表达量呈正相关(P<0.05,r=0.612),与miR-1299相对表达量呈负相关(P<0.05,r=-0.517)。结论食管癌病人miR-27a、miR-1299表达及血清SF与病人肿瘤分期、淋巴结转移和分化程度有关,且可以评估病人术后预后。

微小核糖核酸-155与缺血性脑卒中炎性因子水平的关系研究

目的:探讨缺血性脑卒中患者外周血微小核糖核酸的表达水平变化及其与炎性因子水平的相关性。方法:选择2020年6月至2024年6月期间,张家口市第五医院缺血性脑卒中患者150例作为研究对象,同时选择同期110例无心脑血管病健康志愿者作为对照组。根据阿尔伯塔卒中项目早期CT(Alberta stroke program early CT score,ASPECTS)评分将缺血性脑卒中患者分为大梗死体积组(ASPECTS评分≤4,55例)和小梗死体积组(ASPECTS评分≥5,95例),并根据卒中量表(national institute of health stroke scale,NIHSS)评分分为轻度组(NIHSS评分<7分,100例)和中、重度组(NIHSS评分≥7分,50例)。采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测所有对象血清中微小RNA-155(mi-croRNA-155,miR-155)水平,酶联免疫吸附试验法测定所有患者血清IL-6、TNF-α及CRP水平。采用Pearson法分析脑梗死患者mi R-155与相关炎性因子及病情严重程度之间的关系;分析miR-155对缺血性脑卒中的诊断价值。结果:大梗死体积组、小梗死体积组血清miR-155、IL-6、TNFα及CRP表达水平均高于对照组,且大梗死体积组血清miR-155、IL-6、TNFα及CRP表达水平均高于小梗死体积组(P<0.05)。中、重度组血清miR-155、IL-6、TNF-α及CRP水平高于轻度组(P<0.05)。缺血性脑卒中患者血清miR-155与IL-6、TNF-α及CRP水平均呈正相关(r=0.392、0.347、0.324,P均<0.05);与NIHSS评分呈正相关(r=0.368,P<0.05);miR-155诊断缺血性脑卒中的AUC为0.918,灵敏度为89.0%,特异度为82.1%,约登指数为0.7,截断值0.868,阳性预测值和阴性预测值分别为90.3%、89.8%。结论:缺血性脑卒中患者的miR-155水平与炎性因子水平存在密切关系,可对疾病严重程度进行判断,成为预测疾病预后的重要指标。

姜黄素通过微小核糖核酸-34a介导的自噬途径保护心肌细胞免受高糖诱导的损伤研究

目的:探究姜黄素(curcumin,Cur)通过miR-34a介导的自噬途径保护心肌细胞免受高糖(highglucose,HG)诱导的损伤。方法:将心肌细胞分为Con组(正常培养细胞)、HG组(30mmol/L葡萄糖培养细胞)、HG+Cur-L组(姜黄素25μmol/L和葡萄糖30mmol/L培养细胞)、HG+Cur-M组(姜黄素50μmol/L和葡萄糖30 mmol/L培养细胞)、HG+Cur-H组(姜黄素100μmol/L和葡萄糖30mmol/L培养细胞)、HG+Cur+miR-NC组(转染miR-NC,使用姜黄素100μmol/L和葡萄糖30mmol/L培养细胞)、HG+Cur+miR-34a(转染miR-34a,使用姜黄素100μmol/L和葡萄糖30 mmol/L培养细胞)、HG+Cur+miR-34a+3-MA组(转染miR-34a,使用姜黄素100μmol/L、葡萄糖30 mmol/L及自噬抑制剂3-MA 10μmol/L培养细胞)。采用qRT-PCR检测miR-34a表达水平;CCK8检测细胞活性;ELISA检测LDH含量、SOD、GSH-Px活性;Western blot检测Beclin-1、LC3II/I、p62蛋白表达。结果:与Con组相比,HG组细胞活性、SOD、GSH-Px活性、p62蛋白明显降低,而LDH含量、miR-34a表达、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达明显增加。与HG组比较,HG+Cur-L组、HG+Cur-M组、HG+Cur-H组细胞活性、SOD、GSH-Px活性、p62蛋白明显增加,而LDH含量、miR-34a表达、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达明显降低。与HG+Cur+miR-NC组相比,HG+Cur+miR-34a、HG+Cur+miR-34a+3-MA组细胞活性、SOD、GSH-Px活性、p62蛋白明显降低,而LDH含量、miR-34a表达、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达明显增加。与HG+Cur+miR-34a组相比,HG+Cur+miR-34a+3-MA组细胞活性、SOD、GSH-Px活性、p62蛋白明显增加,而LDH含量、miR-34a表达、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达明显降低。结论:姜黄素通过微小核糖核酸-34a介导自噬途径减缓高糖诱导的心肌细胞损伤。

微小核糖核酸-155对肝癌细胞增殖、侵袭迁移和凋亡的影响

目的探究微小核糖核酸(miR)-155靶向蛋白酪氨酸磷酸酶非受体21型(PTPN21)调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法体外培养Huh7人肝癌细胞并通过miR-155沉默慢病毒(sh-miR-155)转染下调miR-155。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Huh7细胞miR-155沉默效果,获得稳转细胞株后将细胞株随机分为:Blank组(正常Huh7细胞)、shNC组(Huh7细胞+miR-155空载体)、sh-miR-155组(Huh7细胞+miR-155沉默)、sh-miR-155+Recilisib组(Huh7细胞+miR-155沉默+PI3K-AKT激动剂)、shNC+Recilisib组(Huh7细胞+miR-155空载体+PI3K-AKT激动剂)。双荧光素酶实验检测PTPN21是否为miR-155的下游;溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术测定各组细胞凋亡水平;Transwell实验分析各组细胞侵袭与迁移能力;蛋白质印迹检测各组PTPN21、通路相关蛋白PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT及凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、Caspase-3表达变化差异。结果sh-miR-155组中miR-155的表达水平低于Blank组及shNC组(P<0.0001),miR-155在Blank组及shNC组表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。MTT结果显示,sh-miR-155组中Huh7细胞在2、3、4、5 d时A值均低于Blank组及shNC组(P<0.0001),而Blank组与shNC组差异无统计学意义(P>0.05);sh-miR-155组在2、3、4、5 d时A值低于sh-miR-155+Recilisib组及shNC+Recilisib组(P=0.0052,P<0.0001),而sh-miR-155+Recilisib组在2、3、4、5 d时A值低于shNC+Recilisib组(P<0.0001)。Blank组与shNC组迁移及侵袭细胞数差异无统计学意义(P>0.05),激活PI3K-AKT信号通路后,与Blank组相比,shNC+Recilisib组肝癌细胞的迁移、侵袭能力显著增加(P<0.0001)。相反,沉默miR-155后Huh7细胞的迁移及侵袭细胞数明显低于Blank组及shNC组(P<0.0001),而PI3K激动剂逆转了这一现象,与sh-miR-155组相比,sh-miR-155+Recilisib组肝癌细胞的迁移、侵袭能力增强(P=0.0002)。慢病毒转染Huh7人肝癌细胞以沉默miR-155,下调miR-155抑制PTPN21调控PI3K-AKT信号通路从而抑制肝癌细胞的侵袭、迁移、增殖能力,促进肝癌细胞凋亡。结论miR-155通过靶向PTPN21调控PI3K-AKT信号通路抑制肝癌细胞的迁移、侵袭、增殖。miR-155可能是未来肝癌治疗潜在靶点。

微小核糖核酸在脓毒症中的作用机制研究进展

脓毒症是由感染引起的全身性炎性反应综合征,是创伤、烧伤、术后感染和危重病的常见并发症,可导致脓毒性休克和多器官功能障碍综合征,具有发病急、病死率高的特点。微小核糖核酸(miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的内源性非编码RNA,参与调节免疫、代谢、分化、增殖和癌变等多种生物学过程,在脓毒症的发生发展中发挥重要作用。该文介绍了miRNA的生物学特性,以及与脓毒症相关的miRNA在脓毒症的发生、发展过程中的调控机制,以期为脓毒症的预防和治疗提供参考。

老年急性心肌梗死伴心力衰竭患者血清中Kruppel样因子15、微小核糖核酸128-3p表达与心功能的关系

目的探讨老年急性心肌梗死(AMI)伴心力衰竭患者血清中Kruppel样因子15(KLF15)、微小核糖核酸128-3p(miR-128-3p)表达与心功能的关系。方法纳入2020年8月至2021年8月期间襄阳市襄州区人民医院收治的老年AMI伴心力衰竭患者112例作为AMI伴心力衰竭组,同期选取一般资料相匹配且单纯AMI患者120例作为AMI组,所有患者采用超声心动图进行心功能检测,记录左心室收缩末期内径(LVESd)、左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室射血分数(LVEF);测定患者血清中脑钠肽(BNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、KLF15、miR-128-3p水平;Pearson法分析老年AMI伴心力衰竭患者血清KLF15、miR-128-3p表达水平与BNP、CK-MB、cTnI、LVESd、LVEDd、LVEF相关性,并分析血清KLF15与miR-128-3p的相关性。结果与AMI组相比,AMI伴心力衰竭组患者miR-128-3p表达水平、BNP、CK-MB、cTnI、LVESd、LVEDd水平升高(t/Z=38.306、5.865、7.997、20.575、16.037、17.368,P<0.05),LVEF、KLF15水平降低(t=24.072、47.301,P<0.05)。AMI伴心力衰竭患者血清miR-128-3p水平随心功能分级升高而升高(F=322.866,P<0.05),KLF15水平随心功能分级升高而降低(F=221.228,P<0.05);老年AMI伴心力衰竭患者血清miR-128-3p表达水平与BNP、CK-MB、cTnI呈正相关(r=0.667、0.525、0.617,P<0.05),与LVEF呈负相关(r=-0.537,P<0.05);血清KLF15表达水平与BNP、CK-MB、cTnI、LVEDd呈负相关(r=-0.531、-0.574、-0.562、-0.416,P<0.05),与LVEF呈正相关(r=0.624,P<0.05)。TargetScan网站预测miR-128-3p与KLF15具有靶向结合位点,Pearson分析显示,老年AMI伴心力衰竭患者血清miR-128-3p与KLF15呈负相关(r=-0.853,P<0.05)。结论老年AMI伴心力衰竭患者血清KLF15降低,miR-128-3p水平升高,均与患者心功能指标具有相关性,可作为判断AMI伴心力衰竭患者心功能的标志物。